Um Modelo Espacial para a Resposta Imunol��gica Adaptativa da Hepatite B

This paper proposed a two-dimensional spatial model to describe the adaptive immune response for viral hepatitis B. This model considered six populations: healthy hepatocytes T, infected hepatocytes Y , hepatitis B virus V , innate immune system I, active immune system X and memory cells, X. First, a compartmental model was constructed and its equilibrium solutions and also the threshold values related to the stability of each solution were obtained. Using this model, we was able to reproduce the different trends observed for the disease, which are: individuals that eliminate the infection without forming immune response, patients with acute and chronic carriers. By including dispersion of defense cells of the immune system and virus (spatial model), we analyze two situations: homogeneous model, in which the model parameters are the same at all points of the network, and heterogeneous model, which characterizes cells more permeable and less permeable to virus invasion. For the two spatial models (homogeneous and heterogeneous) the times relatead to the viral erradication and/or virus invasion and persistence becoming smaller in relation to the compartmental model. The results also showed that for the set of values used in the simulations and if the two diffusion rates are different from zero, the model is sensitive to variations in the rate of viral spread and not dependent on the dispersion of memory cells. Finally, the heterogeneous model when compared to the homogeneous model shows that the infection can be spatially limited depending on the type of the cell involved in the infection process

Avalia����o do Efeito Fotodin��mico sobre o Crescimento in vitro de Pythium insidiosum

Photodynamic Therapy (PDT) is a therapeutic method which employs a photosensitizer and light to cause cellular death. The chemical compounds have low or none toxicity for hosts cells. Under the incidence of light, in an appropriated wavelength, these chemical compounds produce reactive oxygen which affects the biomolecules of the target-cells. The specific illumination of the affected area increases the selectivity of the therapy, since the photodynamic process occurs only in the irradiated area. Pythiosis, for instance, is a life-threatening emerging disease caused by a fungus-like organism called Pythium insidiosum. The disease occurs in man and other animals, being mostly observed in horses. Human pythiosis may present as ophthalmic, cutaneous-subcutaneous and systemic forms of lesions. Due to the fact that P. insidiosum is not a true fungus, it is refractory to most antifungal drugs and the treatment of the disease is difficult. Extensive surgery procedures, such as limb amputation, are the treatment of choice, however relapses may occur frequently. Although not totally effective, the use of immunotherapy associated to surgery have shown some results. Considering that pythiosis is an emerging disease few explored in its etiological and therapeutic aspects, which are limited and few effective, it is of great importance to encourage the development of researches for new strategies of treatment. In this sense, it was evaluated the effect of PDT on in vitro growth of the pathogen employing two chemical compounds as photosensitizer, porphyrin and chlorine, at different concentrations in combination with several energetic dosages. Porphyrin showed inhibition of growth at 25mg/mL with 100J/cm2 of energetic dosage and chlorine showed similar results employing low concentrations (0,7, 1,0 and 1,3mg/mL) with 70J/cm2 of energetic dosage... (Complete abstract click electronic access below)

Sequenciamento de um fragmento de DNA mitocondrial de Camponotus textor (Forel, 1899) (Hymenoptera, Formicidae)

A grande diversidade das formigas implica na enorme variedade de h��bitats de nidifica����o, prefer��ncias alimentares e comportamento social com divis��o de trabalho, al��m da estrutura����o de seu ninho que por sua vez, podem revelar parte de sua hist��ria evolutiva. Camponotus textor �� uma esp��cie tecel��, a qual constr��i seu ninho a partir da seda produzida pelas suas pr��prias larvas, garantindo um dos mais not��veis exemplos de coopera����o social. �� uma formiga arbor��cola e de grande import��ncia para a agricultura, j�� que pode nidificar no cafeeiro (Coffea arabica) e ser usada como agente de controle biol��gico impedindo o estabelecimento de outras pragas. Atualmente, existem poucos estudos abordando comportamento, fisiologia, gen��tica, endossimbiontes e filogenia desse grupo. Segundo dados da literatura, o DNA mitocondrial tem sido utilizado em an��lises de filogenia devido ao ��timo n��mero de c��pias por célula, altas taxas mutacionais e pouca ou nenhuma recombina����o. Sendo assim, o presente trabalho visa realizar o sequenciamento de um fragmento do DNA mitocondrial de popula����es distintas de Camponotus textor para ser utilizado como marcador molecular, tornandose uma ferramenta para diferencia����o de popula����es e determina����o das rela����es filogen��ticas entre outras esp��cies de formigas relacionadas. Foi feita a extra����o do DNA em TNES (Tris, NaCl, EDTA, SDS), seguida da amplifica����o da regi��o COI (citocromo oxidase I) do DNA mitocondrial utilizando-se os primers elaborados para este trabalho e o sequencimento foi realizado no 3130 Genetic Analyzer (Applied Biosystems). As seq����ncias obtidas foram editadas no BioEdit, e posteriormente comparadas com o banco de dados GenBank, utilizando-se a ferramenta BLAST, e assim a constru����o da an��lise filogen��tica atrav��s do programa MEGA. Foi poss��vel a separa����o das cinco popula����es em duas linhagens distantes geograficamente

Principais marcadores utilizados na avalia����o da qualidade do s��men de animais dom��sticos

Methods of semen cryopreservation allow changes in spermatic cells, such as damage in plasma and acrossomal membrane and modifications in mitochondrial function due to a disorder in the lipidic bilayer. For effective oocyte fertilization, spermatozoa require functional competent membranes, and intact organelles, acrosome and DNA. However, most laboratory methods used to evaluate semen quality are not highly correlated with fertilizing capacity. The discovery of a variety of fluorochromes and compounds conjugated to fluorescent probes has enabled an accurate assessment of the viability, integrity and function of spermatozoa. Among the most used probes that label the various compartments of the sperm cell there are the membrane impermeable fluorescent dyes to test the membrane integrity, as well as acylated dyes that pass the intact membrane. For the acrossomal integrity the most commonly used method is lectins labeled by a fluorescent probe. The acrosome reaction and spermatic capacitation is detected by the evaluation of membrane architecture and disorder of lipids in plasma membrane. Mitochondrial function can be determined using markers for their aerobic activity. The DNA status of spermatozoa has been determined using the metachromatic properties of Acridine Orange, and the DNA fragmentation can also be assessed by TUNEL assay. Finally, DNA condensation is analyzed using a single cell DNA gel electrophoresis assay that indicates DNA compactation. This monograph aims to compile the various tests used to detect damaged spermatozoa under cryopreservation methods, searching for improve the predictive value of semen analysis with the intention of a successful conception

Impacto das muta����es som��ticas pontuais em regi��es reguladoras de Splicing em linhagens tumorais de mama

O evento de splicing alternativo tem como resultado a gera����o de diversos produtos a partir do precursor do RNA mensageiro de um ��nico gene, sendo o respons��vel, assim, pelo aumento da variedade de transcritos e prote��nas existentes em uma célula. Estima-se que cerca de 90% dos genes humanos estejam sujeitos a este tipo de processamento. O funcionamento adequado do processo de splicing depende do reconhecimento correto dos limites entre trechos intr��nicos e ex��nicos pela maquinaria enzim��tica, que se d�� atrav��s do reconhecimento de diversos sinais, como os s��tios de splicing 3��� e 5���, o trato de polipirimidina, a seq����ncia ���branch���, e pequenas seq����ncias presentes em exons e introns, pr��ximas aos s��tios de splicing, que promovem ou inibem a inclus��o de trechos na fita de RNA madura. �� fato comprovado por diversos estudos que muta����es nas seq����ncias sinalizadoras de splicing podem modificar o padr��o de processamento de um gene. Acreditase que varia����es gen��ticas individuais possam modificar a suceptibilidade a diversas doen��as, entre elas o c��ncer, que trata-se, atualmente, da doen��a que mais gera ��bitos no mundo (13% do total). Recentemente, Sjoblom et al. (2006) e Wood et al. (2007) mapearam muta����es n��o silenciosas encontradas em 1718 genes em linhagens de c��ncer de mama e colorretal. Neste trabalho, investigamos os efeitos dessas muta����es som��ticas presentes em c��ncer no padr��o de splicing celular. Para tanto, nos focamos nas 201 muta����es encontradas em quatro linhagens de c��ncer de mama (HCC1954, HCC1599, HCC1143 e HCC2157). A partir dos dados obtidos pela t��cnica de ���Exon Array��� (Affymetrix) e do mapeamento das muta����es, foi realizada uma sele����o dos genes aonde haviam muta����es e eventos de splicing alternativos espec��ficos a somente uma das linhagens celular, e cuja dist��ncia... (Resumo completo, clicar acesso eletr��nico abaixo)

Novas alternativas quimioter��picas para o tratamento do c��ncer atrav��s de compostos organomet��licos de pal��dio

O c��ncer, manifesta����o originada pelo crescimento descontrolado de células, afeta milh��es de indiv��duos. Os macr��fagos s��o as primeiras células a serem ativadas para participar de uma resposta imunol��gica propriamente dita, s��o células capazes de secretar mais de cem produtos biologicamente ativos, entre esses, esp��cies reativas de nitrog��nio e citocinas que atuam no contexto da resposta imunol��gica e/ou inflamat��ria. Sabendo que compostos de pal��dio (II) podem apresentar potenciais atividades antitumorais, neste trabalho foram testado os compostos de f��rmula geral PdI2 (tdmPz) e Pd (SCN)2 (tdmPz), quanto a atividade anti-inflamat��ria e antitumoral. Como droga padr��o das rea����es realizadas foi utilizada a cisplatina. Foi determinada a a����o destes compostos frente ao sistema imunol��gico atrav��s, de ensaios de determina����o de ��ndice de citotoxicidade mediano (IC50) pela t��cnica de MTT, ��xido n��trico (NO) e determina����o das citocinas pr��-inflamat��rias TNF- e IL-12. Al��m disso, foi determinada a atividade antitumoral dos compostos frente �� célula tumoral de Ehrlich. Os resultados n��o mostraram produ����o de NO e das citocinas IL-12 e TNF- pelos macr��fagos peritoneais de animais normais e animais portadores do tumor de Ehrlich na sua forma s��lida. No que se referem �� atividade t��xica dos compostos testados, estes mostraram efeito citot��xico sobre os macr��fagos e sobre a linhagem tumoral testada. Sendo assim mesmo n��o havendo a produ����o de mediadores pr��inflamat��rios, os compostos apresentaram uma consider��vel citotoxicidade frente ��s células tumorais de Ehrlich e macr��fagos peritoneais

Estudo da rela����o entre o fator de in��cio de tradu����o de eucariotos 5A (eIF5A) e a etapa de elonga����o da tradu����o

O fator de in��cio de tradu����o 5A (eukaryotic translation iniciation factor 5A, eIF5A) �� altamente conservado entre arqueas a eucariotos, sendo que as prote��nas eIF5A de Saccharomyces cerevisiae e de mam��feros s��o 63% id��nticas. eIF5A sofre uma modifica����o p��s-traducional ��nica na célula, a hipusina����o de um res��duo de lisina. Essa prote��na j�� foi relacionada ao in��cio da tradu����o, transporte nucleocitoplasm��tico, decaimento de mRNA e prolifera����o celular, mas a fun����o cr��tica de eIF5A ainda n��o foi esclarecida. A deple����o deste fator em S. cerevisiae leva a uma diminui����o (30%) da taxa de s��ntese prot��ica, sugerindo que eIF5A seja um fator envolvido na tradu����o de um grupo espec��fico de mensageiros. Dados do laborat��rio demonstram intera����o f��sica entre eIF5A e prote��nas ribossomais bem como com o fator de elonga����o 2 da tradu����o (eEF2). A intera����o com eEF2, sugere que eIF5A atua na etapa de elonga����o da tradu����o, ao inv��s do in��cio da tradu����o, como proposto inicialmente. Com o objetivo de avaliar a rela����o de eIF5A com a etapa de elonga����o, foram realizadas an��lises de intera����es gen��ticas entre o gene codificador de eIF5A (TIF51A) e diversos genes codificadores de prote��nas envolvidas na tradu����o. Atrav��s de an��lises de intera����es gen��ticas, foi observado que o mutante est��vel de eIF5A, tif51AK56A, apresenta um defeito de crescimento quando o mutante de eEF2, eft2H699K, est�� expresso em alto n��mero de c��pias, enquanto que o mutante tif51AQ22H/L93F n��o apresenta defeitos nesta condi����o. Foi observado tamb��m que o mutante tif51AQ22H/L93F apresenta um defeito de crescimento mais severo quando ocorre superexpress��o de EFT2, gene codificador de eEF2. Foi observado ainda que n��o h�� complementa����o al��lica entre os mutantes est��veis de eIF5A e que a reversibilidade do fen��tipo de sensibilidade a temperatura... (Resumo completo, clicar acesso eletr��nico abaixo)

Produ����o de vetores recombinantes para express��o de diferentes formas da prote��na K1 do herpesv��rus associado ao Sarcoma de Kaposi (KSHV)

Kaposi��s sarcoma associated herpesvirus (KSHV) or human herpesvirus 8 (HHV-8) is a gammaherpesvirus essential for the development of all forms of Kaposi��s sarcoma (KS). The KSHV���s life cycle is basically divided into latent and lytic phases, which have distinct viral gene expression profiles. Some important oncogenic products of KSHV are expressed during the lytic phase, including the viral K1 protein. As an effect of interfer-ence with intracellular signaling, K1 expression increases proliferation and survival of KSHV-infected cells. Due to its high level of genetic variability compared to other re-gions of the viral genome, the K1-encoding ORF (ORF-K1) is commonly evaluated for KSHV genotyping. It remains unclear whether different viral genotypes have particular biological effects that might modify the KSHV oncogenicity. The present study aimed to contribute to the establishment of an experimental in vitro model for evaluation of the K1 protein from common KSHV genotypes. Recombinant expression vectors with the ORF-K1 from KSHV genotypes A, B and C were prepared by genetic cloning. The recombi-nant vectors pKSHVOK1 obtained by cloning were sequenced for structural validation. After that, HEK293 cell line was transfected with the recombinant vectors, and proteins were extracted for expression analysis by Western blot technique, for K1 functional vali-dation. Results showed that ORF-K1 vectors containing KSHV ORF-K1 from the A, B and C genotypes were produced and structurally validated by DNA sequencing. The K1 expression at the protein level was also confirmed by immunoblots using an antibody for FLAG detection, an epitope from the vector that binds to K1. Based on presented re-sults, it��s possible to conclude that the recombinant vectors will be able to be used in future studies of K1 protein biological properties from distinct KSHV genotypes

Rela����o entre a disparidade de for��a entre membros inferiores e estabilidade postural em atletas de voleibol

Volleyball is a sport in which the laterality dominant limb shows superior strength and coordination because of its preferential use. Asymmetrical tendencies during the landing after the jump when striking or blocking actions are predominant for most part of game (ARRUDA; EDUARDO, 2008). Adaptations include imbalance of forces in static and dynamic motions at the knee joint, which increases risk for injury. Also, asymmetries in balance control during jumping and landing associate with a general postural instability that can be observed during static balance tasks. The purpose of this study was to investigate relationship between unequal lower limb strength (muscle imbalance) and postural stability levels in volleyball athletes and non-athletes. Nine female volleyball athletes and 10 active non-athletes participated in this study. Four encouters with participants were scheduled: three encounters in the bodybuilding gymnasium to collect anthropometric measures (weight, height for BMI, thigh circumference, which provided an initial diagnosis about asymmetry), and to perform the isometric strength test (i.e., leg press using a load cell and a force transducer to calculate uni an bilateral strength). The last encounter was in the laboratory where a balance test on a force platform was administered under five test conditions, with three repetitions each: baseline (natural standing position), one-leg standing, right side, with full vision (D_CV), and blindfolded (D_SV), one-leg standing, left side, with full vision (E_CV), and blindfolded (E_SV). The stability levels were evaluated using the path length parameters which was based on the total displacement of the center of pressure (DTCP). . Both groups shows asymmetric strength levels between legs, with better performance for the right leg. An ANOVA three way using the DTCP for the CV condition, legs (D x E), trials (3) with repeated measures for the first two factors and with a between (three)...

Avalia����o dos efeitos citot��xicos, genot��xicos e mutag��nicos do fipronil, ap��s fotodegrada����o, utilizando Allium cepa como organismo teste

Compounds released into the environment can induce genetic alterations in living organisms. A group of chemicals that shows proven toxicity is the pesticides, and the insecticides are the most harmful. The insecticides of the family phenylpyrazole have wide application both in agriculture and in homes. Fipronil, an insecticide of this chemical group, is widely used in various cultures and in homes, mainly for fighting fleas and ticks on dogs and cats. The use of fipronil may represent a risk to man and the environmental health, since this pesticide can potentially induce cell death, regardless of cell type. Fipronil, when in contact with the environment, can undergo various degradation processes, including photodegradation. The toxic effect of one of its metabolites derived from photodegradation, sulfone-fipronil, is approximately 20 fold as great as fipronil itself. The A. cepa test system was used to evaluate cytotoxic, genotoxicity and mutagenic effects of fipronil before and after phptodegradation. Seeds of Allium cepa were subjected to solutions of fipronil, pre-exposed or not exposed to degradation by sunlight. The germination tests were conducted both under the effect of light and in the dark. We evaluated the cumulative potential of this insecticide using 48 and 72-hours recovery tests. The results showed that when fipronil was previously exposed to the sun, it presented a greater genotoxic and mutagenic potential, showing that the metabolites formed by photodegradation can show more harmfull effects

Desvendando o sistema ABO: subs��dios para o ensino de ci��ncias e biologia

O conte��do ���Grupos sangu��neos��� �� abordado principalmente no ensino de biologia no Ensino M��dio e est�� atrelado a diversas quest��es biol��gicas relevantes ao ensino b��sico. Al��m disso, sabe-se que esse tema �� de cunho abstrato aos alunos, o que muitas vezes dificulta a apropria����o do conte��do pelo aluno. Nesse contexto, se torna relevante a elabora����o de materiais que contribuam para um melhor processo de ensino e aprendizagem desse tema, al��m da incorpora����o da dimens��o l��dica no universo escolar. Assim, a proposta do presente trabalho foi a elabora����o de dois modelos did��ticos de célula que facilitem a visualiza����o da rela����o direta existente entre os genes respons��veis pela manifesta����o dos ant��genos do sistema ABO, os gen��tipos dos diferentes indiv��duos e as possibilidades de transfus��o sangu��nea existentes dentro de cada grupo sangu��neo. Al��m disso, foi constru��do um jogo did��tico de perguntas e respostas que envolvem os conhecimentos adquiridos durante a explana����o te��rica do professor com o intuito de fixa����o do conte��do. O conte��do fornecido neste trabalho foi baseado em livros did��ticos, possibilitando aulas com conte��do program��tico adequado e evitando erros conceituais

Hidrog��is do ��cido acr��lico: correla����o das propriedades bioadesivas e lerea����o in vitro do metronidazol

Este trabalho teve por objetivo desenvolver hidrog��is do ��cido acr��lico e correlacionar as propriedades bioadesivas e a libera����o in vitro empregando metronidazol. Para tanto, inicialmente foram preparadas dispers��es dos pol��meros Carbopol 974 �� e Policarbofil �� nas concentra����es de 0,5%, 1,0% e 1,5%, que foram submetidas a testes para avalia����o das propriedades bioadesivas, mec��nicas e reol��gicas. As amostras com maior concentra����o de pol��meros (Carbopol 974 �� 1,5%, e Policarbofil �� 1,0% e 1,5%,) foram as que apresentaram melhores resultados nos testes de bioades��o, e portanto selecionadas para prosseguimento dos estudos, que envolveu a incorpora����o de metronidazol (MTZ) na concentra����o de 0,5% para estudo de libera����o in vitro por 12 horas. O experimento foi realizado por meio do sistema autom��tico com célula de difus��o vertical de Franz e solu����o tamp��o fosfato pH 7,4 como solu����o receptora. A temperatura utilizada foi 32,5 o C. Os resultados demonstraram que o tipo e a concentra����o do pol��mero influenciou diretamente na libera����o do f��rmaco. Os melhores resultados em termos de controle de libera����o foram apresentados pelo pol��mero Policarbofil �� na concentra����o de 1,5%

Mediadores da via intr��nseca da morte celular programada relacionados �� infec����o in vitro pelo herpesvirus bovino tipo 5

Funda����o de Amparo �� Pesquisa do Estado de S��o Paulo (FAPESP)

Polimorfismos GSTM1, GSTT1 e GSTP1 da enzima Glutationa S-transferase como fatores moduladores do fen��tipo na anemia falciforme

Coordena����o de Aperfei��oamento de Pessoal de N��vel Superior (CAPES)

O DNA, seus incr��veis n��meros e seus segredos

O DNA existe por um ��nico motivo ��� criar mais DNA. Em cada célula do nosso organismo, o filamento estendido de DNA chega a ter cerca de 2 metros. Se voc�� imaginar que em nosso corpo h�� perto de 10 trilh��es de células, voc�� ter�� uma ideia da enormidade de DNA que n��s possu��mos. Assim, se todo o seu DNA fosse emendado em um ��nico filamento, seria t��o comprido que se estenderia da Terra �� Lua, ida e volta, v��rias vezes. Pudera, voc�� �� propriet��rio de 20 milh��es de quil��metros de DNA. Seu corpo, em suma, �� uma m��quina de produzir DNA e sem ele voc�� n��o conseguiria viver. Mas o pr��prio DNA, apesar de ser considerado ���a base da vida���, n��o est�� vivo. Ao contr��rio de qualquer outra mol��cula, ele ��, por assim dizer, ���inanimado���. N��o �� reativo e quimicamente inerte. Por essas raz��es, pode ser recuperado de restos de sangue, de s��men, ou de pele secos h�� muito tempo ��� milhares de anos, at��.