Caracterização clínica e molecular da infecção por Giardia Duodenalis em crianças em idade pré-escolar da cidade de Lisboa

As parasitoses intestinais, quer provocadas por protozoários quer por helmintas, afectam humanos a nível ubiquitário, independentemente do sexo, estrato social ou faixa etária, constituindo um verdadeiro problema de Saúde Pública. Dentro dos protozoários, Giardia duodenalis destaca-se por ser um dos principais agentes responsáveis pela doença diarreica infecciosa, afectando milhões de indivíduos em todo o mundo. Apesar da sua maior incidência nos países em vias de desenvolvimento, esta parasitose é actualmente considerada como uma infecção reemergente nos países desenvolvidos, particularmente em crianças frequentadoras de creches e jardins-de-infância. O presente estudo foi desenvolvido com o objectivo de realizar a caracterização clínica e molecular da giardíase em crianças de idade pré-escolar da cidade de Lisboa. Decorreu de Abril a Julho de 2009 e teve como população alvo 685 crianças dos três aos seis anos de idade, frequentadoras de 10 jardins-de-infância da rede de escolas públicas da capital. Participaram voluntariamente, com resposta aos inquéritos protocolares, preenchimento de consentimento informado e fornecimento de amostras biológicas de fezes, 317 crianças. Em oito delas, correspondendo a uma prevalência de 2,5%, e num familiar (irmão) foi identificada infecção por Giardia duodenalis. Salienta-se que este foi o único parasita com potencial patogénico identificado nas amostras de fezes recolhidas. Através de técnicas de genotipagem constatou-se que cinco dos isolados pertenciam ao genótipo A, três ao B e numa amostra não foi possível identificar o genótipo. Dentro da mesma escola as crianças infectadas apresentaram o mesmo genótipo de Giardia. O espectro de manifestações clínicas variou entre flatulência, diarreia aguda, anorexia, dor abdominal recorrente e distensão abdominal, não se conseguindo correlacionar com a variabilidade genética da Giardia duodenalis encontrada. Uma das tinha má progressão ponderal. Todas as crianças infectadas foram tratadas com metronidazol, sem efeitos adversos conhecidos, e o controlo, efectuado duas semanas depois, foi negativo. Em todas as escolas foram realizadas acções de formação de Educação para a Saúde para as crianças, pais, educadores e funcionários das escolas incluídas no estudo, sobre a temática em estudo. Caracterização clínica e molecular da infecção por Giardia duodenalis em crianças em idade pré-escolar da cidade de Lisboa Este estudo contribuiu para um melhor conhecimento epidemiológico da giardíase em Portugal.

Flexible gastrointestinal motility pressure sensors based on aluminum thin-film strain-gauge arrays

This paper reports on an innovative approach to measuring intraluminal pressure in the upper gastrointestinal (GI) tract, especially monitoring GI motility and peristaltic movements. The proposed approach relies on thin-film aluminum strain gauges deposited on top of a Kapton membrane, which in turn lies on top of an SU-8 diaphragm-like structure. This structure enables the Kapton membrane to bend when pressure is applied, thereby affecting the strain gauges and effectively changing their electrical resistance. The sensor, with an area of 3.4 mm2, is fabricated using photolithography and standard microfabrication techniques (wet etching). It features a linear response (R2 = 0.9987) and an overall sensitivity of 2.6 mV mmHg−1. Additionally, its topology allows a high integration capability. The strain gauges’ responses to pressure were studied and the fabrication process optimized to achieve high sensitivity, linearity, and reproducibility. The sequential acquisition of the different signals is carried out by a microcontroller, with a 10-bit ADC and a sample rate of 250 Hz. The pressure signals are then presented in a user-friendly interface, developed using the Integrated Development Environment software, QtCreator IDE, for better visualization by physicians.

Colapsibilidade da Veia Cava Inferior e sinais e sintomas de insuficiência cardíaca: novos insights e possíveis associações

FUNDAMENTO: Nos pacientes com Insuficiência Cardíaca Crônica (ICC) foram propostas medidas ultrassonográficas do Índice de Colapsibilidade da Veia Cava Inferior (ICVCI) para obter uma avaliação e classificação minuciosa da congestão hemodinâmica. OBJETIVO: A finalidade deste estudo era correlacionar os achados no exame físico com o ICVCI em pacientes com ICC. MÉTODOS: De acordo com um projeto de coorte retrospectivo, analisamos 54 pacientes com ICC, direita ou biventricular, classe NYHA III. O plano era determinar se alguma faixa de ICVCI basal poderia predizer uma persistência ou agravamento da congestão clínica achada no final do acompanhamento subsequente (isto é, após 1-2 meses do tratamento oral otimizado). Para essa finalidade, os pacientes foram subdivididos em três grupos de acordo com o valor de ICVCI basal: ≤ 15% (13 pts), 16 - 40% (21 pts) e > 40% (20 pts). Diversos critérios clínicos de congestão foram comparados por meio dos três grupos e incorporados subsequentemente ao modelo multivariado de Cox. RESULTADOS: Preditores multivariados de alto escore de congestão foram distensão da veia jugular (FC: 13,38 95% IC: 2,13 - 84 p = 0,0059) e estertores (FC: 11 95% C.I : 1,45 - 83,8 p = 0,0213). O ICVCI ≤ 15% esteve sempre associado com um alto escore de congestão na segunda visita; todavia, o ICVCI o ≤ 15% não predisse um alto escore de congestão na segunda visita. CONCLUSÃO: No âmbito da ICC, um baixo ICVCI não predisse, em forma confiável, um elevado escore de congestão. Não obstante, o conjunto com ICVCI ≤ 15% sempre se achou associado com sinais e sintomas de uma ICC descompensada, tanto do lado direito como do esquerdo. (Arq Bras Cardiol. 2012; [online].ahead print, PP.0-0)

Fitotoxicidade do herbicida CP. 50 144 para Sesamun indicum L. e Phaseolus vulgaris L. cultivados em soluções nutritivas

O presente trabalho relata um experimento em que foram verificados os efeitos fitotóxicos do herbicida 2-cloro-2', 6'-dietil-N-(metoximetil) acetanilida (CP 50144) em plántulas de gergelim (Sesamun indicum L.) e feijão (Phaseolus vulgaris L.), cultivados em solução nutritiva 0,5-Hoagland. 0 herbicida foi aplicado às folhas, nas doses respectivas de lug/10l, 5ug/ 10l, 25yg/10l, 125ug/10l, 250yg/10l e 500ug/10l. Para o tratamento às raízes, ele foi adicionado à solução nutritiva, nas doses de 1 ppm, 5 ppm, 25 ppm, 125 ppm, 625 ppm e 3125 ppm, respectivamente. O tratamento foliar revelou penetração lenta, tanto nas fôlhas de gergelim como nas de feijão, com pequena translocação e forte ação de contato, especialmente nas concentrações mais elevadas, superiores à da saturação (148 ppm). A absorção pelas raízes e lenta, tanto para o gergelim como para o feijão. Entretanto, o gergelim mostrou-se altamente tolerante ao CP 50144, até a concentração de 125 ppm, inclusive, não tendo demonstrado nenhum sintoma de injuria. Acima dessa concentração, o gergelim foi fortemente injuriado, tendo mostrado fortes sintomas de ação de contato, nas raízes, e sintomas gerais de intoxicação, na parte aerea, que levaram as plantas a morte. O feijão mostrou-se bastante sensível à ação do CP 50144, tendo apresentado forte sintomatologia de intoxicação, tanto por contato como por translocação apoplástica. São descritos os sintomas de fitotoxicidade do herbicida, para as duas plantas. O herbicida CP 50144 e altamente seletivo para o gergelim, mostrando-se bastante promissor para essa cultura. O herbicida mostrou ação inibidora da distensão celular, nas folhas novas de feijão. É interessante que se realizem estudos fitoteratológicos e fitofisiológicos com este herbicida, cujo modo de ação ainda nao e bem conhecido.

Os tubos abdominais dos machos de alguns Arctiidae e Ctnuchidae do Brasil

Nos machos de numerosas espécies de Arctiidae e Ctenuchidae encontra-se, ventralmente, entre o oitavo e o nono segmentos abdominais, um par de tubos protráteis que, como tudo indica, são os portadores de uma substância aromática, de qualidade, muitas vêzes, desagradável ao homem. As células tricogêneas destas cerdas têm aparentemente, uma função glandular fraca. Uma outra área glandular está localizada na parte ventral da cavidade, na qual se encontram os tubos quando em repouso. Cada célula possui uma escama odorífera que transmite a secreção para as cerdas dos tubos. Esta área glandular produz a substância aromática, já citada. A organização das células glandulares é apresentada nas figuras 8 e 11. Para entrar em função, isto é, para deixar evaporar a substância aromática os tubos são distendidos, saindo da cavidade onde, quando em repouso, permanecem retraídos em numerosas e profundas pregas. As cerdas dos tubos são automàticamente erigidas. O mecanismo da expulsão dos tubos, e sua distensão, liga-se a uma entrada de ar em um sistema de grandes sacos traqueais que incluem a base dos tubos, mecanismo êste, que é combinado com alterações de tensão dentro de uma listra cuticular, forte e elástica, e que transloca a base dos tubos abdominais para trás. O desdobramento da parede dos tubos verifica-se pela entrada de hemolinfa no interior dos mesmos. O enchimento dos sacos traqueais (que têm ligação direta com o grande espaço traqueal na base do abdômen) ocorre no momento da contração geral da musculatura inteira do corpo, sendo o volume da cavidade abdominal, dêste modo, consideràvelmente diminuído.

Coronary magnetic resonance angiography for assessment of the stent lumen: a phantom study.

PURPOSE: To evaluate the feasibility of visualizing the stent lumen using coronary magnetic resonance angiography in vitro. MATERIAL AND METHODS: Nineteen different coronary stents were implanted in plastic tubes with an inner diameter of 3 mm. The tubes were positioned in a plastic container filled with gel and included in a closed flow circuit (constant flow 18 cm/sec). The magnetic resonance images were obtained with a dual inversion fast spin-echo sequence. For intraluminal stent imaging, subtraction images were calculated from scans with and without flow. Subsequently, intraluminal signal properties were objectively assessed and compared. RESULTS: As a function of the stent type, various degrees of in-stent signal attenuation were observed. Tantalum stents demonstrated minimal intraluminal signal attenuation. For nitinol stents, the stent lumen could be identified, but the intraluminal signal was markedly reduced. Steel stents resulted in the most pronounced intraluminal signal voids. CONCLUSIONS: With the present technique, radiofrequency penetration into the stents is strongly influenced by the stent material. Thesefindings may have important implicationsforfuture stent design and stent imaging strategies.

Effect of somatostatin on duodenal glucose absorption in man.

OBJECTIVE: The hyperglycemic hyperinsulinemic clamp technique using intraduodenally infused glucose is an attractive tool for studying postprandial glucose metabolism under strictly controlled conditions. Because it requires the use of somatostatin (SST), we examined, in this study, the effect of SST on intestinal glucose absorption. CONTEXT: Twenty-six normal volunteers were given a constant 3-h intraduodenal infusion of glucose (6 mg.kg(-1).min(-1)) labeled with [2-(3)H]glucose for glucose absorption measurement. During glucose infusion, 19 subjects received iv SST at doses of 10-100 ng.kg(-1).min(-1) plus insulin and glucagon, and seven subjects were studied under control conditions. In the controls, glucose was absorbed at a rate that, after a 20-min lag period, equaled the infusion rate. RESULTS: With all the doses of SST tested, absorption was considerably delayed but equaled the rate of infusion after 3 h. At that time, only 5 +/- 2% of the total amount of infused glucose was unabsorbed in the control subjects vs. 36 +/- 2% (P < 0.001) in the SST-infused subjects. In the latter, the intraluminal residue was almost totally absorbed within 40 min of the cessation of SST infusion. At the lowest dose of SST tested (10 ng.kg(-1).min(-1)), suppression of insulin secretion was incomplete. CONCLUSION: These properties of SST hamper the use of intraduodenal hyperglycemic hyperinsulinemic clamps as a tool for exploring postprandial glucose metabolism.

Sleep EEG changes after middle cerebral artery infarcts in mice: different effects of striatal and cortical lesions.

STUDY OBJECTIVES: Hemispheric stroke in humans is associated with sleep-wake disturbances and sleep electroencephalogram (EEG) changes. The correlation between these changes and stroke extent remains unclear. In the absence of experimental data, we assessed sleep EEG changes after focal cerebral ischemia of different extensions in mice. DESIGN: Following electrode implantation and baseline sleep-wake EEG recordings, mice were submitted to sham surgery (control group), 30 minutes of intraluminal middle cerebral artery (MCA) occlusion (striatal stroke), or distal MCA electrocoagulation (cortical stroke). One and 12 days after stroke, sleep-wake EEG recordings were repeated. The EEG recorded from the healthy hemisphere was analyzed visually and automatically (fast Fourier analysis) according to established criteria. MEASUREMENTS AND RESULTS: Striatal stroke induced an increase in non-rapid eye movement (NREM) sleep and a reduction of rapid eye movement sleep. These changes were detectable both during the light and the dark phase at day 1 and persisted until day 12 after stroke. Cortical stroke induced a less-marked increase in NREM sleep, which was present only at day 1 and during the dark phase. In cortical stroke, the increase in NREM sleep was associated in the wake EEG power spectra, with an increase in the theta and a reduction in the beta activity. CONCLUSION: Cortical and striatal stroke lead to different sleep-wake EEG changes in mice, which probably reflect variable effects on sleep-promoting and wakefulness-maintaining neuronal networks.

Direct electrical stimulation using a battery-operated device for induction and modulation of colonic contractions in pigs.

Direct electrical stimulation of the colon offers a promising approach for the induction of propulsive colonic contractions by using an implantable device. The objective of this study was to assess the feasibility to induce colonic contractions using a commercially available battery-operated stimulator (maximum pulse width of 1 ms and maximum amplitude of 10 V). Three pairs of pacing electrodes were inserted into the cecal seromuscular layer of anesthetized pigs. During a first set of in vivo experiments conducted on six animals, a pacing protocol leading to cecum contractions was determined: stimulation bursts with 1 ms pulse width, 10 V amplitude (7-15 mA), 120 Hz frequency, and 30-s burst duration, repeated every 2-5 min. In a second testing phase, an evaluation of the pacing protocol was performed in four animals (120 stimulation bursts in total). By using the battery-operated stimulator, contractions of the cecum and movement of contents could be induced in 92% of all stimulations. A cecal shortening of about 30% and an average intraluminal pressure increase of 10.0 +/- 6.0 mmHg were observed.

Systematized stenting of Baerveldt shunts: techniques to reduce early post-operative hypotony

Purpose: To investigate the effect of the systematized use of intraluminal stents in Baerveldt shunts (BS) on early postoperative IOP control and complication rates. Methods: One hundred and twenty eyes with medically uncontrolled glaucoma were prospectively recruited to undergo BS implantation at Jules Gonin Eye Hospital, Switzerland. Baerveldt shunts were stented (full-length of the intraluminal tube) using a Supramid® 3.0 suture. A minority of shunts (37%) were also ligated intraoperatively and laser suture lysis performed postoperatively. Stent removals, either partial (retraction of 5mm) or complete, were carried out according to a predetermined protocol. Surgery was considered a success when IOP was ≤ 21mmHg and a minimum of 20% reduction from baseline was achieved with/without glaucoma medication (GMs). Hypotony related complications were defined as: choroidal effusions, shallow AC, hypotonous maculopathy or IOP≤5mmHg for over 2 weeks. Results: Mean age was 61.8 years (± standard deviation; ±21.5). Mean follow-up was 17.1 (±7.9) months. Mean preoperative IOP was 26.9 mmHg; mean IOP on the last visit 13.2 mmHg (p<0.001). At year one, the success rate was 87%. In 90% of eyes, IOP was ≤18 mmHg at last visit. Mean number of preoperatively GMs was 3.1; postoperatively 1.4 (p<0.001). Stent removals were performed in 87% of eyes (24% partial; 61% complete). 13% of eyes required no stent removal to reach target IOP. Complications were minor and infrequent (16%) and only 7% were hypotony related. Conclusions: Systematized use of intraluminal stents with Baerveldt aqueous shunts resulted in gradual and controlled IOP lowering with minimal hypotony-related complications. This may have important implications on clinical practice, given the rising rates of aqueous shunt implantation.

The interaction of human pathogenic arena viruses with the host cell

SummaryResearch projects presented in this thesis aimed to investigate two major aspects of the arenaviruses life cycle in the host cell: viral entry and the biosynthesis of the viral envelope glycoprotein.Old World arenaviruses (OWAV), such as Lassa virus (LASV) and lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV), attach to the cell by binding to their receptor, alpha-dystroglycan. Virions are then internalized by a largely unknown pathway of endocytosis and delivered to the late endosome/lysosome where fusion occurs at low pH. In the major project of my thesis, we sought to identify cellular factors involved in OWAV cell entry. Our work indicates that OWAV cell entry requires microtubular transport and a functional multivesicular body (MVB) compartment. Infection indeed depends on phosphatidyl inositol 3-kinase (PI3K) activity and lysobisphosphatidic acid (LBPA), a lipid found in membranes of intraluminal vesicles (ILVs) of the MVB. We further found a requirement of factors that are part of the endosomal sorting complex required for transport (ESCRT), involved in the formation of ILVs. This suggests an ESCRT-mediated sorting of virus- receptor complex during the entry process.During viral replication, biosynthesis of viral glycoprotein takes place in the endoplasmic reticulum (ER) of the host cell. When protein load exceeds the folding capacity of the ER, the accumulation of unfolded proteins is sensed by three ER resident proteins, activating transcription factor 6 (ATF6), inositol-requiring enzyme 1 (IRE1) and PKR-like ER kinase (PERK), whose signaling induces the cellular unfolded protein response (UPR). Our results indicate that acute LCMV infection transiently induces the activation of the ATF6 branch of the UPR, whereas the PERK, and IRE1 axis of UPR are neither triggered nor blocked during infection. Our data also demonstrate that activation of ATF6 pathway is required for optimal viral replication during acute infection.The formation of the mature, fusion-active form of arenaviruses glycoproteins requires proteolytic cleavage mediated by the cellular protease subtilisin kexin isozyme-1 (SKI-l)/site-l protease (SIP). We show that targeting the SKI-1/S1P enzymatic activity with specific inhibitors is a powerful strategy to block arenaviruses productive infection. Moreover, characterization of protease function highlights differences in processing between cellular and viral substrates, opening new possibilities in term of drug development against human pathogenic arenaviruses.RésuméLes projets de recherche présentés dans cette thèse visaient à étudier deux aspects du cycle de vie des arenavirus: l'entrée du virus dans la cellule hôte et la biosynthèse de la glycoprotéine durant la réplication virale.Les arenavirus du vieux monde (OWAV), tels que le virus de Lassa (LASV) et le virus de la chorioméningite lymphocytaire (LCMV) s'attachent à la cellule hôte en se liant à leur récepteur, l'alpha-dystroglycane. Les virions sont ensuite intemalisés par une voie d'endocytose inconnue et livrés à l'endosome tardif/lysosome, où le pH acide permet la fusion entre l'enveloppe virale et la membrane du compartiment. Le projet principal de ma thèse consistait à identifier les facteurs cellulaires impliqués dans l'entrée des OWAV dans la cellule hôte. Nos résultats indiquent que l'entrée des OWAV nécessite le transport microtubulaire et la présence d'un corps multivésiculaire (MVB) fonctionnel. L'infection dépend en effet de l'activité de phosphatidyl inositol 3-kinase (PI3K) et de lysobisphosphatidic acid (LBPA), un lipide présent dans les membranes des vésicules intraluminales (ILVs) du MVB. Nous avons également trouvé l'implication de facteurs constituant l'endosomal sorting complex required for sorting (ESCRT) qui joue un rôle dans la formation des ILVs. Ces donnés suggèrent l'incorporation du complexe virus-récepteur dans des ILVs durant le processus d'entrée.Lors de la réplication virale, la biosynthèse de la glycoprotéine virale a lieu dans le réticulum endoplasmique (ER) de la cellule hôte. Lorsque la charge de protéines nouvellement synthétisées excède la capacité de pliage des protéines dans le ER, l'accumulation de protéines mal pliées est détectée par trois facteurs: activating transcription factor 6 (ATF6), inositol-requiring enzyme 1 (IRE1) et PKR-like ER kinase (PERK). Leur signalisation constitue la réponse cellulaire face aux protéines mal pliées (UPR). Nos résultats montrent que l'infection aiguë avec LCMV induit transitoirement l'activation de la voie de signalisation ATF6 alors que les axes PERK et IRE1 de l'UPR ne sont ni induits ni bloqués pendant l'infection. Nos données prouvent également que l'activation de la voie ATF6 est nécessaire à une réplication virale optimale lors de l'infection aiguë avec LCMV.La maturation des glycoprotéines des arenavirus nécessite un clivage protéolytique par la protéase cellulaire subtilisin kexin isozyme-1 (SKI-l)/site-l protease (SIP). Nous avons démontré que le ciblage de l'activité enzymatique de SKI-1/SIΡ avec des inhibiteurs spécifiques est une stratégie prometteuse pour bloquer l'infection par les arenavirus. La caractérisation du mécanisme d'action de la protéase a, par ailleurs, révélé des différences au niveau du clivage entre les substrats cellulaires et viraux, ce qui ouvre de nouvelles perspectives en terme de développement de médicaments contre les arenavirus pathogènes pour l'homme.

Profile order and time-dependent artifacts in contrast-enhanced coronary MR angiography at 3T: origin and prevention.

To enhance the clinical value of coronary magnetic resonance angiography (MRA), high-relaxivity contrast agents have recently been used at 3T. Here we examine a uniform bilateral shadowing artifact observed along the coronary arteries in MRA images collected using such a contrast agent. Simulations were performed to characterize this artifact, including its origin, to determine how best to mitigate this effect, and to optimize a data acquisition/injection scheme. An intraluminal contrast agent concentration model was used to simulate various acquisition strategies with two profile orders for a slow-infusion of a high-relaxivity contrast agent. Filtering effects from temporally variable weighting in k-space are prominent when a centric, radial (CR) profile order is applied during contrast infusion, resulting in decreased signal enhancement and underestimation of vessel width, while both pre- and postinfusion steady-state acquisitions result in overestimation of the vessel width. Acquisition during the brief postinfusion steady-state produces the greatest signal enhancement and minimizes k-space filtering artifacts.

Trabalho em turnos: estado geral de saúde relacionado ao sono em trabalhadores de enfermagem

O objetivo deste estudo foi identificar os sintomas referentes ao estado geral de saúde associado ao trabalho em turnos de enfermagem e relacioná-los com a qualidade do sono. O estudo foi realizado no Hospital da Irmandade da Santa Casa de Poços de Caldas, Minas Gerais. Participaram 136 profissionais de enfermagem, com média de idade de 33,1 anos, divididos nas seguintes categorias: enfermeiro (8,1%); técnico de enfermagem (80,9%); auxiliar de enfermagem dos turnos diurno e noturno (11%). Os sintomas de saúde foram identificados a partir do Inventário de Estado Geral de Saúde, e a qualidade do sono foi avaliada pelo Diário do Sono. Os dados foram estatisticamente significativos pelo Teste Qui-Quadrado (p=0,021) para a presença do sintoma de flatulência ou distensão abdominal no turno noturno. Constatou-se com a análise de regressão linear múltipla que os sujeitos do turno diurno que apresentaram os sintomas de má digestão (às vezes ou sempre) e irritabilidade (sempre) tiveram pior qualidade de sono noturno.

Comportamento sexual de Anastrepha sororcula Zucchi (Diptera, Tephritidae) em laboratório

Anastrepha sororcula Zucchi, 1979, é uma das espécies de mosca-das-frutas mais disseminadas no País, sendo considerada a praga-chave que causa os maiores danos à produção de goiaba (Psidium guajava L., 1758) no Brasil. Em vista da importância desta espécie no complexo de pragas naturais da fruticultura brasileira e, em face à escassez de dados sobre sua biologia e comportamento, este trabalho teve por objetivo obter informações sobre a idade de maturação sexual de A. sororcula em laboratório e descrever seu comportamento reprodutivo. Os machos atingiram a maturidade sexual entre 7 e 18 dias após a emergência, com a maioria dos indivíduos tornando-se sexualmente maduros entre 10 e 13 dias de idade. Exibiram comportamento de sinalização às fêmeas, caracterizado pela distensão da região pleural do abdome, formando uma pequena bolsa de cada lado e, eversão de uma diminuta bolsa membranosa de cutícula retal que circunda a área anal. Durante este processo, os machos realizaram rápidos movimentos de vibração das asas, produzindo sinais audíveis. Uma gotícula foi liberada da região anal durante os movimentos de vibração alar. Após a atração das fêmeas, os machos realizaram uma série de movimentos elaborados de cortejo. As fêmeas alcançaram a maturação sexual entre 14 e 24 dias da emergência, com a maioria tornando-se sexualmente madura aos 19 dias de idade. A exibição diária das atividades sexuais foi confinada quase que exclusivamente ao período das 16:00-17:30h. A. sororcula apresentou um acentuado padrão de protandria.

Old world arenaviruses enter the host cell via the multivesicular body and depend on the endosomal sorting complex required for transport.

The highly pathogenic Old World arenavirus Lassa virus (LASV) and the prototypic arenavirus lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV) use α-dystroglycan as a cellular receptor and enter the host cell by an unusual endocytotic pathway independent of clathrin, caveolin, dynamin, and actin. Upon internalization, the viruses are delivered to acidified endosomes in a Rab5-independent manner bypassing classical routes of incoming vesicular trafficking. Here we sought to identify cellular factors involved in the unusual and largely unknown entry pathway of LASV and LCMV. Cell entry of LASV and LCMV required microtubular transport to late endosomes, consistent with the low fusion pH of the viral envelope glycoproteins. Productive infection with recombinant LCMV expressing LASV envelope glycoprotein (rLCMV-LASVGP) and LCMV depended on phosphatidyl inositol 3-kinase (PI3K) as well as lysobisphosphatidic acid (LBPA), an unusual phospholipid that is involved in the formation of intraluminal vesicles (ILV) of the multivesicular body (MVB) of the late endosome. We provide evidence for a role of the endosomal sorting complex required for transport (ESCRT) in LASV and LCMV cell entry, in particular the ESCRT components Hrs, Tsg101, Vps22, and Vps24, as well as the ESCRT-associated ATPase Vps4 involved in fission of ILV. Productive infection with rLCMV-LASVGP and LCMV also critically depended on the ESCRT-associated protein Alix, which is implicated in membrane dynamics of the MVB/late endosomes. Our study identifies crucial cellular factors implicated in Old World arenavirus cell entry and indicates that LASV and LCMV invade the host cell passing via the MVB/late endosome. Our data further suggest that the virus-receptor complexes undergo sorting into ILV of the MVB mediated by the ESCRT, possibly using a pathway that may be linked to the cellular trafficking and degradation of the cellular receptor.