Os motivos da não erupção dos terceiros molares

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Medicina Dentária

Xerostomia e hipofunção das glândulas salivares

Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Medicina Dentária

Endogenous interleukin-10 modulates fibrosis and regeneration in experimental chronic pancreatitis.

Interleukin (IL)-10, a potent anti-inflammatory cytokine, limits the severity of acute pancreatitis and downregulates transforming growth factor (TGF)-beta release by inflammatory cells on stimulation. Proinflammatory mediators, reactive oxygen species, and TGF-beta can activate pancreatic stellate cells and their synthesis of collagen I and III. This study evaluates the role of endogenous IL-10 in the modulation of the regeneration phase following acute pancreatitis and in the development of pancreatic fibrosis. IL-10 knockout (KO) mice and their C57BL/6 controls were submitted to repeated courses (3/wk, during 6 wk, followed by 1 wk of recovery) of cerulein-induced acute pancreatitis. TGF-beta(1) release was measured on plasma, and its pancreatic expression was assessed by quantitative RT-PCR and immunohistochemistry. Intrapancreatic IL-10 gene expression was assessed by semiquantitative RT-PCR, and intrapancreatic collagen content was assessed by picrosirius staining. Activated stellate cells were detected by immunohistochemistry. S phase intrapancreatic cells were marked using tritiated thymidine labeling. After repeated acute pancreatitis, IL-10 KO mice had more severe histological lesions and fibrosis (intrapancreatic collagen content) than controls. TGF-beta(1) plasma levels, intrapancreatic transcription, and expression by ductal and interstitial cells, as well as the number of activated stellate cells, were significantly higher. IL-10 KO mice disclosed significantly fewer acinar cells in S phase, whereas the opposite was observed for pseudotubular cells. Endogenous IL-10 controls the regeneration phase and limits the severity of fibrosis and glandular atrophy induced by repeated episodes of acute pancreatitis in mice.

Love is in the air: Sociality and pair bondedness influence sifaka reproductive signalling

© 2013 The Association for the Study of Animal Behaviour.Social complexity, often estimated by group size, is seen as driving the complexity of vocal signals, but its relation to olfactory signals, which arguably arose to function in nonsocial realms, remains underappreciated. That olfactory signals also may mediate within-group interaction, vary with social complexity and promote social cohesion underscores a potentially crucial link with sociality. To examine that link, we integrated chemical and behavioural analyses to ask whether olfactory signals facilitate reproductive coordination in a strepsirrhine primate, the Coquerel's sifaka, Propithecus coquereli. Belonging to a clade comprising primarily solitary, nocturnal species, the diurnal, group-living sifaka represents an interesting test case. Convergent with diurnal, group-living lemurids, sifakas expressed chemically rich scent signals, consistent with the social complexity hypothesis for communication. These signals minimally encoded the sex of the signaller and varied with female reproductive state. Likewise, sex and female fertility were reflected in within-group scent investigation, scent marking and overmarking. We further asked whether, within breeding pairs, the stability or quality of the pair's bond influences the composition of glandular signals and patterns of investigatory or scent-marking behaviour. Indeed, reproductively successful pairs tended to show greater similarity in their scent signals than did reproductively unsuccessful pairs, potentially through chemical convergence. Moreover, scent marking was temporally coordinated within breeding pairs and was influenced by past reproductive success. That olfactory signalling reflects social bondedness or reproductive history lends support to recent suggestions that the quality of relationships may be a more valuable proxy than group size for estimating social complexity. We suggest that olfactory signalling in sifakas is more complex than previously recognized and, as in other socially integrated species, can be a crucial mechanism for promoting group cohesion and maintaining social bonds. Thus, the evolution of sociality may well be reflected in the complexity of olfactory signalling.

Polymorphisms in the kinesin-like factor 1 B gene and risk of epithelial ovarian cancer in Eastern Chinese women.

The kinesin-like factor 1 B (KIF1B) gene plays an important role in the process of apoptosis and the transformation and progression of malignant cells. Genetic variations in KIF1B may contribute to risk of epithelial ovarian cancer (EOC). In this study of 1,324 EOC patients and 1,386 cancer-free female controls, we investigated associations between two potentially functional single nucleotide polymorphisms in KIF1B and EOC risk by the conditional logistic regression analysis. General linear regression model was used to evaluate the correlation between the number of variant alleles and KIF1B mRNA expression levels. We found that the rs17401966 variant AG/GG genotypes were significantly associated with a decreased risk of EOC (adjusted odds ratio (OR) = 0.81, 95 % confidence interval (CI) = 0.68-0.97), compared with the AA genotype, but no associations were observed for rs1002076. Women who carried both rs17401966 AG/GG and rs1002076 AG/AA genotypes of KIF1B had a 0.82-fold decreased risk (adjusted 95 % CI = 0.69-0.97), compared with others. Additionally, there was no evidence of possible interactions between about-mentioned co-variants. Further genotype-phenotype correlation analysis indicated that the number of rs17401966 variant G allele was significantly associated with KIF1B mRNA expression levels (P for GLM = 0.003 and 0.001 in all and Chinese subjects, respectively), with GG carriers having the lowest level of KIF1B mRNA expression. Taken together, the rs17401966 polymorphism likely regulates KIF1B mRNA expression and thus may be associated with EOC risk in Eastern Chinese women. Larger, independent studies are warranted to validate our findings.

Investigation and Development of a Fully 3D Tilt Capable Hybrid SPECT - CT System for Dedicated Breast Imaging

X-ray mammography has been the gold standard for breast imaging for decades, despite the significant limitations posed by the two dimensional (2D) image acquisitions. Difficulty in diagnosing lesions close to the chest wall and axilla, high amount of structural overlap and patient discomfort due to compression are only some of these limitations. To overcome these drawbacks, three dimensional (3D) breast imaging modalities have been developed including dual modality single photon emission computed tomography (SPECT) and computed tomography (CT) systems. This thesis focuses on the development and integration of the next generation of such a device for dedicated breast imaging. The goals of this dissertation work are to: [1] understand and characterize any effects of fully 3-D trajectories on reconstructed image scatter correction, absorbed dose and Hounsifeld Unit accuracy, and [2] design, develop and implement the fully flexible, third generation hybrid SPECT-CT system capable of traversing complex 3D orbits about a pendant breast volume, without interference from the other. Such a system would overcome artifacts resulting from incompletely sampled divergent cone beam imaging schemes and allow imaging closer to the chest wall, which other systems currently under research and development elsewhere cannot achieve.

The dependence of x-ray scatter radiation on object shape, size, material composition and the CT acquisition trajectory, was investigated with a well-established beam stop array (BSA) scatter correction method. While the 2D scatter to primary ratio (SPR) was the main metric used to characterize total system scatter, a new metric called ‘normalized scatter contribution’ was developed to compare the results of scatter correction on 3D reconstructed volumes. Scatter estimation studies were undertaken with a sinusoidal saddle (±15° polar tilt) orbit and a traditional circular (AZOR) orbit. Clinical studies to acquire data for scatter correction were used to evaluate the 2D SPR on a small set of patients scanned with the AZOR orbit. Clinical SPR results showed clear dependence of scatter on breast composition and glandular tissue distribution, otherwise consistent with the overall phantom-based size and density measurements. Additionally, SPR dependence was also observed on the acquisition trajectory where 2D scatter increased with an increase in the polar tilt angle of the system.

The dose delivered by any imaging system is of primary importance from the patient’s point of view, and therefore trajectory related differences in the dose distribution in a target volume were evaluated. Monte Carlo simulations as well as physical measurements using radiochromic film were undertaken using saddle and AZOR orbits. Results illustrated that both orbits deliver comparable dose to the target volume, and only slightly differ in distribution within the volume. Simulations and measurements showed similar results, and all measured dose values were within the standard screening mammography-specific, 6 mGy dose limit, which is used as a benchmark for dose comparisons.

Hounsfield Units (HU) are used clinically in differentiating tissue types in a reconstructed CT image, and therefore the HU accuracy of a system is very important, especially when using non-traditional trajectories. Uniform phantoms filled with various uniform density fluids were used to investigate differences in HU accuracy between saddle and AZOR orbits. Results illustrate the considerably better performance of the saddle orbit, especially close to the chest and nipple region of what would clinically be a pedant breast volume. The AZOR orbit causes shading artifacts near the nipple, due to insufficient sampling, rendering a major portion of the scanned phantom unusable, whereas the saddle orbit performs exceptionally well and provides a tighter distribution of HU values in reconstructed volumes.

Finally, the third generation, fully-suspended SPECT-CT system was designed in and developed in our lab. A novel mechanical method using a linear motor was developed for tilting the CT system. A new x-ray source and a custom made 40 x 30 cm2 detector were integrated on to this system. The SPECT system was nested, in the center of the gantry, orthogonal to the CT source-detector pair. The SPECT system tilts on a goniometer, and the newly developed CT tilting mechanism allows ±15° maximum polar tilting of the CT system. The entire gantry is mounted on a rotation stage, allowing complex arbitrary trajectories for each system, without interference from the other, while having a common field of view. This hybrid system shows potential to be used clinically as a diagnostic tool for dedicated breast imaging.

BENIGN URETHRAL POLYPS

Ten male patients presented between 1985 and 1991 with benign urethral polyps. This lesion is believed to represent a developmental error in the invagination process of the submucous glandular material of the inner zone of the prostate. The clinicopathological features of the condition are discussed and the literature is reviewed.

Vitamin D3 suppresses morphological evolution of the cribriform cancerous phenotype

Development of cribriform morphology (CM) heralds malignant change in human colon but lack of mechanistic understanding hampers preventive therapy. This study investigated CM pathobiology in three-dimensional (3D) Caco-2 culture models of colorectal glandular architecture, assessed translational relevance and tested effects of 1,25(OH)2D3, the active form of vitamin D. CM evolution was driven by oncogenic perturbation of the apical polarity (AP) complex comprising PTEN, CDC42 and PRKCZ (phosphatase and tensin homolog, cell division cycle 42 and protein kinase C zeta). Suppression of AP genes initiated a spatiotemporal cascade of mitotic spindle misorientation, apical membrane misalignment and aberrant epithelial configuration. Collectively, these events promoted “Swiss cheese-like” cribriform morphology (CM) comprising multiple abnormal “back to back” lumens surrounded by atypical stratified epithelium, in 3D colorectal gland models. Intestinal cancer driven purely by PTEN-deficiency in transgenic mice developed CM and in human CRC, CM associated with PTEN and PRKCZ readouts. Treatment of PTEN-deficient 3D cultures with 1,25(OH)2D3 upregulated PTEN, rapidly activated CDC42 and PRKCZ, corrected mitotic spindle alignment and suppressed CM development. Conversely, mutationally-activated KRAS blocked 1,25(OH)2D3 rescue of glandular architecture. We conclude that 1,25(OH)2D3 upregulates AP signalling to reverse CM in a KRAS wild type (wt), clinically predictive CRC model system. Vitamin D could be developed as therapy to suppress inception or progression of a subset of colorectal tumors.

Estudo de otimização de imagem e dose em mamografia digital

O objetivo deste trabalho foi efetuar um estudo de otimização dos parâmetros de exposição do mamógrafo digital da marca GE, modelo Senographe DS instalado no Instituto Português de Oncologia de Coimbra (IPOC) baseado numa análise contraste detalhe e avaliar o impacto do resultado obtido na melhoria da capacidade de detecção clínica das estruturas da mama. O mamógrafo em estudo dispõe de um sistema de controle automático da exposição designado por sistema AOP (Automatic Optimization of Parameters) que foi otimizado pelo fabricante a partir da razão contraste ruído. O sistema AOP é usado na prática clínica na quase totalidade dos exames de mamografia realizados no IPOC. Tendo em conta o tipo de estrutura que se pretende visualizar na mamografia, nomeadamente estruturas de baixo contraste como as massas e estruturas de dimensão submilimétrica como as microcalcificações, a análise contraste detalhe poderia constituir uma abordagem mais adequada para o estudo de otimização dos parâmetros de exposição uma vez que permitiria uma avaliação conjunta do contraste, da resolução espacial e do ruído da imagem. Numa primeira fase do trabalho foi efetuada a caracterização da prática clínica realizada no mamógrafo em estudo em termos de espessura de mama comprimida “típica”, dos parâmetros técnicos de exposição e das opções de processamento das imagens aplicadas pelo sistema AOP (combinação alvo/filtro, tensão aplicada na ampola - kVp e produto corrente-tempo da ampola - mAs). Numa segunda fase foi realizado um estudo de otimização da qualidade da imagem versus dose na perspectiva dos parâmetros físicos. Para tal foi efetuada uma análise contrastedetalhe no objeto simulador de mama CDMAM e usada uma figura de mérito definida a partir do IQFinv (inverted image quality figure) e da dose glandular média. Os resultados apontaram para uma diferença entre o ponto ótimo resultante do estudo de otimização e o ponto associado aos parâmetros de exposição escolhidos pelo sistema AOP, designadamente no caso da mama pequena. Sendo a qualidade da imagem na perspectiva clínica um conceito mais complexo cujo resultado da apreciação de uma imagem de boa qualidade deve ter em conta as diferenças entre observadores, foi efetuado na última parte deste trabalho um estudo do impacto clínico da proposta de otimização da qualidade de imagem. A partir das imagens realizadas com o objeto simulador antropomórfico TOR MAM simulando uma mama pequena, seis médicos(as) radiologistas com mais de 5 anos de experiência em mamografia avaliaram as imagens “otimizadas” obtidas utilizando-se os parâmetros técnicos de exposição resultantes do estudo de otimização e a imagem resultante da escolha do sistema AOP. A análise estatística das avaliações feitas pelos médicos indica que a imagem “otimizada” da mama pequena apresenta uma melhor visualização das microcalcificações sem perda da qualidade da imagem na deteção de fibras e de massas em comparação com a imagem “standard”. Este trabalho permitiu introduzir uma nova definição da figura de mérito para o estudo de otimização da qualidade da imagem versus dose em mamografia. Permitiu também estabelecer uma metodologia consistente que pode facilmente ser aplicada a qualquer outro mamógrafo, contribuindo para a área da otimização em mamografia digital que é uma das áreas mais relevantes no que toca à proteção radiológica do paciente.

Relatório de estágio em nutrição em pediatria

Relatório de estágio de mestrado, Nutrição Clínica, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2014

Mucopiocelo fronto-etmoidal, a propósito de um caso clínico

O mucocelo é uma lesão quística, benigna, expansiva dos seios perinasais. A sobreinfecção deste, designada de mucopiocelo, pode levar a um período de crescimento rápido, com maior risco de complicações. Relata-se o caso clínico de uma doente do sexo feminino, 59 anos, que recorreu ao Serviço de Urgência após crise inaugural de convulsão tónico-clónica generalizada, com queixas de aumento de volume periorbitário direito e febre desde há 1 semana. Apresentava à direita celulite orbitária e proptose ínfero-externa, com área de flutuação na parte medial da pálpebra superior, oftalmoplegia e quemose do olho direito acompanhada de rinorreia mucopurulenta. Realizou TC que demonstrou volumoso abcesso subperiosteal direito, ao nível da parede medial da órbita, tendo como ponto de partida aparente as células etmoidais anteriores homolaterais e seio frontal direito. Colocou-se a hipótese de mucopiocelo fronto-etmoidal. Foi submetida a drenagem de urgência do abcesso e a cirurgia endoscópica nasal com marsupialização da lesão fronto-etmoidal. Verificou-se resolução completa do quadro clínico. Apesar de consideradas lesões benignas, os mucocelos, apresentam potencial destrutivo, principalmente se infectados, necessitando, por vezes, de intervenção cirúrgica de urgência. A abordagem endoscópica destas lesões reafirma-se como tratamento de eleição.

Caracterização genética da Glucano Sintetase de Pneumocystis jirovecii

Pneumocystis jirovecii é um micro-organismo fúngico que pode causar pneumonia em doentes imunocomprometidos. O ciclo de vida de Pneumocystis inclui uma forma biológica trófica e outra quística na qual estão presentes, em sua composição, hidratos de carbono chamados β-Glucanos. Estes componentes são liberados na corrente sanguínea após lise do micro-organismo pela resposta imunitária ou fármacos, sendo assim, considerado um marcador sorológico que atua como auxiliar no diagnóstico da PPc. Porém, este marcador não é específico para o gênero Pneumocystis, podendo ser um teste positivo em outras infecções fúngicas como a candidíase. Caracterizar a sequência genética da Glucano Sintetase permite uma nova abordagem em relação aos testes sorológicos e a possíveis novos alvos terapêuticos. Um teste sorológico para o β-Glucano específico para P. jirovecii podendo ser um marcador muito mais útil e confiável do que os utilizados atualmente. Neste trabalho foi feita a caracterização genética do fragmento correspondente à Glucano Sintetase de P. jirovecii com base na sequência de β-Glucano de P. carinii e na sequência completa de P. jirovecii através de metodologias de PCRs. Com o resultado do sequenciamento do fragmento de β-Glucano de P. jirovecii puderam ser observadas possíveis bases candidatas a polimorfismos de base única (SNP). Determinar os polimorfismos em uma sequência resulta em conhecimento da diversidade genética do micro-organismo para além de reconhecer marcadores moleculares que podem determinar sua origem geográfica, resistência a fármacos e fatores de virulência. Duas bases foram identificadas na sequência como possíveis SNPs. Estudos em projetos futuros com técnicas como o RFLP podem caracterizar e determinar as consequências e importância destes polimorfismos no fragmento da Glucano Sintetase de P. jirovecii. Estabelecer esta importância pode levar à compreensão do modelo de infecção e defesa deste micro-organismo para que possamos perceber melhor sua atuação

Detección de mutaciones en el gen CFTR en una población de pacientes pediátricos con asma en la ciudad de Bogotá

Introducción: El asma es una enfermedad inflamatoria crónica de las vías respiratorias. Se asocia a hiperreactividad bronquial que lleva a episodios recurrentes de sibilancias, disnea y tos, articularmente en la noche o en la madrugada. Estos episodios se asocian con obstrucción de la vía aérea la cual es reversible con farmacoterapia. Esta enfermedad constituye un problema de salud pública a nivel mundial y su prevalencia en Colombia es cerca del 8%. Dentro los factores que contribuyen al desarrollo del asma se encuentran los ambientales y los genéticos. Se han realizado más de 500 investigaciones de asociación y en ellas el gen de la conductancia transmembranal de la fibrosis quística (CFTR) ha emergido como un gen candidato que participa en la patofisiología del asma. Sin embargo, la asociación entre mutaciones en el gen CFTR y el desarrollo de asma es hasta el presente controversial. Algunos de los estudios realizados han establecido que el estado de portador de mutaciones en el gen CFTR contribuye a la aparición de asma, otros afirman que estas mutaciones pueden participar como un factor protector e impedir el desarrollo de la enfermedad y algunas investigaciones han arrojado la ausencia de cualquier tipo de asociación. Objetivos: En el presente estudio se busca determinar la frecuencia de las mutaciones más frecuentemente causantes de FQ en Colombia, en una muestra de pacientes pediátricos asmáticos de la ciudad de Bogotá. Materiales y Métodos: Se genotipificaron 101 pacientes pediátricos con diagnóstico clínico y paraclínico de asma, se realizo extracción de ADN y análisis molecular para las mutaciones de p.F508del, c.1881+1.6 KbA>G, p.G542X y 621+1G>T del gen de la Fibrosis Quística, mediante amplificación por PCR utilizando primers específicos, seguida de digestión con enzimas de restricción y electroforesis en geles de poliacrilamida. Resultados y Discusión: Se identificaron dos portadores: uno para la mutación p.F508del y otro para la mutación p.G542X. Según estos hallazgos la tasa de portadores para estas mutaciones es de 1 en 50. Conclusión: No hay diferencia estadísticamente significativa entre la tasa de portadores de la mutación p.F508del en la población Colombiana (1/84) y la muestra analizada (p < 0.05). Sin embargo, no es posible establecer si existe una asociación entre el estado de portador y el desarrollo de asma.

Evaluación de la efectividad de una organización en el campo de percepción de marca usando un sistema de simulación computarizado basado en agentes

El presente proyecto de investigación tiene como objetivo general evaluar la efectividad de los esfuerzos de una unidad de negocio particular de la compañía Novartis de Colombia S.A. en el área de la percepción de marca mediante un sistema de simulación que implementa una metodología para la medición de esta última. Se tiene en cuenta que contar con datos exactos acerca de cómo los clientes finales perciben una marca es un tarea dispendiosa y que aún no tiene una fórmula matemática, por lo tanto, es muy subjetivo el proceso de entender a los consumidores por parte de los directivos de la empresa. El proceso planea que por medio del procedimiento planteado que se basa en una simulación por computador y más concretamente con una modelación basada en agentes se permita acercar a las partes involucradas en el proceso de compra, es decir, la empresa involucrada, vendedores, clientes y finalmente clientes potenciales.

Eficacia del diagnóstico prenatal no invasivo por células fetales libres en sangre materna 1990-2014. Revisión sistemática

ANTECEDENTES: El aislamiento de células fetales libres o ADN fetal en sangre materna abre una ventana de posibilidades diagnósticas no invasivas para patologías monogénicas y cromosómicas, además de permitir la identificación del sexo y del RH fetal. Actualmente existen múltiples estudios que evalúan la eficacia de estos métodos, mostrando resultados costo-efectivos y de menor riesgo que el estándar de oro. Este trabajo describe la evidencia encontrada acerca del diagnóstico prenatal no invasivo luego de realizar una revisión sistemática de la literatura. OBJETIVOS: El objetivo de este estudio fue reunir la evidencia que cumpla con los criterios de búsqueda, en el tema del diagnóstico fetal no invasivo por células fetales libres en sangre materna para determinar su utilidad diagnóstica.  MÉTODOS: Se realizó una revisión sistemática de la literatura con el fin de determinar si el diagnóstico prenatal no invasivo por células fetales libres en sangre materna es efectivo como método de diagnóstico.  RESULTADOS: Se encontraron 5,893 artículos que cumplían con los criterios de búsqueda; 67 cumplieron los criterios de inclusión: 49.3% (33/67) correspondieron a estudios de corte transversal, 38,8% (26/67) a estudios de cohortes y el 11.9% (8/67) a estudios casos y controles. Se obtuvieron resultados de sensibilidad, especificidad y tipo de prueba. CONCLUSIÓN: En la presente revisión sistemática, se evidencia como el diagnóstico prenatal no invasivo es una técnica feasible, reproducible y sensible para el diagnóstico fetal, evitando el riesgo de un diagnóstico invasivo.