ESCCAR international congress on Rickettsia and other intracellular bacteria.

The European Society for the study of Chlamydia, Coxiella, Anaplasma and Rickettsia (ESCCAR) held his triennial international meeting in Lausanne. This meeting gathered 165 scientists from 28 countries and all 5 continents, allowing efficient networking and major scientific exchanges. Topics covered include molecular and cellular microbiology, genomics, as well as epidemiology, veterinary and human medicine. Several breakthroughs have been revealed at the meeting, such as (i) the presence of CRISPR (the "prokaryotic immune system") in chlamydiae, (ii) an Anaplasma effector involved in host chromatin remodelling, (iii) the polarity of the type III secretion system of chlamydiae during the entry process revealed by cryo-electron tomography. Moreover, the ESCCAR meeting was a unique opportunity to be exposed to cutting-edge science and to listen to comprehensive talks on current hot topics.

Evaluation of a new serological test for the detection of anti-Coxiella and anti-Rickettsia antibodies.

Coxiella burnetii and members of the genus Rickettsia are obligate intracellular bacteria. Since cultivation of these organisms requires dedicated techniques, their diagnosis usually relies on serological or molecular biology methods. Immunofluorescence is considered the gold standard to detect antibody-reactivity towards these organisms. Here, we assessed the performance of a new automated epifluorescence immunoassay (InoDiag) to detect IgM and IgG against C. burnetii, Rickettsia typhi and Rickettsia conorii. Samples were tested with the InoDiag assay. A total of 213 sera were tested, of which 63 samples from Q fever, 20 from spotted fever rickettsiosis, 6 from murine typhus and 124 controls. InoDiag results were compared to micro-immunofluorescence. For acute Q fever, the sensitivity of phase 2 IgG was only of 30% with a cutoff of 1 arbitrary unit (AU). In patients with acute Q fever with positive IF IgM, sensitivity reached 83% with the same cutoff. Sensitivity for chronic Q fever was 100% whereas sensitivity for past Q fever was 65%. Sensitivity for spotted Mediterranean fever and murine typhus were 91% and 100%, respectively. Both assays exhibited a good specificity in control groups, ranging from 79% in sera from patients with unrelated diseases or EBV positivity to 100% in sera from healthy patients. In conclusion, the InoDiag assay exhibits an excellent performance for the diagnosis of chronic Q fever but a very low IgG sensitivity for acute Q fever likely due to low reactivity of phase 2 antigens present on the glass slide. This defect is partially compensated by the detection of IgM. Because it exhibits a good negative predictive value, the InoDiag assay is valuable to rule out a chronic Q fever. For the diagnosis of rickettsial diseases, the sensitivity of the InoDiag method is similar to conventional immunofluorescence.

First identification of natural infection of Rickettsia rickettsii in the Rhipicephalus sanguineus tick, in the State of Rio de Janeiro

The Brazilian Spotted Fever (BSF) is a zoonotic disease caused by Rickettsia rickettsii and transmitted by ticks of the genus Amblyomma, more frequently, Amblyomma cajennense. The aim of this paper was to report the first molecular detection of R. rickettsii on R. sanguineus naturally infected in Rio de Janeiro, Brazil. Ticks were collected from dogs in a rural region of Resende municipality, Rio de Janeiro State, Brazil (22º30'9.46"S, 44º42'44.29"WO), where occurred five human cases of BSF in 2006. The ticks were identified under a stereoscopic microscope and separated in pools by stages, species and sex. DNA extraction was carried out using QIAamp DNA Mini Kit (QIAGEN®). The DNA was submitted to PCR amplification using 04 set of primers: Rr190.70p/Rr190.602n (OmpA, 532bp), BG1-21/BG2-20 (OmpB, 650bp), Tz15/Tz16 (17 kDa protein-encoding gene, 246bp) and RpCS.877p/RpCS.1258n (gltA, 381bp). PCR products were separated by electrophoresis on 1% agarose gels and visualized under ultraviolet light with ethidium bromide. PCR products of the expected sizes were purified by QIAquick® and sequenced by ABI PRISM®. The generated nucleotide sequences were edited with using Bioedit® software and compared with the corresponding homologous sequences available through GenBank, using Discontiguous Mega Blast (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). It was confirmed R. rickettsii by sequencing of the material (GenBank FJ356230). The molecular characterization of R. rickettsii in the tick R. sanguineus emphasizes the role of dogs as carriers of ticks from the environment to home. Moreover, this result suggests that there is a considerable chance for active participation of R. sanguineus as one of tick species in the transmission of R. ricketsii to human being in the Brazilian territory.

Aspectos histológicos e morfométricos dos testículos de gatos domésticos (Felis catus)

Nesta pesquisa foram obtidos dados histológicos e morfométricos comparativos sobre os testículos de gatos, pós-orquiectomia, divididos em dois grupos: Grupo 1, gatos com até 1 ano de idade e Grupo 2, animais acima de 1 ano. Verificou-se que: (1) aos 4 meses de idade os túbulos seminíferos apresentaram-se pouco desenvolvidos e com ausência de luz, epitélio seminífero baixo, células de Sertoli indiferenciadas e tecido intersticial escasso; (2) aos 5 meses os túbulos seminíferos começaram a se diferenciar com aumento do diâmetro e luz tubulares e as demais estruturas permaneceram semelhantes à observação anterior; (3) aos 6-7 meses ocorreu o início da espermatogênese e espermiogênese; as células de Leydig apareceram maiores, poliédricas com citoplasma vacuolizado e núcleo claro, e tecido intersticial esparso com poucos vasos sangüíneos; (4) os animais com 1 ano de idade apresentaram morfologia testicular igual à do animal adulto, com túbulos seminíferos de maior diâmetro, epitélio germinativo alto e luz tubular pequena, as células de Leydig aparecendo poliédricas, com dimensões variadas, citoplasma vacuolizado, núcleo claro e nucléolo evidente, e espaço intertubular seminífero variado com vasos sanguíneos, predominantemente evidentes; (5) no Grupo 1 o diâmetro médio dos túbulos seminíferos foi de 160,58µm e no Grupo 2 foi de 185,94µm, sendo os valores médios significantes entre si; (6) a altura média do epitélio seminífero foi de 49,51µm para o Grupo 1 e de 63,29µm para o Grupo 2, estaticamente significantes; (7) os maiores valores mensurados foram obtidos para os gatos do Grupo 2, por serem gatos adultos e portanto com os órgãos reprodutores funcionais.

Estudo microscópico e macroscópico, com enfoque radiográfico e de alizarina, no desenvolvimento embrionário e fetal de gatos domésticos (Felis catus) em diferentes idades gestacionais

O gato doméstico (Felis catus) foi nomeado por Carolus Linnaeus em seu livro Systema Naturae, em 1798. A família Felidea apresenta muita semelhança morfológica com os felinos selvagens. O estudo da embriologia do gato doméstico é de grande valia, uma vez que, é considerado um importante modelo animal quando comparado aos gatos selvagem em extinção, especialmente relacionado às pesquisas sobre biologia reprodutiva. Este trabalho objetivou análisar e comparar as fases embrionárias de quatro embriões e um feto de felinos domésticos. Nos embriões com idade gestacional estimada em 17 dias (0,5cm CR) podemos observar pela análise macroscópica a presença de dilatação rostral correspondente ao prosencéfalo, o local placóide do cristalino, a flexura cervical, os quatro arcos faríngeos com os sulcos que o dividem, a proeminência cardíaca, o indício do brotamento do membro pélvico, além da presença de somitos. Na região caudal do embrião, visualizamos a curvatura cranio-caudal, permitindo ao mesmo uma posição em formato de "C". Nos embriões com idade gestacional estimada em 22 dias (1,2cm CR), na análise macroscópica foi visualizado o prosencéfalo, vesícula óptica com pigmentação da retina, vesícula ótica, quarto ventrículo, fígado, membros torácicos e pélvicos com discreta distinção dos dígitos e vascularização superficial. Nos embriões com idade gestacional estimada em 25 dias (1,5cm CR) notamos a presença do prosencéfalo e mesencéfalo, a curvatura cervical pronunciada, vesícula óptica com forte pigmentação da retina, vesícula ótica, membros pélvicos e torácicos bem desenvolvidos, com distinção dos dígitos e fígado bem pronunciado. Os fetos com idade gestacional estimada em 52 dias (10cm CR) possuem estruturas internas e externas facilmente identificadas em animais adultos. Com relação às estruturas ósseas notamos que as mesmas não apresentam nenhuma epífise óssea formada, sendo visíveis somente as diáfises ósseas. Na análise microscópica, o embrião de idade gestacional de 19 dias (0,9cm CR) revelou a presença do rostro, cavidade oral com lábio superior e inferior, cavidade nasal, olho e a abertura do 4º ventrículo encefálico, esôfago, coração com átrio e ventrículo, pulmão, fígado, crista mesonéfrica, gônada primitiva, estômago, broto do membro torácico, coluna vertebral e a medula espinhal em formação. Esse trabalho é de grande importância para o estudo da morfologia externa e interna de gatos domésticos, principalmente no que diz respeito ao desenvolvimento ósseo e articular, considerando as alterações que podem ou não ser promovidas pelo uso de terapias medicamentosas ou celulares durante o desenvolvimento embrionário e fetal.

Pre-and post-puberty physiological plasma oxytocin concentrations in male domestic cats (Felis silvestris catus)

The hormone oxytocin is released by the neuropituitary gland through stimulation of the neurons of the supraoptic and paraventricular nuclei of the hypothalamus. In order to determine the physiological concentrations of this hormone in domestic cats, blood samples were collected from 15 male animals (Felis silvestris catus) during the pre- and post-puberty periods (at four and eight months of age, respectively). Oxytocin determination was accomplished by radioimmunoassay. The average oxytocin concentrations measured in the pre- and post-puberty periods were 2.54±0.24 (μg/dL) and 2.53±0.28 (μg/dL), respectively, and there were no statistical differences between these measurements. Because there are few literature on the analysis of this hormone, especially in the case of male Felis silvestris catus, more studies on the influence of oxytocin on the physiology and reproduction of this species should be conducted under maintenance and situations of stress (such as transportation), and other routine events.

Aspectos morfométricos do timo em gatos domésticos (Felis domesticus)

O timo é um órgão linfático primário que desenvolve sua atividade em organismos jovens. Apesar de sua função ser responsável por mecanismos fundamentais na aquisição das defesas e conseqüentes respostas orgânicas, ela ainda não está totalmente esclarecida, nem tampouco as bases morfológicas que respondem por tais funções, como o processo de desenvolvimento e involução do órgão. Objetivou-se analisar e caracterizar os aspectos morfológicos do timo, tais como seu tamanho e volume, e aspectos histológicos do timo em gatos, correlacionando o sexo e o desenvolvimento etário. Doze timos provenientes de fetos de gatos domésticos (Felis domesticus) sem raça definida (SRD), machos e fêmeas, separados em três grupos etários. O timo apresentou-se com uma coloração rosa-pálida e com duas porções, a torácica e a cervical, sendo que cada uma delas possuía um lobo direito e um lobo esquerdo em sua maioria. A porção torácica localizava-se em região de mediastino cranial, entre os pulmões e à base do coração. E a porção cervical estendia-se além das costelas em sentido cranial, estando localizada ventralmente à traqueia. A estrutura celular do timo demonstrou-se organizada com a presença de agregados concêntricos, os chamados corpúsculos tímicos, formados por células epiteliais, sustentada por uma cápsula de tecido conjuntivo de onde partiam septos que ao penetrar no órgão dividia-o em lóbulos. Ocorreram variações significativas quanto à lobação e as dimensões do timo entre indivíduos da mesma faixa etária, e entre sexos diferentes. Os valores relativos ao comprimento, espessura e largura, de maneira geral, apresentaram aumento, em conformidade ao desenvolvimento dos animais, mas com diferenças entre os sexos.

Eficácia do fipronil em cães infestados com diferentes cargas parasitárias de Ctenocephalides felis felis (Siphonaptera: Pulicidae)

O objetivo do trabalho foi avaliar através de teste in vivo, a eficácia e o período residual de proteção do fipronil 10% "top spot" em cães infestados com diferentes cargas parasitárias de Ctenocephalides felis felis. Foram utilizados 24 cães da raça Beagle, compondo seis animais por grupo. Os cães foram divididos em quatro grupos. Os cães dos grupos controles I e II não receberam tratamento, enquanto que os cães dos grupos tratados I e II receberam tratamento com formulação de fipronil 10% "top spot". Os cães dos grupos controle I e tratado I foram infestados com 100 pulgas adultas não alimentadas, e os cães dos grupos controle II e tratado II foram infestados com 300 pulgas adultas não alimentadas. As infestações foram realizadas nos dias, -2, +5, +12, +19, +26, +33 e +40 e nos dias +2, +7, +14, +21, +28, +35 e +42 foi realizada retirada mecânica e contagem de pulgas para avaliação. As eficácias pulguicidas, para o grupo tratado I, nos dias +2, +7, +14, +21, +28, +35 e +42, foram respectivamente 99,36%; 99,73%; 99,48%; 99,74%; 99,75%; 95,06% e 67,62%. As eficácias pulguicidas, para o grupo tratado II, avaliadas nos mesmos dias, foram respectivamente 100%; 100%; 100%; 100%; 99,91%; 95,60% e 68,55%. O fipronil mostrou-se eficaz na eliminação das pulgas em cães até o dia +35. A análise estatística comparativa entre as médias de pulgas vivas, entre os grupos controle I e tratado I, demonstrou que ocorreu diferença significativa (p≤0,05) para os desafios em todos os dias experimentais, após o tratamento. Os grupos controle II e tratado II também apresentaram diferença significativa (p≤0,05) para os desafios em todos os dias experimentais, após o tratamento. A análise estatística entre os grupos tratados I e II demonstrou que não ocorreu diferença significativa (p≥0,05) para os desafios em todos os dias experimentais. O desafio foi encerrado no dia +42 já que a eficácia do fipronil nos grupos tratados I e II foram inferiores 70%. O produto em teste mostrou-se eficaz na eliminação das pulgas em cães até o dia + 35, não apresentando mais efeito residual de proteção quando os animais foram reinfestados. Não houve diferença significativa nos níveis de eficácia entre os grupos infestados com 100 e 300 exemplares adultos de C. felis felis ao longo do período experimental.

Estudio molecular del gen de la prolactina en el gato doméstico (Felis catus)

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Biología Molecular e Ingeniería Genética) UANL

Estado actual de la rabia, cobertura y porcentaje de vacunación antirrábica en perros Canis familiaris (L.) 1758 y gatos felis catus (L.)1758, durante 1997 y 1998, en el área limítrofe de la zona metropolitana de Monterrey, Nuevo León, México

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Manejo de Vida Silvestre) UANL

Detección de Rickettsia typhi ( Rickettsiales: Rickettsiaceae) en roedores y vectores relacionados en el noreste de México

Tesis (Maestría en Ciencias en el Ãrea de Entomología Médica) UANL

Estudio de los genes relacionados a prolactina en el gato doméstico(Felis catus)

Tesis (Maestría en Ciencias con Especialidad en Biología Molecular e Ingeniería Genética) UANL

Estudio de la familia génica GH-PL en el gato doméstico (Felis catus) : un modelo molecular para precisar la evolución de los carnívoros

Tesis (Doctorado en Ciencias con Especialidad en Biología Molecular e Ingeniería Genética) UANL

Identificación y caracterización de rickettsia sp. y sus posibles artrópodos vectores en el estado de Nuevo León y Veracruz, México.

Tesis (Doctorado en Ciencias con Acentuación en Entomología Médica) UANL, 2012.

Estimated Number of Birds Killed by House Cats (Felis catus) in Canada

Predation by house cats (Felis catus) is one of the largest human-related sources of mortality for wild birds in the United States and elsewhere, and has been implicated in extinctions and population declines of several species. However, relatively little is known about this topic in Canada. The objectives of this study were to provide plausible estimates for the number of birds killed by house cats in Canada, identify information that would help improve those estimates, and identify species potentially vulnerable to population impacts. In total, cats are estimated to kill between 100 and 350 million birds per year in Canada (> 95% of estimates were in this range), with the majority likely to be killed by feral cats. This range of estimates is based on surveys indicating that Canadians own about 8.5 million pet cats, a rough approximation of 1.4 to 4.2 million feral cats, and literature values of predation rates from studies conducted elsewhere. Reliability of the total kill estimate would be improved most by better knowledge of feral cat numbers and diet in Canada, though any data on birds killed by cats in Canada would be helpful. These estimates suggest that 2-7% of birds in southern Canada are killed by cats per year. Even at the low end, predation by house cats is probably the largest human-related source of bird mortality in Canada. Many species of birds are potentially vulnerable to at least local population impacts in southern Canada, by virtue of nesting or feeding on or near ground level, and habitat choices that bring them into contact with human-dominated landscapes where cats are abundant. Because cat predation is likely to remain a primary source of bird mortality in Canada for some time, this issue needs more scientific attention in Canada.