Hormones down under: Hormone therapy use after the women's health initiative

Aims: The primary objective was to describe the usage pattern of hormone therapy (HT) in a sample of urban Australian women in 2001 and to assess the characteristics of users vs. non-users. The second objective was to determine whether there had been any change in usage since the publication of the results of the combined oestrogen plus progestagen arm of the Women's Health Initiative (WHI) in 2002. Methods: A cohort of 374 postmenopausal women aged 50-80 years participated in this substudy of the LAW (Longitudinal Assessment of Ageing in Women) project: a 5-year multidisciplinary, observational study. Participants completed an annual medical assessment including details of the use of HT and the reasons for use, as well as demographic and psychosocial data. Results: In December 2001, 30.8% of the participants were using HT, whereas 55.4% were ever users. The management of vasomotor symptoms and mood disturbance were the primary reasons for use. Of those who had been using HT in December 2001 (24.4%) women ceased using HT in the 3 months following publication of the WHI results. The percentage of women using HT in December 2003 (13.9%) was less than half of that of December 2001. Conclusion: The rate of HT use and the reasons for use, in 2001 in Brisbane was similar to that of other Australian regions. Usage of HT decreased since the publication of the WHI results in 2002 which may reflect changing attitudes by patients and practitioners regarding HT.

Levonorgestrel intrauterine system versus medical therapy for menorrhagia

ABSTRACT: Menorrhagia is a common problem that interferes with a woman’s physical, emotional, and social life. Evidence to guide physicians for decision about therapy for heavy menstrual bleeding is lacking. One treatment option, the levonorgestrel-releasing intrauterine system (levonorgestrel-IUS), has been available in the United States since 2009. Updated meta-analyses comparing the levonorgestrel-IUS with nonhormonal and hormonal treatments showed that the levonorgestrel-IUS produced a greater reduction in menstrual blood loss at 3 to 12 months of follow-up. It is not clear whether these short-term benefits persist. Moreover, the rates of discontinuation of the levonorgestrel-IUS at 2 years are as high as 28%, and effects on bleeding-related quality of life are not known. This pragmatic, multicenter, randomized trial compared the effectiveness of the levonorgestrel-IUS with that of usual medical treatment among women with menorrhagia in a primary care setting. A total of 571 women with menorrhagia were randomized to treatment with levonorgestrel-IUS (n = 285) or usual medical treatment (n = 286). Usual treatment was tranexamic acid, mefenamic acid, combined estrogen-progestogen, or progesterone alone. The primary study outcome measure was the patient-reported score on the condition-specific Menorrhagia Multi-Attribute Scale (MMAS) assessed over a 2-year period. The MMAS scores range from 0 to 100, with lower scores indicating greater severity. Summary MMAS scores were assessed at 6, 12, and 24 months. Secondary outcome measures included general health-related quality of life, sexual-activity scores, and surgical intervention. There was a significant improvement in total MMAS scores from baseline to 6 months in both the levonorgestrel-IUS group and the usual-treatment group; the mean increase was 32.7 and 21.4 points, respectively; P < 0.001 for both comparisons. Over the 2-year follow-up, improvements were maintained in both groups but were significantly greater in the levonorgestrel-IUS group (mean between-group difference, 13.4 points; 95% confidence interval, 9.9–16.9; P < 0.001). Significantly greater improvements in all MMAS domains (practical difficulties, social life, psychological health, physical health, work and daily routine, and family life and relationships) occurred with the levonorgestrel-IUS than with the usual treatment (P < 0.001 with the use of a test for trend). This was also found for 7 of the 8 quality-of-life domains. At the 2-year end point, almost twice as many women were still using the levonorgestrel-IUS than were those receiving the usual medical treatment (64% vs 38%, P < 0.001). No significant between-group differences were noted in the rates of surgical intervention or sexual-activity scores as well as in the frequency of serious adverse events. These data show that levonorgestrel-IUS is more effective than usual medical treatment in improving the quality of life of women with menorrhagia in a primary care setting.

Estrogen and lithium: Facilitating factors involved in brain cell signaling pathways

Learning and memory in adult females decline during menopause and estrogen replacement therapy is commonly prescribed during menopause. Post-menopausal women tend to suffer from depression and are prescribed antidepressants – in addition to hormone therapy. Estrogen replacement therapy is a topic that engenders debate since several studies contradict its efficacy as a palliative therapy for cognitive decline and neurodegenerative diseases. Signaling transduction pathways can alter brain cell activity, survival, and morphology by facilitating transcription factor DNA binding and protein production. The steroidal hormone estrogen and the anti-depressant drug lithium interact through these signaling transduction pathways facilitating transcription factor activation. The paucity of data on how combined hormones and antidepressants interact in regulating gene expression led me to hypothesize that in primary mixed brain cell cultures, combined 17β-estradiol (E2) and lithium chloride (LiCl) (E2/LiCl) will alter genetic expression of markers involved in synaptic plasticity and neuroprotection. Results from these studies indicated that a 48 h treatment of E2/LiCl reduced glutamate receptor subunit genetic expression, but increased neurotrophic factor and estrogen receptor genetic expression. Combined treatment also failed to protect brain cell cultures from glutamate excitotoxicity. If lithium facilitates protein signaling pathways mediated by estrogen, can lithium alone serve as a palliative treatment for post-menopause? This question led me to hypothesize that in estrogen-deficient mice, lithium alone will increase episodic memory (tested via object recognition), and enhance expression in the brain of factors involved in anti-apoptosis, learning and memory. I used bilaterally ovariectomized (bOVX) C57BL/6J mice treated with LiCl for one month. Results indicated that LiCl-treated bOVX mice increased performance in object recognition compared with non-treated bOVX. Increased performance in LiCl-treated bOVX mice coincided with augmented genetic and protein expression in the brain. Understanding the molecular pathways of estrogen will assist in identifying a palliative therapy for menopause-related dementia, and lithium may serve this purpose by acting as a selective estrogen-mediated signaling modulator.

Estrogen and Lithium: Facilitating Factors Involved in Brain Cell Signaling Pathways

Learning and memory in adult females decline during menopause and estrogen replacement therapy is commonly prescribed during menopause. Post-menopausal women tend to suffer from depression and are prescribed antidepressants – in addition to hormone therapy. Estrogen replacement therapy is a topic that engenders debate since several studies contradict its efficacy as a palliative therapy for cognitive decline and neurodegenerative diseases. Signaling transduction pathways can alter brain cell activity, survival, and morphology by facilitating transcription factor DNA binding and protein production. The steroidal hormone estrogen and the anti-depressant drug lithium interact through these signaling transduction pathways facilitating transcription factor activation. The paucity of data on how combined hormones and antidepressants interact in regulating gene expression led me to hypothesize that in primary mixed brain cell cultures, combined 17beta-estradiol (E2) and lithium chloride (LiCl) (E2/LiCl) will alter genetic expression of markers involved in synaptic plasticity and neuroprotection. Results from these studies indicated that a 48 h treatment of E2/LiCl reduced glutamate receptor subunit genetic expression, but increased neurotrophic factor and estrogen receptor genetic expression. Combined treatment also failed to protect brain cell cultures from glutamate excitotoxicity. If lithium facilitates protein signaling pathways mediated by estrogen, can lithium alone serve as a palliative treatment for post-menopause? This question led me to hypothesize that in estrogen-deficient mice, lithium alone will increase episodic memory (tested via object recognition), and enhance expression in the brain of factors involved in anti-apoptosis, learning and memory. I used bilaterally ovariectomized (bOVX) C57BL/6J mice treated with LiCl for one month. Results indicated that LiCl-treated bOVX mice increased performance in object recognition compared with non-treated bOVX. Increased performance in LiCl-treated bOVX mice coincided with augmented genetic and protein expression in the brain. Understanding the molecular pathways of estrogen will assist in identifying a palliative therapy for menopause-related dementia, and lithium may serve this purpose by acting as a selective estrogen-mediated signaling modulator.

Novel surface-tethered estrogen polymeric platforms in cardiovascular regenerative medicine

L’estradiol (E2) est une hormone femelle qui joue un rôle essentiel, à la fois dans la régulation et dans la détermination de certaines conditions physiologiques in vivo, telle que la différenciation et la prolifération cellulaire. Lorsque l’E2 est donné en supplément, par exemple dans le cas de thérapie hormonale, deux effets sont observés, un effet génomique et un effet non-génomique, de par son interaction avec les récepteurs à œstrogène du noyau ou de la membrane cellulaire, respectivement. L’effet non-génomique est plus difficile à étudier biologiquement parce que l’effet se produit sur une échelle de temps extrêmement courte et à cause de la nature hydrophobe de l’E2 qui réduit sa biodisponibilité et donc son accessibilité aux cellules cibles. C’est pourquoi il est nécessaire de développer des systèmes d’administration de l’E2 qui permettent de n’étudier que l’effet non-génomique de l’œstrogène. Une des stratégies employée consiste à greffer l’E2 à des macromolécules hydrophiles, comme de l’albumine de sérum bovin (BSA) ou des dendrimères de type poly(amido)amine, permettant de maintenir l’interaction de l’E2 avec les récepteurs d’œstrogène de la membrane cellulaire et d’éviter la pénétration de l’E2 dans le noyau des cellules. Toutefois, ces systèmes macromolécules-E2 sont critiquables car ils sont peu stables et l’E2 peut se retrouver sous forme libre, ce qui affecte sa localisation cellulaire. L’objectif de cette thèse est donc de développer de nouvelles plateformes fonctionnalisées avec de l’E2 en utilisant les approches de synthèses ascendantes et descendantes. Le but de ces plateformes est de permettre d’étudier le mécanisme de l’effet non-génomique de l’E2, ainsi que d’explorer des applications potentielles dans le domaine biomédical. L’approche ascendante est basée sur un ligand d’E2 activé, l’acide 17,α-éthinylestradiol-benzoïque, attaché de façon covalente à un polymère de chitosan avec des substitutions de phosphorylcholine (CH-PC-E2). L’estradiol est sous forme de pro-drogue attachée au polymère qui s’auto-assembler pour former un film. L’effet biologique de la composition chimique du film de chitosan-phosphorylcholine a été étudié sur des cellules endothéliales. Les films de compositions chimiques différentes ont préalablement été caractérisés de façon physicochimique. La topographie de la surface, la charge de surface, ainsi que la rhéologie des différents films contenant 15, 25, ou 40% molaires de phosphorylcholine, ont été étudiés par microscopie à force atomique (AFM), potentiel zêta, résonance plasmonique de surface et par microbalance à cristal de quartz avec dissipation (QCM-D). Les résultats de QCM-D ont montré que plus la part molaire en phosphorylcholine est grande moins il y a de fibrinogène qui s’adsorbe sur le film de CH-PC. Des cellules humaines de veine ombilicale (HUVECs) cultivées sur des films de CH-PC25 et de CH-PC40 forment des amas cellulaire appelés sphéroïdes au bout de 4 jours, alors que ce n’est pas le cas lorsque ces cellules sont cultivées sur des films de CH-PC15. L’attachement de l’estradiol au polymère a été caractérisé par plusieurs techniques, telles que la résonance magnétique nucléaire de proton (1H NMR), la spectroscopie infrarouge avec transformée de Fourier à réfraction totale atténuée (FTIR-ATR) et la spectroscopie UV-visible. La nature hydrogel des films (sa capacité à retenir l’eau) ainsi que l’interaction des films avec des récepteurs à E2, ont été étudiés par la QCM-D. Des études d’imagerie cellulaires utilisant du diacétate de diaminofluoresceine-FM ont révélé que les films hydrogels de CH-PC-E2 stimulent la production d’oxyde nitrique par les cellules endothéliales, qui joue un rôle protecteur pour le système cardiovasculaire. L’ensemble de ces études met en valeur les rôles différents et les applications potentielles qu’ont les films de type CH-PC-E2 et CH-PC dans le cadre de la médecine cardiovasculaire régénérative. L’approche descendante est basée sur l’attachement de façon covalente d’E2 sur des ilots d’or de 2 μm disposés en rangées et espacés par 12 μm sur un substrat en verre. Les ilots ont été préparés par photolithographie. La surface du verre a quant à elle été modifiée à l’aide d’un tripeptide cyclique, le cRGD, favorisant l’adhésion cellulaire. L’attachement d’E2 sur les surfaces d’or a été suivi et confirmé par les techniques de SPR et de QCM-D. Des études d’ELISA ont montré une augmentation significative du niveau de phosphorylation de la kinase ERK (marqueur important de l’effet non-génomique) après 1 heure d’exposition des cellules endothéliales aux motifs alternant l’E2 et le cRGD. Par contre lorsque des cellules cancéreuses sont déposées sur les surfaces présentant des motifs d’E2, ces cellules ne croissent pas, ce qui suggère que l’E2 n’exerce pas d’effet génomique. Les résultats de l’approche descendante montrent le potentiel des surfaces présentant des motifs d’E2 pour l’étude des effets non-génomiques de l’E2 dans un modèle in vitro.

Novel surface-tethered estrogen polymeric platforms in cardiovascular regenerative medicine

L’estradiol (E2) est une hormone femelle qui joue un rôle essentiel, à la fois dans la régulation et dans la détermination de certaines conditions physiologiques in vivo, telle que la différenciation et la prolifération cellulaire. Lorsque l’E2 est donné en supplément, par exemple dans le cas de thérapie hormonale, deux effets sont observés, un effet génomique et un effet non-génomique, de par son interaction avec les récepteurs à œstrogène du noyau ou de la membrane cellulaire, respectivement. L’effet non-génomique est plus difficile à étudier biologiquement parce que l’effet se produit sur une échelle de temps extrêmement courte et à cause de la nature hydrophobe de l’E2 qui réduit sa biodisponibilité et donc son accessibilité aux cellules cibles. C’est pourquoi il est nécessaire de développer des systèmes d’administration de l’E2 qui permettent de n’étudier que l’effet non-génomique de l’œstrogène. Une des stratégies employée consiste à greffer l’E2 à des macromolécules hydrophiles, comme de l’albumine de sérum bovin (BSA) ou des dendrimères de type poly(amido)amine, permettant de maintenir l’interaction de l’E2 avec les récepteurs d’œstrogène de la membrane cellulaire et d’éviter la pénétration de l’E2 dans le noyau des cellules. Toutefois, ces systèmes macromolécules-E2 sont critiquables car ils sont peu stables et l’E2 peut se retrouver sous forme libre, ce qui affecte sa localisation cellulaire. L’objectif de cette thèse est donc de développer de nouvelles plateformes fonctionnalisées avec de l’E2 en utilisant les approches de synthèses ascendantes et descendantes. Le but de ces plateformes est de permettre d’étudier le mécanisme de l’effet non-génomique de l’E2, ainsi que d’explorer des applications potentielles dans le domaine biomédical. L’approche ascendante est basée sur un ligand d’E2 activé, l’acide 17,α-éthinylestradiol-benzoïque, attaché de façon covalente à un polymère de chitosan avec des substitutions de phosphorylcholine (CH-PC-E2). L’estradiol est sous forme de pro-drogue attachée au polymère qui s’auto-assembler pour former un film. L’effet biologique de la composition chimique du film de chitosan-phosphorylcholine a été étudié sur des cellules endothéliales. Les films de compositions chimiques différentes ont préalablement été caractérisés de façon physicochimique. La topographie de la surface, la charge de surface, ainsi que la rhéologie des différents films contenant 15, 25, ou 40% molaires de phosphorylcholine, ont été étudiés par microscopie à force atomique (AFM), potentiel zêta, résonance plasmonique de surface et par microbalance à cristal de quartz avec dissipation (QCM-D). Les résultats de QCM-D ont montré que plus la part molaire en phosphorylcholine est grande moins il y a de fibrinogène qui s’adsorbe sur le film de CH-PC. Des cellules humaines de veine ombilicale (HUVECs) cultivées sur des films de CH-PC25 et de CH-PC40 forment des amas cellulaire appelés sphéroïdes au bout de 4 jours, alors que ce n’est pas le cas lorsque ces cellules sont cultivées sur des films de CH-PC15. L’attachement de l’estradiol au polymère a été caractérisé par plusieurs techniques, telles que la résonance magnétique nucléaire de proton (1H NMR), la spectroscopie infrarouge avec transformée de Fourier à réfraction totale atténuée (FTIR-ATR) et la spectroscopie UV-visible. La nature hydrogel des films (sa capacité à retenir l’eau) ainsi que l’interaction des films avec des récepteurs à E2, ont été étudiés par la QCM-D. Des études d’imagerie cellulaires utilisant du diacétate de diaminofluoresceine-FM ont révélé que les films hydrogels de CH-PC-E2 stimulent la production d’oxyde nitrique par les cellules endothéliales, qui joue un rôle protecteur pour le système cardiovasculaire. L’ensemble de ces études met en valeur les rôles différents et les applications potentielles qu’ont les films de type CH-PC-E2 et CH-PC dans le cadre de la médecine cardiovasculaire régénérative. L’approche descendante est basée sur l’attachement de façon covalente d’E2 sur des ilots d’or de 2 μm disposés en rangées et espacés par 12 μm sur un substrat en verre. Les ilots ont été préparés par photolithographie. La surface du verre a quant à elle été modifiée à l’aide d’un tripeptide cyclique, le cRGD, favorisant l’adhésion cellulaire. L’attachement d’E2 sur les surfaces d’or a été suivi et confirmé par les techniques de SPR et de QCM-D. Des études d’ELISA ont montré une augmentation significative du niveau de phosphorylation de la kinase ERK (marqueur important de l’effet non-génomique) après 1 heure d’exposition des cellules endothéliales aux motifs alternant l’E2 et le cRGD. Par contre lorsque des cellules cancéreuses sont déposées sur les surfaces présentant des motifs d’E2, ces cellules ne croissent pas, ce qui suggère que l’E2 n’exerce pas d’effet génomique. Les résultats de l’approche descendante montrent le potentiel des surfaces présentant des motifs d’E2 pour l’étude des effets non-génomiques de l’E2 dans un modèle in vitro.

Procoagulant state after raloxifene therapy in postmenopausal women

AZEVEDO, George Dantas de et al. Procoagulant state after raloxifene therapy in postmenopausal women. Fertility and Sterility, Estados Unidos, v.84, n.6, p.1680-1684, 2005

Raloxifene therapy does not affect uterine blood flow in postmenopausal women: a transvaginal Doppler study

AZEVEDO, George Dantas de et al. Raloxifene therapy does not affect uterine blood flow in postmenopausal women: a transvaginal Doppler study. Maturitas, Amsterdam, v.47, n.3, p.195-200, 2004

Procoagulant state after raloxifene therapy in postmenopausal women

AZEVEDO, George Dantas de et al. Procoagulant state after raloxifene therapy in postmenopausal women. Fertility and Sterility, Estados Unidos, v.84, n.6, p.1680-1684, 2005

Raloxifene therapy does not affect uterine blood flow in postmenopausal women: a transvaginal Doppler study

AZEVEDO, George Dantas de et al. Raloxifene therapy does not affect uterine blood flow in postmenopausal women: a transvaginal Doppler study. Maturitas, Amsterdam, v.47, n.3, p.195-200, 2004

Controllable drug uptake and nongenomic response through estrogen-anchored cyclodextrin drug complex

Breast cancer is a leading killer of women worldwide. Cyclodextrin-based estrogen receptor-targeting drug-delivery systems represent a promising direction in cancer therapy but have rarely been investigated. To seek new targeting therapies for membrane estrogen receptor-positive breast cancer, an estrogen-anchored cyclodextrin encapsulating a doxorubicin derivative Ada-DOX (CDE1-Ada-DOX) has been synthesized and evaluated in human breast cancer MCF-7 cells. First, we synthesized estrone-conjugated cyclodextrin (CDE1), which formed the complex CDE1-Ada-DOX via molecular recognition with the derivative adamantane-doxorubicin (Ada-DOX) (Kd =1,617 M(-1)). The structure of the targeting vector CDE1 was fully characterized using (1)H- and (13)C-nuclear magnetic resonance, mass spectrometry, and electron microscopy. CDE1-Ada-DOX showed two-phase drug-release kinetics with much slower release than Ada-DOX. The fluorescence polarization analysis reveals that CDE1-Ada-DOX binds to recombinant human estrogen receptor α fragments with a Kd of 0.027 µM. Competition assay of the drug complex with estrogen ligands demonstrated that estrone and tamoxifen competed with CDE1-Ada-DOX for membrane estrogen receptor binding in MCF-7 cells. Intermolecular self-assembly of CDE1 molecules were observed, showing tail-in-bucket and wire-like structures confirmed by transmission electronic microscopy. CDE1-Ada-DOX had an unexpected lower drug uptake (when the host-guest ratio was >1) than non-targeting drugs in MCF-7 cells due to ensconced ligands in cyclodextrins cavities resulting from the intermolecular self-assembly. The uptake of CDE1-Ada-DOX was significantly increased when the host-guest ratio was adjusted to be less than half at the concentration of CDE1 over 5 µM due to the release of the estrone residues. CDE1 elicited rapid activation of mitogen-activated protein kinases (p44/42 MAPK, Erk1/2) in minutes through phosphorylation of Thr202/Tyr204 in MCF-7 cells. These results demonstrate a targeted therapeutics delivery of CDE1-Ada-DOX to breast cancer cells in a controlled manner and that the drug vector CDE1 can potentially be employed as a molecular tool to differentiate nongenomic from genomic mechanism.

Effect of adjunctive raloxifene therapy on severity of refractory schizophrenia in women: a randomized clinical trial

IMPORTANCE: A substantial proportion of women with schizophrenia experience debilitating treatment-refractory symptoms. The efficacy of estrogen in modulating brain function in schizophrenia has to be balanced against excess exposure of peripheral tissue. Raloxifene hydrochloride is a selective estrogen receptor modulator (mixed estrogen agonist/antagonist) with potential psychoprotective effects and fewer estrogenic adverse effects. OBJECTIVE: To determine whether adjunctive raloxifene therapy reduces illness severity in women with refractory schizophrenia. DESIGN, SETTING, AND PARTICIPANTS: This 12-week, double-blind, placebo-controlled, randomized clinical trial with fortnightly assessments was performed at an urban tertiary referral center and a regional center from January 1, 2006, to December 31, 2014. Participants included 56 women with schizophrenia or schizoaffective disorder and marked symptom severity despite substantial and stable antipsychotic doses. Data were analyzed using intention to treat as the basis. INTERVENTIONS: Adjunctive raloxifene hydrochloride, 120 mg/d, or placebo for 12 weeks. MAIN OUTCOMES AND MEASURES: The primary outcome was the change in the Positive and Negative Syndrome Scale (PANSS) total score. Clinical response (defined as a ≥20% decrease in PANSS total score from baseline) and change in PANSS subscale scores, mood, cognition, reproductive hormone levels, and adverse events were also assessed. RESULTS: Of the 56 participants (mean [SD] age, 53 [7.7] years; age range, 40-70 years; mean [SD] duration of psychotic illness, 24 [11] years), 26 were randomized to raloxifene and 30 were randomized to placebo. Raloxifene produced a greater reduction in the PANSS total score relative to placebo (β = -6.37; 95% CI, -11.64 to -1.10; P = .02) and resulted in an increased probability of a clinical response (hazard ratio, 5.79; 95% CI, 1.46 to 22.97; P = .01). A significant reduction was found in the PANSS general symptom scores for the raloxifene compared with the placebo (β = -3.72; 95% CI, -6.83 to -0.61; P = .02) groups. For patients who completed the full 12-week trial, there was not a statistically significant treatment effect on PANSS positive symptom scores (β for change in raloxifene vs placebo, -1.92; 95% CI, -3.83 to 0.00; P = .05). Change in mood, cognition, and reproductive hormone levels and the rate of adverse events did not differ between groups. CONCLUSIONS AND RELEVANCE: Raloxifene hydrochloride, 120 mg/d, reduces illness severity and increases the probability of a clinical response in women with refractory schizophrenia. This large trial of raloxifene in this patient population offers a promising, well-tolerated agent that has potential application in clinical practice. TRIAL REGISTRATION: clinicaltrials.gov Identifier: NCT00361543.