Comparação de três métodos de estimativa da evapotranspiração de referência para a região de Araraquara - SP

Uma forma de verificar a eficiência de métodos de estimativa da evapotranspiração de referência (ETo) é a comparação com o método-padrão. Este trabalho tem por finalidade comparar três métodos de estimativa da ETo: Radiação Solar (RS), Makkink (MAK) e Tanque Classe A (TCA) em relação ao método de Penman-Monteith (PM), em dois períodos distintos das fases de desenvolvimento da cultura de citros, com dados médios quinzenais para os períodos inverno-primavera e verão-outono. A pesquisa foi desenvolvida em uma fazenda de citros, em Araraquara - SP, onde foi instalada uma estação meteorológica automatizada e um tanque Classe A. Por intermédio da estação meteorológica automatizada, foram obtidas medidas da radiação solar global, saldo de radiação, temperatura do ar, umidade relativa do ar e velocidade do vento. A análise de regressão indica que, para o método TCA, pode ser utilizado o modelo de regressão y = bx, em que, y representa a EToPM e x a EToTCA. Para os demais métodos analisados, o modelo mais adequado foi y = bx + a. Os resultados obtidos neste estudo evidenciam que o método do TCA superestimou a ETo em 26% no período verão-outono e em 24% no período inverno-primavera. O método de MAK subestimou a ETo nos dois períodos analisados, enquanto o método da RS superestimou a ETo.

Pomada orgânica natural ou solução salina isotônica no tratamento de feridas limpas induzidas em ratos

Foram utilizados 40 ratos Wistar, machos, com peso inicial médio de 225 gramas, separados em dois grupos. Após serem anestesiados com éter, foi induzida uma ferida limpa na região torácica dorsal cranial, mediante a utilização de molde metálico de 2,0 x 1,5cm. No grupo I, foi utilizada pomada contendo óleo de fígado de bacalhau, extrato de confrei, extrato cítrico, óxido de zinco e veículo (Creamex®); no grupo II, a ferida foi apenas limpa com solução salina isotônica. Para a avaliação histológica, foram submetidos à eutanásia cinco animais de cada grupo no 3º, 7º, 14º e 21º dia de pós-operatório. O grupo tratado com a pomada orgânica apresentou padrão cicatricial de qualidade superior em relação ao grupo tratado com salina isotônica, representado por formação de fibras colágenas, neoformação de vasos e reepitelização completa da epiderme.

Reguladores vegetais e o desbaste químico de frutos de tangor murcote

O tangor 'Murcote' apresenta necessidade de desbaste de frutos devido a alternância de produção, caracterizado por anos de excessiva produção intercalado com anos de baixa produção, evitando assim, a diminuição da qualidade dos frutos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência de reguladores vegetais, a auxina ANA (ácido naftalenacético) e ethephon (etileno) no desbaste químico de frutos de tangor 'Murcote' aplicado 40 dias após o pleno florescimento. O experimento foi conduzido em Pratânia, SP, onde plantas de 5 anos de idade, enxertadas sobre o limoeiro 'Cravo', foram pulverizadas com ANA a 0, 100, 200, 300 e 400 mg L-1 e com ethephon a 200, 300 e 400 mg L-1, ambos em solução aquosa juntamente com adjuvante não iônico a 0,05%. A contagem dos frutos foi realizada previamente aos tratamentos em 2 ramos marcados por planta. O ANA não interferiu significativamente no desbaste de frutos, com porcentagens de queda variando entre 7 a 14%, enquanto que as pulverizações com ethephon mostraram maior eficiência no desbaste de frutos, principalmente na dose de 400 mg L-1, promovendo 66,6% de queda de frutos, sem contudo induzir a abscisão foliar. As doses inferiores de ethephon também promoveram desbaste de frutos da ordem de 40%. As porcentagens de queda de frutos foram pequenas, para plantas pulverizadas com ANA, enquanto que a aplicação de ethephon promoveu maior eficiência no desbaste de frutos.

Armazenamento refrigerado de pomelos variedades flame e henderson revestidos com cera

Objetivou-se, neste trabalho, estudar a conservação de pomelos (Citrus paradisi Macfad.) varieties 'Flame' e 'Henderson' revestidos com cera Sparcitrus e mantidos sob refrigeração (8º C ± 1º C e 95% ± 5% UR). Para cada variedade estudada, utilizou-se delineamento inteiramente casualizado, disposto em esquema fatorial 2 x 5, com 3 repetições, onde o primeiro fator correspondeu aos tratamentos com e sem a aplicação de cera (controle) e o segundo, ao tempo armazenamento (0, 10, 20, 30 e 40 dias). Cada parcela experimental foi composta por cinco frutos. Foram estudadas as seguintes variáveis: perda de massa, rendimento do suco, pH, sólidos solúveis (SS), acidez titulável (AT), SS/AT, açúcares redutores, açúcares não redutores, açúcares solúveis totais, vitamina C e aparência externa. A aplicação de cera é efetiva na preservação da aparência de pomelos 'Flame' e 'Henderson', não afetando sua qualidade interna.

Fibra solúvel e amido como fontes de carboidratos para terminação de novilhos em confinamento

Avaliou-se o efeito da utilização de duas fontes de carboidratos solúveis, amido ou fibra solúvel em detergente neutro, associadas a dois níveis de FDN, sobre o desempenho de novilhos de corte em confinamento na fase de terminação. Foram confinados 24 novilhos ½ Angus x ½ Nelore, com idade inicial de 18 meses e peso de 329 ± 24 kg. As quatro dietas foram calculadas para fornecer nível de PB suficiente para ganho diário de 1,4 kg. As dietas foram constituídas de 40% de silagem de milho e 60% de concentrado (grão de milho, polpa cítrica e casca de soja), além de minerais e uréia, arranjados de forma a promover nível alto de amido associado a dois níveis de FDN (48 e 39%) ou nível alto de fibra solúvel associado aos dois níveis de FDN. Observou-se que os animais alimentados com a dieta com maior nível de polpa cítrica (45%), com baixos teores de fibra solúvel e FDN, apresentaram consumo reduzido e, conseqüentemente, baixo ganho de peso e pior conversão alimentar. Entre as dietas com maior nível de FDN, verificou-se que os animais alimentados com fibra solúvel apresentaram o melhor ganho de peso (1,435 vs 1,262 kg/dia) e a melhor conversão alimentar (7,494 vs 8,651), mas não diferiram daqueles do tratamento com amido e baixo teor de FDN. Os resultados demonstraram que é possível alterar o desempenho animal manipulando a fonte e a concentração dos carboidratos solúveis.

Avaliação da Polpa de Citros Peletizada como Material para Cama de Frangos de Corte

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos de dietas com polpa cítrica em substituição ao milho em grãos no concentrado sobre a degradabilidade e a fauna ruminal em bubalinos

Quatro búfalos com cânulas ruminais foram distribuídos aleatoriamente em quadrado latino 4 x 4, compreendendo quatro rações com feno de capim-coastcross (Cynodon dactylon) (50% MS) e níveis crescentes de polpa cítrica peletizada em substituição ao milho em grão moído no concentrado (0, 33, 66 e 100% MS). Foram avaliadas a degradabilidade dos nutrientes e a população de protozoários no rúmen. Houve efeito quadrático da fração solúvel dos nutrientes entre os tratamentos, com valores maiores nos dois extremos. A taxa de degradação da PB do feno e da MS da polpa cítrica apresentou-se linear com aumento da polpa cítrica na ração. As rações contendo polpa cítrica promoveram menores concentrações de Entodinium e número total de ciliados/mL que a dieta só com milho. Houve predominância dos Entodinium nas dietas contendo somente milho ou somente polpa cítrica, enquanto em mistura predominaram os ciliados da subfamília Diplodiniinae. Observou-se efeito de interação da polpa cítrica com o milho, promovendo modificações no metabolismo ruminal, especialmente na solubilidade dos nutrientes, na curva do pH e na composição da fauna.

Determination of malic acid in real samples by using enzyme immobilized reactors and amperometric detection

The malate dehydrogenase (MDH) and ascorbate oxidase were immobilized independently, onto silanized controlled porous silica and packed in a tygon tube. The reactors were inserted in the flow system, and the malic acid was determined by measurement of NADH produced by enzymatic reaction. The NADH was reoxidized in a wall jet cell that consisted of spectrographic graphite, Ag/AgCl, KCl(sat), and steel needle as work, reference, and counter electrodes, respectively. The current intensities were measured at 390 mV. The malate calibration curve shows a linear range from 5.0 x 10(-6) to 1.0 x 10(-4) molL(-1), the lifetime was 40 analyses, after that a decrease of 20% on the response is observed. Three different citric juices were analyzed and a good correlation between the proposed method and spectrophotometric commercial kit were obtained.

Recombinant expression and characterization of a Xylella fastidiosa cysteine protease differentially expressed in a nonpathogenic strain

Xylella fastidiosa is a xylem-limited, Gram-negative bacterium responsible for citrus variegated chlorosis (CVC) in sweet oranges. In the present study, we present the recombinant expression, purification and characterization of an X. fastidiosa cysteine protease (dubbed Xylellain). The recombinant Xylellain ((HIS)Xylellain) was able to hydrolyze carbobenzoxy-Phe-Arg-7-amido-4-methylcoumarin (Z-FR-MCA) and carbobenzoxy-Arg-Arg-7-amido-4-methylcoumarin (Z-RR-MCA) with similar catalytic efficiencies, suggesting that this enzyme presents substrate specificity requirements similar to cathepsin B. The immunization of mice with (HIS)Xylellain provided us with antibodies, which recognized a protein of c. 31 kDa in the X. fastidiosa pathogenic strains 9a5c, and X. fastidiosa isolated from coffee plants. However, these antibodies recognized no protein in the nonpathogenic X. fastidiosa J1a12, suggesting the absence or low expression of this protein in the strain. These findings enabled us to identify Xylellain as a putative target for combating CVC and other diseases caused by X. fastidiosa strains.

A putative twin-arginine translocation system in the phytopathogenic bacterium Xylella fastidiosa

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Cloning, expression, purification and characterization of recombinant glutathione-S-transferase from Xylella fastidiosa

Xylella fastidiosa is an important pathogen bacterium transmitted by xylem-feedings leafhoppers that colonizes the xylem of plants and causes diseases on several important crops including citrus variegated chlorosis (CVC) in orange and lime trees. Glutathione-S-transferases (GST) form a group of multifunctional isoenzymes that catalyzes both glutathione (GSH)-dependent conjugation and reduction reactions involved in the cellular detoxification of xenobiotic and endobiotic compounds. GSTs are the major detoxification enzymes found in the intracellular space and mainly in the cytosol from prokaryotes to mammals, and may be involved in the regulation of stress-activated signals by suppressing apoptosis signal-regulating kinase 1. In this study, we describe the cloning of the glutathione-S-transferase from X. fastidiosa into pET-28a(+) vector, its expression in Escherichia coli, purification and initial structural characterization. The purification of recombinant xfGST (rxfGST) to near homogeneity was achieved using affinity chromatography and size-exclusion chromatography (SEC). SEC demonstrated that rxfGST is a homodimer in solution. The secondary and tertiary structures of recombinant protein were analyzed by circular dichroism and fluorescence spectroscopy, respectively. The enzyme was assayed for activity and the results taken together indicated that rxfGST is a stable molecule, correctly folded, and highly active. Several members of the GST family have been extensively studied. However, xfGST is part of a less-studied subfamily which yet has not been structurally and biochemically characterized. In addition, these studies should provide a useful basis for future studies and biotechnological approaches of rxfGST. (C) 2008 Elsevier B.V. All rights reserved.

Nicotiana tabacum as an experimental host for the study of plant-Xylella fastidiosa interactions

Xylella fastidiosa causes citrus variegated chlorosis (CVC). Information generated from the X. fastidiosa genome project is being used to study the underlying mechanisms responsible for pathogenicity. However, the lack of an experimental host other than citrus to study plant-X. fastidiosa interaction has been an obstacle to accelerated progress in this area. We present here results of three experiments that demonstrated that tobacco could be an important experimental host for X. fastidiosa. All tobacco plants inoculated with a citrus strain of X. fastidiosa expressed unequivocal symptoms, consisting of orange leaf lesions, approximately 2 months after injection of the pathogen. CVC symptoms were observed in citrus 3 to 6 months after inoculation. The pathogen was readily detected in symptomatic tobacco plants by polymerase chain reaction (PCR) and phase contrast microscopy. In addition, X. fastidiosa was reisolated on agar plates in 4 of 10 plants. Scanning electron microscopy analysis of cross sections of stems and petioles revealed the presence of rod shaped bacteria restricted to the xylem of inoculated plants. The cell size was within the limit typical of X. fastidiosa.

Transposon Tn1721 distribution among strains of Xylella fastidiosa

Transposons are mobile genetic elements found within the genomes of various organisms including bacteria, fungi, plants and animals. Fragments of the transposon Tn1721 were found included in the genome of Xylella fastidiosa strain 9a5c. Regions from such fragments were PCR-amplified using specially designed primers (TNP1 and TNP2). In order to detect insertions of the Tn1721 element, both primers were used and one of them included a region of the transposon (TNP1) and the other one had the right repeat and part of the bacterial chromosome (TNP2). The PCR products obtained from strain 9a5c were used as a pattern for fragment size comparisons when DNA samples from other X. fastidiosa strains were used as template for the PCR assays. Differences were observed concerning the PCR products of such amplifications when some X. fastidiosa strains isolated from grapevine and plum were used. For the citrus-derived strains only the strains U187d and GP920b produced fragments with different sizes or weak band intensity. Such variations in the X. fastidiosa genome related to disrupted Tn1721 copies are probably due to the possibility of such a transposon element being still able to duplicate even after deletion events might have taken place and also because the bacterial strains in which the main differences were detected are derived from different host plants cultivated under different climate conditions from the one used as reference. © 2002 Federation of European Microbiological Societies. Published by Elsevier Science B.V. All rights reserved.

A review of antifertility folkloric plants tested in laboratory animals

The use of natural active principals is widespread among a great proportion of the rural population, or by people who do not have easy access to medical assistance. These active principles are used as food or medicines, and even for purposes of contraception. It becomes necessary to establish a relationship between the folklore habits and current information on the nature of anti-fertility substances, and knowledge of their mechanisms. Anti-fertility agents may exert their actions in a number of areas, (hypothalamus, anterior pituitary, oviduct, uterus, and vagina), inhibiting synthesis and/or liberation of hormones (follicle-stimulating, luteinizing, and steroid hormones), ovulation, ovum transportation, and implantation process. Therefore, a review of literature was carried out, including of several plants used by women as abortifacient and anti-fertility agents to compare their effects with those obtained among laboratory animals.

Putative pyrophosphate phosphofructose 1-kinase genes identified in sugarcane may be getting energy from pyrophosphate

Pyrophosphate-dependent phosphofructokinase (PPi-PFK) has been detected in several types of plant cells, but the gene has not been reported in sugar cane. Using Citrux paradixi PPi-PFK gene (AF095520 and AF095521) sequences to search the sugar cane EST database, we have identified both the α and β subunits of this enzyme. The deduced amino acid sequences showed 76 and 80% similarity with the corresponding α and β subunits of C. paradisi. A high degree of similarity was also observed among the PFK β subunits when the alignment of the sugar cane sequences was compared to those of Ricinus communis and Solanum tuberosum, it appears that α and β are two distinct subunits; they were found at different concentrations in several sugar cane tissues. It remains to be determined if the different gene expression levels have some physiological importance and how they affect sucrose synthesis, export, and storage in vacuoles. A comparison between the amino acid sequences of β PFKs from a variety of organisms allowed us to identify the two critical Asp residues typical of this enzyme's activity site and the other binding sites; these residues are tightly conserved in all members of this protein family. Apparently, there are catalytic residues on the β subunit of the pyrophosphate-dependent enzyme.