Mortalidade de bovinos zebuínos por hipotermia em Mato Grosso do Sul

O presente trabalho teve por objetivo descrever a ocorrência periódica de mortalidade de bovinos por hipotermia após inversão térmica no estado de Mato Grosso do Sul. São relatados 16 surtos encaminhados ao Laboratório de Patologia Animal da FAMEZ/UFMS, ocorridos de agosto de 2000 a julho de 2010, em 13 municípios do Estado. O diagnóstico de hipotermia baseou-se na ocorrência de mortes após queda brusca de temperatura acompanhada de chuvas e ventos, simultaneamente em diversas propriedades, nos sinais clínicos observados e na ausência de lesões macro e microscópicas significativas. Em todos os surtos houve uma queda brusca de temperatura, de até 29ºC, em intervalos de um a quatro dias associada a chuva e vento. Na maioria das vezes a morte dos bovinos ocorreu em locais onde havia escassez de pasto e ausência de abrigos naturais ou artificiais. Os bovinos afetados estavam magros, com baixo escore corporal, e, em grande parte dos casos, eram encontrados mortos nos cantos das invernadas e próximos a cercas no dia seguinte à queda brusca da temperatura. Foram afetados bovinos de diferentes idades. Os sinais clínicos se caracterizavam por cegueira, incoordenação, dismetria, fraqueza, decúbito esternal, movimentos de pedalagem, opistótono, tremores musculares, e dificuldade respiratória e morte. Em 30 bovinos necropsiados os principais achados macroscópicos foram edema subcutâneo, cavitário e pulmonar, e, em alguns casos, histologicamente havia eosinofilia neuronal. A hipotermia é uma importante causa de mortalidade quando bovinos com pobre estado nutricional, pouca disponibilidade e qualidade dos pastos e ausência de abrigos naturais, são submetidos a uma condição de mudança climática com queda brusca de temperatura combinada com ventos fortes e chuvas.

Mortalidade em potros associada ao parasitismo por Strongyloides westeri

É descrito um surto da infecção por Strongyloides westeri em potros. Cinco de seis potros recém desmamados desenvolveram diarreia, perda de peso, hipoalbuminemia e anemia. Grande número de ovos de nematódeos foi detectado nas fezes de dois desses potros. Três potros morreram naturalmente e um quarto foi eutanasiado in extremis. Os achados de necropsia em três potros consistiam de edema subcutâneo, ascite, hidrotórax e petéquias na mucosa do duodeno. Histologicamente, as alterações eram restritas à mucosa do duodeno e caracterizadas por atrofia das vilosidades e infiltrado inflamatório linfoplasmocítico na lamina propria. Múltiplas pequenas cavidades preenchidas por parasitas nematódeos e ovos embrionados ocorriam na ponta das vilosidades duodenais. Com base na epidemiologia, nas características morfológicas dos nematódeos e nos achados de necropsia no três potros necropsiados, um diagnóstico de infecção por S. westeri foi feito.

Malformações, abortos e mortalidade embrionária em ovinos causada pela ingestão de Mimosa tenuiflora (Leguminosae)

Para determinar a teratogenicidade de Mimosa tenuiflora, 15 ovelhas, distribuídas em dois grupos, foram introduzidos em área invadida pela planta. O Grupo 1, com seis ovelhas prenhes, foi introduzido na área experimental 20 dias após o acasalamento. O Grupo 2, formado por nove ovelhas não prenhes e um carneiro, foi introduzido na área experimental no início do experimento. O experimento começou no mês de outubro de 2009, período de estiagem, quando M. tenuiflora estava sementando. Nesse período as plantas foram rebaixadas a 40 cm de altura e os galhos com folhas e sementes foram disponibilizados para os ovinos na mesma área onde M. tenuiflora foi rebaixada. M. tenuiflora começou a rebrotar ainda na estação seca antes do período de chuvas. No período de rebrota, as ovelhas ficavam livres para pastar M. tenuiflora e recebiam concentrado em quantidade equivalente a 1% do peso vivo. Após as primeiras chuvas, em meados de janeiro do ano seguinte, quando o estrato herbáceo apareceu, essas ovelhas foram confinadas em baias, onde M. tenuiflora foi fornecida até o fim do experimento. A cada 15 dias eram realizados exames ultrassonográficos para acompanhamento da gestação. No Grupo 1, três ovelhas abortaram, cada uma um feto sem malformações. Outra ovelha pariu dois cordeiros, um com hiperflexão na articulação inter-falangeana proximal no membro torácico direito e outro sem malformações. Outra ovelha pariu um cordeiro com hiperflexão dos dois membros pélvicos na região da articulação tarso-metatársica. No grupo formado pelas ovelhas que foram acasaladas na área experimental, uma ovelha abortou um feto sem malformações e cinco pariram cordeiros normais. Três das ovelhas desse grupo não emprenharam durante todo o período experimental, mostrando retornos repetidos ao cio, sugerindo perda embrionária. Trinta e duas ovelhas e um carneiro, que permaneceram numa área vizinha a área experimental e foram utilizados como controle, pariram cordeiros normais. Conclui-se que M. tenuiflora, além de causar malformações causa, também, mortalidade embrionária e abortos em ovelhas.

Efeitos da redução ou substituição do soro fetal bovino por outros compostos na maturação in vitro de oócitos bovinos

A utilização do soro fetal bovino (SFB), embora bastante disseminada na produção in vitro (PIV) de embriões bovinos, apresenta limitações por ser um meio indefinido e por causar efeitos que prejudicam a qualidade desses embriões. Por esse motivo, nos últimos anos, grande parte das pesquisas relacionadas à PIV está voltada para a substituição do SFB por outros compostos nos meios de cultura. No presente estudo, foram utilizados como compostos protéicos a albumina sérica bovina livre de ácidos graxos (BSA-FAF) e um produto comercial denominado fluido embriônico (FE) de maneira isolada ou em diferentes combinações e concentrações, com objetivo de substituir ou diminuir a concentração do SFB durante a maturação in vitro (MIV). Para isso, oócitos bovinos foram maturados in vitro nos seguintes grupos (G) que foram delineados de acordo com a suplementação protéica recebida: G1 (controle) = 10% de SFB, G2 = 8mg/mL de BSA-FAF, G3 = 10% de FE, G4 = 6mg/mL de BSA-FAF + 5% de SFB, G5 = 6mg/mL de BSA-FAF + 3,5% de SFB + 1,5% de FE, G6 = 6mg/mL de BSA-FAF + 1,5% de SFB + 3,5% de FE, G7 = 6mg/mL de BSA-FAF + 5% de FE e G8 = 5% de SFB + 5% de FE. Após 24 horas de MIV, os oócitos foram classificados de acordo com a progressão meiótica e migração dos grânulos corticais (GC). As taxas de maturação foram avaliadas pelo teste do Qui-Quadrado (χ²) ou, quando apropriado, pelo teste exato de Fisher, e para o estudo dos efeitos dos suplementos foram realizados contrastes ortogonais. O grupo suplementado com BSA-FAF (G2) mostrou diminuição na taxa de oócitos que atingiram MII (75%) em comparação aos grupos G1, G4, G5 e G8 (88,9%, 89,6%, 87% e 86,8%, respectivamente), sem diferir do do G3 (79,8%), G6 (82,9%) e G7 (82,9%). Ademais, o G3 também apresentou diminuição na taxa de maturação nuclear quando comparado ao G4. Quanto à maturação citoplasmática, nos grupos G2, G7, G6 e G3, houve redução (p<0,05) das taxas para 43,9%, 43,2%, 43,1% e 36,5%, respectivamente, quando comparadas ao meio controle (G1), que permitiu a obtenção de valores médios de 62,4%. Por outro lado, nos grupos G8, G4 e G5, a taxa de maturação citoplasmática não foi afetada com a redução do SFB, onde 59,3%, 51,3% e 50,8% dos oócitos apresentaram os GC dispostos na periferia, respectivamente. Os resultados obtidos pelo teste de contrastes ortogonais complementam os obtidos na avaliação da maturação nuclear e migração de grânulos corticais, mostrando a necessidade do SFB durante a MIV, mesmo que em baixas concentrações, e a possibilidade de diminuir a sua concentração associando-o a BSA-FAF e/ou FE. Dessa forma, conclui-se que é possível reduzir a concentração de SFB no meio de MIV para até 3,5% sem prejuízo significativo aos índices de maturação nuclear e citoplasmática.

Supplementation of fetal bovine serum alters histone modification H3R26me2 during preimplantation development of in vitro produced bovine embryos

Abstract In vitro production (IVP) of bovine embryos is not only of great economic importance to the cattle industry, but is also an important model for studying embryo development. The aim of this study was to evaluate the histone modification, H3R26me2 during pre-implantation development of IVP bovine embryos cultured with or without serum supplementation and how these in vitro treatments compared to in vivo embryos at the morula stage. After in vitro maturation and fertilization, bovine embryos were cultured with either 0 or 2.5% fetal bovine serum (FBS). Development was evaluated and embryos were collected and fixed at different stages during development (2-, 4-, 8-, 16-cell, morula and blastocyst). Fixed embryos were then used for immunofluorescence utilizing an antibody for H3R26me2. Images of stained embryos were analyzed as a percentage of total DNA. Embryos cultured with 2.5% FBS developed to blastocysts at a greater rate than 0%FBS groups (34.85±5.43% vs. 23.38±2.93%; P<0.05). Levels of H3R26me2 changed for both groups over development. In the 0%FBS group, the greatest amount of H3R26me2 staining was at the 4-cell (P<0.05), 16-cell (P<0.05) and morula (P<0.05) stages. In the 2.5%FBS group, only 4-cell stage embryos were significantly higher than all other stages (P<0.01). Morula stage in vivo embryos had similar levels as the 0%FBS group, and both were significantly higher than the 2.5%FBS group. These results suggest that the histone modification H3R26me2 is regulated during development of pre-implantation bovine embryos, and that culture conditions greatly alter this regulation.

Efeito da cobertura do solo sobre a mortalidade de sementes de capim-marmelada em duas profundidades no solo

Conduziu-se um experimento na Estação Experimental Agronômica da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, em Eldorado do Sul, RS, no ano agrícola 1996/97, para avaliar a mortalidade de sementes de capim-marmelada (Brachiaria plantaginea) colocadas sob cinco níveis (0 a 10t/ha) de resíduo de aveia-preta (Avena strigosa) sobre o solo, duas profundidades das sementes (2 e 10 cm) e cinco períodos de enterrio (de 40 a 300 dias). Níveis de palha na superfície do solo inferiores a 5,2 t/ha aceleram a mortalidade de sementes. Sementes de capim-marmelada posicionadas a 2 cm da superfície do solo apresentaram maior mortalidade do que aquelas posicionadas a 10 cm, exceto em solo desnudo, onde a mortalidade foi similar para sementes em ambas profundidades. O período de tempo necessário para se obter 50% de mortalidade das sementes de capim-marmelada foi 5 e 72 dias, quando a superfície do solo se encontrava sem palha ou com 10,5 t/ha de palha, respectivamente. Os resultados sugerem que técnicas de manejo da cultura que mantenham as sementes de B. plantaginea próximas à superfície do solo aumentam a mortalidade das sementes tendo maior potencial de reduzir novas infestações do que técnicas que acumulem palha na superfície do solo.

Expansão e mortalidade de ramos em espécies arbóreas do cerrado sensu stricto

A abordagem de crescimento e mortalidade de ramos fornece informações essenciais a respeito da dinâmica de crescimento de espécies arbóreas. Este estudo mostrou os padrões de expansão e mortalidade de ramos em dez espécies arbóreas comuns em região de cerrado sensu stricto. O crescimento médio anual foi variável entre as espécies estando entre 1 a 17 cm. Miconia pohliana Cogn. e Vochysia thyrsoidea Pohl foram as espécies com os maiores valores de crescimento de ramo. A mortalidade dos ramos ocorreu majoritariamente na estação seca. O estudo demonstra que a mortalidade de ramos é comum nas espécies lenhosas do cerrado e que se deve atentar para seus efeitos em análises e estudos de crescimento e de produtividade.

Estudo dos anéis de crescimento de Schizolobium parahyba (Leguminosae: Caesalpinioideae) após episódio de mortalidade em Ilha Grande, Rio de Janeiro

Schizolobium parahyba (Vell.) S.F. Blake é uma espécie nativa da Floresta Atlântica, cujos indivíduos arbóreos desapareceram devido a um episódio de mortalidade na Ilha Grande, Rio de Janeiro. Neste trabalho, os anéis de crescimento foram investigados com o objetivo de determinar a idade das árvores mortas, a relação da largura desses anéis com os índices pluviométricos locais e a possível relação do episódio de mortalidade com a estrutura etária da população ou com processos sucessionais. Os resultados demonstraram que os indivíduos morreram com diferentes idades e que a largura dos anéis de crescimento foi significativamente correlacionada com a precipitação anual no período investigado. A possibilidade do episódio de mortalidade refletir um processo de sucessão natural ou um evento particular de uma população senescente foi descartada e é provável que as anomalias climáticas ocorridas entre os anos de 1997 e 2001 tenham contribuído para a mortalidade das árvores.

Development of the insulin secretion mechanism in fetal and neonatal rat pancreatic B-cells: response to glucose, K+, theophylline, and carbamylcholine

We studied the development of the insulin secretion mechanism in the pancreas of fetal (19- and 21-day-old), neonatal (3-day-old), and adult (90-day-old) rats in response to stimulation with 8.3 or 16.7 mM glucose, 30 mM K+, 5 mM theophylline (Theo) and 200 µM carbamylcholine (Cch). No effect of glucose or high K+ was observed on the pancreas from 19-day-old fetuses, whereas Theo and Cch significantly increased insulin secretion at this age (82 and 127% above basal levels, respectively). High K+ also failed to alter the insulin secretion in the pancreas from 21-day-old fetuses, whereas 8.3 mM and 16.7 mM glucose significantly stimulated insulin release by 41 and 54% above basal levels, respectively. Similar results were obtained with Theo and Cch. A more marked effect of glucose on insulin secretion was observed in the pancreas of 3-day-old rats, reaching 84 and 179% above basal levels with 8.3 mM and 16.7 mM glucose, respectively. At this age, both Theo and Cch increased insulin secretion to close to two-times basal levels. In islets from adult rats, 8.3 mM and 16.7 mM glucose, Theo, and Cch increased the insulin release by 104, 193, 318 and 396% above basal levels, respectively. These data indicate that pancreatic B-cells from 19-day-old fetuses were already sensitive to stimuli that use either cAMP or IP3 and DAG as second messengers, but insensitive to stimuli such as glucose and high K+ that induce membrane depolarization. The greater effect of glucose on insulin secretion during the neonatal period indicates that this period is crucial for the maturation of the glucose-sensing mechanism in B-cells.

Fetal hemoglobin levels are related to metabolic control in diabetic subjects

We have investigated the relationship between fetal hemoglobin (HbF) levels and metabolic control in subjects with insulin-dependent (N = 79) and non-insulin-dependent diabetes mellitus (N = 242). HbF and hemoglobin A1c (HbA1c) levels were increased in subjects with type 1 and type 2 diabetes as compared to levels in nondiabetic individuals (P<0.0001), and were significantly higher in type 1 than in type 2 diabetes subjects. Lower levels of HbA1c and HbF were observed in type 2 diabetes subjects treated by diet, intermediate levels in those treated with oral hypoglycemic agents, and higher levels in those treated with insulin. HbF and HbA1c levels were correlated in type 1 diabetes (R2 = 0.57, P<0.0001) and type 2 diabetes (R2 = 0.58, P<0.0001) subjects. Following intense treatment, twelve diabetic patients showed significant improvement both in HbA1c and HbF values. We conclude that increased HbF levels reflect poor metabolic control in subjects with diabetes mellitus.

Increased fetal hemoglobin levels in patients infected with human immunodeficiency virus (HIV1/2)

Fetal hemoglobin was measured in HIV1/2 patients under treatment with combined therapy (zidovudine and a protease inhibitor). A total of 143 patients and 103 normal individuals were investigated by the quantitative method of Betke and the semi-quantitative acid elution method of Kleihauer. In the normal person, hemoglobin F makes up less than 1% and an increase higher than 1.5% was observed in 21.4% of HIV patients by the method of Betke and in 24.8% of HIV-infected patients by the method of Kleihauer. The quantitative biochemical method of Betke showed that the populations were significantly different (two-tailed Mann-Whitney test). The reason for this hemoglobin F increase might be ascribed to the effect of zidovudine or to direct viral action on gamma chain expression. The finding of a higher F cell frequency indicated by the method of Kleihauer rather suggests that there is an increased F cell clone proliferation rather than an increase in hemoglobin F level in every cell.

The Agamma-195 (C->G) mutation in hereditary persistence of fetal hemoglobin is not associated with activation of a reporter gene in vitro

Hereditary persistence of fetal hemoglobin is an uncommon, benign disorder in which the expression of gamma-globin genes persists into adult life. Several point mutations have been associated with the increased gamma-globin gene promoter activity. We evaluated the -195 (C->G) mutation by a functional in vitro assay based on the luciferase reporter gene system. The results indicated that the increased promoter activity observed in vivo could not be reproduced in vitro under the conditions employed, suggesting that other factors may be involved in the overexpression of the gamma-globin gene containing the -195 (C->G) mutation. Furthermore, this is the first time that the -195 (C->G) mutation of the Agamma-globin gene has been evaluated by in vitro gene expression.

Assessment of fetal risk associated with exposure to cancer chemotherapy during pregnancy: a multicenter study

The objective of the present study was to evaluate and quantify fetal risks involved in the administration of cancer chemotherapy during gestation, as well as to assess the long-term effects on the exposed children. In this retrospective, cohort study, we reviewed the records of women aged 15 to 45 years with a diagnosis of malignancy or benign tumors with malignant behavior at three reference services in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, from 1990 to 1997. All patients with a diagnosis of pregnancy at any time during the course of the disease were selected, regardless of whether or not they received specific medication. Fetal outcomes of 14 pregnancies with chemotherapy exposure were compared to that of 15 control pregnancies in which these drugs were not used. Long-term follow-up of the exposed children was carried out. Fisher's exact test was used to compare the groups. Continuous variables were compared by the Wilcoxon-Mann-Whitney test. We found an increased rate of prematurity (6/8 vs 2/10; RR: 3.75; CI: 1.02-13.8; P = 0.03) in the exposed group. There was a trend to an increased fetal death rate (4/12 vs 0/10; P = 0.07) in the group exposed to chemotherapy. No malformations were detected in any child, which can be related to our small sample size as well as to the fact that most exposures occurred after the first trimester of pregnancy. Other larger, controlled studies are needed to establish the actual risk related to cancer chemotherapy during pregnancy.

Biochemical profile of amniotic fluid for the assessment of fetal and renal development

Creatinine plays a key role in the function and maturation of fetal kidneys throughout pregnancy. It is important to identify other markers that may help in the diagnosis of renal dysfunction. Our aim was to determine the profile of and the correlation between biochemical markers to be used to assess renal function and maturation of the fetus in the amniotic fluid during pregnancy and to determine the distribution of normal values for creatinine, N-acetyl-ß-D-glucosaminidase (NAG), ß2-microglobulin, glucose, urea, sodium, potassium, phosphorus, calcium, uric acid, albumin, and osmolality in three gestational age groups. This was a cross-section study that assessed 115 samples of amniotic fluid during three different periods of pregnancy, i.e., 13 to 20, 27 to 34, and 36 to 42 weeks. Concentrations of creatinine, NAG, urea, potassium and uric acid increased during pregnancy (P<0.05). ß2-Microglobulin, glucose, sodium, phosphorus, calcium, and albumin concentration and osmolality decreased (P<0.05), whereas ß2-microglobulin, glucose and uric acid presented significant correlations with gestational age and creatinine, respectively (r>0.6, P<0.05). Urea, potassium and phosphorus showed mild correlations with both (r>0.5, P<0.05). NAG, sodium, albumin and osmolality did not show significant correlations (r<0.5, P<0.05). These tests confirmed the important role of creatinine in terms of correlation with gestational age. ß2-Microglobulin, glucose and uric acid were significant as markers of function and maturation of fetal kidneys, whereas NAG did not demonstrate a useful role for the assessment of renal maturation.

Effect of hydroxyurea on G gamma chain fetal hemoglobin synthesis by sickle-cell disease patients

Hydroxyurea is used for sickle-cell disease patients in order to increase fetal hemoglobin synthesis and consequently decrease the severity of pain episodes. Fetal hemoglobin, which is formed by gamma-globin chains A and G, is present in a constant composition throughout fetal development: about 75% of Ggamma and 25% of Agamma. In contrast, adult red cells contain about 40% of Ggamma and 60% of Agamma. In the present study, we analyzed the effect of hydroxyurea induction on the gamma chain composition of fetal hemoglobin in 31 sickle-cell disease patients treated with hydroxyurea. The control group was composed of 30 sickle-cell disease patients not treated with hydroxyurea in clinical steady state. The patients were older than 13 years and were not matched for age. All patients were seen at Hemocentro/UNICAMP and Boldrini Infantile Center, Campinas, SP, Brazil. The levels of total hemoglobin were significantly higher in patients treated with hydroxyurea (mean ± SD, 9.6 ± 2.16 g/dl) than in untreated patients (8.07 ± 0.91 g/dl). Fetal hemoglobin levels were also higher in treated patients (14.16 ± 8.31%) than in untreated patients (8.8 ± 4.09%), as was the Ggamma/Agamma ratio (1.45 ± 0.78 vs 0.98 ± 0.4, P < 0.005). The increase in the Ggamma/Agamma ratio in patients treated with hydroxyurea suggests the prevalence of a pattern of fetal hemoglobin synthesis, whereas patients not treated with hydroxyurea maintain the adult pattern of fetal hemoglobin synthesis. Because no correlation was observed between the Ggamma/Agamma ratio and total hemoglobin or fetal hemoglobin levels, the increase in Ggamma chain synthesis may not imply a higher production of hemoglobin.