921 resultados para Leishmania chagasi Antígenos recombinantes
Resumo:
Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
Resumo:
A leishmaniose considerada um problema de sade pblica, principalmente devido presena de diferentes espcies enzoticas de Leishmania, envolvendo muitos hospedeiros e diferentes insetos vetores. Os antimoniais pentavalentes permanecem como as drogas de primeira escolha para o tratamento das leishmanioses h mais de 50 anos, no entanto, sua utilizao vem sendo comprometida devido, principalmente, a resistncia desenvolvida pelo parasita ao medicamento. Assim, a escolha de drogas derivadas de plantas baseada no estudo e utilizao de prticas da medicina tradicional devem aparecer como nova estratgia para o controle da leishmaniose. No entanto, importante verificar que algumas destas drogas podem ser txicas ao organismo, podendo inclusive apresentar propriedades genotxicas, causando alteraes no DNA com conseqente aumento no risco de carcinognese. A Julocrotina (2-[N-(2-methylbutanolyl)]- N-phenylethylglutarimide) um alcalide glutarimida isolado da espcie Croton pullei var. glabrior Lanj. Euphorbiaceae), encontrada amplamente na Floresta Amaznica e conhecido por possuir potente efeito leishmanicida. Desta forma, no presente estudo avaliamos o efeito citotxico e genotxico da Julocrotinaa partir do Ensaio do MTT e Ensaio do Cometa (verso alcalina) em cultura de linfcitos humanos. Como resultado, o alcalide no demonstrou citotoxicidade em linfcitos humanos nas concentraes testadas. No entanto, a julocrotina mostrou-se genotxica para linfcitos humanos tratados com a maior concentrao (632M) da substncia. Apesar dos resultados de citotoxicidade parecem promissores no que diz respeito ao uso da julocrotina no tratamento da leishmaniose, o efeito genotxico observado refora a necessidade de se obter as devidas precaues quanto ao seu uso como fitoterpico leishmanicida.
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Este trabalho investiga as alteraes neuropatolgicas e do comportamento em tarefas hipocampo-dependentes induzidas pela encefalite experimental aguda associada ao vrus Piry. Trs janelas temporais (3, 7 e 10 dias aps a inoculao) foram avaliadas e dois ambientes testados de forma a avaliar se o enriquecimento ambiental influencia as alteraes associadas infeco. Camundongos fmeas de dois meses de idade foram mantidos em ambientes empobrecido (IE) ou enriquecido (EE) durante seis meses e foram testados para as atividades de burrowing, de campo aberto e de discriminao olfatria. Aps esse perodo os animais foram inoculados por via intranasal com 5l de homogenado de crebro normal (NBH) ou homogenado de crebro infectado pelo vrus Piry (PY) e ento reorganizados nos seguintes grupos: IENBH, IEPY, EENBH e EEPY, com sete animais cada. Trs, sete e dez dias aps a inoculao (dpi), os animais de cada janela temporal foram perfundidos com fixador aldedico. Os encfalos foram removidos, seccionados e as seces foram processadas para imunohistoqumica para anti-Piry e para anti-Iba-1 para marcao dos antígenos virais e de macrfagos/micrglias, respectivamente. Quantificaes estereolgicas foram feitas em cada camada celular de CA3 usando o mtodo do fracionador ptico. Estimativas do fracionador ptico mostraram que no houve alterao da estimativa do nmero total de micrglias em CA3 nos grupos analisados, indicando que a infeco no alterou o nmero de clulas, mas a morfologia das micrglias, que se mostraram mais ativadas no grupo IEPY do que no grupo EEPY. Os resultados revelaram a presena de antígenos virais no bulbo olfatrio, crtex piriforme, estriado e fimbria, ao longo da via olfatria. A atividade de burrowing no grupo IEPY diminuiu na primeira janela temporal e permaneceu baixa at a ltima janela, enquanto que no grupo EEPY no houve alterao neste teste. Na atividade de campo aberto, o grupo IEPY aumentou o tempo imvel j na primeira janela e continuou aumentando at a ltima; reduziu o nmero de linhas cruzadas na segunda janela e permaneceu reduzido na ltima; e diminuiu o tempo na zona central na segunda e ltima janela. J o grupo EEPY, aumentou o tempo imvel e reduziu o nmero de linhas cruzadas na segunda janela. No teste de discriminao olfatria, o principal grupo afetado foi o grupo IEPY, que no discriminou os dois odores na ltima janela, enquanto que o grupo EEPY no teve alterao na discriminao.
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The number of visceral leishmaniasis (VL) cases has increased over the past 10 years in Brazil, especially in the North and Northeast regions of the country. The aim of this study was to evaluate the urbanisation of VL vectors in Barcarena, Par, an area in northern Brazil where VL is endemic. Sandflies were captured using Centers for Disease Control (CDC) light traps along an urban-rural gradient. The CDC traps were installed inside hen houses at a height of 150 cm. A total of 5,089 sandflies were collected and 11 species were identified. The predominant species was Lutzomyia longipalpis (rate of 95.15%), which suggests its participation in the transmission of VL. A total of 1,451 Lu. longipalpis females were dissected and no Leishmania infections were detected. Most of the sandflies were captured at the border of a forest (88.25%) and no flies were captured in the urban area, which suggests that transmission is still restricted to rural sites. However, the fact that a specimen was collected in an intermediate area indicates that urbanisation is a real possibility and that vector monitoring is important.
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Neste trabalho estamos portando o isolamento dos policetdeos citreoserina (1), emodina (2), janthinona (3), dihidrocitrinona (4) e citrinina H-1 (5). Os compostos foram isolados por procedimentos cromatogrficos e identificados por mtodos espectrais de RMN 1D e 2D e EM. Os compostos 1, 2 e 3 foram testados sobre promastigotas de Leishmania brasiliensis.
Resumo:
Um estudo epidemiolgico da prevalncia da infeco por Candida sp. em mulheres no grvidas foi realizado em uma populao do Norte do Brasil (Belm-Par, 2002). Este estudo teve como objetivo principal contribuir para esclarecer os mecanismos de infeco por Candida sp e sua possvel associao com os antígenos de grupos sangneos ABO e Lewis e estado secretor de substncias ABH. Tal estudo compreendeu um total de 165 mulheres, atendidas no Ambulatrio do Hospital da Polcia Militar e Laboratrio de Anlises Clnicas do centro de Cincias Biolgicas da Universidade Federal do Par, que procuraram essas unidades para a realizao de exames ginecolgicos, das quais foram coletadas amostras de sangue, saliva e muco vaginal. A presena da infeco por Candida sp foi feita atravs do exame a fresco de secreo vaginal e bacterioscopia da secreo vaginal. A identificao dos fentipos ABH e Lewis no sangue foi determinada pelos testes de hemaglutinao direta e na saliva pelo dot-blot Elisa. Aplicou-se um questionrio padro para obteno das informaes epidemiolgicas. A prevalncia da infeco por Candida sp foi de 47,9%. Dentre os sintomas mais comumente associados infeco por Candida sp, destacaram-se o prurido e corrimento. Mulheres com idade inferior a 40 anos, que no faziam uso de preservativo e que j tiveram infeces anteriores apresentaram um maior risco de infeco vulvovaginal por Candida sp. Mulheres infectadas e no infectadas por Candida sp tiveram distribuio similares para os fentipos de grupos sangneos ABO, Lewis e estado secretor de substncias ABH. E na comparao da expresso dos antígenos Lewis no sangue, saliva e muco vaginal, verificou-se que ambas as secrees expressavam antígenos Lewis sem qualquer estreita correlao dos fentipos eritrocitrios Lewis. Neste contexto, considera-se que a natureza da diversidade gentica na interao entre hospedeiro e Candida sp requer estudos complementares envolvendo a identificao de diferentes cepas para determinar estas provveis associaes entre os fentipos de grupo sangneos ABH e Lewis com candidase.
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Uma investigao com o objetivo de estudar a soroprevalncia da infeco pela bactria Helicobacter pylori foi realizada em 100 crianas, entre 1 e 12 anos, no Hospital Universitrio Joo de Barros Barreto, em Belm, Brasil, e em suas respectivas 100 mes. Analisaram-se possveis fatores de risco relacionados infeco e possveis associaes da infeco entre as mes e seus filhos, inclusive por cepas CagA. Colheram-se amostras de sangue e saliva de todos os participantes e fezes das crianas. A sorologia anti-H. pylori foi realizada pela hemaglutinao indireta e a anti-CagA por Elisa. Os fentipos ABH e Lewis no sangue foram determinados por hemaglutinao direta e na saliva por dot-blot Elisa. Pesquisou-se antígenos da bactria em 79 amostras de fezes das crianas por um Elisa de captura. Informaes pessoais e familiares foram obtidas atravs de um questionrio padro. A soroprevalncia nas crianas foi de 50,0% e nas mes de 86,0%. A soroprevalncia nas crianas aumentou com a idade (p<0,05) e com o hbito de freqentarem creche ou escola (p<0,05). Os mtodos Elisa de captura e hemaglutinao indireta apresentaram desempenhos semelhantes nas crianas, sendo que nas de 1 a 4 anos observaram-se maiores discordncias (p<0,05). Mes infectadas representaram fator de risco para infeco em seus filhos (p<0,05), sobretudo mes com cepas CagA (p<0,005). Procedncia de municpios com 100 mil habitantes ou mais (p<0,05), gua encanada (p<0,05), ausncia de instalaes sanitrias (p<0,005) e de saneamento na residncia (p<0,05) representaram risco para infeco familiar. A transmisso da H. pylori foi facilitada pelas precrias condies de higiene e saneamento, conglomerados urbanos e por contatos ntimos entre as crianas e mes, mediante as rotas de transmisso fecal-oral, oral-oral e/ou gastro-oral.
Resumo:
Existe uma diversidade de espcies de Leishmania prevalentes na regio Amaznica associadas LTA configurando a etiologia mltipla da doena e, apesar do conhecimento da elevada ocorrncia desta protozoose na Mesorregio do Baixo Amazonas, oeste do Estado do Par, quase nada era sabido sobre os agentes etiolgicos da doena na referida rea. Nesse sentido, o presente trabalho props-se a caracterizar por eletroforese de isoenzimas as amostras de Leishmania isoladas de pacientes procedentes da Mesorregio do baixo Amazonas, verificando a existncia da correlao geogrfica das espcies encontradas com a sua distribuio regional previamente conhecida, e ainda, verificando a presena de variao intraespecfica. A caracterizao das 43 amostras de Leishmania foi feita por eletroforese em gel de amido utilizando sete sistemas enzimticos (6PGDH, PGM, G6PD, MPI, GPI, ASAT E ALAT), comparando seus perfis eletroforticos com os perfis das sete cepas-referncia das espcies conhecidas da regio. As amostras foram testadas previamente por imunofluorescncia indireta com o uso de um painel com 23 anticorpos monoclonais (sistema biotina-avidina) apenas como uma triagem. A caracterizao isoenzimtica das amostras permitiu o seguinte resultado: 11 (25,28%) amostras de L. (V) braziliensis, 20 (46,50%) de L.(V) guyanensis, 2 (4,60%) de L.(L.) amazonensis, 4 (9,30%) de L.(V) shawi e 6 (13,95%) de L.(V) lainsoni. A eletroforese isoenzimtica apresentou elevado poder discriminatrio para a identificao das amostras estudadas, permitindo concluir que esta tcnica representa uma importante ferramenta para a caracterizao dos parasitos do gnero Leishmania. Nas cepas de L. (V) braziliensis observou-se pela primeira vez na Mesorregio do Baixo Amazonas a ocorrncia de variao intraespecfica revelada pela presena de trs serodemas. Nas cepas de L. (V) guyanensis observou-se a presena de duas variantes, uma que apresentou reatividade com o monoclonal B 19 (espcie-especfico), porm com variao nas enzimas 6PGDH e PGM, e a Segunda, sem reatividade para este monoclonal e com perfis eletroforticos semelhantes ao da cepa-referncia L. (V) guyanensis especialmente nas enzimas 6PGDH, porm com tribandas, e na PGM, consideradas os melhores marcadores enzimticos pelo seu elevado poder discriminatrio. Dessa forma, descreveu-se pela primeira vez a ocorrncia de diferentes espcies de Leishmania dermotrpicas na Mesorregio do Baixo Amazonas, as quais j tem registro na regio norte do Brasil, sugerindo a transmisso simptrica das espcies encontradas na referida rea estudada.
Resumo:
Ps-graduao em Medicina Veterinria - FMVZ
Resumo:
Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq)
Resumo:
Os arbovrus Ilhus (VILH) e Rocio (VROC) so flavivirus (famlia Flaviviridae, gnero Flavivirus) de grande importncia para a sade pblica no Brasil por estar relacionados a casos de encefalites em humanos. Sabe-se que outros flavivrus esto envolvidos com a infeco persistente in vitro, in vivo e em relatos clnicos. Deste modo, o objetivo desse trabalho foi investigar a possvel ocorrncia de infeco persistente in vivo dos VILH e VROC utilizando hamsters dourados jovens (Mesocricetus auratus) como modelo experimental. Os hamsters foram inoculados com suspenso de crebros de camundongos recm-nascidos infectados com ttulos de 9,8 e 9,6 DL<sub>50 </sub>/0,02 mL do VROC e VILH respectivamente, pela via intraperitoneal, sendo em seguida a intervalos pr-determinados, anestesiados e sacrificados para coleta de amostras de sangue, soro, urina e rgos durante quatro meses (120 dias) ps-inoculao (p.i.). A quantificao viral foi calculada em amostras de crebro, fgado e sangue, pela tcnica de RT-PCR em tempo real (qRT-PCR). Todas as amostras coletadas foram inoculadas em clula VERO para confirmao de replicao viral, sendo detectados antígenos virais pelo teste de imunofluorescncia indireta (IFI), os nveis de anticorpos foram determinados pelo teste de inibio da hemaglutinao. Exame histopatolgico por hematoxilina-eosina e deteco de antígenos virais por imunohisqumica foram avaliados nas amostras de vsceras e encfalos coletados durante a cintica. O estudo demonstrou que hamsters dourados jovens constituem um bom modelo experimental para infeco persistente pelos flavivrus VILH e VROC. Os dois vrus induziram uma forte resposta imune, embora os nveis de anticorpos para o VILH tenham sido maior do que para o VROC; j o VROC mostrou-se mais patognico nestes animais, sugerindo uma capacidade de neurovirulncia maior que o VILH. Das amostras coletadas dos hamsters infectados e inoculadas em clulas VERO foi possvel isolar ambos os vrus a partir de todos os rgos, sangue, soro e urina, sendo confirmada a replicao viral por IFI. Quanto infeco persistente, o VROC foi detectado, pela tcnica de qRT PCR, por trs meses p.i., no crebro, fgado e sangue, enquanto o VILH apresentou persistncia viral apenas no crebro durante 30 dias p.i. por qRT PCR. O VROC foi capaz de produzir alteraes histopatolgicas e clulas imuno-marcadas expressando antígenos virais nas amostras de fgado, rim, pulmo e crebro por quatro meses. Ao passo que para o VILH, as alteraes histopatolgicas e a expresso de antígenos virais nas amostras de fgado, rim e pulmo ocorreram por 30 dias p.i.; e no crebro por quatro meses p.i.; Os achados deste estudo demonstraram que ambos os vrus apresentaram capacidade de causar infeco persistente em hamsters infectados por via perifrica, sendo necessrios mais estudos para determinar os mecanismos fisiopatolgicos e a patognese de estabelecimento dessas infeces persistentes.
Resumo:
Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP)
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Os flebotomneos compreendem um grupo de insetos de grande interesse mdicoveterininrio, sobretudo com sua associao vetorial com as leishmanioses. A identificao correta destas espcies no campo prtica imprescindvel na pesquisa entomolgica e controle de vetores de Leishmania, sobretudo no estado do Par, onde a fauna de flebotomneos bastante diversificada em relao ao montante brasileiro. No entanto, esta prtica tem sido realizada por tcnicos treinados com base na chave atualizada em 2003, apoiada por desenhos manuais de vrios pesquisadores, que muitas vezes so de difcil entendimento. Assim, este estudo objevitou apresentar a relevncia do uso da fotomicrografia digital como instrumento de apoio para a identificao e registro de flebotomneos do subgnero Psychodopygus. Utilizou-se como abordagem metodolgica a captura de imagens de lminas da coleo do Insetrio de Flebotomneos do Laboratrio de Leishmanioses do Instituto Evandro Chagas, das diversas reas de estudos epidemiolgicos de leishmanioses do estado do Par, no perodo de 1970 at a atualidade, por meio dos sistemas de: Axiostar, Canon via Phototube e cmera convencional sobreposta ocular do microscpio. A partir das imagens capturadas, construiu-se uma base de dados organizada de acordo com a hierarquia taxonmica de Phlebotominae que posteriormente foram comparadas com as ilustraes tradicionais de chaves de identificao. Do total de 2105 lminas, foram obtidas 222 imagens de flebotomneos. Um banco de dados contendo 344 imagens referentes s 17 espcies de Psychodopygus foi preparado no decorrer do estudo. Conclui-se que as imagens das estruturas desenhadas por diferentes pesquisadores ao longo dos anos apresentavam diferenas, traduzindo a subjetividade da interpretao para a mesma espcie dentro do subgnero Psychodopygus; assim a fotomicrografia digital demonstra ser um recurso de grande utilidade e importncia, devido apresentar vantagens, como: melhor qualidade de imagens, durabilidade, fidedignidade com o real observado e praticidade tecnolgica, proporcionando maior segurana e ou confiabilidade ao profissional durante a investigao epidemiolgica.
Resumo:
A Leishmaniose uma doena infecciosa causada por vrias espcies de parasitas do gnero Leishmania. A quimioterapia o nico tratamento efetivo para a doena, mas essas drogas so, em geral, txicas e requer um longo perodo de tratamento. Produtos naturais provenientes de plantas oferecem novas perspectivas e representam uma importante fonte de novos agentes leishmanicidas. Assim, de grande importncia avaliar os efeitos do extrato aquoso da raiz de Physalis angulata, planta amplamente utilizada pela medicina popular, em formas promastigotas e amastigotas de Leishmania (Leishmania) amazonensis e sua ao sobre a clula hospedeira. As fisalinas D, E, F e G foram demonstradas pela primeira vez na raiz de P. angulata pela anlise cromatogrfica. Uma atividade antiproliferativa e uma inibio dose dependente de promastigotas 74,1% e 99,8 % (IC50 35,5 g/mL) e amastigotas 70,6% e 70,9% (IC50 32.0 g/mL) foram observadas quando os parasitas foram tratados com 50 e 100 g/mL do extrato, respectivamente. A anlise da atividade microbicida da clula hospedeira infectada com L. amazonensis mostrou que extrato foi capaz de reverter o efeito causado pelo parasito de inibir a produo de espcies reativas de oxignio. O tratamento com o extrato tambm induziu alteraes morfolgicas importantes em formas promastigotas avaliadas por microscopia ptica, microscopia eletrnica de transmisso e varredura. Foram observadas alteraes na morfologia, na diviso celular, principalmente na fase de citocinese, na membrana flagelar, na bolsa flagelar e alteraes em organelas importantes, como o cinetoplasto, onde ocorreu duplicao irregular e alterao do seu tamanho. J por citometria de fluxo foi possvel confirmar que o tratamento induziu uma exposio de fosfatidilserina e diminuio no volume celular de promastigotas tratadas. Com relao clula hospedeira, o extrato promoveu alteraes no citoesqueleto, o aumento nmero de projees citoplasmticas, do volume celular e de vacolos e da habilidade de espraiamento sem causar efeito citotxico ou alterao ultraestrutural em macrfagos tratados com o extrato. Assim, estes resultados demonstram que o extrato aquoso da raiz de P. angulata foi eficaz na ativao da clula hospedeira e na inibio do crescimento do protozorio, o que representa uma fonte alternativa e promissora de agente leishmanicida.
Resumo:
Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
