Fluorescent RNA cytochemistry: tracking gene transcripts in living cells

The advent of jellyfish green fluorescent protein and its spectral variants, together with promising new fluorescent proteins from other classes of the Cnidarian phylum (coral and anemones), has greatly enhanced and promises to further boost the detection and localization of proteins in cell biology. It has been less widely appreciated that highly sensitive methods have also recently been developed for detecting the movement and localization in living cells of the very molecules that precede proteins in the gene expression pathway, i.e. RNAs. These approaches include the microinjection of fluorescent RNAs into living cells, the in vivo hybridization of fluorescent oligonucleotides to endogenous RNAs and the expression in cells of fluorescent RNA-binding proteins. This new field of ‘fluorescent RNA cytochemistry’ is summarized in this article, with emphasis on the biological insights it has already provided. These new techniques are likely to soon collaborate with other emerging approaches to advance the investigation of RNA birth, RNA–protein assembly and ribonucleoprotein particle transport in systems such as oocytes, embryos, neurons and other somatic cells, and may even permit the observation of viral replication and transcription pathways as they proceed in living cells, ushering in a new era of nucleic acids research in vivo.

Localization of CD4+ T cell epitope hotspots to exposed strands of HIV envelope glycoprotein suggests structural influences on antigen processing

The spectrum of immunogenic epitopes presented by the H2-IAb MHC class II molecule to CD4+ T cells has been defined for two different (clade B and clade D) HIV envelope (gp140) glycoproteins. Hybridoma T cell lines were generated from mice immunized by a sequential prime and boost regime with DNA, recombinant vaccinia viruses, and protein. The epitopes recognized by reactive T cell hybridomas then were characterized with overlapping peptides synthesized to span the entire gp140 sequence. Evidence of clonality also was assessed with antibodies to T cell receptor Vα and Vβ chains. A total of 80 unique clonotypes were characterized from six individual mice. Immunogenic peptides were identified within only four regions of the HIV envelope. These epitope hotspots comprised relatively short sequences (≈20–80 aa in length) that were generally bordered by regions of heavy glycosylation. Analysis in the context of the gp120 crystal structure showed a pattern of uniform distribution to exposed, nonhelical strands of the protein. A likely explanation is that the physical location of the peptide within the native protein leads to differential antigen processing and consequent epitope selection.

Src, a molecular switch governing gain control of synaptic transmission mediated by N-methyl-d-aspartate receptors

The N-methyl-d-aspartate (NMDA) receptor is a principal subtype of glutamate receptor mediating fast excitatory transmission at synapses in the dorsal horn of the spinal cord and other regions of the central nervous system. NMDA receptors are crucial for the lasting enhancement of synaptic transmission that occurs both physiologically and in pathological conditions such as chronic pain. Over the past several years, evidence has accumulated indicating that the activity of NMDA receptors is regulated by the protein tyrosine kinase, Src. Recently it has been discovered that, by means of up-regulating NMDA receptor function, activation of Src mediates the induction of the lasting enhancement of excitatory transmission known as long-term potentiation in the CA1 region of the hippocampus. Also, Src has been found to amplify the up-regulation of NMDA receptor function that is produced by raising the intracellular concentration of sodium. Sodium concentration increases in neuronal dendrites during high levels of firing activity, which is precisely when Src becomes activated. Therefore, we propose that the boost in NMDA receptor function produced by the coincidence of activating Src and raising intracellular sodium may be important in physiological and pathophysiological enhancement of excitatory transmission in the dorsal horn of the spinal cord and elsewhere in the central nervous system.

Ensemble codes involving hippocampal neurons are at risk during delayed performance tests

Multielectrode recording techniques were used to record ensemble activity from 10 to 16 simultaneously active CA1 and CA3 neurons in the rat hippocampus during performance of a spatial delayed-nonmatch-to-sample task. Extracted sources of variance were used to assess the nature of two different types of errors that accounted for 30% of total trials. The two types of errors included ensemble “miscodes” of sample phase information and errors associated with delay-dependent corruption or disappearance of sample information at the time of the nonmatch response. Statistical assessment of trial sequences and associated “strength” of hippocampal ensemble codes revealed that miscoded error trials always followed delay-dependent error trials in which encoding was “weak,” indicating that the two types of errors were “linked.” It was determined that the occurrence of weakly encoded, delay-dependent error trials initiated an ensemble encoding “strategy” that increased the chances of being correct on the next trial and avoided the occurrence of further delay-dependent errors. Unexpectedly, the strategy involved “strongly” encoding response position information from the prior (delay-dependent) error trial and carrying it forward to the sample phase of the next trial. This produced a miscode type error on trials in which the “carried over” information obliterated encoding of the sample phase response on the next trial. Application of this strategy, irrespective of outcome, was sufficient to reorient the animal to the proper between trial sequence of response contingencies (nonmatch-to-sample) and boost performance to 73% correct on subsequent trials. The capacity for ensemble analyses of strength of information encoding combined with statistical assessment of trial sequences therefore provided unique insight into the “dynamic” nature of the role hippocampus plays in delay type memory tasks.

Induction of cellular immunity in chimpanzees to human tumor-associated antigen mucin by vaccination with MUC-1 cDNA-transfected Epstein-Barr virus-immortalized autologous B cells.

Aberrant glycosylation of the mucin molecule (encoded by the gene MUC-1) on human epithelial cell tumors leads to the exposure of tumor-associated epitopes recognized by patients' antibodies and cytotoxic T cells. Consequently, these epitopes could be considered targets for immunotherapy. We designed a cellular vaccine, employing, instead of tumor cells, autologous Epstein-Barr virus (EBV)-immortalized B cells as carriers of tumor-associated mucin, to take advantage of their costimulatory molecules for T-cell activation. The vaccine was tested in chimpanzees because of the identity of the human and chimpanzee MUC-1 tandem repeat sequence. EBV-immortalized B cells derived from two chimpanzees were transfected with MUC-1 cDNA, treated with glycosylation inhibitor phenyl-N-acetyl-alpha-D-galactosaminide to expose tumor-associated epitopes, irradiated, and injected subcutaneously four times at 3-week intervals. One vaccine preparation also contained cells transduced with the interleukin 2 (IL-2) cDNA and producing low levels of IL-2. Already after the first injection we found in the peripheral blood measurable frequency of cytotoxic T-cell precursors specific for underglycosylated mucin. The highest frequency observed was after the last boost, in the lymph node draining the vaccination site. Delayed-type hypersensitivity reaction to the injected immunogens was also induced, whereas no appearance of mucin-specific antibodies was seen. Long-term observation of the animals yielded no signs of adverse effects of this immunization. Autologous antigen-presenting cells, like EBV-immortalized B cells, expressing tumor-associated antigens are potentially useful immunogens for induction of cellular anti-tumor responses in vivo.

Colaboração interprofissional na Estratégia Saúde da Família e a produção do cuidado em saúde durante o pré-natal

Introdução: Uma das mudanças mais importantes na produção do cuidado à saúde é a reorganização do processo de trabalho para a atuação de equipes multiprofissionais com abordagens interdisciplinares. A colaboração interprofissional tem sido apontada como um recurso que pode ser mobilizado para elevar a efetividade dos sistemas de saúde, e como estratégia inovadora, ela pode desempenhar um importante papel para enfrentar problemas do modelo de atenção e da força de trabalho em saúde. Objetivo: Descrever as percepções e atitudes de profissionais de saúde da Estratégia de Saúde da Família sobre as relações interprofissionais na atenção ao pré-natal, construir coletivamente e testar um protocolo de atenção à gestante para impulsionar as competências no trabalho colaborativo com vistas ao incremento da qualidade do cuidado. Métodos: Para isso, realizou-se previamente um estudo observacional descritivo para seleção de duas unidades de saúde. Na sequência foi realizado um estudo de intervenção do tipo antes e depois, com um grupo de controle pós-teste, incluindo métodos mistos. A população do estudo compreendeu oito profissionais de saúde (médicos, dentistas, enfermeiros e técnicos em saúde bucal) e 60 gestantes cadastradas em duas unidades de saúde da família do município de Uberlândia, sendo 36 incluídas no grupo intervenção e 24 no grupo controle. Dados numéricos, narrativas provenientes de entrevistas e registros de diário de campo foram usados para identificar mudanças na autoavaliação da saúde bucal, na qualidade de vida relacionada à saúde bucal medida pelo OHIP-14, na percepção das gestantes sobre o trabalho em equipe e nas práticas profissionais. Testes estatísticos para detectar diferenças de significância e análise temática de conteúdo foram empregados para interpretar os desfechos. Resultados: Em geral, observou-se percepção/atitude favorável dos profissionais em relação à colaboração interprofissional. Diferenças entre as categorias profissionais podem representar uma barreira subjetiva à implementação de protocolos que demandariam maior grau de trabalho colaborativo. Diferenças entre as unidades de atenção primária mostraram que a interação entre membros das equipes multiprofissionais pode sobrepujar dificuldades decorrentes do modo isolado e distinto no qual cada categoria profissional é formada. Foi produzido um Protocolo de Atenção à Gestante abrangendo o fluxo e a dinâmica dos processos de trabalho dentro de uma perspectiva de colaboração interprofissional. Segundo os profissionais, a intervenção apesar do seu caráter desafiador, estimulou o comprometimento da equipe para reorientar o processo de trabalho resultando em maior interação profissional colaborativa. Em relação às gestantes, a maioria era jovem (menos de 26 anos de idade) e tinha ensino médio incompleto ou completo sem diferenças significativas entre os grupos teste e controle. Gestantes do grupo intervenção perceberam que os profissionais trabalhavam mais em equipe do que as gestantes do grupo controle. De modo geral, as gestantes avaliaram que a saúde bucal e a qualidade de vida decorrente da saúde bucal melhoraram após a intervenção. Conclusões: Concluiu-se que apesar da percepção geral dos profissionais favorável à colaboração interprofissional, recursos formais e organizacionais não estavam sendo empregados. O método ZOPP se mostrou flexível e adequado para o desenvolvimento de competências para o trabalho colaborativo e para a construção de um protocolo de organização de serviços na atenção primária à saúde. O Protocolo de Atenção à Gestante testado provocou tensões e produziu efeitos positivos na colaboração interprofissional e na qualidade de vida relacionada à saúde bucal contribuindo para qualificar a atenção ao pré-natal oferecido.

Triangulación empresarial: España - China - América Latina

Cada período de la historia tiene sus hechos y acontecimientos relevantes que marcan el devenir de los países. Los protagonistas de estas etapas son artífices de grandes cambios en la vida de millones de personas, así como en el modo en el que el mundo se relaciona. En el tiempo presente que vivimos, China es, sin lugar a dudas, uno de los grandes referentes en la historia del s.XXI, como líder del comercio mundial, máximo inversor internacional y uno de los nuevos agentes en la gobernanza global. Los cambios que se han venido produciendo durante los últimos años en la economía china han impulsado al gigante asiático hasta la segunda posición en la clasificación de potencias mundiales, vigilando de cerca a la que hasta el momento ha sido durante décadas la gran hegemónica superpotencia mundial, Estados Unidos. Para alcanzar esta posición, los cambios en la estructura interna del país asiático han sido cuanto menos cuantiosos, y han estado en todo momento alentados por la férrea voluntad de sus máximos dirigentes políticos por posicionar a la RP China en el lugar del mundo que ellos consideran que siempre ha merecido el país como potencia. En el nuevo orden económico mundial, y de mantenerse las previsiones de crecimiento registradas durante las últimas décadas, en breve presenciaremos el hecho histórico de que el país asiático más poblado del mundo, China, con una población superior a los 1.300 millones de habitantes, y gobernado por el Partido Comunista, se convierta en la primera potencia mundial. Este evento supondrá un cambio en las palancas del liderazgo global en el marco de las relaciones internacionales al que será preciso que el resto de países desarrollados se acomoden y adapten en consecuencia...

Multiclassificador inteligente de falhas no domínio do tempo em motores de indução trifásicos alimentados por inversores de frequência

Os motores de indução desempenham um importante papel na indústria, fato este que destaca a importância do correto diagnóstico e classificação de falhas ainda em fase inicial de sua evolução, possibilitando aumento na produtividade e, principalmente, eliminando graves danos aos processos e às máquinas. Assim, a proposta desta tese consiste em apresentar um multiclassificador inteligente para o diagnóstico de motor sem defeitos, falhas de curto-circuito nos enrolamentos do estator, falhas de rotor e falhas de rolamentos em motores de indução trifásicos acionados por diferentes modelos de inversores de frequência por meio da análise das amplitudes dos sinais de corrente de estator no domínio do tempo. Para avaliar a precisão de classificação frente aos diversos níveis de severidade das falhas, foram comparados os desempenhos de quatro técnicas distintas de aprendizado de máquina; a saber: (i) Rede Fuzzy Artmap, (ii) Rede Perceptron Multicamadas, (iii) Máquina de Vetores de Suporte e (iv) k-Vizinhos-Próximos. Resultados experimentais obtidos a partir de 13.574 ensaios experimentais são apresentados para validar o estudo considerando uma ampla faixa de frequências de operação, bem como regimes de conjugado de carga em 5 motores diferentes.

Estudo sobre a interação de métodos anti-ilhamento para sistemas fotovoltaicos conectados à rede de distribuição de baixa tensão com múltiplos inversores.

Este trabalho estuda a interação entre os métodos anti-ilhamento aplicados em sistemas fotovoltaicos residenciais, operando simultaneamente em uma rede de distribuição de baixa tensão. Os sistemas fotovoltaicos em geral interagem entre si, com a rede de distribuição da concessionária e com outras fontes de geração distribuída. Uma consequência importante dessa interação é a ocorrência do ilhamento, que acontece quando as fontes de geração distribuída fornecem energia ao sistema elétrico de potência mesmo quando esta se encontra eletricamente isolada do sistema elétrico principal. A função anti-ilhamento é uma proteção extremamente importante, devendo estar presente em todos os sistemas de geração distribuída. Atualmente, são encontradas diversas técnicas na literatura. Muitas delas oferecem proteção adequada quando um inversor está conectado à linha de distribuição, mas podem falhar quando dois ou mais funcionam simultaneamente, conectados juntos ou próximos entre si. Dois destes métodos são analisados detalhadamente nesse estudo, avaliados em uma rede de distribuição residencial de baixa tensão. Os resultados obtidos mostram que a influência de um método sobre o outro é dependente da predominância de cada um deles dentro do sistema elétrico. Contudo, nas condições analisadas o ilhamento foi detectado dentro do limite máximo estabelecido pelas normas pertinentes.

Green education using open educational resources (OER): setting up a green OER repository

A wealth of open educational resources (OER) focused on green topics is currently available through a variety of sources, including learning portals, digital repositories and web sites. However, in most cases these resources are not easily accessible and retrievable, while additional issues further complicate this issue. This paper presents an overview of a number of portals hosting OER, as well as a number of “green” thematic portals that provide access to green OER. It also discusses the case of a new collection that aims to support and populate existing green collections and learning portals respectively, providing information on aspects such as quality assurance/collection and curation policies, workflow and tools for both the content and metadata records that apply to the collection. Two case studies of the integration of this new collection to existing learning portals are also presented.

Inventario de plantas con interés etnobotánico de Carrizales (Elche), SE de la Península Ibérica

Se ha realizado un inventario de flora útil en la Partida de Carrizales en el término municipal de Elche (Alicante). A partir de entrevistas de tipo semiestructurado se han encontrado un total de 246 especies, de las cuales aparece una pequeña descripción botánica, ecológica y aplicación etnobotánica. Así, se pretende hacer una aproximación al conocimiento etnobotánico existente en una zona de regadío colonizada a partir del s. XVIII e intensamente antropizada. En nuestro trabajo hemos prestado atención no sólo a los cultivos que actualmente encontramos, sino también los que han estado presentes en el pasado, ya que conociendo sus características se pueden tratar de recuperar y crear productos con sello propio y dinamizar la economía local.

Solvent-Free Enantioselective Organocatalyzed Aldol Reactions

The use of proline as catalyst for the aldol process has given a boost to the development of organocatalysis as a research area. Since then, a plethora of organocatalysts of diverse structures have been developed for this and other organic transformations under different reaction conditions. The use of an organic molecule as catalyst to promote a reaction meets several principles of Green Chemistry. The implementation of solvent-free methodologies to carry out the aldol reaction was soon envisaged. These solvent-free processes can be performed using conventional magnetic stirring or applying ball milling techniques and are even compatible with the use of supported organocatalysts as promoters, which allows the recovery and reuse of the organocatalysts. In addition, other advantages such as the reduction of the required amount of nucleophile and the acceleration of the reaction are accomplished by using solvent-free conditions leading to a “greener” and more sustainable process.

La Universidad de Alicante Universidad promotora de salud/Universidad Saludable. Un reto y una oportunidad

Justificación: Dentro de la estrategia de Universidades Saludables, la Universidad de Alicante (UA) inicia un proyecto para conocer, difundir y potenciar los activos para la salud. Se plantea dotar de contenido empírico la propuesta de Morgan y Ziglio de usar el modelo de activos para la salud pública identificados por la comunidad universitaria. Objetivos: explorar la factibilidad y los retos de la aplicación de mapeos de activos para la salud en la UA con el fin de que la comunidad universitaria pueda ganar salud, calidad de vida y bienestar. Desarrollo de la experiencia: Formación de promotores de salud: • La promoción de la salud y la teoría salutogénica. • Aproximación al modelo y la estrategia de activos en salud. Enfoque Asset-Based Community Development (ABCD). • Diferencia entre recursos y activos. • Técnicas de observación y diálogo. • Técnicas mixtas: open space, TICs y mapping... • Competencias profesionales, entorno facilitador y apoyo para obtener resultados. Metodología: Lograr el mapeo de los activos en salud, sus entornos y sus estudiantes siguiendo el enfoque de John McKnight. Aplicación de “lo aprendido” en el contexto de la UA: Planificación del proyecto para el año 2014. Resultados: construcción de un mapa de activos para la salud, geolocalizado en la Universidad de Alicante. Dinamización del mapa de activos, estudiando conexiones entre activos y necesidades de la comunidad universitaria con las personas participantes, para realizar propuestas de acción futura. Difusión del mismo a través de tecnologías de la información.

Design of hybrid asymmetric capacitors in aqueous electrolyte using ZTC and ultraporous activated carbons

The use of two different materials as electrodes allows the construction of asymmetric and hybrid capacitors cells with enhanced energy and power density. This approach is especially well-suited for overcoming the limitations of pseudocapacitive materials that provide a huge capacitance boost, but in a limited potential window. In this work, we introduce the concepts and protocols that are required for a successful design of such systems, which is illustrated by the construction of an asymmetric hybrid cell where a zeolite-templated carbon and an ultraporous activated carbon have been combined.

Creatividad, atención y rendimiento académico en alumnado de conservatorio profesional

El objetivo de este trabajo fue analizar la relación entre creatividad, atención y su repercusión en los resultados académicos en las enseñanzas profesionales de música. Para ello, se ha seleccionado una muestra de 84 alumnos de entre 12 y 18 años (M = 14.79; DT = 2.29) que cursan Enseñanzas Profesionales en un Conservatorio de Música público y reglado. Se utilizaron como instrumentos de medida el Test de Inteligencia Creativa (CREA; Corbalán et al. 2003) y el Test de Atención (d2; Brickenkamp, 2004). Se hallaron correlaciones positivas y estadísticamente significativas entre (a) atención y creatividad y (b) atención y resultados académicos musicales. En cambio, se hallaron correlaciones negativas y estadísticamente significativas entre creatividad y rendimiento académico musical. Tras los resultados se pueden establecer programas preventivos o potenciadores de la creatividad y la atención, con el fin de fomentar que la totalidad del alumnado de conservatorio alcance su máximo potencial y un alto rendimiento, ya que éstos son el reflejo de un aprendizaje más eficaz.