ADP-Ribose-1"-Monophosphatase: a Conserved Coronavirus Enzyme That Is Dispensable for Viral Replication in Tissue Culture

Replication of the ~30-kb plus-strand RNA genome of coronaviruses and synthesis of an extensive set of subgenome-length RNAs are mediated by the replicase-transcriptase, a membrane-bound protein complex containing several cellular proteins and up to 16 viral nonstructural proteins (nsps) with multiple enzymatic activities, including protease, polymerase, helicase, methyltransferase, and RNase activities. To get further insight into the replicase gene-encoded functions, we characterized the coronavirus X domain, which is part of nsp3 and has been predicted to be an ADP-ribose-1"-monophosphate (Appr-1"-p) processing enzyme. Bacterially expressed forms of human coronavirus 229E (HCoV-229E) and severe acute respiratory syndrome-coronavirus X domains were shown to dephosphorylate Appr-1"-p, a side product of cellular tRNA splicing, to ADP-ribose in a highly specific manner. The enzyme had no detectable activity on several other nucleoside phosphates. Guided by the crystal structure of AF1521, an X domain homolog from Archaeoglobus fulgidus, potential active-site residues of the HCoV-229E X domain were targeted by site-directed mutagenesis. The data suggest that the HCoV-229E replicase polyprotein residues, Asn 1302, Asn 1305, His 1310, Gly 1312, and Gly 1313, are part of the enzyme's active site. Characterization of an Appr-1"-pase-deficient HCoV-229E mutant revealed no significant effects on viral RNA synthesis and virus titer, and no reversion to the wild-type sequence was observed when the mutant virus was passaged in cell culture. The apparent dispensability of the conserved X domain activity in vitro indicates that coronavirus replicase polyproteins have evolved to include nonessential functions. The biological significance of the novel enzymatic activity in vivo remains to be investigated.

La cultura homérica en la Escenografía del Seiscientos: "Il Greco in Troia" y "La caduta del regno dell´Amazzoni"

Sería imposible hacer una enumeración de festejos, espectáculos y representaciones teatrales, que a lo largo de la época moderna, tuvieron como argumento las historias narradas por la literatura homérica. Incontables, pero todas ellas buscaban el don de la elocuencia que tenían desde que en la Antigüedad empezaron a reeditarse. Apenas un iglo después de la recopilación de relatos orales que quedaron hilvanados bajo los títulos de la Iliada y la Odisea –si se acepta la autoría de ese personaje mítico que fue Homero en torno al siglo VIII antes de Cristo–, tiranos y oligarcas atisbaron de forma visionaria las posibilidades que aportaban las tramas en las que se vieron envueltos dioses y héroes. La mitología olímpica no sólo sirvió al propósito de la unificación panhelénica de la nación de naciones que era Grecia, en torno a un mundo de creencias común en el marco de los grandes santuario, sino que además, las vicisitudes de los principales personajes, como Paris, Aquiles, Héctor, Ulises, Pentesilea, Eneas, Agamenón, Andrómaca, Casandra y Helena, proporcionaron un repertorio de modelos de conducta y un protocolo ceremonial en sociedad extremadamente útil. Piedad, fidelidad, excelencia, belleza, sumisión, virtudes morales que habían de “adornar” por igual a gobernantes y a ciudadanos, garantizaban un nuevo orden en la Hélade, constituyendo asimismo las notas distintivas con respecto a los anquilosados y monolíticos Imperios hegemónicos en la zona de Oriente Próximo, Egipcio y Babilónico o Persa, respectivamente. Se propone el análisis de la incidencia iconológica de tales asuntos a partir de la revisión escenográfica de dos libretos para dos representaciones teatrales italianas de finales del Seicento, de los que se encuentran sendos ejemplares en la Biblioteca Nacional de Madrid: Il Greco in Troia y La caduta del regno dell´amazzone.