Rescue of embryonic lethality in mdmx null mice by loss of p53 suggests a non-overlapping pathway with MDM2 to regulate p53

The tumor suppressor p53 is mutated in over 50% of human sporadic tumors originating from diverse tissues. p53 responds to DNA damage and cell stress by activating the transcription of a variety of target genes, the protein products of which then initiate either growth arrest or apoptosis. ^ A p53 target with a particularly intriguing function is the oncogene MDM2. MDM2 functions, in part, by binding to and inhibiting p53's activity. Overexpression of MDM2, by gene amplification, has been found in 30% of human sarcomas harboring a wild type p53, indicating that an increase in MDM2 levels is sufficient for p53 inactivation. Mice carrying a homozygous null allele for mdm2 exhibit an early embryonic lethality that is completely rescued in a p53-null background. These data indicate that MDM2's only critical function in early mouse embryogenesis is the negative regulation of p53. ^ The mdmx gene is the first additional member of the mdm2 gene family to be isolated. MDMX, like MDM2, contains a RING-finger domain, ATP binding domain and a p53 binding domain, which retains the ability to bind and inhibit p53 transactivation in vitro. However, mdmx does not appear to be transcriptionally regulated by p53. We have cloned and characterized the murine mdmx genomic locus from a mouse 129 genomic library. The mdmx gene contains 11 exons, spans approximately 37 Kb of DNA, and is located on mouse chromosome 1. The genomic organization of the mdmx gene is identical to that of mdm2 except at the 5′ end of the gene near the p53 responsive element. Northern expression analysis of mdmx transcripts during mouse embryogenesis and in adult tissues revealed constitutive and ubiquitous expression throughout adult tissues and embryonic development. To determine the in vivo function of MDMX, mice carrying a null allele of mdmx have been generated. Mdmx homozygous null mice are early embryonic lethal. Mdmx null mice do not develop beyond 9.5 dpc and can be discerned by gross dissection as early as 7.5 dpc. Utilizing TUNEL and BrdU assays on 7.5 dpc histological sections we have determined that the mutant embryos are dying due to increased levels of growth arrest, but not apoptosis. Surprisingly, Mdmx homozygous null mice are viable in a p53 null background, indicating that MDMX is also very important in the negative regulation of p53. ^

The role of Ski/Sno oncoproteins as negative regulators of the TGF-beta/SMAD signaling pathway in B -cell non -Hodgkin's lymphoma (NHL-B)

Non-Hodgkin's lymphomas are common tumors of the human immune system, primarily of B cell lineage (NHL-B). Negative growth regulation in the B cell lineage is mediated primarily through the TGF-β/SMAD signaling pathway that regulates a variety of tumor suppressor genes. Ski was originally identified as a transforming oncoprotein, whereas SnoN is an isoform of the Sno protein that shares a large region of homology with Ski. In this study, we show that Ski/SnoN are endogenously over-expressed both in patients' lymphoma cells and NHL-B cell lines. Exogenous TGF-β1 treatment induces down-regulation of Ski and SnoN oncoprotein expression in an NHL-B cell line, implying that Ski and SnoN modulate the TGF-β signaling pathway and are involved in cell growth regulation. Furthermore, we have developed an NHL-B cell line (DB) that has a null mutation in TGF-β receptor type II. In this mutant cell line, Ski/SnoN proteins are not down-regulated in response to TGF-β1 treatment, suggesting that downregulation of Ski and SnoN proteins in NHL-B require an intact functional TGF-β signaling pathway Resting normal B cells do not express Ski until activated by antigens and exogenous cytokines, whereas a low level of SnoN is also present in peripheral blood Go B cells. In contrast, autonomously growing NHL-B cells over-express Ski and SnoN, implying that Ski and SnoN are important cell cycle regulators. To further investigate a possible link between reduction of the Ski protein level and growth inhibition, Ski antisense oligodeoxynucleotides were transfected into NHL-B cells. The Ski protein level was found to decrease to less than 40%, resulting in restoring the effect of TGF-β and leading to cell growth inhibition and G1 cell cycle arrest. Co-immunoprecipitation experiments demonstrated that Ski associates with Smad4 in the nucleus, strongly suggesting that over-expression of the nuclear protein Ski and/or SnoN negatively regulates the TGF-β pathway, possibly by modulating Smad-mediated tumor suppressor gene expression. Together, in NHL-B, the TGF-β/SMAD growth inhibitory pathway is usually intact, but over-expression of the Ski and/or SnoN, which binds to Smad4, abrogates the negative regulatory effects of TGF-β/SMAD in lymphoma cell growth and potentiates the growth potential of neoplastic B cells. ^

Roles of p38 mitogen-activated protein kinase pathway in the regulation of SOX9 activity and chondrogenesis

Sox9 is a master transcription factor in chondrocyte differentiation. Several lines of evidence suggest that the p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway is involved in chondrocyte differentiation. In the present study, we examined the roles of p38 in the regulation of SOX9 activity and chondrogenesis. ^ COS7 cells were transfected with a SOX9 expression vector and 4x48-p89, a luciferase construction harboring four tandem copies of a SOX9-dependent 48-bp enhancer in Col2a1. Coexpression of MKK6EE, a constitutively active mutant of MKK6, a MAPKK that specifically activates p38, further increased the activity of the SOX9-dependent 48-bp enhancer about 5-fold, and SOX9 protein levels were not increased under these conditions. This increase in enhancer activity was not observed in a mutant enhancer construct harboring mutations that abolish SOX9 binding. These data strongly suggested that activation of the p38 pathway results in increased activity of SOX9. In addition, the increase of the activity of the SOX9-dependent 48-bp enhancer by MKK6EE was also observed in primary chondrocytes, and this increase was abolished by coexpression of a p38 phosphatase, MKP5, and p38 specific inhibitors. Furthermore, treatment of primary chondrocytes with p38 inhibitors decreased the expression of Col2a1, a downstream target of Sox9, without affecting Sox9 RNA levels, further supporting the hypothesis that p38 plays a role in regulating Sox9 activity in chondrocytes. ^ To further study the role of the p38 MAPK pathway in chondrogenesis, we generated transgenic mice that express MKK6EE in chondrocytes under the control of the Col2a1 promoter/intron regulatory sequences. These mice showed a dwarf phenotype characterized by reduced chondrocyte proliferation and a delay in the formation of primary and secondary ossification centers. Histological analysis using in situ hybridization showed reduced expression of Indian hedgehog, PTH/PTHrP receptor, cyclin D1 and increased expression of p21. In addition, consistent with the notion that Sox9 activity was increased in these mice, transgenic mice that express MKK6EE in chondrocytes showed phenotypes similar to those of mice that overexpress SOX9 in chondrocytes. Therefore, our study provides in vivo evidence for the role of p38 in chondrocyte differentiation and suggests that Sox9 is a downstream target of the p38 MAPK pathway. ^

Rodó y su Ariel. El Ariel de Rodó

El artículo presenta al autor de Ariel, Rodó, como integrante de la promoción literaria uruguaya, como uno de los exponentes del modernismo y como pensador que pertenece a la generación de los Fundadores. Parte de la problemática Ariel- Calibán como símbolo latinoamericano y de la postulación de Ariel como discurso antiimperialista para situar la pregunta respecto de la función de la educación en la constitución del joven latinoamericano como sujeto social portador de sentido del proyecto nacional. Se tratan luego las figuras que se desprenden de los Prósperos, los Calibanes y los Arieles concebidos como la pluralidad de perspectivas desde las que transcurren las vidas de los sujetos y de los espacios desde los cuales las naciones se paran para mirarse unas a otras.

La lección de Próspero : Rodó, la enseñanza de la literatura y los apuntes inéditos

Fil: Rocca, Pablo.

La perspectiva americana de José Enrique Rodó desde el Capitolio de Roma

Fil: Aínsa, Fernando.

Alonso, Diego. José Enrique Rodó: una retórica de la democracia. Montevideo: Trilce, 2009, 197 p.

Fil: Olalla, Marcos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

Los principios hispanoamericanos : La crítica de José Enrique Rodó y la literatura peninsular

Fil: Bonfiglio, Florencia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educación; Argentina.

La Tempestad del Modernismo (Darío y Rodó) : un (pre)texto para la religación latinoamericana a partir de la derrota de España

La derrota del '98 (o "El triunfo de Calibán" según la crónica dariana) implicó para losmodernistas una revisión de los lazos con España que, luego de un largo período de rechazoiniciado con las independencias políticas de los países latinoamericanos, posibilitó no sólo unnuevo acercamiento a la cultura y la literatura españolas desde una posición culturalmente "independizada", sino un anclaje histórico y político para el imaginario latinoamericanista yreligador desplegado en su escritura. En este contexto (aunque habría que retrotraerse a laimagen de España elaborada por los latinoamericanos como resultado de los festejos del cuarto centenario de la Conquista en 1892), la lectura antiimperialista y "arielista" de LaTempestad de Shakespeare se transforma en un poderoso fenómeno de religación cultural para los latinoamericanos, tensionados entre la difícil búsqueda de autonomía estética y la intervención pública, pero conscientes de la necesidad de unión (simbólica y efectiva) para laformación de una literatura con caracteres propios en el mercado internacionalizado de lasletras.

Rodó y Ugarte : Programas para el rescate de la América latina

En el marco de la tradición del discurso antinorteamericano rioplatense de fines del siglo XIX y comienzos del XX, y de la gravitación del discurso en torno a la latinidad, propongo examinar las zonas de contacto de algunas de las ideas desarrolladas por José E. Rodó en Ariel y por Manuel Ugarte, sobre todo en El porvenir de la América latina (1911). En primer lugar, puede decirse que ambos escritores buscan intervenir en el rumbo contemporáneo de las repúblicas sudamericanas construyendo programas de acción, algo que resulta más visible en Ugarte y que sin embargo también está también presente en Rodó. En segundo lugar, intentaremos contrastar sus caracterizaciones de los Estados Unidos, cuyas diferencias derivan, precisamente, de sus respectivos programas de acción. Finalmente, me detendré en su formulación del tópico del destino americano como tierra de promesas y continuadora de la herencia latina

Religaciones hispano-americanas en torno del 98 : Los usos de La Tempestad en el Modernismo (Darío y Rodó)

Con el 'Desastre' del 98, la reacción antiimperialista del Modernismo implicó una revisión de sus afiliaciones culturales. Como se sabe, han sido frecuentes las críticas al hispanismo y al latinismo desplegados en la escritura modernista en tanto síntomas de un persistente 'colonialismo'. Este trabajo analiza las relaciones establecidas entre los escritores latinoamericanos y españoles a partir de la Derrota del 98 -las cuales eran promovidas a su vez por el Hispanismo peninsular desde los festejos del IV Centenario en 1892- y el modo en que los Modernistas piensan los lazos con España ante una situación que confirmaba la hegemonía sajona y la 'decadencia latina'. En este contexto la lectura 'antiimperialista' de La Tempestad de Shakespeare ('El triunfo de Calibán' de Darío, el Ariel de Rodó) se transforma en un poderoso fenómeno de religación en torno del cual se debaten las relaciones con la ex-Madre Patria. Para los modernistas, según nuestra lectura, la unión con la intelectualidad hispana implicaba el fortalecimiento de un sistema literario común en el mercado internacionalizado de la letras. En tal sistema, resultaba evidente hacia el fin de siglo el liderazgo de Darío y la posibilidad de que los latinoamericanos compititieran con los españoles en pie de igualdad

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Los principios hispanoamericanos : La crítica de José Enrique Rodó y la literatura peninsular

Fil: Bonfiglio, Florencia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educación; Argentina.