Desenvolvimento e validação de método analítico para determinação de teor de ácido gálico e catequina no fitoterápico sanativo® por cromatografia líquida de alta eficiência

The herbal medicine Sanativo® is produced by the Pernambucano Laboratory since 1888 with indications of healing and hemostasis. It is composed of a fluid extract about Piptadenia colubrina, Schinus terebinthifolius, Cereus peruvianus and Physalis angulata. Among the plants in their composition, S. terebinthifolius and P. colubrina have in common phenolic compounds which are assigned most of its pharmacological effects. The tannins, gallic acid and catechin were selected as markers for quality control. The aim of this study was the development and validation of analytical method by HPLC/UV/DAD for the separation and simultaneous quantification of gallic acid (GAC) and catechin (CTQ) in Sanativo®. The chromatographic system was to stationary phase, C-18 RP column, 4,6 x 150 mm (5 mm) under a temperature of 35 ° C, detection at 270 and 210 nm. The mobile phase consisted of 0.05% trifluoroacetic acid and methanol in the proportions 88:12 (v/v), a flow rate of 1 ml/min. The analytical method presented a retention factor of 0.30 and 1.36, tail factor of 1.8 and 1.63 for gallic acid and catechin, respectively, resolution of 18.2, and theoretical plates above 2000. The method validation parameters met the requirements of Resolution n º 899 of May 29, 2003, ANVISA. The correlation coefficient of linear regression analysis for GAC and CTQ from the standard solution was 0.9958 and 0.9973 and when performed from the Sanativo® 0.9973 and 0.9936, the matrix does not interfere in the range 70 to 110 %. The limits of detection and quantification for GAC and CQT were 3.25 and 0.863, and 9.57 and 2.55 mg/mL, respectively. The markers, GAC and CQT, showed repetibility (coefficient of variation of 0.94 % and 2.36 %) and satisfactory recovery (100.02 ± 1.11 % and 101.32 ± 1.36 %). The method has been characterized selective and robust quantification of GAC and CTQ in the Sanativo® and was considered validated

Preferential infection sites of Cysticercus bovis in cattle experimentally infected with Taenia saginata eggs

The preferential sites of infection of Cysticercus bovis were evaluated in the skeletal muscle and entrails of 25 cattle that were experimentally infected with Taenia saginata (2 x 10(4) eggs). Two other animals were not inoculated (control). Ninety days after inoculation, all the cattle were euthanized. The carcasses were deboned and dissected into 26 anatomical sections (masseter muscles, brain, tongue, esophagus, heart, diaphragm, lungs, liver, kidneys, spleen, top sirloin butt, bottom sirloin butt, outside round, top (inside) round, transversus abdominus, top sirloin cap, strip loin, full tenderloin, eye of round, knuckle, shoulder clod, foreshank, shank, chuck, back ribs, and tail muscles). The dissected tissues were sliced into 5 mm sections. From the 25 cattle, 9258 C. bovis (cysticerci) were recovered; 75.02% (6946) of these were recovered from skeletal muscles and 24.98% (2312) from the entrails. A high parasitism level was found in the shoulder clod (12.55%), heart (11.02%), liver (9.48%), masseter muscles (8.51%), chuck (8.25%), strip loin and full tenderloin (7.26%), knuckle (6.63%), and back ribs (5.53%), totaling 69.23% (5738) of all of the detected cysticerci. on the other hand, there was a low C. bovis parasitism level in the brain, spleen, tail muscles, kidneys, esophagus, and diaphragm, representing just 3.9% of the total number of cysticerci. Given these results, we conclude that specific skeletal musculature regions, such as the shoulder blade, chuck, strip loin and full tenderloin, knuckle, back ribs and top round, which are not officially examined in many countries, are effective sites to efficiently screen C. bovis infection. To date, these regions have not been considered as preferential sites of C. bovis infection. Based on our work, however, these regions deserve greater attention from health inspectors because they contained a greater number of Cysticercus than the other regions of carcasses that are parasitized by T. saginata larvae. (c) 2010 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Estudo morfométrico comparativo de 58 populações brasileiras de Rotylenchulus reniformis (Nemata: Rotylenchulinae)

Foram recuperadas 58 populações de Rotylenchulus reniformis de amostras de solo e raízes de diferentes culturas e inoculadas em plantas de algodoeiro (Gossypium hirsutum) cv. COODETEC 402 e de mamona (Ricinus communis), mantidas em vasos de argila em casa de vegetação do Departamento de Fitossanidade da UNESP/FCAV, Campus de Jaboticabal - São Paulo. Foi realizado estudo morfométrico comparativo das populações ao microscópio óptico composto, seguido da ordenação das populações segundo análises multivariadas de agrupamento e de componentes principais. Foram avaliadas 11 variáveis morfométricas em dez fêmeas jovens de cada população e sete variáveis derivadas. A amplitude de variação de caracteres morfométricos em populações brasileiras desse nematóide tais como, comprimento do estilete, V e forma da cauda, é maior que em populações da mesma espécie de outras regiões do mundo. Os dados obtidos confirmam que o comprimento do estilete, presença de machos e V são suficientes para identificação de R. reniformis e que esta é a espécie do grupo predominante nos agroecossistemas brasileiros.

Protein requirements for Blue-fronted Amazon (Amazona aestiva) growth

The objective of this study was to evaluate the protein requirements for hand-rearing Blue-fronted Amazon parrots (Amazona aestiva). Forty hatchlings were fed semi-purified diets containing one of four (as-fed basis) protein levels: 13%, 18%, 23% and 28%. The experiment was carried out in a randomized block design with the initial weight of the nestling as the blocking factor and 10 parrots per protein level. Regression analysis was used to determine relationships between protein level and biometric measurements. The data indicated that 13% crude protein supported nestling growth with 18% being the minimum tested level required for maximum development. The optimal protein concentration for maximum weight gain was 24.4% (p = 0.08; r(2) = 0.25), tail length 23.7% (p = 0.09; r(2) = 0.19), wing length 23.0% (p = 0.07; r(2) = 0.17), tarsus length 21.3% (p = 0.06; r(2) = 0.10) and tarsus width 21.4% (p = 0.07; r(2) = 0.09). Tarsus measurements were larger in males (p < 0.05), indicating that sex must be considered when studying developing psittacines. These results were obtained using a highly digestible protein and a diet with moderate metabolizable energy levels.

Real time B-mode ultrasound in pacas pregnancy (Agouti paca, Linnaeus, 1766)

O objetivo deste estudo foi estabelecer o tempo de prenhez da paca por meio de ultra-sonografia. Nove pacas prenhes foram periodicamente acompanhadas com um transdutor eletrônico setorial bi-frequencial de 5,0 e 7,5 MHz, em modo B, desde a detecção ultra-sonográfica da vesícula embrionária ou do feto até o nascimento dos filhotes. Os animais foram colocados em uma gaiola de ferro de prensagem lateral e permaneceram em posição quadrupedal durante as sessões. Um pano escuro foi usado para cobrir a gaiola e frutas foram oferecidas durante o exame ultra-sonográfico para evitar reações agressivas. Quanto mais precocemente ocorreu a detecção de prenhez, maior foi o período de acompanhamento ultra-sonográfico até o nascimento dos filhotes. Apenas um filhote nasceu por parto, com 796,5 ± 74,36 gramas (valor médio ± desvio padrão da amostra) e 33,46 ± 0,60 centímetros (valor médio ± desvio padrão da amostra) de comprimento (entre a borda rostral do focinho e a extremidade distal da cauda). O período de prenhez da paca abrange 135 a 139 dias.

Steinernema brazilense n. sp (Rhabditida: Steinernematidae), a new entomopathogenic nematode from Mato Grosso, Brazil

A new entomopathogenic nematode, Steinernema brazilense n. sp., was isolated from a single soil sample collected from a natural forest in Mato Grosso do Sul state, Brazil. S. brazilense n. sp. is characterized morphologically by features of infective juveniles (IJ), males and females. For the IJ, body length averaging 1157 (1023-1284) mu m, distance from anterior end to excretory pore 95 (87-102) mu m, from anterior end to end of esophagus 148 (139-153) mu m, tail length 85 (80-104) mu m, D% and E% values 63 (58-70) and 106 (95-118.0), respectively. Lateral field pattern variable; the formula for the arrangement of ridges from head to tail is: 2, 4, 6, 8, 6, 2. For the male, the diagnostic characters include spicule averaging 83 (75-89) mu m; D% about 65; the ratio SW% about 192. The length of spicule head is greater than width. Lateral field with one narrow ridge. First generation females are characterized by the presence of a ventral postanal swelling. S. brazilense n. sp. is morphologically close to Steinernema diaprepesi. It can be differentiated from S. diaprepesi by its longer IJ body length (1157 vs 1002 mu m), longer distance from anterior end to excretory pore (1110 vs 75 mu m), a longer tail length (103 vs 83 mu m); males of the new species with longer spicule (83 vs 79 mu m). The new species can be distinguished further from other members of Steinernema glaseri group by characteristics of rDNA of ITS and D2D3 regions. Published by Elsevier B.V.

Estudo morfométrico comparativo de populações de Rotylenchulus reniformis (Nemata: Rotylenchulinae) do Brasil

Quarenta e oito populações de Rotylenchulus reniformis foram recuperadas de amostras de solo e raízes de diferentes culturas e inoculadas em diferentes plantas hospedeiras, mantidas em microparcelas no Departamento de Fitossanidade da UNESP/FCAV, Campus de Jaboticabal, São Paulo. Os sintomas da doença causada pelo nematóide em algodoeiro (Gossypium hirsutum), no campo, foram documentados, bem como o hábito de parasitismo do nematóide em raízes de algodão e de mamoeiro (Carica papaya), utilizando-se de coloração in situ do nematóide com fuccina ácida. Efetuou-se a comparação morfológica de todas as populações, ao microscópio óptico composto, em montagens temporárias e, de algumas, ao microscópio eletrônico de varredura. Para as observações ao microscópio eletrônico de varredura, fêmeas adultas presas às raízes foram fixadas em glutaraldeído e pós-fixadas em tetróxido de ósmio, desidratadas em álcool etílico, secas em secador de ponto crítico, montadas, recobertas com 35 nm de ouro, observadas e elétromicrografadas em 15 kV. Os dados obtidos confirmam que R. reniformis é a única espécie do gênero distribuída nos agroecossistemas brasileiros e que a amplitude de variação de caracteres morfométricos em populações brasileiras desse nematóide, tais como comprimento do estilete, V % e forma da cauda, é maior que em populações da mesma espécie de outras regiões do mundo. Foram ilustradas fêmeas jovens de R. reniformis com a cauda bifurcada, e esse detalhe da morfologia do nematóide ainda não havia sido relatado.

Uso do diluente água de coco em pó (ACP-103®) na conservação prolongada do sêmen do varrão: avaliação in vitro e in vivo

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Morphologic and morphometric analysis of testis of Pseudis limellum (Cope, 1862) (Anura, Hylidae) during the reproductive cycle in the Pantanal, Brazil

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Canibalismo em larvas de matrinxã, Brycon cephalus, após imersão dos ovos à diferentes concentrações de triiodotironina (T3)

The present work evaluated larvae cannibalism of matrinxa, Brycon cephalus, originated from eggs exposed to triiodothyronine, in the period of 36 to 72 hours after hatching. Observed parameters were: weight and length of larvae, stomach content, presence of cannibalism and type of attacks. This study was carried out at Centro de Pesquisa e Gestao de Recursos Pesqueiros Continentais (CEPTA/IBAMA), Pirassununga-SP, in November 2004. Three females were hormonally induced to spawn and pooled oocytes were fertilized and separated into four batches that constituted the treatments: L-1 (control - water); L-2 (0.01 ppm T-3); L-3 (0.05 ppm T-3) and L-4 (0.1 ppm T-3). Eggs were exposed during 15 minutes to water or to solutions containing the different concentrations of T3. Eggs were distributed in 12 conic incubators (60 L), with three replicates per treatment. There was stocked 500 mL of eggs per incubator and hatched larvae were counted. Samples of 30 larvae per treatment were colleted during occurrence of cannibalism (36, 48, 60 and 72 hours post hatching). Predator larvae (with rests of larvae in the stomach) were 50% of the total number of larvae and they presented weight 50% higher compared to that of non predator larvae (without rests of larvae in the stomach) and 9% higher regarding length. Coefficient of variation of weight and length did not differ among treatments, showing similarity in relation to the size. The stomach content revealed that cannibalism occurred in around 50-60 % of larvae, regardless the exposure to the triiodothyronine, and attacks were characterized as head-tail and tail-head attacks.

Comparative study of the sedative and antinociceptive effects of levomepromazine, azaperone and midazolam in laboratory animals

Os efeitos sedativos e antinociceptivos da levomepromazina, azaperone e midazolam foram avaliados utilizando-se três testes de comportamento em ratos e camundongos. No teste da atividade locomotora espontânea em campo aberto observou-se que tanto o comportamento exploratório como a atividade locomotora espontânea foram significativamente diminuídos quando se utilizou levomepromazina e azaperone. O efeito causado pelo azaperone foi menos prolongado quando comparado ao da levomepromazina. O midazolam causou diminuição do comportamento exploratório sem alterar a atividade locomotora espontânea. Quando se avaliou o efeito antinociceptivo por meio da latência para o reflexo da retirada da cauda em ratos após estímulo doloroso, as drogas não apresentaram nenhum efeito antinociceptivo observável. No teste das contorções em camundongos, os fármacos foram capazes de abolir as contorções quando comparados ao efeito do grupo-controle. Levomepromazina, azaperone e midazolam nas doses utilizadas foram capazes de inibir o comportamento exploratório de ratos, comprovando seus efeitos sedativos. Com relação aos efeitos antinociceptivos para dor visceral, eles foram capazes de inibir as contorções.

Variabilidade sazonal no ducto epididimário de codorna doméstica: observações morfológicas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação morfométrica da área do epidídimo e dos dúctulos eferentes e ductos epididimários da codorna doméstica, no decorrer do ano

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Early development of Astronotus ocellatus under stereomicroscopy and scanning electron microscopy

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Histopathological analysis of the reproductive system of male dogs experimentally infected with Toxoplasma gondii

O presente trabalho teve como objetivo descrever eventuais alterações histopatológicas no sistema reprodutor (testículo e epidídimo) de cães machos experimentalmente infectados com Toxoplasma gondii. Para tal, 10 animais sorologicamente negativos para T. gondii foram selecionados e distribuídos em três grupos experimentais: GI - três cães inoculados com 2,0 x 10(5) oocistos da cepa P, GII - três cães infectados com 1,0 x 10(6) taquizoítos da cepa RH e GIII - quatro cães mantidos como controle. Pesquisa de anticorpos (IFI) contra T. gondii foi realizada. A infecção por T. gondii confirmou-se pela soroconversão de todos os machos infectados a partir do 7° e do 14° dia pós-inoculação (DPI) para cães que receberam taquizoítos e oocistos respectivamente. Decorridos 70DPI, realizou-se, em todos os cães, orquiectomia, e amostras (testículo e epidídimo) foram coletadas e processadas histologicamente para leitura em microscópio óptico. As seguintes alterações foram diagnosticadas: infiltrado inflamatório mononuclear leve e moderado em epidídimo, edema celular moderado, degeneração hidrópica e fibrose intersticial moderada em túbulos seminíferos. Os resultados histopatológicos do presente trabalho, aliados ao isolamento do T. gondii em fragmentos de testículo e epidídimo pela imunoistoquímica, juntamente com os resultados encontrados na literatura por outros autores em diferentes tecidos, permitem inferir que as alterações encontradas nos cães infectados com o respectivo protozoário são sugestivas de infecção toxoplásmica.