Purification, cloning, and functional expression of sucrose:fructan 6-fructosyltransferase, a key enzyme of fructan synthesis in barley.

Fructans play an important role in assimilate partitioning and possibly in stress tolerance in many plant families. Sucrose:fructan 6-fructosyltransferase (6-SFT), an enzyme catalyzing the formation and extension of beta-2,6-linked fructans typical of grasses, was purified from barley (Hordeum vulgare L.). It occurred in two closely similar isoforms with indistinguishable catalytic properties, both consisting of two subunits with apparent masses of 49 and 23 kDa. Oligonucleotides, designed according to the sequences of tryptic peptides from the large subunit, were used to amplify corresponding sequences from barley cDNA. The main fragment generated was cloned and used to screen a barley cDNA expression library. The longest cDNA obtained was transiently expressed in Nicotiana plumbaginifolia protoplasts and shown to encode a functional 6-SFT. The deduced amino acid sequence of the cDNA comprises both subunits of 6-SFT. It has high similarity to plant invertases and other beta-fructosyl hydrolases but only little to bacterial fructosyltransferases catalyzing the same type of reaction as 6-SFT.

The hypocone as a key innovation in mammalian evolution.

The hypocone, a cusp added to the primitively triangular upper molar teeth of therian mammals, has evolved convergently > 20 times among mammals during the Cenozoic. Acquisition of the hypocone itself involves little phenotypic change, but subsequent diversification of groups possessing the hypocone may be greatly enhanced. Our analysis of the Cenozoic mammalian radiations, including the Recent fauna, shows that high species diversity of mammals with hypocones and association of the hypocone with herbivory strongly support recognition of the hypocone as a key innovation that has allowed invasion of, and diversification within, herbivorous adaptive zones. In contrast, mammals lacking hypocones show no marked increase in species diversity during the Cenozoic.

The algT (algU) gene of Pseudomonas aeruginosa, a key regulator involved in alginate biosynthesis, encodes an alternative sigma factor (sigma E).

Chronic infection by alginate-producing (mucoid) Pseudomonas aeruginosa is the leading cause of mortality among cystic fibrosis (CF) patients. During the course of sustained infection, the production of an alginate capsule protects the bacteria and allows them to persist in the CF lung. One of the key regulators of alginate synthesis is the algT (algU) gene encoding a putative alternative sigma factor (sigma E). AlgT was hyperproduced and purified from Escherichia coli. The N-terminal sequence of the purified protein matched perfectly with that predicted from the DNA sequence. The purified protein, in the presence of E. coli RNA polymerase core enzyme, was able to initiate transcription of an algT promoter. Deletion of the -35 region of this promoter abolished this activity in vitro as well as in vivo. These data indicate that the algT gene encodes a sigma factor that is autoregulatory.

Oxygen as a key developmental regulator of Rhizobium meliloti N2-fixation gene expression within the alfalfa root nodule.

The symbiotic pattern of expression of Rhizobium meliloti N2-fixation genes is tightly coupled with the histological organization of the alfalfa root nodule and thus is under developmental control. N2-fixation gene expression is induced very sharply at a particular zone of the nodule called interzone II-III that precedes the zone where N2 fixation takes place. We show here that this coupling can be disrupted, hereby resulting in ectopic expression of N2-fixation genes in the prefixing zone II of the nodule. Uncoupling was obtained either by using a R. meliloti strain in which a mutation rendered N2-fixation gene expression constitutive with respect to oxygen in free-living bacterial cultures or by placing nodules induced by a wild-type R. meliloti strain in a microoxic environment. These results implicate oxygen as a key determinant of the symbiotic pattern of N2-fixation gene expression.

Criação de valor para o cliente: um estudo exploratório sobre programas de Key Account Management (KAM)

Nas últimas décadas, a maturidade de alguns mercados, a globalização e o crescente poder de barganha dos clientes aumentam ainda mais a necessidade das empresas em manterem e desenvolverem de forma eficaz seus clientes mais importantes. Neste contexto, ganham relevância os programas de Key Account Management (KAM), iniciativas corporativas que tratam de forma especial os clientes mais importantes do fornecedor. Para obter o desempenho financeiro superior, o programa de KAM precisa criar valor para o cliente para posterior apropriação de valor pelo fornecedor. Contudo, a maioria dos estudos enfatiza a apropriação de valor pelo fornecedor, porém poucas pesquisas investigam a criação de valor para o cliente em programas de KAM. Além disso, a maioria das pesquisas em marketing de relacionamento ainda foca muito nos impactos positivos do relacionamento. Dessa forma, é importante analisar empiricamente como é a implementação da criação de valor para o cliente em programas de KAM, identificando as principais dimensões e os fatores críticos. O objetivo do presente estudo é analisar o processo de criação de valor para o cliente em programas de Key Account Management (KAM) e propor um modelo de criação de valor para o cliente segundo a perspectiva da empresa fornecedora. As análises e o modelo são elaborados a partir de um processo de investigação abdutiva, ou seja, a combinação entre a fundamentação teórica sobre o conceito de valor e programas de KAM e a análise de conteúdo de 22 entrevistas em profundidade com especialistas em programas de KAM, profissionais de marketing/vendas que trabalham por pelo menos cinco anos com programas de KAM em grandes empresas no Brasil. O modelo proposto explica de forma integrada e sistemática como é a criação de valor para o cliente em programas de KAM segundo cinco dimensões (Desenvolvimento de relacionamentos; Entendimento dos direcionadores de valor; Desenvolvimento da proposta de valor; Comunicação da proposta de valor; e mensuração de valor), quatro moderadores (Orientação relacional do cliente; Formalização do programa de KAM para o cliente; Abordagem do fornecedor: \"orientada ao cliente\" vs. \"orientar o cliente\"; e Fit estratégico entre o fornecedor e o cliente) e três riscos (Não entrega do valor básico para o cliente; Rotatividade do Key Account Manager; e Sentimento de injustiça do cliente). Contribui-se com a teoria sobre o tema, ao incluir uma dimensão específica no modelo para desenvolvimento de relacionamentos do nível da díade (organização-organização) e indivíduo (funcionário-funcionário), e ao abordar não somente aspectos positivos do relacionamento, mas também os aspectos negativos (ou riscos da criação de valor para o cliente). Contribui-se também para a prática, ao prover uma visão mais ampla, sistemática e integradora dos diversos elementos da criação de valor para o cliente aos executivos das empresas que possuem programas de KAM, e ao recomendar práticas organizacionais que servem como guias para a tomada de decisão dos gestores de programas de KAM. Ademais, como a parte empírica do estudo é baseada no contexto brasileiro, amplia-se o conhecimento sobre KAM no Brasil. Por fim, apresentam-se as limitações do estudo com a agenda de pesquisas futuras