Differential inhibition of HIV-1 preintegration complexes and purified integrase protein by small molecules.

To replicate, HIV-1 must integrate a cDNA copy of the viral RNA genome into a chromosome of the host. The integration system is a promising target for antiretroviral agents, but to date no clinically useful integration inhibitors have been identified. Previous screens for integrase inhibitors have assayed inhibition of reactions containing HIV-1 integrase purified from an Escherichia coli expression system. Here we compare action of inhibitors in vitro on purified integrase and on subviral preintegration complexes (PICs) isolated from lymphoid cells infected with HIV-1. We find that many inhibitors active against purified integrase are inactive against PICs. Using PIC assays as a primary screen, we have identified three new anthraquinone inhibitors active against PICs and also against purified integrase. We propose that PIC assays are the closest in vitro match to integration in vivo and, as such, are particularly appropriate for identifying promising integration inhibitors.

Similar antigenic surfaces, rather than sequence homology, dictate T-cell epitope molecular mimicry.

Molecular mimicry, normally defined by the level of primary-sequence similarities between self and foreign antigens, has been considered a key element in the pathogenesis of autoimmunity. Here we describe an example of molecular mimicry between two overlapping peptides within a single self-antigen, both of which are recognized by the same human self-reactive T-cell clone. Two intervening peptides did not stimulate the T-cell clone, even though they share nine amino acids with the stimulatory peptides. Molecular modeling of major histocompatibility complex class II-peptide complexes suggests that both of the recognized peptides generate similar antigenic surfaces, although these are composed of different sets of amino acids. The molecular modeling of a peptide shifted one residue from the stimulatory peptide, which was recognized in the context of the same HLA molecule by another T-cell clone, generated a completely different antigenic surface. Functional studies using truncated peptides confirmed that the anchor residues of the two "mimicking" epitopes in the HLA groove differ. Our results show, for two natural epitopes, how molecular mimicry can occur and suggest that studies of potential antigenic surfaces, rather than sequence similarity, are necessary for analyzing suspected peptide mimicry.

Glycosylation of the c-Myc transactivation domain.

O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) is an abundant and dynamic posttranslational modification composed of a single monosaccharide, GlcNAc, glycosidically composed of a single monosaccharide, GlcNAc, glycosidically linked to the side-chain hydroxyl of serine or threonine residues. Although O-GlcNAc occurs on a myriad of nuclear and cytoplasmic proteins, only a few have thus far been identified. These O-GlcNAc-bearing proteins are also modified by phosphorylation and form reversible multimeric complexes. Here we present evidence for O-GlcNAc glycosylation of the oncoprotein c-Myc, a helix-loop-helix/leucine zipper phosphoprotein that heterodimerizes with Max and participates in the regulation of gene transcription in normal and neoplastic cells. O-GlcNAc modification of c-Myc is shown by three different methods: (i) demonstration of lectin binding to in vitro translated protein using a protein-protein interaction mobility-shift assay; (ii) glycosidase or glycosyltransferase treatment of in vitro translated protein analyzed by lectin affinity chromatography; and (iii) direct characterization of the sugar moieties on purified recombinant protein overexpressed in either insect cells or Chinese hamster ovary cells. Analyses of serial deletion mutants of c-Myc further suggest that the O-GlcNAc site(s) are located within or near the N-terminal transcription activation/malignant transformation domain, a region where mutations of c-Myc that are frequently found in Burkitt and AIDS-related lymphomas cluster.

Tendências e contratendências de mercantilização: as reformas dos sistemas de saúde alemão, francês e britânico

Ao longo dos últimos trinta anos, entre meados das décadas de 1980 e 2010, os sistemas de saúde da Alemanha, França e Reino Unido foram reformados, gerando uma crescente mercantilização no financiamento e na prestação de serviços. O trabalho analisa as raízes dessas mudanças, assim como identifica que a mercantilização não ocorreu nem mediante os mesmos mecanismos e nem com a mesma profundidade, havendo importante inércia institucional. As diferenças observadas atestam as especificidades de cada país, em termos de seu contexto econômico, de seus arranjos políticos, das características institucionais de cada sistema e das formas que assumiram os conflitos sociais (extra e intra sistema de saúde). Os sistemas de saúde alemão, francês e britânico, enquanto sistemas públicos de ampla cobertura e integralidade, são frutos do período após a Segunda Guerra Mundial. Um conjunto de fatores contribuiu para aquele momento histórico: os próprios impactos do conflito, que forjaram a ampliação na solidariedade nacional e a maior pressão por parte dos trabalhadores; a ascensão socialista na União Soviética; o maior apoio à ação e ao planejamento estatal; o forte crescimento econômico, fruto da emersão de um regime de acumulação fordista, pautado na expansão da produtividade. A acomodação do conflito capital-trabalho, neste contexto, ocorreu mediante a expansão dos salários reais e ao desenvolvimento do Estado de bem-estar social, ou seja, de políticas públicas voltadas à criação e/ou ampliação de uma rede de proteção social. No entanto, a crise econômica da década de 1970 corroeu a base de financiamento e gerou questionamentos sobre sua eficiência, em meio à transformação do regime de acumulação de fordista para financeirizado, levando à adoção de reformas constantes ao longo das décadas seguintes. Além disso, as transformações específicas do setor saúde complexificaram a situação, tendo em vista o crescente envelhecimento populacional, a demanda por cuidados mais amplos e complexos e, principalmente, os custos derivados da incorporação tecnológica. Este cenário impulsionou a implementação de uma série de alterações nesses sistemas de saúde, com destaque para a incorporação de mecanismos de mercado (como a precificação dos serviços prestados, a indução à concorrência entre prestadores de serviços), o crescimento da responsabilidade dos usuários pelo financiamento do sistema (como o aumento nos co-pagamentos e a redução na cobertura pública) e a ampliação da participação direta do setor privado na prestação dos serviços de saúde (realizando os serviços auxiliares, a gestão de hospitais públicos, comprando instituições estatais). No entanto, de forma simultânea, as reformas ampliaram o acesso e a regulamentação estatal, além da modificação na base de financiamento, principalmente na França. Isto significa que a mercantilização não foi o único direcionamento das reformas, em decorrência de dois fatores principais: a própria crise econômica expulsou parcela da população dos mecanismos pós-guerra de proteção à saúde, demandando reação estatal, e diferentes agentes sociais influenciaram nas mudanças, bloqueando ou ao menos limitando um direcionamento mercantil único.

Complexos de dirutênio com os fármacos ibuprofeno, ácido acetilsalicílico, naproxeno, indometacina, e com ácido y-linolêncio: Síntese, caracterização, avaliação da ação antiproliferativa sobre células tumorais e estudo da interação da unidade dimetálica com adenina e adenosina

Este trabalho tem como principal objetivo contribuir para o desenvolvimento de novos potenciais metalofármacos de rutênio. Nele são descritas a síntese, a caracterização e a avaliação da ação antiproliferativa de alguns complexos de dirutênio (II,III) com os fármacos antiinflamatórios não-esteróides (AINEs): ibuprofeno (ibp), ácido acetilsalicílico (aas), naproxeno (npx) e indometacina (ind) e também com o ácido γ-linolênico (lin), sobre células cancerígenas. Os compostos obtidos foram caracterizados por análise elementar, espectroscopia de absorção eletrônica, medidas de susceptibilidade magnética, espectroscopia vibracional FTIR e Raman, difratometria de raios X de pó, medidas de condutividade molar e análise térmica (TG, OTAe OSC). Todos os complexos sintetizados apresentam estrutura em gaiola, com os carboxilatos derivados dos fármacos AINEs coordenados à unidade dimetálica Ru2( (II,III), em ponte equatorial, estabilizando assim a ligação direta rutênio-rutênio. As posições axiais são ocupadas por íons cloreto, no caso dos complexos [Ru2(O2(CR)4(Cl] (O2(CR = ibp, aas, npx ou ind), ou por moléculas de água, nas espécies do tipo [Ru2(O2(CR)4(H2O)2]PF6(O2CR =npx e ind). Ensaios biológicos demonstraram que os compostos [Ru2(ibp) 4Cl]•½H2O e [Ru2(npx)4(H2O)2]PF6 apresentam ação antiproliferativa sobre células de glioma de rato C6 in vitro, dependendo do tempo de exposição do meio celular ao complexo. O complexo [Ru2 (lin)4Cl] também apresenta efeito sobre a proliferação de células C6; entretanto, nesse caso, efeitos significativos são observaçlos já nas primeiras 24 h de exposição. Estudos mostraram que as bases adenina e adenosina reagem com o complexo [Ru2(OAc)4(H2O)2]PF6 sem que ocorra quebra da estrutura em gaiola. As bases nitrogenadas substituem axialmente as moléculas de água, formando pontes axiais entre duas unidades de dirutênio (II,III) no estado sólido.

Estudo da remediação de um aquífero contaminado com sulfato e metais através de barreira reativa permeável orgânica.

Este trabalho teve como objetivo geral estudar a viabilidade técnica de utilizar bagaço de cana como meio reativo de barreiras reativas permeáveis (BRP) para remoção de sulfato e metais de águas subterrâneas contaminadas. O estudo baseou-se em investigação experimental, por meio de ensaios laboratoriais de coluna, e em modelagem matemática, para a qual utilizaram-se também alguns dados obtidos em um estudo de caso de uma unidade industrial contaminada com sulfato e metais. Neste local contaminado, as características hidrogeológicas e topográficas propiciam a utilização de uma barreira reativa permeável como técnica de remediação. Barreiras reativas permeáveis são uma alternativa para remediação de águas subterrâneas que vem progredindo rapidamente na última década, a partir de ensaios de bancada e coluna em laboratório para implementação em escala real em campo. Três colunas bióticas foram montadas utilizando bagaço de cana como meio reativo e um material de base poroso constituído de areia e cascalho para fornecer adequada condutividade hidráulica, com a proporção de 1:28 em massa seca. Também foi adicionado ao meio reativo um inóculo bacteriano composto por esterco bovino dissolvido. Uma quarta coluna, sem inóculo e contendo um agente biocida, compôs o experimento branco (abiótico). Uma solução sintética foi introduzida nas colunas simulando condições da água subterrânea do estudo de caso, com velocidade de Darcy em torno de 2,0x10-7 m/s composta por sulfato e metais (zinco e níquel) com concentrações de 6.000 mg/L e 15 mg/L, respectivamente. Os resultados das análises da fase líquida das colunas bióticas apresentaram: (i) média da taxa de remoção de sulfato durante todo o tempo do experimento de 49 mg/L/dia; (ii) as concentrações de Zn e Ni diminuíram de 15 mg/L para valores não detectáveis pela técnica analítica utilizada (< 0,01 mg/L); (iii) aumento do pH de 5.5-5.8 para valores entre 6,8-8,0; (iv) redução do valor do potencial de óxido redução (Eh) para valores de até -200mV. Não foram observadas reduções das concentrações de metais e sulfato na fase líquida da coluna abiótica e os valores de pH e Eh permaneceram dentro das faixas iniciais. Análises nas fases sólidas das colunas bióticas por MEV e EDS após o término do experimento identificaram a presença de Ni, Zn, S e Mn, indicando a precipitação desses metais em forma de sulfetos. Estes elementos não foram detectados na fase sólida da coluna abiótica. Assim, pôde-se inferir que toda a remoção de sulfato verificada nas colunas bióticas pode ser atribuída a redução bacteriana de sulfato. A partir das condições experimentais dos ensaios, foi realizada a modelagem e o dimensionamento da BRP. Para a estimativa da cinética de redução de sulfato, aplicou-se a solução analítica de Van Genuchten para transporte de contaminantes com degradação, obtendo-se uma taxa de decaimento de primeira ordem de 0,01 dia-1. A determinação da espessura e tempo de residência da barreira foi realizada considerando que a concentração de sulfato na saída da barreira fosse menor ou igual a 250 mg/L. O resultado do dimensionamento de uma BRP preenchida com bagaço de cana e areia nas proporções de 1:28 em massa seca resultaria em uma BRP de 7,1 m de espessura, com tempo de residência de 950 dias, no local de estudo de caso. Caso fosse utilizado o dobro da proporção de bagaço de cana e areia em massa seca (1:14), a implantação da BRP apresentar-se-ia viável, com espessura aproximada de 4 m. Através destes resultados, pôde ser comprovada a hipótese de que bagaço de cana como substrato e esterco bovino como inóculo compõem um meio reativo viável para a redução de sulfato e precipitação de metais em uma BRP.

Promoter effect of sodium in graphene-supported Ni and Ni–CeO2 catalyst for the low-temperature WGS reaction

The low temperature water–gas shift (WGS) reaction has been studied over Ni–CeO2/Graphene and Ni/Graphene. The catalysts were prepared with 5 wt.% Ni and 20 wt.% CeO2 loadings, by deposition-precipitation employing sodium hydroxide and urea as precipitating agents. The materials were characterized by TEM, powder X-ray diffraction, Raman spectroscopy, H2-temperature-programmed reduction and X-ray photoelectron spectroscopy (XPS). The characterization and the reaction results indicated that the interaction between the active species and the support is higher than with activated carbon, and this hinders the reducibility of ceria and thus the catalytic performance. On the other hand, the presence of residual sodium in samples prepared by precipitation with NaOH facilitated the reduction of ceria. The catalytic activity was highly improved in the presence of sodium, what can be explained on the basis of an associative reaction mechanism which is favored over Ni-O-Na entities.

No other choice but co-operation. The background of Lithuania's and Latvia's relations with Belarus. OSW Commentary No. 99, 2013-01-04

For years now Belarus has been a key economic partner for Lithuania and Latvia. These two Baltic states have well-developed port infrastructure and thus provide what are the geographically closest and also the cheapest exit to international outlets for Belarusia’s petrochemical and chemical industries, both of which are export-oriented. As a result, the transit of Belarusian goods is one of the major sources of income for the state budgets of the two countries. This economic interdependence has affected the stance Riga and Vilnius take on Minsk at the EU forum. When in February and March 2012 the Council of the European Union was resolving the issue of imposing economic sanction on selected Belarusian companies which backed Alyaksandr Lukashenka’s regime, this triggered a discussion on what the point of such measures is and on possible economic losses in Lithuania and Latvia. As a result of firm resistance from Latvia (which was backed by Slovenia), the Council removed those companies which were most strongly engaged in co-operation with Latvian partners from the list of those to be covered with economic sanctions. Lithuania, which is more critical of the political situation in Belarus, did not express its official opposition to the sanctions. Despite some differences in the policies adopted by Riga and Vilnius, it turned out that Minsk could count on strong support from local business groups in both of these countries, as these groups fear impediments in this highly profitable co-operation and also retaliation from the Belarusian government. The existing economic bonds mean that neither Vilnius nor Riga have any other choice but to co-operate with Belarus. They must therefore adopt a carefully balanced policy towards Minsk. At the same time, being EU member states, they do not officially deny that a problem exists with the violation of human rights by Alyaksandr Lukashenka’s regime. It is for this reason that the governments of Latvia and Lithuania will be interested in maintaining the status quo in relations with Minsk. On the other hand, Belarus in a way also has no other choice but to use the ports in Lithuania and Latvia, and this will prevent it from excessively escalating tension in relations with these two countries.

Pro-American non-alignment. Sweden and Finland develop closer military co-operation with the United States. OSW COMMENTARY NUMBER 205/31.03.2016

Russia’s increasingly aggressive policy and its enhanced military activity in the Nordic-Baltic region has led to revaluations in Sweden’s and Finland’s security and defence policies and a rethinking of the formats of their military co-operation. While remaining outside NATO, the two states have been developing closer bilateral defence co-operation and working more closely with the United States, while at the same time developing co-operation with NATO. Sweden and Finland perceive the United States as the guarantor of regional and European security. From their point of view, the United States is currently the country that has both the necessary military capabilities and the political will to react in the event of a conflict between Russia and NATO in the Nordic-Baltic region, in which both countries would inevitably become involved despite their non-aligned status. For Sweden and Finland, intensified co-operation with the United States offers an alternative to NATO membership, which is currently out of the question for domestic political reasons. Meanwhile, the US has also become increasingly aware of the strategic importance of the two states, which, for the purposes of contingency planning, are in fact an extension of NATO’s north-eastern flank.

Disentangling the Pathways and Effects of Ecosystem Service Co-Production

Research on ecosystem services has become a dominant field within environmental management, framing the way in which human–nature relationships are understood and managed. Although ecosystem services are usually defined as ‘the benefits that humans receive from nature’, our work shows that most services are actually co-produced by a mixture of natural capital and various forms of social, human, financial and technological capital. Here, we review how ecosystem services are co-produced, and then we assess how this affects the quantity, quality, trade-offs, resilience and the equity of the distribution of ecosystem services. Then we discuss the implications of co-production for sustainability. Finally, we present some challenges for an adequate consideration of co-production within the assessment of ecosystem services.

Index of wills, inventories, etc. in the office of the Secretary of State prior to 1901.

Names arranged alphabetically under each county.

Arbitration cases between Federation of Glass, Ceramic and Silica Sand Workers of America-CIO and Mosaic Tile Company, Cambridge Tile Manufacturing Co., Pittsburgh Plate Glass Company, Brickwede Brothers Company, Rohm & Haas Company, Franklin Clay Manufacturing Co.

Cover title.

Annual report of the New Orleans & North Eastern Railroad Co. and statement of accounts : for the year ending ...

Imprint varies.

The Epstein-Barr virus nuclear antigen-6 protein co-localizes with EBNA-3 and survival of motor neurons protein

The Epstein-Barr virus nuclear antigen (EBNA)-6 protein is essential for Epstein-Barr virus (EBV)-induced immortalization of primary human B-lymphocytes in vitro. In this study, fusion proteins of EBNA-6 with green fluorescent protein (GFP) have been used to characterize its nuclear localization and organization within the nucleus. EBNA-6 associates with nuclear structures and in immunofluorescence demonstrate a punctate staining pattern. Herein, we show that the association of EBNA-6 with these nuclear structures was maintained throughout the cell cycle and with the use of GFP-E6 deletion mutants, that the region amino acids 733-808 of EBNA-6 contains a domain that can influence the association of EBNA-6 with these nuclear structures. Co-immunofluorescence and confocal analyses demonstrated that EBNA-6 and EBNA-3 co-localize in the nucleus of cells. Expression of EBNA-6, but not EBNA-3, caused a redistribution of nuclear survival of motor neurons protein (SMN) to the EBNA-6 containing nuclear structures resulting in co-localization of SMN with EBNA-6. (C) 2003 Elsevier Inc. All rights reserved.

Integrated versus non-integrated management and care for clients with co-occurring mental health and substance use disorders: a qualitative systematic review of randomised controlled trials

The purpose of this paper is to conduct a qualitative review of randomised controlled trials in relation to the treatment of adults with co-occurring mental health and substance use disorder (MH/SUD). In particular, integrated approaches are compared with non-integrated approaches to treatment. Ten articles were identified for inclusion in the review. The findings are equivocal with regard to the superior efficacy of integrated approaches to treatment, although the many limitations of the studies need to be considered in our understanding of this finding. Clearly, this is an extremely challenging client group to engage and maintain in intervention research, and the complexity and variability of the problems render control particularly difficult. The lack of available evidence to support the superiority of integration is discussed in relation to these challenges. Much remains to be investigated with regard to integrated management and care for people with co-occurring and MH/SUD, particularly for specific combinations of dual diagnosis and giving consideration to the level of inter-relatedness between the disorders. (C) 2004 Elsevier Ltd. All rights reserved.