Phytohemagglutinin improves the development and ultrastructure of in vitro-cultured goat (Capra hircus) preantral follicles

The objective this study was to determine the effect of phytohemagglutinin (PHA) on survival, growth and gene expression in caprine secondary follicles culturedin vitro. Secondary follicles (&#8764;0.2 mm) were isolated from the cortex of caprine ovaries and cultured individually for 6 days in &#945;-MEM+ supplemented with PHA (0, 1, 10, 50, 100, or 200 ��g/mL). After 6 days of culture, follicle diameter and survival, antrum formation, ultrastructure and expression of mRNA for FSH receptors (FSH-R), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), and neuronal nitric oxide synthase were determined. All treatments maintained follicular survival [&#945;-MEM+ (94.59%); 1 ��g/mL PHA (96.43%); 10 ��g/mL PHA (84.85%); 50 ��g/mL PHA (85.29%); 100 ��g/mL PHA (88.57%), and 200 ��g/mL PHA (87.50)], but the presence of 10 ��g/mL PHA in the culture medium increased the antrum formation rate (21.21%) when compared with control (5.41%, P < 0.05) and ensured the maintenance of oocyte and granulosa cell ultrastructures after 6 days of culture. The expression of mRNA for FSH-R (2.7 �� 0.1) and PCNA (4.4 �� 0.2) was also significantly increased in follicles cultured with 10 ��g/mL PHA in relation to those cultured in &#945;-MEM+ (1.0 �� 0.1). In conclusion, supplementation of culture medium with 10 ��g/mL PHA maintains the follicular viability and ultrastructure, and promotes the formation of antral cavity after 6 days of culture in vitro.

Maternal protein restriction affects gene expression and enzyme activity of intestinal disaccharidases in adult rat offspring

This study investigated the consequences of intrauterine protein restriction on the gastrointestinal tract and particularly on the gene expression and activity of intestinal disaccharidases in the adult offspring. Wistar rat dams were fed isocaloric diets containing 6% protein (restricted, n = 8) or 17% protein (control, n = 8) throughout gestation. Male offspring (n = 5-8 in each group) were evaluated at 3 or 16 weeks of age. Maternal protein restriction during pregnancy produced offspring with growth restriction from birth (5.7 �� 0.1 vs 6.3 �� 0.1 g; mean �� SE) to weaning (42.4 �� 1.3 vs 49.1 �� 1.6 g), although at 16 weeks of age their body weight was similar to control (421.7 �� 8.9 and 428.5 �� 8.5 g). Maternal protein restriction also increased lactase activity in the proximal (0.23 �� 0.02vs 0.15 �� 0.02), medial (0.30 �� 0.06vs 0.14 �� 0.01) and distal (0.43 �� 0.07vs 0.07 �� 0.02 U��g-1��min-1) small intestine, and mRNA lactase abundance in the proximal intestine (7.96 �� 1.11vs 2.38 �� 0.47 relative units) of 3-week-old offspring rats. In addition, maternal protein restriction increased sucrase activity (1.20 �� 0.02 vs 0.91 �� 0.02 U��g-1��min-1) and sucrase mRNA abundance (4.48 �� 0.51 vs 1.95 �� 0.17 relative units) in the duodenum of 16-week-old rats. In conclusion, the present study shows for the first time that intrauterine protein restriction affects gene expression of intestinal enzymes in offspring.

Myosin light chain kinase is necessary for post-shock mesenteric lymph drainage enhancement of vascular reactivity and calcium sensitivity in hemorrhagic-shocked rats

Vascular hyporeactivity is an important factor in irreversible shock, and post-shock mesenteric lymph (PSML) blockade improves vascular reactivity after hemorrhagic shock. This study explored the possible involvement of myosin light chain kinase (MLCK) in PSML-mediated vascular hyporeactivity and calcium desensitization. Rats were divided into sham (n=12), shock (n=18), and shock+drainage (n=18) groups. A hemorrhagic shock model (40��2 mmHg, 3 h) was established in the shock and shock+drainage groups. PSML drainage was performed from 1 to 3 h from start of hypotension in shock+drainage rats. Levels of phospho-MLCK (p-MLCK) were determined in superior mesenteric artery (SMA) tissue, and the vascular reactivity to norepinephrine (NE) and sensitivity to Ca2+ were observed in SMA rings in an isolated organ perfusion system. p-MLCK was significantly decreased in the shock group compared with the sham group, but increased in the shock+drainage group compared with the shock group. Substance P (1 nM), an agonist of MLCK, significantly elevated the decreased contractile response of SMA rings to both NE and Ca2+ at various concentrations. Maximum contractility (Emax) in the shock group increased with NE (from 0.179��0.038 to 0.440��0.177 g/mg, P<0.05) and Ca2+ (from 0.515��0.043 to 0.646��0.096 g/mg, P<0.05). ML-7 (0.1 nM), an inhibitor of MLCK, reduced the increased vascular response to NE and Ca2+ at various concentrations in the shock+drainage group (from 0.744��0.187 to 0.570��0.143 g/mg in Emax for NE and from 0.729��0.037 to 0.645��0.056 g/mg in Emax for Ca2+, P<0.05). We conclude that MLCK is an important contributor to PSML drainage, enhancing vascular reactivity and calcium sensitivity in rats with hemorrhagic shock.

Serum uric acid and disorders of glucose metabolism: the role of glycosuria

Hyperuricemia has been associated with hypertension, diabetes mellitus, and metabolic syndrome. We studied the association between hyperuricemia and glycemic status in a nonrandomized sample of primary care patients. This was a cross-sectional study of adults &#8805;20 years old who were members of a community-based health care program. Hyperuricemia was defined as a value >7.0 mg/dL for men and >6.0 mg/dL for women. The sample comprised 720 participants including controls (n=257) and patients who were hypertensive and euglycemic (n=118), prediabetic (n=222), or diabetic (n=123). The mean age was 42.4��12.5 years, 45% were male, and 30% were white. The prevalence of hyperuricemia increased from controls (3.9%) to euglycemic hypertension (7.6%) and prediabetic state (14.0%), with values in prediabetic patients being statistically different from controls. Overall, diabetic patients had an 11.4% prevalence of hyperuricemia, which was also statistically different from controls. Of note, diabetic subjects with glycosuria, who represented 24% of the diabetic participants, had a null prevalence of hyperuricemia, and statistically higher values for fractional excretion of uric acid, Na excretion index, and prevalence of microalbuminuria than those without glycosuria. Participants who were prediabetic or diabetic but without glycosuria had a similarly elevated prevalence of hyperuricemia. In contrast, diabetic patients with glycosuria had a null prevalence of hyperuricemia and excreted more uric acid and Na than diabetic subjects without glycosuria. The findings can be explained by enhanced proximal tubule reabsorption early in the course of dysglycemia that decreases with the ensuing glycosuria at the late stage of the disorder.

Enhanced production and organic solvent stability of a protease fromBrevibacillus laterosporus strain PAP04

A bacterial strain (PAP04) isolated from cattle farm soil was shown to produce an extracellular, solvent-stable protease. Sequence analysis using 16S rRNA showed that this strain was highly homologous (99%) to Brevibacillus laterosporus. Growth conditions that optimize protease production in this strain were determined as maltose (carbon source), skim milk (nitrogen source), pH 7.0, 40��C temperature, and 48 h incubation. Overall, conditions were optimized to yield a 5.91-fold higher production of protease compared to standard conditions. Furthermore, the stability of the enzyme in organic solvents was assessed by incubation for 2 weeks in solutions containing 50% concentration of various organic solvents. The enzyme retained activity in all tested solvents except ethanol; however, the protease activity was stimulated in benzene (74%) followed by acetone (63%) and chloroform (54.8%). In addition, the plate assay and zymography results also confirmed the stability of the PAP04 protease in various organic solvents. The organic solvent stability of this protease at high (50%) concentrations of solvents makes it an alternative catalyst for peptide synthesis in non-aqueous media.

PROPRIEDADES EMULSIFICANTES E SOLUBILIDADE DA CASE��NA BOVINA E DE SEUS HIDROLISADOS TR��PTICOS: 1. EFEITO DO PH E DO TEMPO DE HIDR��LISE

Visando a aplica����o industrial da case��na e de seus hidrolisados tr��pticos, foram estudados os efeitos da varia����o do pH e do tempo de hidr��lise sobre suas caracter��sticas de solubilidade e propriedades emulsificantes. Testou-se os valores de pH de 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; 7,0 e 8,0 e os tempos de hidr��lise: 5, 10 15, 30 e 60min. Foram medidos a solubilidade, a capacidade emulsificante, o ��ndice de atividade emulsificante, a estabilidade da emuls��o, e calculdado o tamanho dos gl��bulos de gordura. Os resultados obtidos para a case��na nativa indicaram que os melhores valores para estas propriedades funcionais foram encontrados em pH acima de 5,0. A hidr��lise tr��ptica da case��na foi ben��fica para sua solubilidade e capacidade emulsificante e prejudicou sua estabilidade, em todos os valores de pH e tempos de hidr��lise, exceto no pH 5,0 com 5 min de rea����o. Por outro lado, este tratamento enzim��tico contribuiu para melhorar o ��ndice de atividade emulsificante da case��na, entre valores de pH 3,0 e 5,0 e ap��s 10 min de rea����o.

An��lise da aceita����o de aguardentes de cana por testes afetivos e mapa de prefer��ncia interno

A aceita����o de 11 amostras de aguardentes de cana envelhecidas e n��o envelhecidas foi avaliada por testes sensoriais afetivos e an��lises estat��sticas uni e multivariada. As aguardentes estudadas compreenderam seis amostras comerciais de diferentes marcas, (sendo tr��s n��o envelhecidas e tr��s envelhecidas) e ainda outras cinco amostras correspondentes a zero, 12, 24, 36 e 48 meses de envelhecimento em um tonel de carvalho de 200L. As amostras foram avaliadas por 100 provadores consumidores do produto, recrutados por question��rio de avalia����o quanto �� afetividade. Para os testes afetivos foi utilizada escala hed��nica n��o estruturada de 9cm, sendo os dados obtidos avaliados por dois m��todos estat��sticos distintos: o Mapa de Prefer��ncia Interno (MDPREF) e a an��lise de vari��ncia univariada (ANOVA) com compara����o de m��dias pelo teste de Tukey e an��lise de correla����o. As amostras de aguardente envelhecidas por 12, 36 e 48 meses obtiveram maior aceita����o, com m��dias ao redor de 7,0 na escala hed��nica. A amostra com menor aceita����o foi a correspondente ao tempo zero de envelhecimento (controle). As demais amostras obtiveram aceita����o intermedi��ria. A an��lise por MDPREF gerou em espa��o multidimensional (onde as varia����es com rela����o aos dados de prefer��ncia foram extra��das em eixos ortogonais e para cada dimens��o de prefer��ncia), coordenadas relativas aos produtos, que foram geradas em fun����o da resposta dos consumidores. Os dados de aceita����o de cada provador foram utilizados para o desenvolvimento de vetores individuais de prefer��ncia, resultando na constru����o de um mapa mutidimensional das amostras, em fun����o dos dados de aceita����o. No presente estudo o MDPREF foi gerado pelas primeira e segunda dimens��es de prefer��ncia, as quais explicaram em conjunto 89,83% das varia����es observadas entre as amostras com rela����o �� aceita����o. O MDPREF confirmou os resultados da ANOVA, indicando uma maior prefer��ncia dos provadores pelas amostras de aguardentes envelhecidas. Os resultados sugerem tamb��m que aguardentes envelhecidas por mais de 24 meses em tonel de carvalho de 200L s��o preferidas pelos consumidores, em detrimento das comerciais n��o envelhecidas e mesmo das comerciais envelhecidas, que podem ser adicionadas de aguardente n��o envelhecida (processo denominado corte) e tamb��m ter corre����o da cor, conforme permite a Legisla����o Brasileira. O conte��do de polifen��is totais e a intensidade de cor tamb��m foram determinados, e ambos apresentaram correla����o linear positiva significativa (p<=0,05) com o aumento do tempo de envelhecimento das amostras.

Embalagens alternativas para caf�� sol��vel

O objetivo deste trabalho foi estimar a vida ��til de caf�� sol��vel em novas op����es de potes pl��sticos atrav��s de modelo matem��tico, que relaciona o aumento de umidade do produto, com a barreira �� umidade da embalagem. Os potes pl��sticos foram caracterizados quanto ��s dimens��es, �� capacidade volum��trica, �� taxa de permeabilidade ao vapor d'��gua (TPVA) e ao torque de abertura. Caracterizou-se os dois tipos de caf�� sol��vel (aglomerado e em p��) quanto �� umidade inicial e cr��tica e �� isoterma de sor����o de umidade. Os potes pl��sticos de poli��ster (PET) mostraram-se cerca de dez vezes mais perme��veis que os de polipropileno (PP). Observou-se aglomera����o nos produtos com 7,0% b.s. de umidade a 30��C, mas a umidade cr��tica foi considerada como sendo de 5,0% b.s., que �� o teor fixado pela legisla����o. Os resultados indicaram que, nos potes de PP, os per��odos de vida ��til dos caf��s sol��veis aglomerado e em p�� foram superiores a 1,8 anos e 2,5 anos, respectivamente, a 30��C/80%UR. Entretanto, o uso de potes de poli��ster (PET) n��o se mostrou vi��vel devido aos baixos per��odos de vida ��til estimados a 30��C/80%UR (inferiores a 4 meses).

Efeito do pH e da hidr��lise tr��ptica sobre as propriedades emulsionantes da globina bovina

No intuito de estudar o efeito do pH e da a����o da tripsina sobre as propriedades emulsionantes da globina bovina, extra��da pelo m��todo da acetona acidificada, foram determinados neste trabalho, a capacidade emulsionante (EC), o ��ndice de atividade emulsionante (EAI) e a estabilidade da emuls��o (ES). Testaram-se os valores de pH de 3,0 a 8,0 e os tempos de hidr��lise de 5,0 a 60 min. Os dados obtidos indicam que os maiores valores de EC e ES foram obtidos no pH 5,0 e 6,0, respectivamente, correspondente �� faixa de alta solubilidade da prote��na. Por outro lado, o EAI, al��m de apresentar um m��ximo no pH 3,0, foi igualmente elevado nos valores de pH 7,0 e 8,0, situados na zona onde a globina �� praticamente insol��vel. A hidr��lise tr��ptica, nas condi����es empregadas, contribuiu para melhorar a EC, em toda a faixa de pH estudada, enquanto que para o EAI somente foi ben��fico em pH 4,0 e 5,0. No caso da ES, este tratamento enzim��tico n��o foi vantajoso, promovendo melhoras apenas no pH 7,0, onde a prote��na �� insol��vel, e somente ap��s 60 min de hidr��lise.

Comportamento do ��leo de soja refinado utilizado em fritura por imers��o com alimentos de origem vegetal

A fritura �� uma opera����o que confere aos alimentos caracter��sticas de odor, sabor, cor e textura de grande aceitabilidade sensorial. O ��leo ou gordura pode, entretanto, se tornar um ingrediente capaz de introduzir altera����es qu��micas provocadas pelo aquecimento prolongado. Neste trabalho, estudou-se o comportamento do ��leo de soja refinado em fritura de imers��o intermitente, em restaurante universit��rio, sob temperatura controlada entre 170&ordm;C e 180&ordm;C, por um per��odo de 30 horas. Foram utilizados 101 litros de ��leo de soja para processar 373kg de vegetais, como batata, couve-flor, abobrinha e mandioca. Analisou-se o ��leo mediante determina����es f��sicas de absortividade no u.v. (A232nm e A270nm) e cor (Lovibond), e qu��micas (��ndice de acidez (IA) e compostos polares (CP)). An��lise sensorial de aceitabilidade foi realizada nos produtos. Os par��metros-limite que determinaram o descarte do ��leo foram: 25% de compostos polares, 1% de ��cidos graxos livres e m��dia de 7,0 para o teste de aceitabilidade. Os resultados ao final do per��odo foram: IA, 0,282; CP, 18,8%; cor Lovibond 14Y/2R; A232nm de 9,213; A270nm de 2,409 e 7,96 para o teste de aceitabilidade. Com base nos resultados obtidos, concluiu-se que, apesar do aquecimento do ��leo ter levado a altera����es hidrol��ticas e oxidativas, os par��metros n��o atingiram o n��vel de descarte, indicando que o ��leo de soja submetido a essas condi����es de fritura pode ser usado por 30 horas.

Efeito da hidr��lise tr��ptica e do pH sobre as propriedades funcionais do plasma bovino

Visando a utiliza����o do plasma bovino como agente funcional de alimentos, foram estudadas, na faixa de pH de 3,0 a 8,0, a solubilidade, a hidrofobicidade e a sua habilidade de formar e estabilizar emuls��es. Para tal, foram determinados a capacidade emulsionante (EC), o ��ndice de atividade emulsionante (EAI) e a estabilidade da emuls��o (ES). O efeito da a����o da tripsina sobre estas propriedades foi, tamb��m, verificado, tendo sido preparados cinco hidrolisados enzim��ticos. Os resultados obtidos indicam que a hidrofobicidade e o EAI apresentaram um m��ximo em pH 3,0 e 7,0, respectivamente, enquanto que as outras propriedades praticamente n��o foram influenciadas pela varia����o de pH. A hidr��lise tr��ptica provocou uma redu����o da solubilidade e da EC, n��o afetou o EAI e a ES, tendo contribu��do para melhorar apenas a hidrofobicidade, em alguns tempos de rea����o.

Avalia����o das condi����es experimentais de CLAE na determina����o de ��cido f��lico em leites enriquecidos

A import��ncia que foi atribu��da ao ��cido f��lico recentemente, em virtude de sua a����o ben��fica ao homem, tem aumentado o interesse dos pesquisadores por esta vitamina. Conseq��entemente, aumentou a preocupa����o dos analistas em desenvolver metodologias apropriadas para a determina����o do ��cido f��lico (AF) em alimentos enriquecidos ou n��o com esta vitamina e o controle do mesmo em alimentos enriquecidos. Dentro desse panorama, o objetivo deste trabalho foi de avaliar algumas condi����es experimentais na determina����o e no controle de ��cido f��lico, por cromatografia l��quida de alta efici��ncia (CLAE), em leites enriquecidos. Utilizando coluna de fase reversa (C18), foram testados 35 diferentes sistemas de elui����o isocr��tica e 11 por gradiente. Os perfis cromatogr��ficos foram monitorados em quatro diferentes comprimentos de onda. Foram realizados estudos sobre a estabilidade das solu����es-padr��o de AF utilizadas na quantifica����o. Em rela����o ��s etapas pr��-cromatogr��ficas, foram avaliadas 15 solu����es extratoras. Os procedimentos de extra����o com solu����es alcalinas, pH acima de 7.0, forneceram os melhores resultados. As melhores condi����es de an��lise foram obtidas com elui����o por gradiente, a vaz��o de 0,5mL/min, utilizando 10% de acetonitrila e 90% de fase aquosa tamponada (��cido ac��tico 0,166mol/L; hidr��xido de pot��ssio 0,01mol/L; pH 2,8) no in��cio da corrida, fazendo um gradiente at�� oito minutos e meio (8,5min) chegando em 24% de acetonitrila e 76% de fase aquosa tamponada, permanecendo esta concentra����o at�� nove minutos (9min) de corrida. A detec����o do ��cido f��lico foi feita na regi��o do ultra-violeta, a 290nm, em conseq����ncia da menor interfer��ncia dos constituintes da matriz. A quantifica����o foi feita por padroniza����o externa, sendo que o padr��o de ��cido f��lico, dissolvido em tamp��o fosfato (pH6,5) e mantido a 4&deg;C, pode ser utilizado por at�� 30 dias. Os limites de detec����o e quantifica����o, determinados foram, respectivamente, 1,3ng/mL, 2,6ng/mL.

Avalia����o microbiol��gica e sensorial da vida-��til de cortes de peito de frango irradiados

Caixas de papel��o contendo cortes de peito de frango sem pele e sem ossos, previamente acondicionadas em bandejas de polietileno expandido, com aproximadamente 200 gramas por bandeja e recobertas por filme de polietileno, foram submetidas �� irradia����o com 60Co, utilizando-se equipamento Nordion JS 7500. As amostras foram expostas a doses de 1,5; 3,0 e 7,0kGy, sendo irradiadas na modalidade est��tica a 0�� e 180�� em rela����o ao feixe de irradia����o. Para avaliar a homogeneidade das doses de irradia����o um conjunto de 18 dos��metros de alanina+parafina por tratamento foi colocado dentro das caixas com as amostras. Outro conjunto de dos��metros foi irradiado na faixa de 1 a 10kGy para elabora����o da curva de resposta . Ap��s a irradia����o, os peitos de frango foram armazenados a 5��1��C durante 39 dias, sendo submetidos a an��lises microbiol��gicas (contagem total de bact��rias aer��bias psicrotr��ficas, bact��rias aer��bias mes��filas, bolores e leveduras, Pseudomonas spp, enterobacteri��ceas totais, bact��rias l��cticas e NMP de E.coli) em 10 per��odos diferentes ao longo do armazenamento. Os resultados obtidos revelaram um comportamento linear dos dos��metros de alanina+parafina na faixa de 1 a 10kGy de irradia����o. Com base nas avalia����es microbiol��gicas as amostras controle tiveram vida-��til de 5 dias, observando-se um ganho na vida-��til de 1,75; 4,40 e 7,0 vezes para as amostras irradiadas com 1,5; 3,0 e 7,0kGy, respectivamente. Constatou-se uma altera����o crescente do odor de queimado �� medida que se aumentavam as doses de irradia����o, indicando a dose de 3kGy como a mais recomend��vel para se garantir um produto com maior vida-��til e sem altera����es sensoriais percept��veis.

Pesquisa de Salmonella sp., Listeria sp. e microrganismos indicadores higi��nico-sanit��rios em queijos produzidos no estado do Rio Grande do Norte

O objetivo do trabalho foi verificar a qualidade higi��nico-sanit��ria de amostras de queijo de coalho (11 amostras) e de queijo de manteiga (13 amostras) produzidas no Estado do Rio Grande do Norte. Todas as amostras de queijo de coalho apresentaram coliformes totais, das quais 36,4% continham coliformes fecais, entre 3 a 7NMP/g , com confirma����o de Escherichia coli. Em rela����o ao queijo de manteiga, 84,6% das amostras tamb��m apresentaram coliformes totais, 15,4%, coliformes fecais, com confirma����o de E. coli em 7,7%. A contagem de bolores e leveduras variou de 1,9 x 10(4) a 4,8 x 10(8) UFC/g nas amostras queijo de coalho e de 1,5 x 10(4) a 2,8 x 10(8) UFC/g nas amostras de queijo de manteiga. Estafilococos coagulase positiva foi observado em 72,7% das amostras de queijo de coalho e 84,7% das amostras de queijo de manteiga, com contagens variando de 7,0 x 10(4) a 1,3 x 10(8) UFC/g e 2,4 x 10�� a 8,6 x 10(6) UFC/g, respectivamente. Salmonella foi detectada em 9% das amostras de queijo de coalho e em 15% das de queijo de manteiga. Listeria sp. foi constatada em 9% e 15% das amostras de queijos coalho e manteiga, respectivamente. A elevada popula����o de bolores e leveduras observada em ambos os queijos indicou defici��ncia nos procedimentos de higiene e sanitiza����o e os caracterizam como produto em condi����es higi��nicas insatisfat��rias. Os queijos de coalho e de manteiga oriundos das seis microrregi��es do Rio Grande do Norte envolvidas no estudo n��o apresentaram seguran��a alimentar, visto que a maioria continha estafilococos coagulase positiva. A presen��a de Salmonella classificou os produtos como sendo impr��prios ao consumo humano.

Functional characterization of acetylated Brazil nut (Bertholletia excelsa HBK) kernel globulin

Defatted Brazil nut kernel flour, a rich source of high quality proteins, is presently being utilized in the formulation of animal feeds. One of the possible ways to improve its utilization for human consumption is through improvement in its functional properties. In the present study, changes in some of the functional properties of Brazil nut kernel globulin were evaluated after acetylation at 58.6, 66.2 and 75.3% levels. The solubility of acetylated globulin was improved above pH 6.0 but was reduced in the pH range of 3.0-4.0. Water and oil absorption capacity, as well as the viscosity increased with increase in the level of acetylation. Level of modification also influenced the emulsifying capacity: decreased at pH 3.0, but increased at pH 7.0 and 9.0. Highest emulsion activity (approximately 62.2%) was observed at pH 3.0 followed by pH 9.0 and pH 7.0 and least (about 11.8%) at pH 5.0. Emulsion stability also followed similar behavior as that of emulsion activity.