Aberrant expression of E-cadherin and beta-catenin proteins in placenta of bovine embryos derived from somatic cell nuclear transfer

Abnormal placental development is common in the bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT)-derived fetus. In the present study, we characterised the expression of E-cadherin and beta-catenin, structural proteins of adherens junctions, in SCNT gestations as a model for impaired placentation. Cotyledonary tissues were separated from pregnant uteri of SCNT (n - 6) and control pregnancies (n - 8) obtained by artificial insemination. Samples were analysed by western blot, quantitative RT-PCR (qRT-PCR) and immunohistochemistry. Bovine trophectoderm cell lines derived from SCNT and control embryos were analysed to compare with the in utero condition. Although no differences in E-cadherin or beta-catenin mRNA abundance were observed in fetal tissues between the two groups, proteins encoded by these genes were markedly under-expressed in SCNT trophoblast cells. Immunohistochemistry revealed a different pattern of E-cadherin and total beta-catenin localisation in SCNT placentas compared with controls. No difference was observed in subcellular localisation of dephosphorylated active-beta-catenin protein in SCNT tissues compared with controls. However, qRT-PCR confirmed that the wingless (WNT)/beta-catenin signalling pathway target genes CCND1, CLDN1 and MSX1 were downregulated in SCNT placentas. No differences were detected between two groups of bovine trophectoderm cell lines. Our results suggest that impaired expression of E-cadherin and beta-catenin proteins, along with defective beta-catenin signalling during embryo attachment, specifically during placentation, is a molecular mechanism explaining insufficient placentation in the bovine SCNT-derived fetus.

Prevalência de rotavírus do grupo A em fezes diarréicas de bezerros de corte em sistema semi-intensivo de produção

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Polimorfismo da transferrina e albumina e as associações com precocidade sexual em bovinos da raça Nelore doadores de sêmen

O presente estudo utilizou 16 animais Bos taurus indicus da raça Nelore doadores de sêmen. Estes animais foram divididos em grupos de acordo com a idade em que o sêmen congelou pela primeira vez. O grupo I, considerado precoce, apresentou animais com sêmen passível de congelação com idade inferior a 20 meses. O grupo II, composto por animais que tiveram o sêmen congelado com idade entre 21 e 26 meses. E o grupo III, tido como tardio, composto por animais com sêmen congelável com idade superior a 27 meses. Para análise dos padrões eletroforéticos da transferrina e albumina, amostras de sangue foram colhidas em tubos heparinizados e submetidos a centrifugação de 2.500 G por 15 minutos para separação do plasma sangüíneo. As amostras de plasma sangüíneo foram processadas para que a corrida eletroforética em gel de poliacrilamida pudesse ser realizada. Para a coloração do gel, usou-se Coomasie Brilliant Blue. Após análise dos padrões eletroforéticos da transferrina e albumina, observou-se que não houve relação detectável entre os fenótipos da albumina e precocidade sexual de touros doadores. Entretanto, em relação à transferrina, foi possível sugerir uma associação entre o alelo TfD com touros portadores de sêmen congelável precocemente ou medianamente em termos de idade à congelação.

Alterações do padrão ultrassonográfico do parênquima testicular em bovinos jovens da raça Nelore

The ultrasononographic examination of testicles is a noninvasive and rapid method that, allied to clinical examination, can lead to an early diagnostic of testicles disorders. The aim of the present study is to enhance andrologic evaluation and to make public altered ultrasonographic testicular parenchyma pattern in young Nelore bulls. Testes of 114 Nelore bulls from 9 to 15 months old were submitted to ultrasonographic evaluation (Frontal and transverse planes of testes). In this group, 111 animals presented testicular parenchyma with uniform pattern at low echogenicity, and the testicular echogenicity increased in proportion to the animal's age. Three animals, from 9 to 15 months old, presented heterogeneous testicular parenchyma with multiple hyperechoics

Efeito da idade sobre as principais características andrológicas de touros Brangus- Efeito da idade sobre as principais características andrológicas de touros BrangusIbagé criados extensivamente no estado do Mato Grosso do Sul - Brasil Ibagé criados extensivamente no estado do Mato Grosso do Sul - Brasil

Background: Bull fertility is extremely important for beef cattle production systems and has a multiplier impact on the economical and zootechnical indexes of the herd. Bulls raised in tropical conditions may present varied seminal characteristics due to, among other causes, different management practices and quality of pastures. Another factor that influences the semen characteristics is the age of the sire. The reproductive potential of bull evaluated through the andrological exam aims to ensure the semen quality and to improve the herd reproductive efficiency. The aim of this study was to evaluate the main semen parameters of Brangus-Ibage bulls extensively reared in eastern Mato Grosso do Sul state and to verify the effect of age on the andrological characteristics analyzed. It was also evaluated the correlation between age, scrotal circumference, and physical and morphological sperm characteristics produced by the Brangus bulls.Materials, Methods & Results: The study took place in the month of July 2010, during the routine andrological examination of 168 synthetic Brangus-Ibage bulls (5/8 Angus x 3/8 Nelore), belonging to the same property. For data analysis the animals were divided by age groups: animals younger than 4 years (Age I), animals between 4 and 8 years of age (Age II), and animals between 8 and 15 years of age (Age III). In another analysis, the animals were grouped according to the sperm motility pattern obtained from the semen collection: sperm motility lower than 40% (Motility I), sperm motility between 40 and 70% (Motility II) and sperm motility between 70 and 90% (Motility III). The results of the present study demonstrated an effect of age (P < 0.05) on the following androgical characteristics: scrotal circumference, ejaculate volume, sperm vigor, major defects, minor defects and total defects. It was also observed that the animals with higher sperm motility presented higher (P < 0.05) scrotal circumference, and lower (P < 0.05) percentages of major and total defects. Among the andrological characteristics evaluated in the present work, it was observed positive correlations between age and scrotal circumference (R =0.299; P =0.000), age and volume of ejaculate (R =0.161; P =0.037), age and major defects (R =0.188; P =0.015), sperm motility and scrotal circumference (R =0.245; P =0.001), sperm motility and sperm vigor (R =0.483; P =0.000), and between major defects and total defects (R =0.946; P =0.000). Also, negative correlations were observed between sperm motility and total defects (R =-0.372; P =0.000), sperm vigor and major defects (R =-0.498; P =0.000), and sperm vigor and total defects (R =-0.432; P =0.000).Discussion: Based on the results of this study it was concluded that the Brangus-Ibage bulls utilized for natural breeding in eastern Mato Grosso do Sul, Brazil, presented satisfactory semen quality taking into account the quality of the pastures where the animals were located. In addition, the scrotal circumference, the ejaculate volume, the sperm vigor, and the percentage of morphological characteristics were influenced by the age of the bulls. Therefore, considering the production system and the environmental conditions, the animals with age between 4 and 8 years were superior regarding the sperm parameters evaluated.

Effect of moderate and severe heat stress on avian embryonic Hsp70 gene expression

Stress response is a universal mechanism developed by all organisms to deal with adverse changes in the environment, which lead to the synthesis of heat shock proteins (Hsps). In this study, the effect of moderate (41degreesC) and severe (44degreesC) heat stress on Hsp70 transcript expression pattern was investigated during chicken embryogenesis. Acute exposure to severe heat stress for one hour resulted in a fifteen-fold increase in Hsp70 mRNA levels. The return of stressed embryos to normal incubation temperature resulted in Hsp70 mRNA levels five-fold higher than control after three hours and normal levels after six hours. Moderate heat stress did not induce enhancements on Hsp70 mRNA levels. The spatial expression of Hsp70 transcripts was detected in embryos under normal incubation conditions. Whole-mount in situ hybridization analysis showed that Hsp70 transcripts were constitutively present in somite and in distinct encephalic domains (predominantly in prosencephalon and mesencephalon areas) of the chicken embryo. These results showed that Hsp70 induction is dependent on incubation temperature conditions, suggesting that early chicken embryos may induce a quick emergence response to cope with severe heat stress by increasing Hsp70 mRNA levels.

Nucleus isthmi and control of breathing in amphibians

Despite recent advances, the mechanisms of neurorespiratory control in amphibians are far from understood. One of the brainstem structures believed to play a key role in the ventilatory control of anuran amphibians is the nucleus isthmi (NI). This nucleus is a mesencephalic structure located between the roof of the midbrain and the cerebellum, which differentiates during metamorphosis; the period when pulmonary ventilation develops in bullfrogs. It has been recently suggested that the NI acts to inhibit hypoxic and hypercarbic drives in breathing by restricting increases in tidal volume. This data is similar to the influence of two pontine structures of mammals, the locus coeruleus and the nucleus raphe magnus. The putative mediators for this response are glutamate and nitric oxide. Microinjection of kynurenic acid (an ionotropic receptor antagonist of excitatory amino acids) and L-NAME (a non-selective NO synthase inhibitor) elicited increases in the ventilatory response to hypoxia and hypercarbia. This article reviews the available data on the role of the NI in the control of ventilation in amphibians. (C) 2004 Elsevier B.V. All rights reserved.

Ultrastructural morphology and morphometry of the normal corneal endothelium of adult crossbred pig

O endotélio corneal é uma monocamada de células poligonais. A integridade e saúde dessa camada são essenciais para a manutenção da transparência corneal normal. Este estudo reportou pela primeira vez, de forma detalhada, a morfologia ultra-estrutural e a morfometria do endotélio corneal de suínos adultos mestiços à microscopia eletrônica de varredura (MEV). A superfície endothelial corneal apresentou um padrão regular de células poligonais, com predomínio da forma hexagonal e de bordas celulares nítidas. O núcleo foi observado como protuberância arredondada no centro da célula. Também foram observados os cílios (2-4) em apenas algumas células da região periférica da córnea, as aberturas das vesículas pinocitóticas na proximidade dos cílios, as microvilosidades, as varas da borda e as bordas celulares em formato de zigzag. A área celular média foi significativamente maior (P<0,05) no centro da córnea do que na periferia, com um coeficiente de variação menor no centro da córnea. A densidade celular média foi significativamente maior na periferia (P<0,05) e 43,9% maior que os dados reportados por outros autores na microscopia especular, o que demonstra o efeito da retração celular durante o processamento das amostras. O valor médio do número de lados das células (pleomorfismo) foi de 5,9, o que evidencia um predomínio do formato hexagonal. A percentagem de células hexagonais foi significativamente maior no centro (P<0,001). Os parâmetros obtidos nesta pesquisa servirão de base para estudos futuros sobre o efeito de medicamentos, cirurgias intracamerulares ou soluções para armazenamento de córneas para transplantes no endotélio corneal do suíno.

Role of the oblique ligament in the integrity of the medial collateral ligament of the canine elbow joint

Foram estudados o arranjo e o diâmetro médio das fibrilas colágenas do ligamento colateral medial da articulação do cotovelo do cão, isolado ou associado ao ligamento oblíquo e tracionado até a ruptura. Dezoito articulações foram divididas em três grupos. O primeiro grupo teve o ligamento colateral medial coletado, mas não tracionado; o segundo grupo teve o ligamento colateral medial tracionado isoladamente; o terceiro grupo teve os ligamentos colateral medial e oblíquo tracionados associadamente. O ligamento colateral medial não submetido ao ensaio de tração apresentou um padrão ondulado das fibras colágenas, o qual não foi totalmente destruído quando foi tracionado, associado ao ligamento oblíquo, e perdeu totalmente o padrão reticular das fibras colágenas quando testado isoladamente. Quando o ligamento colateral medial foi submetido à tensão isoladamente, o diâmetro médio das fibrilas colágenas aumentou em relação ao grupo não submetido à tensão. Associado ao ligamento oblíquo, o diâmetro médio das fibrilas colágenas foi o maior na região de inserção e o menor na região média, em relação aos outros grupos. Concluiu-se que o ligamento oblíquo pode favorecer a integridade da região de inserção do ligamento colateral medial, aumentando a eficácia de sua reconstrução após a lesão.

A elasticidade do ligamento colateral medial da articulação do cotovelo de cão não advém de elastina

A literatura relata que ligamentos consistem de tecido conjuntivo denso, composto por água, colágeno tipos I e III, diversas proteoglicanas, pouca elastina e várias outras substâncias. Além disso, os ligamentos, quando testados in vitro com tensão longitudinal e unidirecional, apresentam um comportamento mecânico não-linear, ou seja, as fibras colágenas são alongadas aos poucos, perdendo seu padrão ondulado, até que todas estejam no limite máximo de tração e iniciem o rompimento. Portanto, no presente estudo avaliou-se a presença de fibras elásticas (elastina) no ligamento colateral medial do cotovelo de cães adultos para ponderar se a elasticidade do referido ligamento deve-se à presença de fibras elásticas ou às propriedades elásticas do colágeno ou à combinação de ambas. Foram utilizadas quatro articulações, de machos e fêmeas em igual proporção, das quais foram adquiridas as amostras das porções médias dos ligamentos colaterais mediais para a rotina histológica. Os cortes foram corados pela técnica de Weigert, e não foi observada a presença de fibras elásticas, detectável por esta técnica à microscopia de luz. Concluiu-se que a elasticidade do ligamento colateral medial do cotovelo de cão deve-se, principalmente, ao padrão ondulado das fibras colágenas, devido à quantidade ínfima ou até à inexistência de fibras elásticas nesta estrutura.

Efeitos do espaço de alojamento e da idade sobre desenvolvimento, integridade e proteção da mucosa intestinal de frangos de corte

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Water intake behavior of broiler chickens exposed to heat stress and drinking from bell or and nipple drinkers

The aspects involved in broiler water intake are not well known, despite the importance of water in animal nutrition and physiology. Water intake behavior should be taken into account when deciding on different types of drinkers. Bell and nipple drinkers are the most commonly used in commercial broiler production. Broilers were housed in cages equipped with two different drinker types and raised at two different environmental temperatures (25 and 34 ºC) to evaluate water intake behavior and volume. Broiler water intake behavior was influenced by drinker type. Birds visited bell drinkers less often, but presented higher total water intake per visit to the drinker as compared to those drinking from nipple drinkers. The results of this study suggest that both broilers drinking behavior and water intake volume should be taken into account when deciding on drinker type to equip broiler houses.

Polymorphism analysis of the hsp70 stress gene in Broiler chickens (Gallus gallus) of different breeds

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Do hematologic constituents really increase due to endurance exercise in horses?

Este estudo objetivou avaliar o comportamento dos componentes do sangue em cavalos que concluiram com êxito provas de enduro em condições tropicais. Punção da veia jugular foi realizada para coletar o sangue antes, durante e após o evento. Os dados foram analisados por meio de uma abordagem matemática, com base no hematócrito e volume de sangue onde a variação percentual no volume plasmático foi utilizada para corrigir os valores de cada variável analisada. O nível de significância adotado foi P<0,05. O modelo matemático proposto para avaliar as concentrações de componentes do sangue permitiu a observação de um padrão diferente no comportamento de várias variáveis plasmáticas, destacando que a abordagem seguida pelos autores é mais sensível do que aquelas que não seguiram este procedimento. em conclusão, o método utilizado neste estudo permitiu acompanhar os processos fisiológicos que realmente ocorrem durante o esforço de resistência em condições tropicais.

Variabilidade sazonal no ducto epididimário de codorna doméstica: observações morfológicas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)