Characterization of the co-purified invertase and beta-glucosidase of a multifunctional extract from Aspergillus terreus

The filamentous fungus Aspergillus terreus secretes both invertase and beta-glucosidase when grown under submerged fermentation containing rye flour as the carbon source. The aim of this study was to characterize the co-purified fraction, especially the invertase activity. An invertase and a beta-glucosidase were co-purified by two chromatographic steps, and the isolated enzymatic fraction was 139-fold enriched in invertase activity. SDS-PAGE analysis of the co-purified enzymes suggests that the protein fraction with invertase activity was heterodimeric, with subunits of 47 and 27 kDa. Maximal invertase activity, which was determined by response surface methodology, occurred in pH and temperature ranges of 4.0-6.0 and 55-65 A degrees C, respectively. The invertase in co-purified enzymes was stable for 1 h at pH 3.0-10.0 and maintained full activity for up to 1 h at 55 A degrees C when diluted in water. Invertase activity was stimulated by 1 mM concentrations of Mn2+ (161 %), Co2+ (68 %) and Mg2+ (61 %) and was inhibited by Al3+, Ag+, Fe2+ and Fe3+. In addition to sucrose, the co-purified enzymes hydrolyzed cellobiose, inulin and raffinose, and the apparent affinities for sucrose and cellobiose were quite similar (K-M = 22 mM). However, in the presence of Mn2+, the apparent affinity and V-max for sucrose hydrolysis increased approximately 2- and 2.9-fold, respectively, while for cellobiose, a 2.6-fold increase in V-max was observed, but the apparent affinity decreased 5.5-fold. Thus, it is possible to propose an application of this multifunctional extract containing both invertase and beta-glucosidase to degrade plant biomass, thus increasing the concentration of monosaccharides obtained from sucrose and cellobiose.

Structural and functional characterization of the chaperone Hsp70 from sugarcane. Insights into conformational changes during cycling from cross-linking/mass spectrometry assays

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Espécies ácidas gasosas e íons majoritários no material particulado atmosférico de uma região agriícola do Mato Grosso

Pós-graduação em Química - IQ

Efeito da aldosterona e da espironolactona na hipertrofia ventricular esquerda em pacientes com doença renal crônica em hemodiálise

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Utilização de composto orgânico de peixe em adubação de capim-marandu

Pós-graduação em Zootecnia - FCAV

Long-term obesity promotes alterations in diastolic function induced by reduction of phospholamban phosphorylation at serine-16 without affecting calcium handling

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Daily photosynthesis, water relations, and ion concentrations of uuonymus irrigated with treated wastewater

Euonymus japonica Thunb. (euonymus) plants were submitted for 9 months to two irrigation treatments using water from different sources: a control (C) water with electrical conductivity (EC) less than 1.2 dS.m(-1) and reclaimed wastewater (RW) with EC approximate to 4 dS.m(-1). At the end of the experiment, no differences in the total dry weight were observed between treatments, whereas the leaf dry mass increased (to the detriment of the root part in RW plants). Throughout the day, the stem water potential (Psi(stem)) of the RW plants was lower than in C, whereas stomatal conductance (g(S)) was slightly reduced in RW from 0800 HR to 1200 HR, but no significant variation in photosynthesis (P-n) or energy conversion efficiency (F'(v)/F'(m)) in photosystem II was detected through the effect of salinity. Gas exchange and fluorescence showed a tendency to increase after midday in plants treated with RW. The photosynthetic behavior and fluorescence of RW plants may have been related to the nitrogen and chlorophyll content of the leaves, confirming the resistance of the photosynthetic mechanism to salinity in this species in these conditions. The toxic effects produced by high concentrations of boron (B), sodium (Na+) and chloride (Cl-) were offset by the effect of other ions like magnesium (Mg2+), potassium (K+), and phosphorus (P) in plants irrigated with RW, thus improving their physiological status without decreasing their ornamental value.

Taxonomia molecular e filogeografia de Hypostomus strigaticeps (Teleostei: loricariidae) na bacia do alto rio Paraná

Buscando identificar marcadores populacionais que indiquem supostos mecanismos de isolamento entre as populações, no presente trabalho foram realizadas análises filogenéticas e filogeográficas em populações de Hypostomus strigaticeps, com base em sequências de DNA mitocondrial do gene ATPase 8/6. Um total de 32 exemplares provenientes de 11 populações de quatro sub-bacias: rio Mogi-Guaçu (duas), rio Paranapanema (cinco), rio Tietê (três) e Rio do Peixe (um), tiveram DNA extraído e o gene ATPase 8/6 completamente amplificado (840 pares de base) e sequenciado. As sequências obtidas foram alinhadas com o programa Bioedit, as análises filogenéticas foram realizadas no programa MEGA 5.0 através do método de Neighbor-Joining, Máxima Parcimônia e Minimun-Evolution, com 1000 réplicas de boostrap. Para as análises filogeográficas as sequências foram analisadas no programa TCS. As análises filogenéticas mostraram que a espécie forma uma unidade monofilética composta por duas linhagens: “TG” com representantes das populações dos rios Tietê, Mogi-Guaçu e Rio do Peixe, e “PC” com representantes dos rios Paranapanema e reservatório de Chavantes. A divergência genética da linhagem “TG” é de 0,1% e da linhagem “PP” é de 0,2%, enquanto a divergência genética entre as duas linhagens é de cerca de 1%. Na análise filogeográfica observou-se a existência de seis haplótipos (A-H), sendo o haplótipo A considerado ancestral para as populações analisadas. Apenas os representantes da bacia do Tietê possuem o haplótipo ancestral. Os haplótipos A, B e F possuem a maior frequência (18,51%). Os resultados obtidos para uma população do Mogi-guaçu (Cachoeira de Emas), mostram que estes peixes são muito distantes das demais populações de H. strigaticeps, tanto no ponto de vista filogenético quanto no ponto de vista fitogeográfico... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Variabilidade genética e filogeografia de populações de Prochilodus lineatus (Pisces: prochilodontidae) das bacias dos rios Paraguai-Paraná e da bacia Amazônica: bases para programas de conservação e de psicultura

A espécie Prochilodus lineatus, considerada um migrador por excelência, possui intensa ocorrência durante a migração reprodutiva. São peixes de elevado valor econômico e a sua adaptação em cativeiro os tornam altamente interessantes para desenvolvimento de programas de piscicultura. O monitoramento regular das variações genéticas nos estoques é importante em programas de conservação, evitando o declínio da variabilidade genética, essencial para a conservação das espécies. No entanto, os poucos dados moleculares populacionais para Prochilodus lineatus justificam a presente proposta. Nesse sentido, tivemos como objetivo caracterizar a variabilidade genética e estabelecer as relações filogeográficas entre 6 populações de P. lineatus das bacias dos rios Paraguai (2 do rio Paraguai e 3 do rio Cuiabá, MT) e Paraná (1 do rio Mogi-Guaçu, SP), num total de 34 indivíduos. Outros 16 indivíduos dos rios: da Prata, Uruguai, Paraná, Bermejo, Paraguai, Amazonas e Madeira, cujas sequências foram obtidas do National Center for Biotechnology Information (Genbank), foram analisados, totalizando assim, 50 indivíduos. Como grupo externo foi utilizado Salminus brasiliensis. O estudo foi realizado através das análises das sequências do gene mitocondrial ATPase 8/6. O interesse do uso de um gene mitocondrial está na vasta literatura que esse possui em análises filogenéticas e na confiança que existe nos dados gerados de tais análises. O gene citado foi completamente sequenciado (842pb), as análises filogenéticas foram conduzidas pelos métodos “Neighbor Joining (NJ)”, “Minimum Evolution (ME)” e “Máxima Parcimônia (MP)”, com 1000 réplicas de bootstrap no programa MEGA 5.0. Para análises filogeográficas as sequências foram analisadas no programa TCS e no programa Arlequin. Os resultados auxiliarão em uma melhor compreensão da história evolutiva, migração... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)

Produção e avaliação da estabilidade de enzimas fúngicas

As enzimas estão presentes em todas as células vivas, onde exercem a função de catalisadores das reações que compõem as vias catabólicas e anabólicas do metabolismo celular. Esses biocatalisadores são moléculas de proteínas e seu poder catalítico está associado à conformação nativa, que depende de condições específicas de pH, temperatura e força iônica do meio. Os micro-organismos são bastante atrativos para a indústria, pois possibilitam a produção de enzimas por processos fermentativos em larga escala com regularidade necessária e simplicidade na requisição nutricional. Assim, embora alguns biocatalisadores sejam extraídos de tecidos animais e vegetais, as enzimas industriais são, em sua maior parte, obtidas a partir de micro-organismos. Este trabalho teve como objetivo a produção das enzimas lipase e β-glucanase a partir dos fungos Aspergillus niger e Trichoderma reesei, respectivamente, em diferentes meios de cultura, para determinar as condições de maior produção da enzima em questão. As enzimas produzidas em agitador orbital foram obtidas a partir da filtração do produto da fermentação, precipitação com sulfato de amônio e liofilização. Após a produção e precipitação a atividade das enzimas e a concentração de proteínas foram quantificadas, os parâmetros cinéticos foram determinados frente a diferentes pHs, temperaturas e força iônica do meio. A lipase apresentou melhor atividade a 30°C e em pH 6,0. A presença dos íons Mg2+ e Zn2+ levaram a um aumento na atividade da enzima. A β-glucanase apresentou maiores atividades quando submetidas a 37°C e pH 5,0. Os íons Mg2+, Cu2+ e Ca2+ induziram melhor a atividade enzimática.

Qualidade e erodibilidade de latossolos sob mata e cultivo de cana-de-açúcar

Pós-graduação em Agronomia (Ciência do Solo) - FCAV

Efeito do uso do solo sobre seus atributos na microrregião de Chapadinha-MA

Pós-graduação em Agronomia (Ciência do Solo) - FCAV

Uso de probiótico e óleos essenciais na ração sobre a microbiota intestinal, atividade de enzimas digestivas e a expressão de genes relacionados aos processos de digestão e absorção de nutrientes em frangos

Pós-graduação em Zootecnia - FCAV

Antidepressivo modula o comportamento e a expressão gênica das cadeias de miosina, serca2 e fosfolambam em ratos com insuficiência aórtica?

Introduction: Aortic insufficiency (AoI), a volume overload, is characterized by the diastolic reflux of blood from the regurgitating aorta to the left ventricle. This effect results from malfunctioning aortic cusps. The main cause of AoI in developing countries is rheumatic fever, including Brazil, and valvar degeneration in developed countries. There is a strong association between cardiovascular diseases and depression. Selective serotonin reuptake inhibitors (SSRI) are one of the most prescribed antidepressants in the world. Previous studies of our laboratory showed that the utilization of a SSRI, paroxetine, improved cardiac function in rats with sub-chronic AoI and reduced the daily ingestion of hypertonic sodium (NaCl 0,3M). Cardiovascular diseases can determine behavior changes like increase of anxiety, and it is yet unknown if AoI would determine anxiety or anhedonia, incapacity of obtaining pleasure through physical or sensorial experiences. A possible target for SSRI action could be a change in the expression of enzyme isoforms that collaborate in the contractile function of the heart muscle, like the heavy chains of myosine, the sarcoplasmatic reticulum Ca2+/ATPase (SERCA) and its regulator protein, phospholamban (PLB). Objectives: Evaluation of behavior parameters for anxiety and anhedonia state and genic expression of a-myosine, b-myosine, SERCA2a and PLB in the heart tissue of rats with subchronic AoI that received treatment with an SSRI (paroxetine) for 4 weeks. Methods: Surgery to induce AoI was performed on male Wistar rats, anxiety was evaluated by the elevated plus-maze (EPM) and state of anhedonia was tested by ingestion of 2% sucrose solution. After euthanasia the heart tissue was collected and total RNA was extracted to be analyzed by the RT-qPCR method. Results: Heart fractional shortening was preserved in rats with AoI that were treated compared to rats with AoI that were not treated. There was no statistically ...

Efeitos da dimerização na estrutura e atividade biológica dos peptídeos antimicrobianos Aureína 1.2 e Magainina 2

Pós-graduação em Biotecnologia - IQ