Immunization with HIV Gag targeted to dendritic cells followed by recombinant New York vaccinia virus induces robust T-cell immunity in nonhuman primates.

Protein vaccines, if rendered immunogenic, would facilitate vaccine development against HIV and other pathogens. We compared in nonhuman primates (NHPs) immune responses to HIV Gag p24 within 3G9 antibody to DEC205 ("DEC-HIV Gag p24"), an uptake receptor on dendritic cells, to nontargeted protein, with or without poly ICLC, a synthetic double stranded RNA, as adjuvant. Priming s.c. with 60 μg of both HIV Gag p24 vaccines elicited potent CD4(+) T cells secreting IL-2, IFN-γ, and TNF-α, which also proliferated. The responses increased with each of three immunizations and recognized multiple Gag peptides. DEC-HIV Gag p24 showed better cross-priming for CD8(+) T cells, whereas the avidity of anti-Gag antibodies was ∼10-fold higher with nontargeted Gag 24 protein. For both protein vaccines, poly ICLC was essential for T- and B-cell immunity. To determine whether adaptive responses could be further enhanced, animals were boosted with New York vaccinia virus (NYVAC)-HIV Gag/Pol/Nef. Gag-specific CD4(+) and CD8(+) T-cell responses increased markedly after priming with both protein vaccines and poly ICLC. These data reveal qualitative differences in antibody and T-cell responses to DEC-HIV Gag p24 and Gag p24 protein and show that prime boost with protein and adjuvant followed by NYVAC elicits potent cellular immunity.

Metal complexation by electroanalytical techniques: hard- and soft-modelling approaches

En la investigació de la complexació de metalls mitjançant eines electroanalítiques són emprades dues aproximacions generals. La primera, anomenada de modelatge dur (hardmodelling), es basa en la formulació d'un model fisicoquímic conjunt per als processos electròdic i de complexació i en la resolució analítica o numèrica del model. Posteriorment, l'ajust dels paràmetres del model a les dades experimentals donarà la informació desitjada sobre el procés de complexació. La segona aproximació, anomenada de modelatge tou (soft-modelling), es basa en la identificació d'un model de complexació a partir de l'anàlisi numèrica i estadística de les dades, sense cap assumpció prèvia d'un model. Aquesta aproximació, que ha estat extensivament emprada amb dades espectroscòpiques, ho ha estat poquíssim amb dades electroquímiques. En aquest article tractem de la formulació d'un model (hard-modelling) per a la complexació de metalls en sistemes amb mescles de lligands, incloent-hi lligands macromoleculars, i de l'aplicació d

Estudio de la accesibilidad de los documentos cientificos en soporte digital

Resumen: El artículo analiza los problemas de accesibilidad que actualmente presentan los artículos científicos en soporte digital. El estudio se centra en los aspectos de facilidad de uso del contenido de los documentos digitales según la forma en que se publiquen, sin entrar en el estudio de los distintos sistemas de recuperación. Se analizan los dos formatos más utilizados para la publicación de artículos científicos en soporte digital: HTML y PDF, estudiando el desempeño lector en relación a la presencia de sumarios o de tablas internas o vinculadas. El estudio se ha realizado con dos colectivos: 30 sujetos ciegos, usuarios de Jaws, contactados gracias a la mediación de la Fundación ONCE, y 30 sujetos no ciegos, profesores del Departamento de Biblioteconomía y Documentación de la Universidad de Barcelona. El estudio muestra que la localización de los datos contenidos en tablas se ve facilitada en documentos HTML por la inclusión de un sumario que vincule con la tabla, así como la inclusión de tablas completas en el cuerpo del documento HTML facilita la actividad lectora por parte de los usuarios ciegos. A nivel metodológico la presente investigación aporta dos novedades relevantes respecto a la literatura existente en los estudios de usabilidad con ciegos: estudia la usabilidad del formato PDF y es un test de usabilidad cuantitativo; este último hecho dificulta su comparación con la mayoría de artículos publicados. Abstract: This paper analyses the problems of accessibility posed by scientific articles published in digital format, focusing on the ease of use of their content with respect to the form in which they are published (irrespective of the recovery system). The two most widely used formats for the publication of scientific articles in digital format, HTML and PDF, are analysed, examining reader performance in relation to the presence of contents lists or internal or linked tables. The study involved two groups: 30 blind subjects, all JAWS users, contacted through the ONCE Foundation, and 30 sighted subjects, lecturers in the Department of Librarianship and Documentation of the University of Barcelona. The results shows the location of data in tables is easier in HTML documents through the inclusion of a contents list linked to these tables. Further, the inclusion of complete tables in the body of HTML document facilitates the reading activity of blind users. At the methodological level, this work reports two novelties with respect to the existing literature on usability by blind people: it examines the usability of the PDF format, and discusses a quantitative usability test. The latter hinders comparison with the majority of published articles.

Cloning and functional expression of the human islet GLP-1 receptor. Demonstration that exendin-4 is an agonist and exendin-(9-39) an antagonist of the receptor.

A complementary DNA for a glucagon-like peptide-1 receptor was isolated from a human pancreatic islet cDNA library. The isolated clone encoded a protein with 90% identity to the rat receptor. In stably transfected fibroblasts, the receptor bound [125I]GLP-1 with high affinity (Kd = 0.5 nM) and was coupled to adenylate cyclase as detected by a GLP-1-dependent increase in cAMP production (EC50 = 93 pM). Two peptides from the venom of the lizard Heloderma suspectum, exendin-4 and exendin-(9-39), displayed similar ligand binding affinities to the human GLP-1 receptor. Whereas exendin-4 acted as an agonist of the receptor, inducing cAMP formation, exendin-(9-39) was an antagonist of the receptor, inhibiting GLP-1-induced cAMP production. Because GLP-1 has been proposed as a potential agent for treatment of NIDDM, our present data will contribute to the characterization of the receptor binding site and the development of new agonists of this receptor.

Tissue distribution of the Ankara strain of vaccinia virus (MVA) after mucosal or systemic administration.

MVA is a candidate vector for vaccination against pathogens and tumors. Little is known about its behaviour in mucosal tissues. We have investigated the fate and biosafety of MVA, when inoculated by different routes in C57BL/6 mice. Intranasal inoculation targeted the virus to the nasal associated lymphoid tissue and the lungs, whereas systemic inoculation led to distribution of MVA in almost all lymphoid organs, lungs and ovaries. Intravaginal, intrarectal and intragastric inoculations failed to induce efficient infection. After 48 h no virus was detectable any more in the organs analyzed. Upon intranasal inoculation, no inflammatory reactions were detected in the central nervous system as well as the upper and lower airways. These results show the tropism of MVA and indicate that high doses of recombinant MVA are safe when nasally administered, a vaccination route known to elicit strong cellular and humoral immune responses in the female genital tract.

NFκB activation by modified vaccinia virus as a novel strategy to enhance neutrophil migration and HIV-specific T-cell responses.

Neutrophils are antigen-transporting cells that generate vaccinia virus (VACV)-specific T-cell responses, yet how VACV modulates neutrophil recruitment and its significance in the immune response are unknown. We generated an attenuated VACV strain that expresses HIV-1 clade C antigens but lacks three specific viral genes (A52R, K7R, and B15R). We found that these genes act together to inhibit the NFκB signaling pathway. Triple ablation in modified virus restored NFκB function in macrophages. After virus infection of mice, NFκB pathway activation led to expression of several cytokines/chemokines that increased the migration of neutrophil populations (Nα and Nβ) to the infection site. Nβ cells displayed features of antigen-presenting cells and activated virus-specific CD8 T cells. Enhanced neutrophil trafficking to the infection site correlated with an increased T-cell response to HIV vector-delivered antigens. These results identify a mechanism for poxvirus-induced immune response and alternatives for vaccine vector design.

Innate immune sensing of modified vaccinia virus Ankara (MVA) is mediated by TLR2-TLR6, MDA-5 and the NALP3 inflammasome.

Modified vaccinia virus Ankara (MVA) is an attenuated double-stranded DNA poxvirus currently developed as a vaccine vector against HIV/AIDS. Profiling of the innate immune responses induced by MVA is essential for the design of vaccine vectors and for anticipating potential adverse interactions between naturally acquired and vaccine-induced immune responses. Here we report on innate immune sensing of MVA and cytokine responses in human THP-1 cells, primary human macrophages and mouse bone marrow-derived macrophages (BMDMs). The innate immune responses elicited by MVA in human macrophages were characterized by a robust chemokine production and a fairly weak pro-inflammatory cytokine response. Analyses of the cytokine production profile of macrophages isolated from knockout mice deficient in Toll-like receptors (TLRs) or in the adapter molecules MyD88 and TRIF revealed a critical role for TLR2, TLR6 and MyD88 in the production of IFNbeta-independent chemokines. MVA induced a marked up-regulation of the expression of RIG-I like receptors (RLR) and the IPS-1 adapter (also known as Cardif, MAVS or VISA). Reduced expression of RIG-I, MDA-5 and IPS-1 by shRNAs indicated that sensing of MVA by RLR and production of IFNbeta and IFNbeta-dependent chemokines was controlled by the MDA-5 and IPS-1 pathway in the macrophage. Crosstalk between TLR2-MyD88 and the NALP3 inflammasome was essential for expression and processing of IL-1beta. Transcription of the Il1b gene was markedly impaired in TLR2(-/-) and MyD88(-/-) BMDM, whereas mature and secreted IL-1beta was massively reduced in NALP3(-/-) BMDMs or in human THP-1 macrophages with reduced expression of NALP3, ASC or caspase-1 by shRNAs. Innate immune sensing of MVA and production of chemokines, IFNbeta and IL-1beta by macrophages is mediated by the TLR2-TLR6-MyD88, MDA-5-IPS-1 and NALP3 inflammasome pathways. Delineation of the host response induced by MVA is critical for improving our understanding of poxvirus antiviral escape mechanisms and for designing new MVA vaccine vectors with improved immunogenicity.

Systems analysis of MVA-C induced immune response reveals its significance as a vaccine candidate against HIV/AIDS of clade C.

Based on the partial efficacy of the HIV/AIDS Thai trial (RV144) with a canarypox vector prime and protein boost, attenuated poxvirus recombinants expressing HIV-1 antigens are increasingly sought as vaccine candidates against HIV/AIDS. Here we describe using systems analysis the biological and immunological characteristics of the attenuated vaccinia virus Ankara strain expressing the HIV-1 antigens Env/Gag-Pol-Nef of HIV-1 of clade C (referred as MVA-C). MVA-C infection of human monocyte derived dendritic cells (moDCs) induced the expression of HIV-1 antigens at high levels from 2 to 8 hpi and triggered moDCs maturation as revealed by enhanced expression of HLA-DR, CD86, CD40, HLA-A2, and CD80 molecules. Infection ex vivo of purified mDC and pDC with MVA-C induced the expression of immunoregulatory pathways associated with antiviral responses, antigen presentation, T cell and B cell responses. Similarly, human whole blood or primary macrophages infected with MVA-C express high levels of proinflammatory cytokines and chemokines involved with T cell activation. The vector MVA-C has the ability to cross-present antigens to HIV-specific CD8 T cells in vitro and to increase CD8 T cell proliferation in a dose-dependent manner. The immunogenic profiling in mice after DNA-C prime/MVA-C boost combination revealed activation of HIV-1-specific CD4 and CD8 T cell memory responses that are polyfunctional and with effector memory phenotype. Env-specific IgG binding antibodies were also produced in animals receiving DNA-C prime/MVA-C boost. Our systems analysis of profiling immune response to MVA-C infection highlights the potential benefit of MVA-C as vaccine candidate against HIV/AIDS for clade C, the prevalent subtype virus in the most affected areas of the world.

Reflexiones a la técnica de instrumentación rotatoria y aplicación clínica del HERO 642

El auge de las técnicas mecánicas, mediante rotación continua, en la preparación del sistema de conductos radiculares obliga a realizar una serie de reflexiones respecto a las ventajas e inconvenientes de las mismas según los diferentes objetivos que se persiguen en esta fase de la terapéutica. Se describe el sistema de instrumentación HERO 642 comparado con otras marcas y se expone la técnica propugnada por los diseñadores, Vulcain JM y Calas P, junto con las modificaciones propuestas por los autores del artículo. Finalmente, se establecen unas premisas fundamentales para el correcto empleo de la instrumentación rotatoria como técnica habitual en el tratamiento de conductos radiculares, en comparación con otros sistemas.

Pla d'acollida per a la integració d'adolescents i joves nouvinguts a la ciutat de Sant Boi de Llobregat

L'estudi que presentem té com a primer objectiu conèixer en profunditat les necessitats dels i les adolescents i joves immigrats i la realitat actual dels diferents serveis per a donar resposta a aquestes necessitats. Un segon objectiu ha estat elaborar conjuntament amb els agents socials i les entitats de Sant Boi un pla d'acollida per facilitar la integració d¿aquests adolescents i joves, així com la coordinació dels diferents agents, entitats i serveis municipals. Per aquest motiu es planteja una investigació col·laborativa amb diferents agents i entitats representatius del teixit social de la població, i amb els/les tècnics/iques de les diferents regidories de l'Ajuntament (joventut, serveis socials, nova ciutadania, participació i educació). Els objectius generals de la investigació són els següents: a) fer una anàlisi de necessitats dels i les adolescents i joves immigrants de la població de Sant Boi amb referència a la seva participació social; b) realitzar un estudi diagnòstic de l'acollida d¿adolescents i joves immigrants en el teixit associatiu i social en el municipi de Sant Boi de Llobregat; c) elaborar un pla d'acollida integral per als i les adolescents i joves nouvinguts a la ciutat de Sant Boi. El disseny de la investigació segueix les fases d¿una avaluació participativa. Al llarg del procés s'ha treballat de forma consensuada entre l'equip de recerca i els agents socials de la zona: Administració pública i entitats d'iniciativa social. L'anàlisi de necessitats i la diagnosi de l'atenció socioeducativa dels i les joves immigrats s'ha desenvolupat a través de dos instruments de recollida d'informació: un qüestionari per als i les joves, fonamentat en un model dinàmic de ciutadania i una entrevista semiestructurada als agents socials de la zona. Les conclusions, les hem classificat segons els eixos i àmbits del nou Programa municipal transversal per a nova ciutadania de Sant Boi i en forma de propostes a partir de les necessitats detectades.

Elaboració d'un programa orientat al desenvolupament de la ciutadania intercultural a través del treball amb xarxes comunitàries: un estudi de cas

El nostre estudi consisteix a facilitar el desenvolupament, des d'una visió integral, d'un pla de ciutadania i immigració per a localitats de menys de 4.000 habitants amb un percentatge de població estrangera superior al 10 %. La nostra recerca es fa a partir d'un estudi de cas. En aquest projecte hem intentat aprofundir en la realitat de Sant Quintí de Mediona, fent un diagnòstic de tipus participatiu sobre els canvis experimentats pels processos migratoris en aquesta població i establint una priorització de les necessitats observades. Hem estudiat especialment la xarxa d'entitats que hi ha a la població i la seva obertura real que hi participin persones immigrades. A partir d'aquest estudi, s'ha elaborat i negociat un programa orientat al desenvolupament d'una ciutadania intercultural, basada en la convivència com a eix fonamental.

Pla d'acollida per a la integració d'adolescents i joves nouvinguts a la ciutat de Sant Boi de Llobregat

L'estudi que presentem té com a primer objectiu conèixer en profunditat les necessitats dels i les adolescents i joves immigrats i la realitat actual dels diferents serveis per a donar resposta a aquestes necessitats. Un segon objectiu ha estat elaborar conjuntament amb els agents socials i les entitats de Sant Boi un pla d'acollida per facilitar la integració d¿aquests adolescents i joves, així com la coordinació dels diferents agents, entitats i serveis municipals. Per aquest motiu es planteja una investigació col·laborativa amb diferents agents i entitats representatius del teixit social de la població, i amb els/les tècnics/iques de les diferents regidories de l'Ajuntament (joventut, serveis socials, nova ciutadania, participació i educació). Els objectius generals de la investigació són els següents: a) fer una anàlisi de necessitats dels i les adolescents i joves immigrants de la població de Sant Boi amb referència a la seva participació social; b) realitzar un estudi diagnòstic de l'acollida d¿adolescents i joves immigrants en el teixit associatiu i social en el municipi de Sant Boi de Llobregat; c) elaborar un pla d'acollida integral per als i les adolescents i joves nouvinguts a la ciutat de Sant Boi. El disseny de la investigació segueix les fases d¿una avaluació participativa. Al llarg del procés s'ha treballat de forma consensuada entre l'equip de recerca i els agents socials de la zona: Administració pública i entitats d'iniciativa social. L'anàlisi de necessitats i la diagnosi de l'atenció socioeducativa dels i les joves immigrats s'ha desenvolupat a través de dos instruments de recollida d'informació: un qüestionari per als i les joves, fonamentat en un model dinàmic de ciutadania i una entrevista semiestructurada als agents socials de la zona. Les conclusions, les hem classificat segons els eixos i àmbits del nou Programa municipal transversal per a nova ciutadania de Sant Boi i en forma de propostes a partir de les necessitats detectades.