816 resultados para Electrophoretic depositions


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Esse trabalho teve por objetivo investigar a trajetória das mulheres negras diretoras de escola pública e o processo de construção de sua identidade social, cultural, de gênero e raça. De fato, as mulheres negras em questão constroem suas identidades nadando entre águas profundas e revoltas: a das relações de gênero e a das relações raciais. A pesquisa permitiu-nos desvendar o processo seletivo pelo qual passam essas mulheres que conseguiram romper o duplo bloqueio formado pelas relações de gênero e de raça e atingiram a posição profissional de diretoras de escola pública. A questão central que norteia essa pesquisa diz respeito à trajetória de vida da mulher negra que optou pela carreira do magistério, as intercorrências encontradas ao longo de sua trajetória pessoal, de formação acadêmica e profissional, suas experiências, frustrações, expectativas, preconceitos e discriminações sofridos na caminhada até chegar ao exercício de sua atividade pública, sua ascensão social, o ingresso na carreira pública e as relações de poder que perpassam as questões de gênero e raça. Aborda ainda como essas intercorrências incidem sobre o processo de construção da identidade dessas mulheres negras e de suas relações com seus colegas brancos, homens e mulheres. A coleta de dados empíricos foi realizada através da história oral representada pela memória dessas mulheres, baseada nos depoimentos escritos e em entrevistas semi-estruturadas. Os depoimentos colhidos permitiram reunir material que foram interpretados segundo as relações de poder elaboradas por Foucault e que nos possibilitam a compreensão e uma reflexão do processo de construção das identidades individual e coletiva.

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Numa perspectiva sociológica, este trabalho tem o objetivo de identificar o perfil profissional do supervisor de ensino que atua na Secretaria de Estado da Educação de São Paulo, verificando se sua atuação está voltada ao pedagógico ou ao administrativo e qual o compromisso político e as concepções educacionais destes profissionais. Apoiando-se em Tragtenberg, Silva Jr e Huert, entre outros autores que abordam, especificamente, a supervisão de ensino, procurou-se fazer uma analise histórica da legislação, de planilhas e dos dados que foram colhidos através de depoimentos e entrevistas com supervisores de ensino efetivos de três Diretorias de Ensino da Grande São Paulo. O resultado da pesquisa aponta para a predominância de um perfil burocrático e de fiscalização na ação do supervisor de ensino, bem como de executor das políticas públicas e não partícipe da sua elaboração. O supervisor de ensino é um representante de um poder político que favorece uma determinada ordem, mesmo que exista uma tentativa de superação de uma representatividade unilateral dentro da supervisão de ensino.(AU)

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Este trabalho teve como propósito a análise da gestão democrática de uma escola do Sistema S, especificamente o Centro Educacional SESI Nº 406, localizado na cidade de Mauá, uma das 211 escolas que compõem a Rede Escolar SESI do Estado de São Paulo, no período de 2001 a 2007, tendo como referência a análise do contexto histórico das lutas travadas pela democratização da sociedade no período que sucede a ditadura militar. O ensino como direito de todos, os mecanismos de participação, a inserção da comunidade escolar nos processos decisórios e a construção da gestão democrática da escola, foram movimentos que acompanharam o processo de redemocratização da sociedade no início da década de 1980. O estudo discute os caminhos trilhados para a conquista da gestão democrática, identificando mudanças e as transformações ocorridas no período em questão. Utilizamos como recurso para a coleta de dados a análise de documentos da instituição, a observação participante, a coleta de depoimentos escritos e gravados de alunos, professores e demais integrantes da comunidade escolar. Os dados desta pesquisa revelam que a mudança de postura do gestor, no sentido de possibilitar a diluição do poder, é imprescindível para a ruptura dos modelos de administração verticalizada e centralizadora, tendo este o gestor o papel fundamental de articulador das ações que priorizem o coletivo. Os resultados evidenciam o reconhecimento positivo do conjunto de atores sociais entrevistados quanto aos avanços da gestão democrática, considerada é um processo em construção. Concluímos com Coutinho (2004), que a democracia deve ser entendida não como um estado, mas sempre como um processo.

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O presente trabalho tem o objetivo de analisar o Programa Ler e Escrever das escolas estaduais de São Paulo, apontando seus possíveis benefícios e principais problemas. O programa representa mais uma tentativa do sistema público de ensino no sentido de reverter o quadro de precariedade apresentado pelos alunos da escola pública no que se refere ao processo de alfabetização. No primeiro capítulo encontram-se considerações pertinentes a alfabetização e concepções de ensino. No segundo capítulo é apresentada a legislação que respalda o programa e também a forma como vem sendo aplicado. O terceiro capítulo trata dos procedimentos metodológicos. Foram desenvolvidos questionários para professores alfabetizadores e professores-coordenadores e elaborados quadros de análise para classificar os depoimentos coletados a partir dos pares de categorias dialéticas do referencial teórico-metodológico construído por Alves (2000). Alguns dos professores entrevistados acreditam que o programa traz idéias novas, porém seu referencial teórico é fundado no construtivismo, que já orienta os documentos institucionais da educação brasileira há mais de 25 anos.(AU)

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Este trabalho tem por objetivo levantar e analisar algumas concepções sobre a avaliação escolar em Matemática e sobre a Avaliação em Matemática do Sistema de Avaliação de Rendimento Escolar do Estado de São Paulo (SARESP), procurando desvendar a realidade que é encontrada nas escolas paulistas referente à avaliação dessa disciplina. O intuito é verificar os pontos de vista dos alunos, professores, gestores escolares, família e especialistas para articular uma organização escolar que desenvolva um processo permanente de construção do conhecimento. Para verificar quais as concepções referentes às avaliações já citadas foram adotadas entrevistas, questionários e desenhos realizados pelos alunos, mostrando o que pensam sobre as avaliações previamente aplicadas. As entrevistas somente foram aplicadas aos discentes, pois seus depoimentos são fundamentais para a pesquisa. Para a concretização destas entrevistas foi solicitado aos alunos à produção de desenhos que representassem o que são as avaliações já mencionadas anteriormente. Levantamos uma grande quantidade de informações a partir desses depoimentos e desenhos sobre as avaliações pesquisadas, a opinião que possuem sobre a escola, seus professores de Matemática, de como são ministradas as aulas e também sobre a forma de avaliar dos professores. Os questionários foram dirigidos ao corpo docente de Matemática, diretor, vice-diretor, professor coordenador, supervisor de ensino, família e especialistas em Educação, Psicologia da Educação e Matemática para verificar também sua concepção sobre avaliação escolar em Matemática e sobre a prova de Matemática do SARESP, que fazem parte fundamental de todo o processo de avaliação, pois, direta ou indiretamente, estão ligados a ela e são responsáveis pelos seus resultados. Na análise dos dados obtidos foram destacados, nos depoimentos dos questionários e das entrevistas, as,unidades significativas referentes aos processos de avaliações pesquisadas, para com isso analisarmos e verificarmos quais são as opiniões e fatos que podem ajudar ou atrapalhar todo o processo de Avaliação em Matemática, tanto o escolar quanto o de grande escala como o SARESP. Também foram analisados o que os alunos representaram na produção dos desenhos. As imagens adquiridas demonstraram muitas informações sobre o que os discentes pensam sobre a Avaliação em Matemática ao desenhar monstros, corações, números e até mesmo pontos de exclamação e de interrogação. Este estudo foi desenvolvido em uma escola pública da rede Estadual de ensino do Estado de São Paulo. Essa pesquisa investiga o que realmente está acontecendo em todo o processo de Avaliação em Matemática, possibilitando identificar no que cada sujeito envolvido neste processo pode contribuir ou atrapalhar para sua concretização, evidenciando assim áreas críticas efavoráveis sobre a tão temida e polêmica Avaliação em Matemática.

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O presente estudo teve como objetivos investigar a opinião do enfermeiro sobre a Sistematização da Assistência de Enfermagem, verificar os efeitos da Sistematização da Assistência de Enfermagem na organização do trabalho do enfermeiro e identificar se a Implementação da Sistematização da Assistência de Enfermagem causa sofrimento psíquico nesses profissionais. Trata-se de uma pesquisa qualitativa, realizada com 22 enfermeiros que atuam em uma instituição pública de saúde do grande ABCD, no Estado de São Paulo. Foram utilizadas entrevistas semi-estruturadas, por meio de gravação dos depoimentos. A análise dos dados foi realizada buscando apreender os conteúdos representacionais sobre os efeitos da Implementação da Sistematização da Assistência de Enfermagem nos Enfermeiros. As categorias de análise sobre a influência da SAE nos sujeitos foram: a)conhecimento sobre a SAE: tem conhecimento e tem pouco conhecimento; b)opinião sobre a SAE: favorável e parcialmente favorável; c)desenvolvimento da SAE no contexto do trabalho: ocorre parcialmente e não ocorre; d)influência da Implementação da SAE no desempenho das tarefas: afeta e não afeta; e)ocorrência de sofrimento psíquico na Implementação da SAE : há e não há expressões diretas de sofrimento psíquico. Os dados revelaram que os efeitos da Implementação da Sistematização da Assistência de Enfermagem nos Enfermeiros causam sofrimento psíquico, resultantes das condições de trabalho inadequadas para promover a Sistematização da Assistência de Enfermagem.

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We recently reported that methionine-loaded human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) exported homocysteine (Hcy) and were associated with hydroxyl radical generation and oxidation of lipids in LDL. Herein we have analysed the Hcy-induced posttranslational modifications (PTMs) of LDL protein. PTMs have been characterised using electrophoretic mobility shift, protein carbonyl ELISA, HPLC with electrochemical detection and Western blotting of 3-nitrotyrosine, and LDL uptake by scavenger receptors on monocyte/macrophages. We have also analysed PTMs in LDL isolated from rheumatoid (RA) and osteo-(OA) arthritis patients with cardiovascular disease (CVD). While reagent Hcy (<50 μM) promoted copper-catalysed LDL protein oxidation, Hcy released from methionine-loaded HUVECs promoted LDL protein nitration. In addition, LDL nitration was associated with enhanced monocyte/macrophage uptake when compared with LDL oxidation. LDL protein nitration and uptake by monocytes, but not carbonyl formation, was elevated in both RA and OA patients with CVD compared with disease-matched patients that had no evidence of CVD. Moreover, a direct correlation between plasma total Hcy (tHcy) and LDL uptake was observed. The present studies suggest that elevated plasma tHcy may promote LDL nitration and increased scavenger receptor uptake, providing a molecular mechanism that may contribute to the clinical link between CVD and elevated plasma tHcy. © 2005 Elsevier Inc. All rights reserved.

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Generation of neoepitopes on apolipoprotein B within oxidised low-density lipoprotein (LDL) is important in the unregulated uptake of LDL by monocytic scavenger receptors (CD36, SR-AI, LOX-1). Freshly isolated LDL was oxidised by peroxyl radicals generated from the thermal decomposition of an aqueous azo-compound. We describe that formation of carbonyl groups on the protein component is early as protein oxidation was seen after 90min. This is associated with an increased propensity for LDL uptake by U937 monocytes. Three classes of antioxidants (quercetin, dehydroepiandrosterone (DHEA) and ascorbic acid) have been examined for their capacity to inhibit AAPH-induced protein oxidation, (protein carbonyls, Δ electrophoretic mobility and LDL uptake by U937 monocytes). CD36 expression was assessed by flow cytometry and was seen to be unaltered by oxidised LDL uptake. All three classes were effective antioxidants, quercetin (P<0.01), ascorbic acid (P<0.01), DHEA (P<0.05). As LDL protein is the control point for LDL metabolism, the degree of oxidation and protection by antioxidants is likely to be of great importance for (patho)-physiological uptake of LDL by monocytes. © 2003 Elsevier B.V. All rights reserved.

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The aim of the work described in this paper was two-fold: (1) the purification of the hydroxylase component of the MSAMO to electrophoretic homogeneity using a four-step chromatographic strategy and (2) the crystallization of the two-component hydroxylase of the MSAMO in order to enhance our understanding of the precise three-dimensional structure of the MSAMO, thus yielding an insight into the nature of the active site of this enzyme. Optimised crystallization conditions were identified allowing growth of crystals of the hydroxylase component of the MSAMO within five days. Crystals exhibited a brown colour suggesting the presence on an intact Rieske-iron sulfur centre and diffracted to 7.0 Å when a few degrees of data were evaluated on a beam line X11. © 2006 Elsevier Inc. All rights reserved.

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Humic substances are the major organic constituents of soils and sediments. They are heterogeneous, polyfunctional, polydisperse, macromolecular and have no accurately known chemical structure. Their interactions with radionuclides are particularly important since they provide leaching mechanisms from disposal sites. The central theme to this research is the interaction of heavy metal actinide analogues with humic materials. Studies described focus on selected aspects of the characteristics and properties of humic substances. Some novel approaches to experiments and data analysis are pursued. Several humic substances are studied; all but one are humic acids, and those used most extensively were obtained commercially. Some routine characterisation techniques are applied to samples in the first instance. Humic substances are coloured, but their ultra-violet and visible absorption spectra are featureless. Yet, they fluoresce over a wide range of wavelengths. Enhanced fluorescence in the presence of luminescent europium(III) ions is explained by energy transfer from irradiated humic acid to the metal ion in a photophysical model. Nuclear magnetic resonance spectroscopy is applied to the study of humic acids and their complexes with heavy metals. Proton and carbon-13 NMR provides some structural and functionality information; Paramagnetic lanthanide ions affect these spectra. Some heavy metals are studied as NMR nuclei, but measurements are restricted by their sensitivity. A humic acid is fractionated yielding a broad molecular weight distribution. Electrophoretic mobilities and particle radii determined by Laser Doppler Electrophoretic Light Scattering are sensitive to the conditions of the supporting media, and the concentration and particle size distribution of humic substances. In potentiometric titrations of humate dispersions, the organic matter responds slowly and the mineral acid addition is buffered. Proton concentration data is modelled and a mechanism is proposed involving two key stages, both resulting in proton release after some conformational changes.

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The major cause of death in CF is a continuous inflammation of the lungs colonised with Pseudomonas aeruginosa and occasionally also with Burkholderia cepacia. A combination of serum IgG to LPS and serum PCT levels were found to be good markers for detection of early colonisation with P. aeruginosa. Colomycin sulphomethate (colistin E) is one of the antibiotics used to treat P. aeruginosa infections in CF. Electrophoretic methods were developed to monitor the rate of conversion of colomycin sulphomethate to the active form of the drug. Antimicrobial activity towards P. aeruginosa was generated as the sulphomethate substituents were released. Clinical resistance of P. aeruginosa to colomycin is rare, but a number of isolates have been isolated. Twelve colomycin-resistant clinical isolates were investigated to determine the mechanism of resistance. It was found that the low level of resistance was due to over expression of outer membrane protein H (OprH) in 5 isolates. A novel mechanism of resistance involving modification of the phosphate groups in LPS was identified in one of the isolates. Drugs which reduce inflammation in infected CF lungs would be of great advantage for therapy. Reducing inflammation would preserve the lung function and increase the quality of life for CF patients. Antibiotics like tetracyclines, macrolides and polymyxins were tested for their potential anti-inflammatory effects using cultured human monocytic (U937) cells which secrete the pro-inflammatory cytokines IL1- and TNF- in response to LPS from P. aeruginosa and B. cepacia. It was found that tetracyclines, and especially doxycycline, are good inhibitors of cytokine release by U937 cells and therefore could reduce the inflammatory cascade.

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The Tie receptors (Tie-1 and Tie-2/Tek) are essential for angiogenesis and vascular remodeling/integrity. Tie receptors are up-regulated in tumor-associated endothelium, and their inhibition disrupts angiogenesis and can prevent tumor growth as a consequence. To investigate the potential of anti-gene approaches to inhibit tie gene expression for anti-angiogenic therapy, we have examined triple-helical (triplex) DNA formation at 2 tandem Ets transcription factor binding motifs (designated E-1 and E-2) in the human tie-1 promoter. Various tie-1 promoter deletion/mutation luciferase reporter constructs were generated and transfected into endothelial cells to examine the relative activities of E-1 and E-2. The binding of antiparallel and parallel (control) purine motif oligonucleotides (21-22 bp) targeted to E-1 and E-2 was assessed by plasmid DNA fragment binding and electrophoretic mobility shift assays. Triplex-forming oligonucleotides were incubated with tie-1 reporter constructs and transfected into endothelial cells to determine their activity. The Ets binding motifs in the E-1 sequence were essential for human tie-1 promoter activity in endothelial cells, whereas the deletion of E-2 had no effect. Antiparallel purine motif oligonucleotides targeted at E-1 or E-2 selectively formed strong triplex DNA (K(d) approximately 10(-7) M) at 37 degrees C. Transfection of tie-1 reporter constructs with triplex DNA at E-1, but not E-2, specifically inhibited tie-1 promoter activity by up to 75% compared with control oligonucleotides in endothelial cells. As similar multiple Ets binding sites are important for the regulation of several endothelial-restricted genes, this approach may have broad therapeutic potential for cancer and other pathologies involving endothelial proliferation/dysfunction.

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Poly(Nε-trifluoroacetyl-l-lysine) was used as a model solute to investigate the potential of nonaqueous capillary electrophoresis (NACE) for the characterization of synthetic organic polymers. The information obtained by NACE was compared to that derived from size exclusion chromatography (SEC) experiments, and the two techniques were found to be complimentary for polymer characterization. On one hand, NACE permitted (i) the separation of oligomers according to their molar mass and (ii) the separation of the polymers according to the nature of the end groups. On the other hand, SEC experiments were used for the characterization of the molar mass distribution for higher molar masses. Due to the tendency of the solutes (polypeptides) to adsorb onto the fused-silica capillary wall, careful attention was paid to the rinsing procedure of the capillary between runs in order to keep the capillary surface clean. For that purpose, the use of electrophoretic desorption under denaturating conditions was very effective. Optimization of the separation was performed by studying (i) the influence of the proportion of methanol in a methanol/acetonitrile mixture and (ii) the influence of acetic acid concentration in the background electrolyte. Highly resolved separation of the oligomers (up to a degree of polymerization n of ∼50) was obtained by adding trifluoroacetic acid to the electrolyte. Important information concerning the polymer conformations could be obtained from the mobility data. Two different plots relating the effective mobility data to the degree of polymerization were proposed for monitoring the changes in polymer conformations as a function of the number of monomers.

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Elevated LDL concentration in mid-life increases the risk of developing Alzheimer's disease (AD) in later life. Increased oxidative modification (oxLDL) and nitration is observed during dementia and hypercholesterolemia. We investigated the hypothesis that statin intervention in mid-life mitigates the inflammatory effects of oxLDL on the microvasculature. Human microvascular endothelial cells (HMVEC) were maintained on transwells to mimic the microvasculature and exposed to patient and control LDL. Blood was obtained from statin-naïve, normo- and hyperlipidaemic subjects, AD with vascular dementia (AD-plus) and AD subjects (n=10/group) at baseline. Only hyperlipidaemic subjects with normal cognitive function received 40mg simvastatin intervention/day for three months. Blood was re-analysed from normo- and hyper-lipidaemic subjects after three months. LDL isolated from statin-naïve hyperlipidaemic, AD and AD-plus subjects was more oxidised (agarose gel electrophoretic mobility, protein carbonyl content and 8-isoprostane F2α) compared to control subjects. Statin intervention decreased protein carbonyls (2.5±0.4 Vs 3.95±0.2nmol/mg; P<0.001) and 8-isoprostane F2α (30.4±4.0 pg/ml Vs 43.5±8.42 pg/ml; P<0.05). HMVEC treatment with LDL-lipids from hyperlipidaemic, AD and AD-plus subjects impaired endothelial tight junction expression and decreased total glutathione levels (AD; 18.61±1.3, AD-plus; 16.5±0.7nmol/mg protein) compared to untreated cells (23.8±1.2 vs nmol/mg protein). Basolateral IL-6 secretion was increased by LDL-lipids from hyperlipidaemic (78.4±1.9 pg/ml), AD (63.2±5.9 pg/ml) and AD-plus (80.8±0.9 pg/ml) groups compared to healthy subject lipids (18.6±3.6 pg/ml). LDL-Lipids isolated after statin intervention did not affect endothelial function. In summary, LDL-lipids from hypercholesterolaemic, AD and AD-plus patients are inflammatory to HMVEC. In vivo intervention with statins reduces the damaging effects of LDL-lipids on HMVEC.

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Motivation: In any macromolecular polyprotic system - for example protein, DNA or RNA - the isoelectric point - commonly referred to as the pI - can be defined as the point of singularity in a titration curve, corresponding to the solution pH value at which the net overall surface charge - and thus the electrophoretic mobility - of the ampholyte sums to zero. Different modern analytical biochemistry and proteomics methods depend on the isoelectric point as a principal feature for protein and peptide characterization. Protein separation by isoelectric point is a critical part of 2-D gel electrophoresis, a key precursor of proteomics, where discrete spots can be digested in-gel, and proteins subsequently identified by analytical mass spectrometry. Peptide fractionation according to their pI is also widely used in current proteomics sample preparation procedures previous to the LC-MS/MS analysis. Therefore accurate theoretical prediction of pI would expedite such analysis. While such pI calculation is widely used, it remains largely untested, motivating our efforts to benchmark pI prediction methods. Results: Using data from the database PIP-DB and one publically available dataset as our reference gold standard, we have undertaken the benchmarking of pI calculation methods. We find that methods vary in their accuracy and are highly sensitive to the choice of basis set. The machine-learning algorithms, especially the SVM-based algorithm, showed a superior performance when studying peptide mixtures. In general, learning-based pI prediction methods (such as Cofactor, SVM and Branca) require a large training dataset and their resulting performance will strongly depend of the quality of that data. In contrast with Iterative methods, machine-learning algorithms have the advantage of being able to add new features to improve the accuracy of prediction. Contact: yperez@ebi.ac.uk Availability and Implementation: The software and data are freely available at https://github.com/ypriverol/pIR. Supplementary information: Supplementary data are available at Bioinformatics online.