Influence of transport and time on blood variables commonly measured for the athlete biological passport.

Some recent studies have characterized the stability of blood variables commonly measured for the Athlete Biological Passport. The aim of this study was to characterize the impact of different shipments conditions and the quality of the results returned by the haematological analyzer. Twenty-two healthy male subjects provided five EDTA tubes each. Four shipment conditions (24, 36, 48, 72 h) under refrigerated conditions were tested and compared to a set of samples left in the laboratory also under refrigerated conditions (group control). All measurements were conducted using two Sysmex XT-2000i analyzers. Haemoglobin concentration, reticulocytes percentage, and OFF-score numerical data were the same for samples analyzed just after collection and after a shipment under refrigerated conditions up to 72 h. Detailed information reported especially by the differential (DIFF) channel scatterplot of the Sysmex XT-2000i indicated that there were signs of blood deterioration, but were not of relevance for the variables used in the Athlete Biological Passport. As long as the cold chain is guaranteed, the time delay between the collection and the analyses of blood variables can be extended. Copyright© 2015 John Wiley & Sons, Ltd.

Effects of dietary restraint and oral contraceptives on bone strength and bone turnover in young women

ABSTRACT Introduction The purpose of this study was to assess specific osteoporosis-related health behaviours and physiological outcomes including daily calcium intake, physical activity levels, bone strength, as assessed by quantitative ultrasound, and bone turnover among women between the ages of 18 and 25. Respective differences on relevant study variables, based on dietary restraint and oral contraceptive use were also examined. Methods One hundred women (20.6 ± 0.2 years of age) volunteered to participate in the study. Informed written consent was obtained by all subjects prior to participation. The study and all related procedures were approved by the Brock University Research Ethics Board. Body mass, height, relative body fat, as well as chest, waist and hip circumferences were measured using standard procedures. The 10-item restrained eating subscale of the Dutch Eating Behaviour Questionnaire (DEBQ) was used to assess dietary restraint (van Strien et al., 1986). Daily calcium intake was assessed by the Rapid Assessment Method (RAM) (Hertzler & Frary 1994). Weekly physical activity was documented by the 4-item Godin Leisure-Time Exercise Questionnaire (Godin & Shephard 1985). Bone strength was determined from the speed of sound (SOS) as measured by QUS (Sunlight 7000S). SOS measurements (m/s) were taken of the dominant and non-dominant sides of the distal one third of the radius and the mid-shaft of the tibia. Resting blood samples were collected from all subjects between 9am and 12pm, in order to evaluate the impact of lifestyle factors on biochemical markers of bone turnover. Blood was collected during the early follicular phase of the menstrual cycle (approximately days 1-5) for all subjects. Samples were centrifliged and the serum or plasma was aliquoted into separate tubes and stored at -80°C until analysis. The bone formation markers measured were Osteocalcin (OC), bone specific alkaline phosphatase (BAP) and 25-OH vitamin D. The bone resorption markers measured were the carboxy (CTx) and amino (NTx) terminal telopeptides of type-I collagen crosslinks. All markers were assessed by ELISA. Subjects were divided into high (HDR) and low dietary restrainers (LDR) based on the median DEBQ score, and also into users (BC) and non-users (nBC) of oral contraceptives. A series of multiple one way ANOVA's were then conducted to identify differences between each set of groups for all relevant variables. A two-way ANOVA analysis was used to explore significant interactions between dietary restraint and use of oral contraceptives while a univariate follow-up analysis was also performed when appropriate. Pearson Product Moment Correlations were used to determine relationships among study variables. Results HDR had significantly higher BMI, %BF and circumference measures but lower daily calcium intake than LDR. There were no significant differences in physical activity levels between HDR and LDR. No significant differences were found between BC and nBC in body composition, calcium intake and physical activity. HDR had significantly lower tibial SOS scores than LDR in both the dominant and non-dominant sites. The post-hoc analysis showed that within the non-birth control group, the HDR had significantly lower tibial SOS scores of bone strength when compared to the LDR but Aere were no significant differences found between the two dietary restraint groups for those currently on birth control. HDR had significantly lower levels of OC than LDR and the BC group had lower levels of BAP than the nBC group. Consistently, the follow-up analysis revealed that within those not on birth control, subjects who were classified as HDR had significantly (f*<0.05) lower levels of OC when compared with LDR but no significant differences were observed in bone turnover between the two dietary restraint groups for those currently on birth control. Physical activity was not correlated with SOS scores and bone turnover markers possibly due to the low physical activity variability in this group of women. Conclusion This is the first study to examine the effects of dietary restraint on bone strength and turnover among this population of women. The most important finding of this study was that bone strength and turnover are negatively influenced by dietary restraint independent of relative body fat. In general, the results of the present thesis suggest that dietary restraint, oral contraceptive use, as well as low daily calcium intake and low physical activity levels were widespread behaviours among this population of college-aged women. The young women who were using dietary restraint as a strategy to lose weight, and thus were in the HDR group, despite their higher relative body fat and weight, had lower scores of bone strength and lower levels of markers of bone turnover compared to the low dietary restrainers. Additionally, bone turnover seemed to be negatively affected by oral contraceptives, while bone strength, as assessed by QUS, seemed unaffected by their use in this population of young women. Physical activity (weekly energy expenditure), on the other hand, was not associated with either bone strength or bone tiimover possibly due to the low variability of this variable in this population of young Canadian women.

Isolation and characterization of a chitinase-secreting mutant of mortierella pusilla with altered interaction with the mycoparasite piptocephalis virginiana

Mortierella pusilla is a susceptible host and supports good growth of the mycoparasite, Piptocephalis virginiana. Uninucleate spores of M. pusilla were sUbjected to N-methyl-N'-nitro-nitrosoguanidine (MNNG). To attain a high mutation frequency , a 1o-minute exposure to 10 mg/ml MNNG was used and lead to the survival of about 10 % of the spores. The exposed spores then were plated on chitin or milk plates. Approximately 30,000 colonies were examined after mutagenesis on the screening media. A strain, MUT23 , with abnormal slow growth morphology was found to delay parasitism by £. virginiana. The particular morphology was not due to auxotrophy, because this strain displayed normal hyphae when glucose was used as the sole carbon source. One interesting phenomenon was that MUT23 showed an extensive clearing zone around the colony on colloidal chitin agar after 20-25 d. On the same conditions, wild type strain did not show this phenotype. In addition, the MUT23 strain produced the same normal hypha as the wild type strain when it was grown on colloidal chitin agar. The MUT23 was also able to produce more spores on colloidal chitin agar than on malt-yeast extract and minimal media. The parasite germ tubes formed appressoria at the point of contact on the cell surface of wild type and MUT23 grown for 6 days cell surface but not on the cel surface of MUT23 grown for 2 days. Thus, interaction between MUT23 strain and the mycoparasite was dependent on MUT23 age. The effect of MUT23 filtrate on germination of the parasite was tested. Lysis of germinated spores of the parasite were observed in concentrated MUT23 filtered solution. MUT23 was compared to the wild type strain for their chitinase production in sUbmerged culture. The chitinase isozymes of both wild type and MUT23 were shown by immunoblotting. Eight distinct chitinase molecules were detected. MUT23 showed markedly higher chitinase activity than the wild type cultured in chitin-containing medium. Maximum chitinase activities of MUT23 were 13.5 fold higher at 20 day of the culture then that of wild type.

Light and electron microscope studies of host-parasite relations in a mycoparasite

Light microscope studies of the mycoparasite Piptocephalis virginiana revealed that the cylindrical spores of the parasite became spherical upon germination and produced 1-4 germ tubes. Generally t"l.vO germ tubes were produced by each spore. When this parasite was inoculated on its potential hosts, Choanephora cucurbitarum and Phascolomyces articulosus, the germ tube nearest to the host hypha continued to grow and made contact with the host hypha. The tip of the parasite's germ tube became swollen to form a distinct appressorium. Up to this stage the behavior of the parasite was similar regardless of the nature of the host. In the compatible host-parasite combination, the parasite penetrated the host, established a nutritional relationship and continued to grow to cover the host completely with its buff colored spores in 3-4 days. In the incompatible host-parasite combination, the parasite penetrated the host but its further advance was arrested. As a result of failure to establish a nutritional relationship with the resistant host, the parasite made further attempts to penetrate the host at different sites producing multiple infections. In the absence of nutrition the parasite weakened and the host outgrew the parasite completely. In the presence of a non-host species, Linderina pennispora the parasite continued to grow across the non-host 1).yp_hae vlithout establishing an initial contact. Germination studies showed that the parasite germinated equally well in the presence of host and non-host species. Further electron microscope studies revealed that the host-parasite interaction between P. virginiana and its host, C. cucurbi tarum, was compatible when the host hyphae were young slender, with a thin cell wall of one layer. The parasite appeared to penetrate mechanically by pushing the host-cell wall inward. The host plasma membrane invaginated along the involuted cell wall. The older hyphae of C. cucurbitarum possessed two distinct layers of cell wall and-showed an incompatible interaction when challenged vlith the parasite. At the point of contact, the outer layer of the host-cell wall dissolved, probably by enzymatic digestion, and the inner layer became thickened and developed a papilla as a result of its response to the parasite. The haustoria of the parasite in the old hyphae were always surrounded by a thick, well developed sheath, whereas the haustoria of the same age in the young host mycelium were devoid of a sheath during early stages of infection. Instead, they were in direct contact with the host protoplast. The incompatible interaction between a resistant host, P. articulosus and the parasite showed similar results as with the old hyphae of C. cucurbitarum. The cell wall of P. articulosus appeared thick-with two or more layers even in the 18-22 h-old hyphae. No contact or interaction was established between the parasite and the non-host L. pennispora. The role of cell wall in the resistance mechanism is discussed.

Demographic and genetic attributes of dispersing and resident individuals of an enclosed Microtus pennsylvanicus population

A dispersal polymorphism may exist in emigrants from cyclic populations of Microtus '~nnsylvanicus biasing trap-revealed movements of unenclosed animals in favour of sedentary or colonizing individuals. The dispersal tendency of emigrants from an enclosed population was investigated by releasing animals via tubes into one of two adjacent enclosures, one vacant and one inhabited. Individuals from the enclosed population were monitored for age, sex, weight and electrophoretically detectable serum transferrin genotype in an intensive live-trapping program. In 1973 the minimum number alive in the introduced enclosed study population reached approximately l67/ha when breeding stopped in October. In 1974 intensive breeding increased the population density to 333/ha by mid-July when a long decline in numbers and breeding intensity began without an intervening plateau. An adjacent unenclosed area had a much lower density and longer breeding season in 1974. The growth rate of young males in the enclosed population tended to be lowest during the decline period in 1974. Survival of the enclosed population was high throughout but was lowest during the decline phase in both sexes, especially males. Low transferrin heterozygote survival during the decline coincided with a significant heterozygote deficiency in females whereas in males genotype frequencies did not depart from Hardy-Weinberg equilibrium values throughout th.e study. Twenty-nine suitable ani.mals were released during the decline in five periods from July to November 1974. The proportions of males and transferrin heterozygotes in the released graun were generally greater than in the source population~ In the test enclosures 21% of the released animals continued their movement through the vacant area while 41% (no significant difference) moved through the inhabited enclosure. In the vacant test area, females had a greater tendency than males to continue dispersal whereas no difference was noted in the inhabited area. Low frequency of captures in the tubes, predator disturbances and cold weather forced the termination of the study. The role of dispersal as a population regulating mechanism was further substantiated. The genetic differences between emigrant and resident animals lend support to Howard's hypothesis that a genetic polymorphism influences the tendency to disperse. Support is also given to Myers' and Krebs' contention that among dispersers an additional density dependent polymorphism influences the distance dispersed.

Thorold Tunnel opening ceremony photographs, September 18,1968.

Construction on the Thorold tunnel began in 1965 and was completed in 1967. It was designed by H. G. Acres & Company Ltd. and built by Pitts-Atlas, a joint venture of C.A. Pitts, General Contractor Ltd., and Atlas Construction Company Ltd. The tunnel replaced two lift bridges (Bridge 9 at Ontario Paper Co. and Bridge 7) that carried traffic over the Welland Canal. The majority of the construction occurred during the winter months, when the canal was closed to shipping. The water was drained and concrete sections shaped liked tubes were poured, creating the tunnel. During the summer months, the end sections of the tunnel were constructed so that shipping could continue uninterrupted. The 24 million dollar project was financed jointly by the Department of Highways and the St. Lawrence Seaway Authority. The tunnel was officially opened on September 18, 1968.

Spectro-imagerie optique à faible flux et comparaison de la cinématique Ha et HI d'un échantillon de galaxies proches

Un nouveau contrôleur de EMCCD (Electron multiplying Charge Coupled Device) est présenté. Il permet de diminuer significativement le bruit qui domine lorsque la puce EMCCD est utilisé pour du comptage de photons: le bruit d'injection de charge. À l'aide de ce contrôleur, une caméra EMCCD scientifique a été construite, caractérisée en laboratoire et testée à l'observatoire du mont Mégantic. Cette nouvelle caméra permet, entre autres, de réaliser des observations de la cinématique des galaxies par spectroscopie de champ intégral par interférométrie de Fabry-Perot en lumière Ha beaucoup plus rapidement, ou de galaxies de plus faible luminosité, que les caméras à comptage de photon basées sur des tubes amplificateurs. Le temps d'intégration nécessaire à l'obtention d'un rapport signal sur bruit donné est environ 4 fois moindre qu'avec les anciennes caméras. Les applications d'un tel appareil d'imagerie sont nombreuses: photométrie rapide et faible flux, spectroscopie à haute résolution spectrale et temporelle, imagerie limitée par la diffraction à partir de télescopes terrestres (lucky imaging), etc. D'un point de vue technique, la caméra est dominée par le bruit de Poisson pour les flux lumineux supérieurs à 0.002 photon/pixel/image. D'un autre côté, la raie d'hydrogène neutre (HI) à 21 cm a souvent été utilisée pour étudier la cinématique des galaxies. L'hydrogène neutre a l'avantage de se retrouver en quantité détectable au-delà du disque optique des galaxies. Cependant, la résolution spatiale de ces observations est moindre que leurs équivalents réalisés en lumière visible. Lors de la comparaison des données HI, avec des données à plus haute résolution, certaines différences étaient simplement attribuées à la faible résolution des observations HI. Le projet THINGS (The HI Nearby Galaxy Survey a observé plusieurs galaxies de l'échantillon SINGS (Spitzer Infrared Nearby Galaxies Survey). Les données cinématiques du projet THIGNS seront comparées aux données cinématiques obtenues en lumière Ha, afin de déterminer si la seule différence de résolution spatiale peut expliquer les différences observées. Les résultats montrent que des différences intrinsèques aux traceurs utilisées (hydrogène neutre ou ionisé), sont responsables de dissemblances importantes. La compréhension de ces particularités est importante: la distribution de la matière sombre, dérivée de la rotation des galaxies, est un test de certains modèles cosmologiques.

Morphologie évolutive et fonctionnelle des hémichordés

L’embranchement Hemichordata regroupe les classes Enteropneusta et Pterobranchia. Hemichordata constitue, avec l’embranchement Echinodermata, le groupe-frère des chordés. Les entéropneustes sont des organismes vermiformes solitaires qui vivent sous ou à la surface du substrat et s’alimentent généralement par déposivorie, alors que les ptérobranches sont des organismes coloniaux filtreurs habitant dans un réseau de tubes appelé coenecium. Ce mémoire présente trois études dont le point commun est l’utilisation des hémichordés actuels pour répondre à des questions concernant l’évolution des hémichordés, des chordés, et du super-embranchement qui les regroupe, Deuterostomia. Notre première étude démontre que les fentes pharyngiennes, l’organe pré-oral cilié (POCO) et le pharynx de l’entéropneuste Protoglossus graveolens sont utilisés pour l’alimentation par filtration. Le système de filtration de P. graveolens permet la capture de particules jusqu’à 1.3 um, à un débit de 4.05 mm.s-1, pour une demande énergétique de 0.009 uW. Les similarités structurales et fonctionnelles avec le système de filtration des céphalochordés suggèrent que la filtration pharyngienne est ancestrale aux deutérostomes. Lors de notre deuxième étude, nous avons exploré l’hypothèse selon laquelle le POCO des entéropneustes, une structure ciliée pré-buccale au rôle possiblement chémorécepteur, serait homologue au « wheel organ » des céphalochordés et à l’adénohypophyse des vertébrés. Pour cela, nous avons déterminé par immunohistochimie l’expression de Pit-1, un facteur de transcription spécifique à ces deux structures, chez l’entéropneuste Saccoglossus pusillus. Pit-1 est exprimé dans des cellules sensorielles du POCO, mais aussi dans des cellules épithéliales distribuées dans le proboscis, collet et tronc. Ce patron d’expression ne permet pas de confirmer ou rejeter l’homologie du POCO et de l’adénohypophyse des vertébrés. Lors de notre troisième étude, nous avons caractérisé l’ultrastructure du coenecium des ptérobranches Cephalodiscus hodgsoni, Cephalodiscus nigrescens et Cephalodiscus densus par microscopie électronique à transmisison et à balayage. Cephalodiscus est le groupe frère de Graptolithina, un groupe qui inclut les graptolithes éteints ainsi que les ptérobranches du genre Rhabdopleura. Nous avons décrit les types de fibrilles de collagène présents, leur taille et leur organisation, ainsi que l’organisation globale du coenecium. Nous avons ainsi démontré la présence chez Cephalodiscus d’une organisation similaire au paracortex, pseudocortex et eucortex des graptolithes. La présence chez Cephalodiscus de ce type d’organisation suggère que le cortex est ancestral à la classe Pterobranchia. Ces trois études illustrent plusieurs axes importants de la recherche sur les hémichordés, qui en intégrant des données morphologiques, fonctionnelles et moléculaires permet de reconstruire certains évènements clés de l’évolution des deutérostomes.

Sélection de mutations affectant la formation de biofilm chez Actinobacillus pleuropneumoniae

Actinobacillus pleuropneumoniae (App) est l’agent étiologique de la pleuropneumonie porcine, une infection pulmonaire contagieuse chez les porcs. Parmi les nombreux mécanismes de virulence retrouvés chez les bactéries, la formation de biofilms joue souvent un rôle important dans la pathogenèse. Il a été récemment démontré qu’App avait la capacité de former des biofilms in vitro. Dans notre laboratoire, la formation de biofilms par App a été évaluée en microplaques dans différents milieux de culture. Nous avons démontré que la souche de référence de sérotype 1 est capable de former des biofilms. Le but de ce travail est d’identifier des gènes impliqués dans la biosynthèse et dans la régulation de l’expression des biofilms chez App. L’objectif de cette étude était de générer une banque de mutants d’App 4074NalR à l’aide du transposon mini-Tn10. Cette banque de 1200 mutants a été criblée à l’aide du modèle in vitro de formation de biofilms en microplaques et en tubes : 24 mutants démontrant une formation de biofilms modifiée par rapport à la souche mère App 4074NalR ont été sélectionnés et identifiés, nous permettant ainsi de localiser le site d’insertion du transposon. Une analyse a permis d’identifier de nouveaux gènes impliqués dans la biosynthèse et dans la régulation de l’expression des biofilms chez App. Notre criblage a permis d’identifier 16 gènes connus impliqués dans la formation de biofilms chez App (hns) ou chez d’autres pathogènes (potD2, ptsI, tig and rpmF) mais également de nouveaux gènes impliqués dans la formation de biofilm (APL_0049, APL_0637 and APL_1572). Une caractérisation plus poussée de ces gènes nous permettra d’améliorer la compréhension des mécanismes impliqués dans la formation de biofilm chez App.

Actin cytoskeleton regulates pollen tube growth and tropism

La fertilisation chez les plantes dépend de la livraison des cellules spermatiques contenues dans le pollen à l’ovule. Au contact du stigmate, le grain de pollen s’hydrate et forme une protubérance, le tube pollinique, chargé de livrer les noyaux spermatiques à l’ovule. Le tube pollinique est une cellule à croissance rapide, anisotrope et non autotrophe; ainsi tout au long de sa croissance à travers l’apoplaste du tissu pistillaire, le tube pollinique puise ses sources de carbohydrates et de minéraux du pistil. Ces éléments servent à la synthèse des constituants de la paroi qui seront acheminés par des vésicules de sécrétion jusqu’à l’apex du tube. Ce dernier doit aussi résister à des pressions mécaniques pour maintenir sa forme cylindrique et doit répondre à différents signaux directionnels pour pouvoir atteindre l’ovule. Mon projet de doctorat était de comprendre le rôle du cytosquelette dans la croissance anisotrope du tube pollinique et d’identifier les éléments responsables de sa croissance et de son guidage. Le cytosquelette du tube pollinique est composé des microfilaments d’actine et des microtubules. Pour assurer une bonne croissance des tubes polliniques in vitro, les carbohydrates et les éléments de croissance doivent être ajoutés au milieu à des concentrations bien spécifiques. J’ai donc optimisé les conditions de croissance du pollen d’Arabidopsis thaliana et de Camellia japonica qui ont été utilisés avec le pollen de Lilium longiflorum comme modèles pour mes expériences. J’ai développé une méthode rapide et efficace de fixation et de marquage du tube pollinique basée sur la technologie des microondes. J’ai aussi utilisé des outils pharmacologiques, mécaniques et moléculaires couplés à différentes techniques de microscopie pour comprendre le rôle du cytosquelette d’actine lors de la croissance et le tropisme du tube pollinique. J’ai trouvé que le cytosquelette d’actine et plus précisément l’anneau d’actine localisé dans la partie sub-apicale du tube est fortement impliqué dans la croissance et le maintien de l’architecture du tube à travers le contrôle de la livraison des vésicules de sécrétion. J’ai construit une chambre galvanotropique qui peut être montée sur un microscope inversé et qui sert à envoyer des signaux tropistiques bien précis à des tubes polliniques en croissance. J’ai trouvé que les filaments d’actine sont impliqués dans la capacité du tube pollinique à changer de direction. Ce comportement tropistique dépend de la concentration du calcium dans le milieu de croissance et du flux de calcium à travers des canaux calciques. Le gradient de calcium établi dans le tube pollinique affecte l’activité de certaines protéines qui se lient à l’actine et dont le rôle est la réorganisation des filaments d’actine. Parmi ces protéines, il y a celles de dépolymérisation de l’actine (ADF) dont deux spécifiquement exprimées dans le gamétophyte mâle d’Arabidopsis (ADF7 et ADF10). Par marquage avec des proteins fluorescents, j’ai trouvé que l’ADF7 et l’ADF10 ont des expressions différentielles pendant la microsporogenèse et la germination et croissance du tube pollinique et qu’elles partagent entre elles des rôles importants durant ces différents stades.

Reconstruction des structures magnéto-convectives solaires sous une région active, par l’utilisation conjointe d’un modèle de convection anélastique et d’une méthode d’assimilation de données.

L’utilisation d’une méthode d’assimilation de données, associée à un modèle de convection anélastique, nous permet la reconstruction des structures physiques d’une partie de la zone convective située en dessous d’une région solaire active. Les résultats obtenus nous informent sur les processus d’émergence des tubes de champ magnétique au travers de la zone convective ainsi que sur les mécanismes de formation des régions actives. Les données solaires utilisées proviennent de l’instrument MDI à bord de l’observatoire spatial SOHO et concernent principalement la région active AR9077 lors de l’ ́évènement du “jour de la Bastille”, le 14 juillet 2000. Cet évènement a conduit à l’avènement d’une éruption solaire, suivie par une importante éjection de masse coronale. Les données assimilées (magnétogrammes, cartes de températures et de vitesses verticales) couvrent une surface de 175 méga-mètres de coté acquises au niveau photosphérique. La méthode d’assimilation de données employée est le “coup de coude direct et rétrograde”, une méthode de relaxation Newtonienne similaire à la méthode “quasi-linéaire inverse 3D”. Elle présente l’originalité de ne pas nécessiter le calcul des équations adjointes au modèle physique. Aussi, la simplicité de la méthode est un avantage numérique conséquent. Notre étude montre au travers d’un test simple l’applicabilité de cette méthode à un modèle de convection utilisé dans le cadre de l’approximation anélastique. Nous montrons ainsi l’efficacité de cette méthode et révélons son potentiel pour l’assimilation de données solaires. Afin d’assurer l’unicité mathématique de la solution obtenue nous imposons une régularisation dans tout le domaine simulé. Nous montrons enfin que l’intérêt de la méthode employée ne se limite pas à la reconstruction des structures convectives, mais qu’elle permet également l’interpolation optimale des magnétogrammes photosphériques, voir même la prédiction de leur évolution temporelle.

Modélisation de l'évolution du réseau magnétique au cours du cycle solaire

Le réseau magnétique consiste en un ensemble de petites concentrations de flux magnétique sur la photosphère solaire. Vu sa petite échelle de taille et de flux, à la limite de détection, son comportement n'est connu que depuis récemment. Les interactions du réseau sont pourtant cruciales afin de comprendre la dynamo et l'irradiance solaires, car beaucoup de caractérisques du réseau dépendent de ces interactions. De plus, le réseau est la principale contribution magnétique surfacique à l'irradiance solaire. Les modèles existants du réseau ne tenaient jusqu'à maintenant pas compte des interactions du réseau. Nous avons tenté de combler cette lacune avec notre modèle. Nos simulations impliquent une marche aléatoire en 2D de tubes de flux magnétiques sur la photosphère solaire. Les tubes de flux sont injectés puis soumis à des règles de déplacement et d'interaction. L'injection se fait à deux échelles, respectivement la plus petite et la plus grande observables: les tubes de flux élémentaires et les taches solaires. Des processus de surface imitant ceux observés sont inclus, et consistent en l'émergence, la coalescence, l'annulation et la submergence de flux. La fragmentation des concentrations n'est présente que pour les taches, sous forme de désintégration libérant des tubes de flux. Le modèle est appliqué au cycle solaire 21 (1976-1986, le mieux documenté en termes de caractéristiques de taches solaires. Il en résulte des réponses à deux questions importantes en physique solaire. La première est: l'injection de flux magnétique à deux échelles très distinctes peut-elle conduire à une distribution de flux en loi de puissance comme on l'observe, si l'on inclut des processus de surface qui retraitent le flux? Cette question est étroitement liée à l'origine de la dynamo solaire, qui pourrait produire ladite distribution. Nous trouvons qu'on peut effectivement produire une telle distribution avec ce type d'injection et ce type de processus de surface. Cela implique que la distribution de flux observée ne peut servir à déterminer quel type de dynamo opère dans le Soleil. La deuxième question à laquelle nous avons apporté un élément de réponse est celle à savoir combien de temps il faut au réseau pour retrouver son état d'activité de base. Cet état a été observé lors du minimum de Maunder en 1645-1715 et touche de près la question de l'influence de l'activité solaire sur le climat terrestre. Le récent minimum d'activité est considéré par certains comme ayant atteint cet état. Nous trouvons plutôt que ça n'a pas été le cas. En effet, le temps de relaxation du réseau que nous avons calculé est supérieur au temps écoulé entre la fin du dernier cycle solaire d'activité et celui de l'amorce du présent cycle.

Destins des S-RNases et interactions moléculaires dans le tube pollinique dans le cadre de l’auto-incompatibilité gamétophytique chez Solanum chacoense

L’auto-incompatibilité (AI) est une barrière reproductive prézygotique qui permet aux pistils d’une fleur de rejeter leur propre pollen. Les systèmes d’AI peuvent prévenir l’autofertilisation et ainsi limiter l’inbreeding. Dans l’AI gamétophytique, le génotype du pollen détermine son propre phénotype d’incompatibilité, et dans ce système, les déterminants mâles et femelles de l’AI sont codés par un locus multigénique et multi-allélique désigné le locus S. Chez les Solanaceae, le déterminant femelle de l’AI est une glycoprotéine stylaire extracellulaire fortement polymorphique possédant une activité ribonucléase et désignée S-RNase. Les S-RNases montrent un patron caractéristique de deux régions hypervariables (HVa et HVb), responsables de leur détermination allélique, et cinq régions hautement conservées (C1 à C5) impliquées dans l’activité catalytique ou la stabilisation structurelle de ces protéines. Dans ce travail, nous avons investigué plusieurs caractéristiques des S-RNases et identifié un nouveau ligand potentiel aux S-RNases chez Solanum chacoense. L’objectif de notre première étude était l’élucidation du rôle de la région C4 des S-RNases. Afin de tester l’hypothèse selon laquelle la région C4 serait impliquée dans le repliement ou la stabilité des S-RNases, nous avons généré un mutant dans lequel les quatre résidus chargés présents en région C4 furent remplacés par des résidus glycine. Cette protéine mutante ne s’accumulant pas à des niveaux détectables, la région C4 semble bien avoir un rôle structurel. Afin de vérifier si C4 est impliquée dans une liaison avec une autre protéine, nous avons généré le mutant R115G, dans lequel un acide aminé chargé fût éliminé afin de réduire les affinités de liaison dans cette région. Ce mutant n’affectant pas le phénotype de rejet pollinique, il est peu probable que la région C4 soit impliquée dans la liaison des S-RNases avec un ligand ou leur pénétration à l’intérieur des tubes polliniques. Enfin, le mutant K113R, dans lequel le seul résidu lysine conservé parmi toutes les S-RNases fût remplacé par un résidu arginine, fût généré afin de vérifier si cette lysine était un site potentiel d’ubiquitination des S-RNases. Toutefois, la dégradation des S-RNases ne fût pas inhibée. Ces résultats indiquent que C4 joue probablement un rôle structurel de stabilisation des S-RNases. Dans une seconde étude, nous avons analysé le rôle de la glycosylation des S-RNases, dont un site, en région C2, est conservé parmi toutes les S-RNases. Afin d’évaluer la possibilité que les sucres conjugués constituent une cible potentielle d’ubiquitination, nous avons généré une S11-RNase dont l‘unique site de glycosylation en C2 fût éliminé. Ce mutant se comporte de manière semblable à une S11-RNase de type sauvage, démontrant que l’absence de glycosylation ne confère pas un phénotype de rejet constitutif du pollen. Afin de déterminer si l’introduction d’un sucre dans la région HVa de la S11-RNase pourrait affecter le rejet pollinique, nous avons généré un second mutant comportant un site additionnel de glycosylation dans la région HVa et une troisième construction qui comporte elle aussi ce nouveau site mais dont le site en région C2 fût éliminé. Le mutant comportant deux sites de glycosylation se comporte de manière semblable à une S11-RNase de type sauvage mais, de manière surprenante, le mutant uniquement glycosylé en région HVa peut aussi rejeter le pollen d’haplotype S13. Nous proposons que la forme non glycosylée de ce mutant constitue un allèle à double spécificité, semblable à un autre allèle à double spécificité préalablement décrit. Il est intéressant de noter que puisque ce phénotype n’est pas observé dans le mutant comportant deux sites de glycosylation, cela suggère que les S-RNases ne sont pas déglycosylées à l’intérieur du pollen. Dans la dernière étude, nous avons réalisé plusieurs expériences d’interactions protéine-protéine afin d’identifier de potentiels interactants polliniques avec les S-RNases. Nous avons démontré que eEF1A, un composant de la machinerie de traduction chez les eucaryotes, peut lier une S11-RNase immobilisée sur résine concanavaline A. Des analyses de type pull-down utilisant la protéine eEF1A de S. chacoense étiquetée avec GST confirment cette interaction. Nous avons aussi montré que la liaison, préalablement constatée, entre eEF1A et l’actine est stimulée en présence de la S11-RNase, bien que cette dernière ne puisse directement lier l’actine. Enfin, nous avons constaté que dans les tubes polliniques incompatibles, l’actine adopte une structure agrégée qui co-localise avec les S-RNases. Ces résultats suggèrent que la liaison entre eEF1A et les S-RNases pourrait constituer un potentiel lien fonctionnel entre les S-RNases et l’altération du cytosquelette d’actine observée lors des réactions d’AI. Par ailleurs, si cette liaison est en mesure de titrer les S-RNases disponibles à l’intérieur du tube pollinique, ce mécanisme pourrait expliquer pourquoi des quantités minimales ou « seuils » de S-RNases sont nécessaires au déclenchement des réactions d’AI.

Studying the cytomechanic aspects of pollen tube growth behavior using Lab-On-Chip technology

L'élongation cellulaire de cellules cultivant bout comme hyphae fongueux, inculquez hairs, des tubes de pollen et des neurones, est limité au bout de la cellule, qui permet à ces cellules d'envahir l'encerclement substrate et atteindre une cible. Les cellules cultivant bout d'équipement sont entourées par le mur polysaccharide rigide qui régule la croissance et l'élongation de ces cellules, un mécanisme qui est radicalement différent des cellules non-walled. La compréhension du règlement du mur de cellule les propriétés mécaniques dans le contrôle de la croissance et du fonctionnement cellulaire du tube de pollen, une cellule rapidement grandissante d'équipement, est le but de ce projet. Le tube de pollen porte des spermatozoïdes du grain de pollen à l'ovule pour la fertilisation et sur sa voie du stigmate vers l'ovaire le tube de pollen envahit physiquement le stylar le tissu émettant de la fleur. Pour atteindre sa cible il doit aussi changer sa direction de croissance les temps multiples. Pour évaluer la conduite de tubes de pollen grandissants, un dans le système expérimental vitro basé sur la technologie de laboratoire-sur-fragment (LOC) et MEMS (les systèmes micro-électromécaniques) ont été conçus. En utilisant ces artifices nous avons mesuré une variété de propriétés physiques caractérisant le tube de pollen de Camélia, comme la croissance la croissance accélérée, envahissante et dilatant la force. Dans une des organisations expérimentales les tubes ont été exposés aux ouvertures en forme de fente faites de l'élastique PDMS (polydimethylsiloxane) la matière nous permettant de mesurer la force qu'un tube de pollen exerce pour dilater la croissance substrate. Cette capacité d'invasion est essentielle pour les tubes de pollen de leur permettre d'entrer dans les espaces intercellulaires étroits dans les tissus pistillar. Dans d'autres essais nous avons utilisé l'organisation microfluidic pour évaluer si les tubes de pollen peuvent s'allonger dans l'air et s'ils ont une mémoire directionnelle. Une des applications auxquelles le laboratoire s'intéresse est l'enquête de processus intracellulaires comme le mouvement d'organelles fluorescemment étiqueté ou les macromolécules pendant que les tubes de pollen grandissent dans les artifices LOC. Pour prouver que les artifices sont compatibles avec la microscopie optique à haute résolution et la microscopie de fluorescence, j'ai utilisé le colorant de styryl FM1-43 pour étiqueter le système endomembrane de tubes de pollen de cognassier du Japon de Camélia. L'observation du cône de vésicule, une agrégation d'endocytic et les vésicules exocytic dans le cytoplasme apical du bout de tube de pollen, n'a pas posé de problèmes des tubes de pollen trouvés dans le LOC. Pourtant, le colorant particulier en question a adhéré au sidewalls du LOC microfluidic le réseau, en faisant l'observation de tubes de pollen près du difficile sidewalls à cause du signal extrêmement fluorescent du mur. Cette propriété du colorant pourrait être utile de refléter la géométrie de réseau en faisant marcher dans le mode de fluorescence.

Réécrire à l’ère du soupçon insidieux : Amélie Nothomb et le récit postmoderne

L’article se veut une défense et illustration du phénomène de la réécriture au féminin comme stratégie discursive telle qu’elle se manifeste dans les pratiques palimpsestes à l’ère « postmoderne ». Il propose une réflexion sur le comment et le pourquoi des relectures qu’effectuent bon nombre d’auteures du XXe siècle dans le dessein de réécrire un texte antérieur, d’écrire autrement cet hypotexte, de le « traduire » en un nouvel hypertexte. Car le choix d’un modèle générateur-« géniteur » influe sur la stratégie et l’objectif de sa réécriture. L’oeuvre romanesque d’Amélie Nothomb — plus particulièrement les romans « Mercure » et « Métaphysique des tubes » — sert d’exemple pour étudier la réécriture à la fois au féminin et selon le paradigme du récit postmoderne. L’analyse révèle que le recours aux mythes fondateurs, aux « grands » mais aussi aux « petits » récits est au coeur du réécrire au féminin; les auteures réécrivent, le plus souvent sur un ton ironique, en repensant la matière littéraire canonique.