The effect of rifampicin and pyrazinamide on isoniazid pharmacokinetics in rats

Tuberculosis chemotherapy involves combination of the drugs isoniazid (INH), rifampicin (RMP) and pyrazinamide (PYR) for a 6-month period. The present work investigated the influence of RMP and PYR on the pharmacokinetic parameters of INH when groups of rats were pre-treated for 21 days with INH alone or in combination with RMP and/or PYR, in the following amounts per kg body weight: INH 100 mg; INH 100 mg + RMP 100 mg; INH 100 mg + PYR 350 mg; INH 100 mg + PYR 350 mg + RMP 100 mg. It was found that the co-administration of PYR caused an increase in the INH distribution volume (V-d/F), half-life of elimination t(1)/2(beta)) and clearance (Cl-T/F), and a decrease in the area under curve 0 to 24 h (AUC). Co-administration of RMP caused an increase in the Cl-T/F and a decrease in the AUC. The combination INH + PYR + RMP caused an increase in the Cl-T/F and a decrease in the AUC. These significant pharmacokinetic interactions between the tuberculostatic drugs might be related to differences in the therapeutic and toxic effects. Copyright 0( 2007 John Wiley & Sons, Ltd.

Simultaneous analysis of the enantiomers of verapamil and norverapamil in rat plasma by liquid chromatography tandem mass spectrometry

An enantioselective micromethod for the simultaneous analysis of verapamil (VER) and norverapamil (NOR) in plasma was developed, validated and applied to the study of the kinetic disposition of VER and NOR after the administration of a single oral dose of racemic-VER to rats. VER, NOR and the internal standard (paroxetine) were extracted from only 100-mu L plasma samples using n-hexane and the enantiomers were resolved on a Chiralpak AD column using n-hexane:isopropanol: ethanol: diethyl ami ne (88:6:6:0.1) as the mobile phase. The analyses were performed in the selected reaction monitoring mode. Transitions 456 > 166 for VER enantiomers, 441 > 166 for NOR enantiomers and 330 > 193 for the internal standard were monitored and the method had a total chromatographic run time of 12 min. The method allows the determination of VER and NOR enantiomers at plasma levels as low as 1.0 ng/mL. Racemic VER hydrochloride (10 mg/kg) was given to male Wistar rats by gavage and blood samples were collected from 0 to 6.0 h(n = 6 at each time point). The concentration of (-)-(S)-VER was three folds higher than (+)-(R)-VER, with an AUC ratio (-)/(+) of 2.66. Oral clearance values were 12.17 and 28.77 L/h/kg for (-)-(S)-VER and (+)-(R)-VER, respectively. The pharmacokinetic parameters of NOR were not shown to be enantioselective. (c) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

Surfactant systems for nasal zidovudine delivery: structural, rheological and mucoadhesive properties

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

In vivo CYP2E1 phenotyping as a new potential biomarker of occupational and experimental exposure to benzene

Assessing CYP2E1 phenotype in vivo may be important to predict individual susceptibility to those chemicals, including benzene, which are metabolically activated by this isoenzyme. Chlorzoxazone (CHZ), a specific CYP2E1 substrate, is readily hydroxylated to 6-OH-chlorzoxazone (6-OH-CHZ) by liver CYP2E1 and the metabolic ratio 6-OH-CHZ/CHZ in serum (MR) is a specific and sensitive biomarker of CYP2E1 activity in vivo in humans. We used this MR as a potential biomarker of effect in benzene-treated rats and, also, in humans occupationally exposed to low levels of benzene. Male Sprague-Dawley rats (375-400 g b.w.) were treated i.p. for 3 days with either a 0.5 ml solution of benzene (5 mmol/kg b.w.) in corn oil, or 0.5 ml corn oil alone. Twenty-four hours after the last injection, a polyethylene glycol (PEG) solution of CHZ (20 mg/kg b.w.) was injected i.p. in both treated and control animals. After 2, 5.10,15, 20,30,45, 60, 90, 120, 180, and 240 min from injection, 0.2 ml blood was taken from the tip tail and stored at -20 degrees C until analysis. A modified reverse phase HPLC method using a 5 mu m Ultrasphere C18 column equipped with a direct-connection ODS guard column, was used to measure CHZ and its metabolite 6-OH-CHZ in serum. No statistically significant difference in the MR was observed, at any sampling time, between benzene-treated and control rats. The concentration-versus-time area under the curve (AUC), however, was lower (p < 0.05, Mann-Whitney test), whereas the systemic clearance was higher (p < 0.05) in treated than in control rats. Eleven petrochemical workers occupationally exposed to low levels of airborne benzene (mean +/- SD, 25.0 +/- 24.4 mu g/m(3)) and 13 non-exposed controls from the same factory (mean +/- SD, 6.7 +/- 4.0 mu g/m(3)) signed an informed consent form and were administered 500 mg CHZ p.o. Two hours later a venous blood sample was taken for CHZ and 6-OH-CHZ measurements. Despite exposed subjects showed significantly higher levels of t,t-MA and S-PMA, two biomarkers of exposure to benzene, than non-exposed workers, no difference in the MR mean values +/- SD was found between exposed (0.59 +/- 0.29) and non-exposed (0.57 +/- 0.23) subjects. So, benzene was found to modify CHZ disposition, but not CYP2E1 phenotype in benzene-treated rats, nor in workers exposed to benzene, probably due to the levels of exposure being too low. (C) 2009 Elsevier B.V. All rights reserved.

Experimental murine mycobacteriosis: evaluation of the functional activity of alveolar macrophages in thalidomide- treated mice

Thalidomide is a selective inhibitor of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), a cytokine involved in mycobacterial death mechanisms. We investigated the role of this drug in the functional activity of alveolar macrophages in the presence of infection induced by intranasal inoculation of Mycobacterium avium in thalidomide-treated and untreated adult Swiss mice. Sixty animals were inoculated with 5 x 10(6) M. avium by the respiratory route. Thirty animals received daily thalidomide (30 mg/kg mouse) and 30 received water by gavage up to sacrifice. Ten non-inoculated mice were used as a control group. Lots of animals from each group were evaluated until 6 weeks after inoculation. Infection resulted in an increased total number of inflammatory cells as well as increased activity of pulmonary macrophages. Histologically, intranasal inoculation of bacilli resulted in small mononuclear infiltrates located at the periphery of the organ. Culture of lung fragments revealed the presence of bacilli only at the beginning and at the end of the experimental period. Thalidomide administration did not affect the microbiological or histological features of the infection. Thalidomide-treated and untreated animals showed the same amount of M. avium colonies 3 weeks after infection. Although it did not affect bacillary clearance, thalidomide administration resulted in a decreased percent of spread cells and release of hydrogen peroxide, suggesting that factors other than TNF-alpha play a role in the killing of mycobacteria by alveolar macrophages. Thalidomide administration also reduced the number of spread cells among resident macrophages, suggesting a direct effect of the drug on this phenomenon.

Modulation of macrophage cytokine profiles during solid tumor progression: susceptibility to Candida albicans infection

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Glibenclamide effects on renal function and histology after acute hemorrhage in rats under sevoflurane anesthesia

Introduction. Hypovolemia from hemorrhage evokes protective compensatory reactions, such as the renin-angiotensin system, which interferes in the clearance function and can lead to ischemia. This study was designed to evaluate the effects of glibenclamide, a K-ATP(+) channel blocker, on renal function and histology in rats in a state of hemorrhagic shock under sevoflurane anesthesia. Material and Methods. Twenty Wistar rats were randomized into two groups of 10 animals each (G1 and G2), only one of which (G2) received intravenous glibenclamide (1 mu g.g(-1)), 60 min before bleeding was begun. Both groups were anesthetized with sevoflurane and kept on spontaneous respiration with oxygen-air, while being bled of 30% of volemia in three stages with 10 min intervals. There was an evaluation of renal function-sodium para-aminohippurate and iothalamate clearances, filtration fraction, renal blood flow, renal vascular resistance-and renal histology. Renal function attributes were evaluated at three moments: M1 and M2, coinciding with the first and third stages of bleeding; and M3, 30 min after M2, when the animals were subjected to bilateral nephrectomy before being sacrificed. Results. Significant differences were found in para-aminohippurate clearance, G1 < G2, and higher renal vascular resistance values were observed in G1. Histological examination showed the greater vulnerability of kidneys exposed to sevoflurane alone (G1) with higher scores of vascular and tubular dilatation. There were vascular congestion and tubular vacuolization only in G1. Necrosis and signs of tubular regeneration did not differ in both groups. Conclusion. Treatment with glibenclamide attenuated acutely the renal histological changes after hemorrhage in rats under sevoflurane anesthesia.

Rat model of depending prostaglandin renal state: Effect of ketoprofen

Introduction .The renal prostaglandins (PGs), vasodilators, preserve kidney function during increased activity of the renin-angiotensin system or renal sympathetic nerves (renal PG-dependent state [RPGD]). Ketoprofen (Ket) inhibits cyclooxygenase and, therefore, the synthesis of PGs. The aim of this study was to determine, in the rat, the action of Ket in the renal histology and function in a RPGD state (stress of anesthesia and hemorrhage). Material and Methods . Twenty male Wistar rats, anesthetized with sodium pentobarbital, were randomly divided into two groups: G1-control ( n = 10) and G2-Ket ( n = 10) submitted to arterial hemorrhage of 30% of volemia (estimated as 6% of body weight) three times (10% each 10 min), 65 min after anesthesia. G2 animals received Ket, 1.5 mg. kg -1 , venously, 5 min after anesthesia and 60 min before the first hemorrhage moment (first moment of the study [M1]). Medium arterial pressure (MAP), rectal temperature (T), and heart rate were monitored. G1 and G2 received para-aminohippurate sodium (PAH) and iothalamate sodium (IOT) solutions during the entire experimental time in order to determine clearance of PAH (effective renal plasma flow [ERPF]) and clearance of IOT (glomerular filtration rate [GFR]) without urine collection (determination of blood concentrations of PAH and IOT through the high-performance liquid chromatography), filtration fraction (FF), and renal vascular resistance (RVR). The animals were sacrificed in M3, 30 min after the third hemorrhage (M2) moment, and the kidneys and blood collected during the hemorrhage periods were utilized for histological study and determinations of hematocrit (Ht), serum creatinine (S Cr ), ERPF, GFR, FF, and RVR, respectively. Results . There were significant reductions of MAP, T, and Ht and a significant increase of S Cr . During the experiment, ERPF and GFR did not change, but ERPF was always higher in G1 than in G2. Ket did not alter FF, which increased in G1 over the duration of experiment. The Ket group had significantly higher RVR than the control group. The histology verified that both G1 and G2 were similar for tubular dilation and necrosis, but they were significantly different for tubular degeneration: G1 > G2. Conclusion . The changes observed in kidney histology probably were determined by hemorrhage and hypotension. Ket inhibited the synthesis of PGs and diminished tubular degeneration.

Efeitos do halotano, isoflurano e sevoflurano sobre a função renal em cães sob pinçamento aórtico infra-renal

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: O pinçamento infra-renal da aorta abdominal pode produzir alterações renais. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos do halotano, isoflurano e sevoflurano sobre a função renal, em cães submetidos a pinçamento aórtico infra-renal. MÉTODO: O estudo aleatório foi realizado em 30 cães, distribuídos em três grupos, de acordo com o anestésico halogenado utilizado durante a anestesia, em concentrações equipotentes de 0,75 CAM: GH (n = 10) - halotano a 0,67%; GI (n = 10) - isoflurano a 0,96%; e GS (n = 10) - sevoflurano a 1,8%. em todos os animais foi realizada ligadura infra-renal da aorta, por período de 30 minutos. Os atributos renais foram estudados nos momentos: C (controle), após 15 (Ao15) e 30 (Ao30) minutos de pinçamento aórtico, e após 15 (DAo15) e 30 (DAo30) minutos do despinçamento aórtico. RESULTADOS: A depuração de água livre foi menor nos grupos GI e GS, em relação ao GH, após o despinçamento aórtico (p < 0,05). Durante o pinçamento aórtico, nos três grupos, houve aumento do débito urinário, da excreção urinária de sódio e da depuração de sódio, e diminuição da osmolaridade urinária (p < 0,05). A resistência vascular renal e a fração de filtração aumentaram somente em GS (p < 0,05), enquanto a excreção fracionária de sódio aumentou em GH e GI (p < 0,05). Após o despinçamento aórtico, houve normalização dos atributos que haviam se alterado, com exceção da osmolaridade urinária, que continuou em níveis menores do que os do controle em todos os grupos (p < 0,05). A resistência vascular renal e a fração de filtração continuaram mais elevadas em GS, acompanhadas por diminuição do fluxo sangüíneo renal e da depuração de para-aminohipurato de sódio (p < 0,05). CONCLUSÕES: No cão nas condições experimentais empregadas, a inalação de halotano e isoflurano a 0,75 CAM, mas não de sevoflurano, atenuou a principal alteração após o pinçamento infra-renal da aorta, que é o aumento da resistência vascular renal.

Efeitos renais e cardiovasculares da infusão de dopamina e da solução de cloreto de sódio a 7,5%: estudo experimental em cães com restrição hídrica

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: É controvertido o uso da infusão de dopamina na proteção renal. O objetivo desta pesquisa foi estudar o efeito da dopamina, da solução hipertônica e da associação de ambas em cães com restrição hídrica, simulando o jejum pré-operatório. MÉTODO: Foram estudados, em 32 cães anestesiados com tiopental sódico e fentanil, os seguintes parâmetros da função renal: fluxo plasmático efetivo renal (depuração de para-aminohipurato de sódio), ritmo de filtração glomerular (depuração de creatinina) e as depurações de sódio, de potássio e osmolar, excreção fracionária de sódio e potássio, excreção de sódio e potássio e a resistência vascular renal. Os parâmetros cardiovasculares foram: pressão arterial média, freqüência cardíaca, pressão da veia cava inferior, índice cardíaco, hematócrito e índice de resistência vascular periférica. Os animais foram subdivididos, através de sorteio, em 4 grupos experimentais: Grupo 1 - G1 (n = 8) - grupo controle; Grupo 2 - G2 (n = 8) infusão de dopamina (2 µg.kg-1.min-1), Grupo 3 - G3 (n = 8) solução de cloreto de sódio a 7,5% (2 ml.kg-1) e Grupo 4 - G4 (n = 8) - associação de dopamina (2 µg.kg-1.min-1) e cloreto de sódio a 7,5% (2 ml.kg-1). Os grupos tiveram quatro fases experimentais e cada momento com duração de 30 minutos, compreendendo os momentos M1, M2, M3 e M4. RESULTADOS: O grupo da dopamina (G2) apresentou diminuição da pressão arterial média, da resistência vascular renal e da excreção de potássio. O grupo da solução hipertônica de cloreto de sódio (G3) apresentou aumento do índice cardíaco, do volume urinário, da depuração de sódio e de potássio, da excreção urinária de sódio e potássio e da excreção fracionária de sódio. No grupo da solução hipertônica de cloreto de sódio associada à dopamina (G4), ocorreu elevação da freqüência cardíaca, do índice cardíaco, do fluxo plasmático efetivo renal e da excreção urinária de sódio; ocorreu também diminuição do índice de resistência vascular sistêmica e do potássio plasmático. CONCLUSÕES: Deste estudo conclui-se que a solução hipertônica de cloreto de sódio foi capaz de melhorar as condições hemodinâmicas e, conseqüentemente, a função renal de cães sob restrição hídrica de 12 horas. O mesmo não aconteceu com a infusão de 2 µg.kg-1.min-1 de dopamina que, em situação similar, não causou aumento da diurese e da excreção de sódio.

Eficácia da solução de cloreto de sódio a 7,5% com e sem dextran 70 a 6% na preservação da função renal de cães hipovolêmicos submetidos à isquemia-reperfusão

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: As soluções hipertônicas de cloreto de sódio, associadas ou não a colóides hiperoncóticos, podem ser eficazes em proteger o rim em situações de hipovolemia. O objetivo deste estudo foi verificar, em cães, o real benefício dessas soluções sobre a função renal, em vigência de hipovolemia e isquemia do órgão. MÉTODO: em 24 cães, anestesiados com pentobarbital sódico, submetidos à nefrectomia direita e à expansão volêmica com solução de Ringer (1 ml.kg-1.min-1), foram observadas possíveis alterações renais morfo-funcionais após hemorragia de 20 ml.kg-1 e trinta minutos de total isquemia renal esquerda, com posterior reperfusão, além da repercussão renal da administração de soluções de cloreto de sódio 7,5% (SH) e esta em dextran 70 a 6% (SHD). Atributos estudados: FC, PAM, pressão de veia cava inferior, fluxo sangüíneo renal, resistência vascular renal, hematócrito, Na+, K+, osmolaridade plasmática, PaO2, PaCO2 e pH, depuração (para-aminohipurato de sódio - PAH-1, creatinina, osmolar, água livre, Na+, K+), fração de filtração, volume e osmolaridade urinários, excreções urinárias e fracionárias de Na+ e K+ e exame histopatológico do rim. Os atributos foram estudados em três grupos (G1, G2 e G3) e em cinco momentos. RESULTADOS: Houve elevação estatisticamente significativa da pressão arterial média em G2 e G3, da resistência vascular renal em G1, do fluxo sangüíneo renal e da depuração de PAH em G3, da excreção fracionária de Na+ em G2 e G3, das depurações de creatinina, osmolar, de água livre e de Na+ e K+, da excreção urinária de Na+ e K+ e do volume urinário em G3. CONCLUSÕES: A SHD administrada 15 minutos após hemorragia moderada e 30 minutos antes de insulto isquêmico de 30 minutos foi eficiente em proteger o rim de cães das repercussões da isquemia-reperfusão. Não foi constatada alteração histopatológica renal à microscopia óptica.

Efeitos do pneumoperitônio sobre a hemodinâmica e função renais de cães ventilados com volume e pressão controlados

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Avaliação da função renal do idoso em duas horas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos hemodinâmicos e renais da injeção de doses elevadas de clonidina no espaço peridural do cão

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Não existem estudos que relatem as repercussões renais determinadas pela injeção de doses elevadas de clonidina no espaço peridural. O objetivo do estudo foi avaliar os efeitos hemodinâmicos e renais determinados pela injeção de doses elevadas de clonidina no espaço peridural do cão. MÉTODO: Vinte animais anestesiados com tiopental sódico e fentanil foram distribuídos aleatoriamente e de forma duplamente encoberta em dois grupos: Grupo 1 ou placebo (n = 10), que recebeu 0,2 mL.kg-1 de solução fisiológica, e Grupo 2 ou clonidina (n = 10), que recebeu 0,2 mL.kg-1 de uma solução contendo 50 µg.mL-1 de clonidina, no espaço peridural. Foram avaliados os seguintes parâmetros hemodinâmicos: freqüência cardíaca (FC): bat.min-1; pressão arterial média (PAM): mmHg; pressão da artéria pulmonar ocluida (PAOP): mmHg; débito cardíaco (DC): L.min-1; volume sistólico (VS): mL; também, os seguintes parâmetros da função renal foram avaliados: fluxo sangüíneo renal (FSR): mL.min-1; resistência vascular renal (RVR): mmHg.mL-1.min; volume urinário minuto (VUM): mL.min-1; depuração de creatinina (D Cr): mL.min-1; depuração de para-aminohipurato (D PAH): mL.min-1; fração de filtração (FF); depuração de sódio (D Na): mL.min-1; depuração de potássio (D K): mL.min-1; excreção fracionária de sódio (EF Na): %; excreção urinária de sódio (U NaV): µEq.min-1; excreção urinária de potássio (U K V): µEq.min-1. O experimento consistiu em três momentos de 20 minutos cada. Os dados foram coletados aos 10 minutos de cada momento e a diurese, no início e no final de cada momento. Ao término de M1, a clonidina ou a solução fisiológica foi administrada no espaço peridural. Após período de 20 minutos iniciou-se M2 e, em seguida, M3. RESULTADOS: A clonidina na dose de 10 µg.kg-1 no espaço peridural do cão promoveu alterações significativas, com diminuições da freqüência cardíaca e do débito cardíaco e aumento da relação depuração de para-aminohipurato de sódio/débito cardíaco. CONCLUSÕES: Nas condições realizadas e nas doses empregadas, pode-se concluir que a clonidina não promoveu alteração da função renal, mas diminuiu valores hemodinâmicos (freqüência e débito cardíaco).

Efeitos da dexmedetomidina sobre o sistema renal e sobre a concentração plasmática do hormônio antidiurético: estudo experimental em cães

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: A insuficiência renal aguda peri-operatória é responsável por elevada taxa de morbidade e mortalidade. Os fármacos alfa2-agonistas aumentam o débito urinário e promovem boa estabilidade hemodinâmica nesse período. O objetivo desta pesquisa foi estudar os efeitos renais e sobre a concentração plasmática do hormônio antidiurético (HAD) provocados pela dexmedetomidina no cão anestesiado. MÉTODO: Trinta e seis cães adultos, anestesiados com propofol, fentanil e isoflurano, foram divididos aleatoriamente em três grupos que receberam, de modo encoberto: G1 - injeção de 20 mL de solução de cloreto de sódio a 0,9%, em 10 minutos, seguida de injeção de 20 mL da mesma solução em uma hora; G2 - injeção de 20 mL de solução de cloreto de sódio a 0,9% contendo dexmedetomidina (1 µg.kg-1), em 10 minutos, seguida de injeção de 20 mL da mesma solução, com a mesma dose de dexmedetomidina (1 µg.kg-1), em uma hora e G3 - injeção de 20 mL de solução de cloreto de sódio a 0,9% contendo dexmedetomidina (2 µg.kg-1) em 10 minutos, seguida de injeção de 20 mL da mesma solução, com a mesma dose de dexmedetomidina (2 µg.kg-1), em uma hora. As variáveis renais, hemodinâmicas e a concentração plasmática do HAD foram estudadas em quatro momentos: M1 (controle) - imediatamente após o período de estabilização; M2 - após a injeção inicial de 20 mL da solução em estudo, em 10 minutos, coincidindo com o início da injeção da mesma solução, em uma hora; M3 - 30 minutos após M2 e M4 - 30 minutos após M3. RESULTADOS: A dexmedetomidina reduziu a freqüência cardíaca e promoveu estabilidade hemodinâmica, mantendo constante o débito cardíaco. Houve elevação do débito urinário no G2 e G3, em comparação com o G1. A osmolalidade urinária no G2 e G3 foi menor no M3 e M4 em relação ao M1 e M2. A depuração de água livre aumentou no G3. A concentração plasmática do HAD diminuiu no G3, apresentando valores mais baixos que os observados no G1 e G2 em M2 e M4. CONCLUSÕES: Os cães anestesiados com baixas doses de dexmedetomidina promovem diurese hídrica por inibir a secreção do hormônio antidiurético, havendo potencial para proteção renal em eventos isquêmicos.