Heat stress adaptation in hyperthermophiles: bosynthesis of inositol-containing compatible solutes

Dissertation presented to obtain the Ph.D. degree in Biochemistry

Imunossensores Eletroquímicos para o Diagnóstico Precoce e Descentralizado do Cancro da Mama

O cancro é uma das principais causas de morte em todo o mundo. Entre as mulheres, o cancro da mama é o mais frequente. A deteção precoce do cancro é de extrema importância na medida em que pode aumentar as possibilidades de cura dos pacientes e contribuir para a diminuição da taxa de mortalidade desta doença. Um método que tem contribuído para a deteção precoce do cancro é a análise de biomarcadores. Biomarcadores associados ao cancro da mama, como o Recetor 2 do Fator de Crescimento Epidérmico Humano (HER2) e o Antigénio Carbohidratado 15-3 (CA 15-3), podem ser detetados através de dispositivos como os biossensores. Neste trabalho foram desenvolvidos dois imunossensores eletroquímicos para a análise de HER2 e CA 15-3. Para ambos os sensores foram utilizados, como transdutores, elétrodos serigrafados de carbono. A superfície destes transdutores foi nanoestruturada com nanopartículas de ouro. Foram realizados imunoensaios não-competitivos (do tipo sandwich) em ambos os imunossensores, cuja estratégia consistiu na (i) imobilização do respetivo anticorpo de captura na superfície nanoestruturada dos elétrodos, (ii) bloqueio da superfície com caseína, (iii) incubação com uma mistura do analito (HER2 ou CA 15-3) e o respetivo anticorpo de deteção biotinilado, (iv) adição de estreptavidina conjugada com fosfatase alcalina (S-AP; a AP foi utilizada como marcador enzimático), (v) adição de uma mistura do substrato enzimático (3-indoxil fosfato) e nitrato de prata, e (vi) deteção do sinal analítico através da redissolução anódica, por voltametria de varrimento linear, da prata depositada enzimaticamente. Com as condições experimentais otimizadas, foi estabelecida a curva de calibração para a análise de HER2 em soro, entre 15 e 100 ng/mL, obtendo-se um limite de deteção de 4,4 ng/mL. Para o CA 15-3 a curva de calibração (em solução aquosa) foi estabelecida entre 15 e 250 U/mL, obtendo-se um limite de deteção de 37,5 U/mL. Tendo em conta o valor limite (cutoff value) estabelecido para o HER2 (15 ng/mL) pode-se comprovar a possível utilidade do imunossensor desenvolvido para o diagnóstico precoce e descentralizado do cancro da mama. No caso do CA 15-3 serão necessários estudos adicionais para se poder avaliar a utilidade do imunossensor para o diagnóstico do cancro da mama.

Tecnologias Multimédia no Apoio ao Ensino da Assistência Pré-Hospitalar

Vivemos num mundo em constante mudança, onde a evolução tecnológica está cada vez mais presente no nosso quotidiano e as suas influências são inúmeras nas nossas vidas. Por outro lado, a vida humana é algo extremamente valioso e único pelo que a sociedade, também nessa área, tem procurado evoluir e dotar-se de novos meios e mecanismos de atuação, que possibilitem um socorro rápido e adequado em situações que possam em algum momento pôr em perigo a vida do ser humano. Pretendemos com o presente estudo, correlacionar estas duas vertentes, a do socorro á vítima para apoio á vida humana e a tecnologia no sentido de contribuir para uma formação mais distribuída mas ao mesmo tempo capaz de transmitir conhecimentos necessários á formação dos que socorrem. Para o efeito, planeamos o desenvolvimento de um Objeto de Aprendizagem (OA) denominado CiTAT (Curso Interativo de Tripulante de Ambulância de Transporte) que tem como objetivo acrescentar valor a todos os que são obrigados a frequentar o curso em regime presencial de Tripulante de Ambulância de Transporte (TAT). Após uma fase de análise do estado da arte relacionada com este tipo de formação, e após termos percebido como funciona e que tipos de recursos utilizam, analisámos temas relacionados com este tipo de formação como o “Sistema Integrado de Emergência Médica” o “Exame á Vítima”, o “Suporte Básico de Vida” e as “Emergências de Trauma”. Percebemos que a mudança de paradigma de formação das pessoas passou a ter novas formas de distribuir conhecimento em formato digital e que proporciona aos formandos um ensino distribuído em formatos de e-learning ou de b-learning. Os Objetos de Aprendizagem (OA) parecem assumir um relevo especial no ensino da área da saúde, abordando áreas temáticas e proporcionando aos seus utilizadores mecanismos de autoavaliação após a visualização dos conteúdos pedagógicos. Após o desenho do modelo concetual do CiTAT, avançamos para a produção de recursos necessários para a sua integração no OA. Após uma fase de testes e ajustes, avançamos para a sua avaliação final por parte dos utilizadores e preparamos um questionário para aferir o potencial de utilização deste tipo de soluções no ensino de TAT, atendendo ao facto de ser uma formação obrigatória e cuja recertificação é feita de três em três anos. O passo final foi a sua distribuição ao nível global, sendo o CiTAT catalogado com metadados e colocado no repositório MERLOT.

The impact of the social class on the development of money knowledge

A Work Project, presented as part of the requirements for the Award of a Masters Degree in Management from the NOVA – School of Business and Economics

Quality of essential drugs in tropical countries: evaluation of antimalarial drugs in the Brazilian Health System

INTRODUCTION: The emergence of drug resistance is one of the main problems concerning malaria treatment. The use of counterfeit and/or substandard antimalarial drugs can contribute to the development of parasite resistance. Thus, the aim of this study was to evaluate the quality of antimalarial drugs distributed in Brazil. METHODS: Samples containing chloroquine phosphate, mefloquine hydrochloride, primaquine phosphate, and quinine sulfate tablets were delivered to the Rio de Janeiro central storeroom (CENADI), state storerooms (SS), and Basic Health Units (BHUs) in the north region of Brazil - a total of 10 sample sets. After 5 months of storage, the samples were collected, and in vitro quality control analyses according to official and published methods were performed. RESULTS: Inadequate drug storage conditions were found in two SS and in all BHUs evaluated. There were no quality deviations found in the chloroquine samples. The quinine samples exhibited weight variation above the allowed limits. The primaquine samples were found to have packaging deficiency. The release of mefloquine in samples from some regions showed a statistically significant difference when compared with the CENADI samples. CONCLUSIONS: It is important to periodically evaluate the quality and storage conditions of essential drugs. The quality deviations found with the primaquine and quinine samples are not related to storage conditions and must be addressed urgently. The decreased mefloquine release from tablets is related to formulation problems or influenced by inadequate storage conditions, prompting further investigation. Even with the mentioned problems, the samples would probably not contribute to resistant parasite selection.

Fotografia-História, o pensamento em imagens : Contributos para a leitura de «História da Imagem Fotográfica em Portugal, 1839-1997» (António Sena, 1998) como um hiperdocumento

Com esta investigação pretende-se caracterizar a relação indissociável entre História e Fotografia, reconhecendo as múltiplas formas de manipulação e respectivos mecanismos de hierarquização de poder, que não apenas determinam o desenvolvimento da sua produção, arquivo e recepção, como desvendam uma constelação de ligações disciplinares, técnicas e políticas que potenciam e moldam o seu sentido. Esta problemática é analisada no contexto português, a partir das práticas de exposição, publicação e colecção fotográfica e consequente ajuste do discurso teórico e crítico nas décadas de 1980 e 1990, adoptando como eixo de pesquisa o trabalho de investigação e historiografia desenvolvido entre 1973 e 1998 por António Sena e, especificamente, o modo como aplica a História (de um meio) como hiperdocumento. O filme Olho de Vidro, uma História da Fotografia (1982), realizado por António Sena e Margarida Gil, as iniciativas fotográficas desenvolvidas pela associação ether/vale tudo menos tirar olhos entre 1982 e 1994, a criação da base de dados Luzitânia/ ether pix database e as publicações Uma História de Fotografia (1991) e História da Imagem Fotográfica em Portugal, 1839-1997 (1998) da autoria de António Sena, formam o corpus do nosso estudo de caso.

Relação entre coordenação motora e comportamento sedentário, em crianças

Relatório de atividade profissional de mestrado em Ensino de Educação Física nos Ensinos Básico e Secundário

Práticas centradas na família: identificação de comportamentos para uma prática de qualidade nos distritos de Braga, Viana do Castelo e Vila Real

Dissertação de mestrado em Educação Especial (área de especialização em Intervenção Precoce)

Influence of river ecological condition on changes in physico-chemical water parameters along rivers

Dissertação de mestrado em Ecology

Desenvolvimento e caracterização de membranas de remoção de compostos de arsénio em água

Dissertação de mestrado em Técnicas de Caracterização e Análise Química

Influência do filer e da borracha no comportamento do mástique asfáltico

Dissertação de mestrado integrado em Engenharia Civil

Persistent organic chemicals of emerging environmental concern

The use of chemicals and chemical derivatives in agriculture and industry has contributed to their accumulation and persistence in the environment. Persistent organic pollutants (POPs) are among the environmental pollutants of most concern since, when improperly handled and disposed, they can persist in the environment, bioaccumulate through the food web, and may create serious public health and environmental problems. Development of an effective degradation process has become an area of intense research. The physical/chemical methods employed, such as volatilization, evaporation, photooxidation, adsorption, or hydrolysis, are not always effective, are very expensive, and, sometimes, lead to generation/disposal of other contaminants. Biodegradation is one of the major mechanisms by which organic contaminants are transformed, immobilized, or mineralized in the environment. A clear understanding of the major processes that affect the interactions between organic contaminants, microorganisms, and environmental matrix is, thus, important for determining persistence of the compounds, for predicting in situ transformation rates, and for developing site remediation. Information on their risks and impact and occurrence in the different environmental matrices is also important, in order to attenuate their impact and apply the appropriate remediation process. This chapter provides information on the fate of pesticides and polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), their impact, bioavailability, and biodegradation. © Springer Science+Business Media Dordrecht 2014.

Evidence against a direct role of klotho in insulin resistance.

The klotho gene may be involved in the aging process. Klotho is a coactivator of FGF23, a regulator of phosphate and vitamin D metabolism. It has also been reported to be downregulated in insulin resistance syndromes and paradoxically to directly inhibit IGF-1 and insulin signaling. Our aim was to study klotho's regulation and effects on insulin and IGF-1 signaling to unravel this paradox. We studied klotho tissue distribution and expression by quantitative real-time polymerase chain reaction and Western blotting in obese Zucker rats and high-fat fed Wistar rats, two models of insulin resistance. Klotho was expressed in kidneys but at much lower levels (<1.5%) in liver, muscle, brain, and adipose tissue. There were no significant differences between insulin resistant and control animals. We next produced human recombinant soluble klotho protein (KLEC) and studied its effects on insulin and IGF-1 signaling in cultured cells. In HEK293 cells, FGF23 signaling (judged by FRS2-alpha and ERK1/2 phosphorylation) was activated by conditioned media from KLEC-producing cells (CM-KLEC); however, IGF-1 signaling was unaffected. CM-KLEC did not inhibit IGF-1 and insulin signaling in L6 and Hep G2 cells, as judged by Akt and ERK1/2 phosphorylation. We conclude that decreased klotho expression is not a general feature of rodent models of insulin resistance. Further, the soluble klotho protein does not inhibit IGF-1 and/or insulin signaling in HEK293, L6, and HepG2 cells, arguing against a direct role of klotho in insulin signaling. However, the hypothesis that klotho indirectly regulates insulin sensitivity via FGF23 activation remains to be investigated.

Suicidal expression among school-attending adolescents in a middle-income sub-Saharan country.

We investigated correlates for suicidal expression among adolescents in the Seychelles. Data on 1,432 students (52% females) were derived from the Global School-based Health Survey. Participants were divided into three groups: those with no suicidal behavior (N = 1,199); those with suicide ideation/SI (N = 89); and those reporting SI with a plan to carry out a suicide attempt/SISP (N = 139), each within a 12-month recall period. Using multinomial logistic regression, we examined the strength of associations with social, behavioral and economic indicators while adjusting for covariates. Sixteen percent of school-attending adolescents reported a suicidal expression (10% with a plan/6.2% without). Those reporting SI were younger (relative risk ratio RRR = 0.81; CI = 0.68-0.96), indicated signs of depression (RRR = 1.69; CI = 1.05-2.72) and loneliness (RRR=3.36; CI =1.93-5.84). Tobacco use (RRR = 2.34; CI = 1.32-4.12) and not having close friends (RRR = 3.32; CI = 1.54-7.15) were significantly associated with SI. Those with SISP were more likely to be female (RRR = 0.47; 0.30-0.74), anxious (RRR = 3.04; CI = 1.89-4.88) and lonely (RRR = 1.74; CI = 1.07-2.84). Having no close friends (RRR = 2.98; 1.56-5.69) and using tobacco (RRR = 2.41; 1.48-3.91) were also strongly associated. Having parents who were understanding was protective (RRR = 0.50; CI = 0.31-0.82). Our results suggest that school health promotion programs may benefit from targeting multiple factors associated with suicidal expression. More research, particularly multilevel designs are needed to identify peer and family influences which may modify associations with suicidality.

tagO is involved in the synthesis of all anionic cell-wall polymers in Bacillus subtilis 168.

Sequence homologies suggest that the Bacillus subtilis 168 tagO gene encodes UDP-N-acetylglucosamine:undecaprenyl-P N-acetylglucosaminyl 1-P transferase, the enzyme responsible for catalysing the first step in the synthesis of the teichoic acid linkage unit, i.e. the formation of undecaprenyl-PP-N-acetylglucosamine. Inhibition of tagO expression mediated by an IPTG-inducible P(spac) promoter led to the development of a coccoid cell morphology, a feature characteristic of mutants blocked in teichoic acid synthesis. Indeed, analyses of the cell-wall phosphate content, as well as the incorporation of radioactively labelled precursors, revealed that the synthesis of poly(glycerol phosphate) and poly(glucosyl N-acetylgalactosamine 1-phosphate), the two strain 168 teichoic acids known to share the same linkage unit, was affected. Surprisingly, under phosphate limitation, deficiency of TagO precludes the synthesis of teichuronic acid, which is normally induced under these conditions. The regulatory region of tagO, containing two partly overlapping sigma(A)-controlled promoters, is similar to that of sigA, the gene encoding the major sigma factor responsible for growth. Here, the authors discuss the possibility that TagO may represent a pivotal element in the multi-enzyme complexes responsible for the synthesis of anionic cell-wall polymers, and that it may play one of the key roles in balanced cell growth.