Efeitos da Imunocastração e de agonistas beta-adrenérgicos sobre a qualidade da carne de bovinos

Os agonistas beta-adrenérgicos (βAA) são conhecidos por aumentar a hipertrofia muscular e lipólise, neste caso uma maneira de se reduzir o efeito da lipólise seria a imunocastração. Dessa forma, o objetivo deste projeto foi avaliar o efeito dos βAA e da imunocastração sobre a qualidade da carne de bovinos Nelore. Foram utilizados noventa e seis bovinos Nelore, sendo que metade dos animais (n=48) receberam uma dose da vacina de imunocastração, e após 30 dias receberam a segunda dose. A outra metade dos animais (n=48) não recebeu nenhuma dose da vacina. Durante 70 dias os animais foram alimentados com uma dieta padrão composta de 24% volumoso e 76% de concentrado. Após 70 dias de confinamento os animais foram divididos em três grupos, dentro de bloco (peso inicial) e condição sexual e foram alimentados por 30 dias, com umas das seguintes dietas: CON - dieta padrão utilizada na fase anterior, sem a adição de βAA; ZIL - dieta padrão acrescida de 80 mg/dia Cloridrato de Zilpaterol; RAC - dieta padrão acrescida de 300 mg/dia Cloridrato de Ractopamina. Ao final desse período os animais foram abatidos e colhidas amostras do músculo Longissimus dorsi para as avaliações de qualidade de carne, lipídeos totais, perfil de ácidos graxos, análise sensorial do consumidor, perfil morfométrico muscular, expressão dos genes calpaína e calpastatina, comprimento de sarcômero. Para a maioria das características avaliadas não foram observadas interações entre os tratamentos. Ao avaliar o efeito da condição sexual, os animais imunocastrados apresentaram maiores intensidades de cor L, a e b, lipídios totais, ácidos oleico, palmítico e total de monoinsaturados e maior frequência para as fibras oxidativas (FO) e glicolíticas (FG) em relação aos não-castrados. Contudo, os animais não-castrados tiveram uma tendência a apresentarem uma carne mais macia na análise sensorial e obtiveram maior frequência das fibras oxidativasglicolíticas (FOG) em relação aos imunocastrados. Quanto ao efeito dos βAA, o grupo ZIL apresentaram uma carne menos macia na força de cisalhamento, maiores concentrações de ácidos heptadecanoico, linoleico, araquidonico ácido C20:3 N6C8C11C14, ômega 6, maior frequência para as FO e menor para FG em comparação ao grupo RAC e CON. No entanto, os animais do grupo CON e ZIL apresentaram maior área para as FO em comparação ao grupo RAC, enquanto que para as FOG, os animais do grupo CON tiveram maior área do que os animais do grupo RAC e ZIL. Na análise sensorial, os grupos RAC e ZIL receberam menores notas para os atributos textura e qualidade global em relação ao CON. Não foi observado efeito da condição sexual e dos βAA sobre a expressão dos genes e comprimento de sarcômero. Conclui-se que a condição sexual e a suplementação com os βAA podem alterar a qualidade da carne, perfil de ácidos graxos e morfométrico muscular, sem, contudo, alterar a expressão dos genes e do comprimento de sarcômero.

Efeito da suplementação prolongada de grão de soja cru e integral no pré-parto sobre o desempenho produtivo, qualidade oocitária e embrionária, e função imune de vacas leiteiras

Objetivou-se avaliar o efeito da suplementação prolongada de grão de soja cru e integral (GSI) como fonte de ácido graxo Ω6 sobre o desempenho produtivo, perfil metabólico, qualidade oocitária e embrionária e função imune de vacas leiteiras no período de transição e início de lactação. Foram selecionadas 44 vacas da raça Holandesa, multíparas e gestantes, com parto previsto para 90 dias após o início da avaliação e fornecimento das dietas experimentais, porém em razão da ocorrência de enfermidades metabólicas ou infecciosas (3 abortos; 3 deslocamentos de abomaso; 3 enfermidades podais; 4 distocias) 13 animais foram retirados do experimento. As vacas foram distribuídas aleatoriamente em quatro grupos experimentais diferindo entre eles o início do fornecimento de grão de soja cru e integral (GSI) durante o pré-parto. A dieta era baseada na inclusão de 12% de GSI %MS, com aproximadamente 5,1% de extrato etéreo (EE) o início de seu fornecimento foi conforme descrito a seguir: Grupo 0: Animais não receberam dieta contendo GSI no pré-parto; Grupo 30: Início do fornecimento de dieta com GSI nos 30 dias finais da gestação; Grupo 60: Início do fornecimento de dieta com GSI nos 60 dias finais da gestação; Grupo 90: Início do fornecimento de dieta com GSI nos 90 dias finais da gestação. Após o parto, todas as vacas receberam dieta única com 5,1% de EE, baseada na inclusão de 12% de GSI %MS até 90 dias de lactação. Os animais foram arraçoados de acordo com o consumo de matéria seca no dia anterior, de forma a ser mantido porcentual de sobras das dietas, diariamente, entre 5 e 10%. As amostras dos alimentos e sobras foram coletadas diariamente e armazenadas a -20ºC. Semanalmente as amostras coletadas diariamente foram misturadas e foi retirada uma amostra composta referente a um período de uma semana, a fim de mensurar o consumo de matéria seca e nutrientes. Amostras de fezes foram coletadas nos dias -56, -21, 21, 56 e 84 dias em relação ao parto, com o propósito de mensurar a digestibilidade da matéria seca e nutrientes. A produção de leite foi mensurada diariamente e para a composição dos teores de gordura, proteína, lactose e perfil de ácidos graxos amostras foram coletadas semanalmente. As amostras de sangue para análise dos metabólitos sanguíneos foram coletadas semanalmente. Amostras de sangue para mensurar a atividade do sistema imune foram coletadas na semanas -8, -4, -2, -1 em relação ao parto, parto, +1, +2, +4 e +8 semanas no período pós-parto. Nos dias 21, 42, 63 e 84 do período pós-parto foram realizadas aspirações foliculares, com posterior fertilização in vitro dos oócitos. Todas as variáveis mensuradas foram analisadas pelo procedimento PROC MIXED do SAS 9.4 através de regressão polinomial, utilizando efeito fixo de tratamento, semana, interação tratamento*semana e efeito de animal dentro de tratamento como aleatório. Utilizou nível de 5% de significância. Foi observado efeito (P<0,05) linear crescente para CEE no pré-parto. Não foi observado diferenças no CMS e nutrientes no pós-parto. Não houve alteração da digestibilidade nos períodos pré e pós-parto. Não houve alteração no balanço de energia e nitrogênio nos periodos pré e pós-parto. Não foi observado diferença na produção, composição e teor dos componentes totais do leite. No perfil de ácidos graxos do leite houve efeito (P<0,05) linear descrescente para as concentrações de C16:1cis, C18:1 cis, total de C:18 insaturado, total de AG monoinsaturados, insaturados e a relação do total de AGS:AGI. Foi observado efeito linear (P<0,05) crescente para o total de AG aturado e efeito (P<0,05) quadrático para C18:2, CLAcis9-trans11, e total de AGPI. Foi observado efeito linear crescente (P<0,05) para colesterol total, LDL no préparto e linear decrescente (P<0,05) para GGT nos períodos pré e pós-parto. Foi observado efeito quadrático (P<0,05) para HDL no pré-parto e AST no pós-parto. Em relação a atividade do sistema imune foi observado efeito linear (P<0,05) crescente para o percentual de CD3+ ativos no pós-parto, para o percentual de monócitos que produziram espécie reativa de oxigênio (ERO) no pós-parto quando foram estimulados por S.aureus e E.coli e para a intensidade de imunofluorescência de ERO para ganulócitos no pós-parto quando estimulados por S.aureus. Foi observado efeito (P<0,05) quadrático para o percentual de granulócitos, mononucleares, CD8+ ativos no pós-parto e para o percentual de granulócitos que produziram ERO no pós-parto quando estimulados por E.coli. A suplementação prolongada com GSI no pré-parto melhora a atividade do sistema imune, não melhora a qualidade oocitária e embrionária bem como não influencia negativamente os parametros produtivos de vacas leiteiras no período de transição e início de lactação

Products of Cytochrome P450BioI (CYP107H1)-Catalyzed Oxidation of Fatty Acids

[GRAPHICS] Oxidation of tetradecanoic and hexadecanoic acids by cytochrome P450(Biol) (CYP107H1) produces mainly the 11-, 12-, and 13-hydroxy C-14 fatty acids and the 11- to 15-hydroxy C-16 fatty acids, respectively. In contrast to previous reports, terminal hydroxylation is not observed. The enantiospecificity of fatty acid hydroxylation by P450(Biol) was also determined, and the enzyme was shown to be moderately selective for production of the (R)-alcohols.

Fatty acids as haptens: exploring the limits of antigenicity

Fatty acids (FAs) are relatively small, hydrophobic and highly mobile molecular structures with vital biological functions and a ubiquitous distribution. Surprisingly, however, they can be rendered immunogenic. We have synthesised a novel immunogen in which dicarboxylic linoleic acid was conjugated to a carrier protein. Dicarboxylic fatty acids (DCA) differ from their normal counterparts only by their possession of a carboxyl group at each end of the molecule. When conjugated to proteins as haptens, they are, therefore, presented to the immune system with a free carboxyl group at the distal end, instead of a methyl group. Polyclonal IgG antibodies raised in response to this unique immunogen could bind not only conjugated hapten with high affinity, but also the equivalent free FA in mono and dicarboxylic form. Similar conjugates constructed from normal FAs produced much weaker antibody responses and could scarcely be considered antigenic at all. The cross-reactivities of the anti-DCA antibodies with FA variants differing in the number, position and configuration of their double bonds showed that the antibody paratope (binding site) was structured to accommodate the hapten in a way that depended on the precise shape of the acyl chain. We suggest that FAs become much more effective as B-cell epitopes when presented with their hydrophilic carboxyl group exposed on the surface of immunogenic conjugates. This type of epitope is determined by the particular double bond pattern of the unsaturated acyl chain, as well as the polar head group. (C) 2003 Elsevier Ltd. All rights reserved.

An adaptogenic role for omega-3 fatty acids in stress; a randomised placebo controlled double blind intervention study (pilot) [ISRCTN22569553]

Background There is evidence for an adaptive role of the omega -3 fatty acid, docosahexaenoic acid (DHA) during stress. Mechanisms of action may involve regulation of stress mediators, such as the catecholamines and proinflammatory cytokines. Prevention of stress-induced aggression and hostility were demonstrated in a series of clinical trials. This study investigates whether perceived stress is ameliorated by DHA in stressed university staff. Methods Subjects that scored ≥ 17 on the Perceived Stress Scale were randomised into a 6-week pilot intervention study. The diet reactive group was supplemented with 6 g of fish oil containing 1.5 g per day DHA, while the placebo group was supplemented with 6 g a day of olive oil. The groups were compared with each other and a wider cross sectional study population that did not receive either active or placebo intervention. Results There was a significant reduction in perceived stress in both the fish oil and the placebo group from baseline. There was also a significant between-group difference between the fish oil group and the no-treatment controls in the rate of stress reduction (p < 0.05). However, there was not a significant between-group difference between the fish oil and the placebo group, nor the placebo group and the control group. These results are discussed in the context of several methodological limitations. The significant stress reductions in both the fish oil and the placebo group are considered in view of statistical regression, an effect likely to have been exaggerated by the time course of the study, a large placebo effect and the possibility of an active effect from the placebo. Conclusion There were significant differences (p < 0.05) in the fish oil group compared with no-treatment controls. This effect was not demonstrated in the placebo group. As a pilot study, it was not sufficiently powered to find the difference between the fish oil group and the placebo group significant. Further work needs to be undertaken to conclusively demonstrate these data trends. However, the findings from this research support the literature in finding a protective or 'adaptogenic' role for omega-3 fatty acids in stress.

Cyclopropyl containing fatty acids as mechanistic probes for cytochromes P450

The mechanism of aliphatic hydroxylation by cytochromes P450 has been the subject of intense debate with several proposed mechanistic alternatives. Various cyclopropyl containing compounds (radical clocks), which can produce both unrearranged and ring opened products upon oxidation, have been key tools in these investigations. In this study, we introduce several cyclopropyl containing fatty acids 1a-4a with which to probe the mechanism of P450s capable of fatty acid hydroxylation. The probes are shown to be capable of distinguishing radical from cationic intermediates due to the rapid equilibration of isomeric cyclopropyl cations. Ring opening of a radical intermediate in an oxidative transformation is expected to yield a single rearranged alcohol, whereas a cation isomerizes prior to ring opening, leading to two isomeric homoallylic alcohols. Oxidation of these probes by P450(BM3) and P450(Biol) gives results consistent with a radical but not a cationic intermediate in fatty acid hydroxylation by these enzymes. Quantitation of the unrearranged and ring opened products gives remarkably homogeneous rates for oxygen rebound of (2-3) x 10(10) s(-1). The effects of introduction of a cyclopropane ring into a fatty acid upon the regiochemistry of hydroxylation are discussed.

Cholesterol and fatty acids regulate dynamic caveolin trafficking through the golgi complex and between the cell surface and lipid bodies

Caveolins are a crucial component of plasma membrane (PM) caveolae but have also been localized to intracellular compartments, including the Golgi complex and lipid bodies. Mutant caveolins associated with human disease show aberrant trafficking to the PM and Golgi accumulation. We now show that the Golgi pool of mainly newly synthesized protein is detergent-soluble and predominantly in a monomeric state, in contrast to the surface pool. Caveolin at the PM is not recognized by specific caveolin antibodies unless PM cholesterol is depleted. Exit from the Golgi complex of wild-type caveolin-1 or -3, but not vesicular stomatitis virus-G protein, is modulated by changing cellular cholesterol levels. In contrast, a muscular dystrophy-associated mutant of caveolin-3, Cav3P104L, showed increased accumulation in the Golgi complex upon cholesterol treatment. In addition, we demonstrate that in response to fatty acid treatment caveolin can follow a previously undescribed pathway from the PM to lipid bodies and can move from lipid bodies to the PM in response to removal of fatty acids. The results suggest that cholesterol is a rate-limiting component for caveolin trafficking. Changes in caveolin flux through the exocytic pathway can therefore be an indicator of cellular cholesterol and fatty acid levels.