968 resultados para Universidad Autónoma de Nuevo León. Facultad de Organización Deportiva . Departamento de Sistemas
Resumo:
Introduccin: A mediados de los aos 70s del siglo pasado el descubrimiento de la tecnologa del ADN recombinante marca el inicio de la era de la biotecnologa moderna. La implementacin de estas tecnologas permiti la utilizacin de organismos como sistemas de expresin que a lo largo de los aos ha generado la produccin de una gran variedad de productos biolgicos. Dentro de estos sistemas Pichia pastoris es un sistema de expresin ampliamente utilizado debido a sus caractersticas tales como la produccin de protenas en grandes cantidades, la liberacin de los productos al medio de cultivo, la obtencin de productos complejos que requieren modificaciones postraduccionales tpicas de los eucariotas o que contienen puentes disulfuro, entre otras. Nocardia brasiliensis es una bacteria parcialmente cido-alcohol resistente la cual forma colonias granulares, con hifas areas escasas, sus colonias exhiben un color anaranjado pardo con bordes en blanco. N. brasiliensis es patgena para el ser humano y es el agente causal del actinomicetoma. El actinomicetoma es una enfermedad crnica generalmente localizada en las extremidades. Se caracteriza por ser un proceso lento de tumefaccin con ndulos, abscesos y fstulas.La Superxido Dismutasa (SOD) es una enzima reductora polimrica que cataliza la conversin del in superxido a perxido de hidrgeno y oxgeno molecular. La SOD ha sido propuesta como un factor de virulencia de microorganismos patgenos, cuya accin consiste en bloquear los efectores oxidativos del estallido respiratorio iniciado por los fagoctos en el fagolisosoma. Este mecanismo ha sido descrito para bacterias de los gneros Mycobacterium, Rhodococcus y Nocardia. Objetivo: producir y caracterizar la Superxido Dismutasa A (SODA) de Nocardia brasiliensis en Pichia pastoris. Metodologa: se realiz el diseo de primers adicionando secuencias de sitios de corte para las enzimas XhoI y AvrII, as como una cola de histidinas en el extremo 5 para la amplificacin del gen sodA de N. brasiliensis a partir del ADN genmico de Nocardia brasiliensis. El amplicn se clon en el vector de expresin pPIC9. Se llev a cabo la transformacin por electroporacin de levaduras Pichia pastoris GS115. La produccin de SOD se llev a cabo en inducciones de 96 h con metanol como agente inductor. Los sobrenadantes se dializaron con membranas de celulosa. Los dializados se observaron por SDS-PAGE y western blot. Se analiz la actividad funcional de la enzima con el SOD Assay kit de Sigma Aldrich. Resultados: Por reaccin en cadena de la polimerasa se obtuvo una secuencia de 625 pb correspondiente al gen sodA. El fragmento se lig al vector de expresin pPIC9 y fue caracterizado con las enzimas de restriccin XhoI y AvrII. Las cepas trasformadas de P. pastoris GS115 se caracterizaron con el gen aox1 obteniendo cepas Mut+ y Muts. Los anlisis por SDSPAGE mostraron bandas no observadas en el control negativo de expresin mientras en los western blot solo una de las clonas mostr seal. Los anlisis de actividad funcional sugieren inhibicin de la reaccin enzimtica infiriendo presencia de la protena SOD en el medio dializado. Conclusiones: Se logr la construccin del sistema de expresin Pichia pastoris con el casete de expresin de la SOD de N. brasiliensis. As como la generacin de cepas Mut+y Muts. En los ensayos de actividad funcional se observ inhibicin de la reaccin enzimtica.
Resumo:
Introduccin. La Secretara de Salud enfoca sus campaas de prevencin y diagnstico oportuno de cnceres ginecolgicos a los tumores de mama y cervicouterino, dejando un poco en el olvido a los de endometrio y ovario. Estos dos ltimos comienzan a reclamar atencin debido a la falta de mtodos certeros de diagnstico. Es por ello que el presente trabajo pretende sentar las bases para el desarrollo de una futura prueba de diagnstico molecular utilizando el Papanicolaou en base lquida; este ambicioso enfoque toma como punto de partida la descripcin de las variantes genticas presentes en poblacin mexicana, pues a la fecha no existe un estudio que muestre este conocimiento gentico. Los genes BRCA1/2 son genes cuyas mutaciones emblemticas estn presentes en el desarrollo del cncer de ovario y que se toma como un punto de partida para los siguientes anlisis de secuenciacin de nueva generacin. Materiales y Mtodos. Al ser un primer aporte de esta nueva lnea de investigacin, el proyect contempl la recoleccin de tumores en muestras de tejido embebido en parafina, tanto provenientes del ovario como del endometrio. Adems, inici con el reclutamiento de pacientes con alguna de stas dos neoplasias a las cuales se les solicit una muestra de sangre, Papanicolaou en base lquida y biopsia de tejido tumoral. A todas las muestras se les realiz la extraccin de su ADN para su ingres al Biobanco Piloto Institucional y posteriormente se realizaron estudios de secuenciacin de nueva generacin utilizando la plataforma Illumina y teniendo como blanco de estudio a los genes BRCA1/2. nicamente se secuenci el ADN proveniente de los tumores de ovario. Resultados. Se aportaron 50 muestras de tumores de ovario y 60 muestras de tumores de endometrio, as como cinco pacientes con cncer de ovario y seis con cncer de endometrio de los que, adems del tumor, se obtuvo una muestra de su sangre y una ms de Papanicolaou en base lquida. El anlisis bioinformtico de la secuenciacin arroj la presencia de 174 variantes distribuidas en 48 de las 50 muestras analizadas; 70 variantes haban sido reportadas previamente y el resto fue reportado por vez primera. Destacaron ocho variantes patognicas (rs80356862, rs80358027, rs80358981, rs80357219 y rs80357260 en BRCA1, y rs80358557 y rs80359775 en BRCA2) y una muestra portadora de 70 variantes (tres de ellas patognicas) las cuales comprometen la funcin de las protenas producidas. Conclusin: El presente trabajo aport una coleccin debidamente resguardada de tumores de ovario y otra de endometrio. En la coleccin de aquellos tumores de ovario se logr describir las variantes polimrficas presentes en los genes BRCA1/2, siendo el primer estudio de este tipo en la Repblica Mexicana. El conocimiento aqu generado coloca las bases para la bsqueda de aquellas averas genticas emblemticas de este tumores, en pro del futuro desarrollo de una prueba de diagnstico molecular para su deteccin oportuna.
Resumo:
El trmino fusoquina se utiliza para denominar a las protenas de fusin compuestas por dos diferentes citocinas. Las citocinas son una familia de protenas y glicoprotenas solubles que controlan la activacin, proliferacin e incluso la muerte celular programada de clulas del sistema inmune. Debido a su participacin natural como inmunomoduladores se ha investigado su importancia en la regulacin de microambiente tumoral. Dos de las quimiocinas que se han estudiado son IP10 y linfotactina. En nuestro equipo de trabajo se construy previamente un vector adenoviral que expresa la fusin de estas quimiocinas. Por lo que el propsito de este trabajo fue evaluar el efecto antitumoral y antiangiognico de este adenovirus. Para esto se produjeron las partculas virales a gran escala, se purificaron y cuantificaron por el mtodo de punto final en placa. El modelo in vivo que se utiliz fue la cepa de ratn C57BL/6 y la lnea tumoral de pulmn TC-1. Para determinar si el Ad-FIL incrementa el efecto antitumoral de la vacuna de DNA CRT/E7, los ratones fueron sensibilizados con sta vacuna y posteriormente se les administraron los tratamientos Ad-Vaco, Ad-IP10, Ad-LPTN, Ad-IP10 + Ad-LPTN o Ad-FIL. Para le evaluacin del efecto antiangiognico los ratones fueron sacrificados y se obtuvieron los tumores, estos fueron procesados por la tcnica histolgica y se llev a cabo una inmunohistoqumica para el marcador de vasos CD31. Finalmente se realiz un ensayo antitumoral empleando las mismas construcciones en un contexto de vacunas de DNA, para esto se emplearon dos grupos de ratones, uno de los grupos de ratones recibieron ambas vacunas de DNA (CRT/E7 + quimiocinas) mientras que el otro grupo de ratones recibieron solamente las quimocinas. La fusoquina FIL compuesta por IP10 y Linfotactina no present efecto antitumoral en el modelo estudiado; sin embargo, si present un efecto antiangiognico significativo. Se deber estudiar esta fusoquina en otros modelos y condiciones para continuar evaluando su efecto biolgico, as como su utilidad al administrarla en combinacin con otros tratamientos.
Resumo:
Introduccin: El sistema nervioso tiene como funcin el controlar y regular el funcionamiento de los diversos rganos y sistemas de los vertebrados, coordinando su interrelacin, as como la relacin del organismo con el medio externo, permitiendo su interaccin. Este sistema se comienza a desarrollar durante la etapa embrionaria mediante la neurognesis, en la cual mltiples procesos biolgicos trabajan en conjunto para asegurar que los diversos tipos de clulas nerviosas proliferen, se diferencien, migren y formen sinapsis en el momento y lugar apropiado, siendo un mecanismo finamente regulado, dependiente de la apropiada expresin temporal y espacial, as como del correcto funcionamiento de diferentes productos gnicos. Debido a esto, mutaciones que alteren la correcta expresin o funcin de un gen involucrado en la neurognesis y/o en el mantenimiento del SNC pueden contribuir a la iniciacin y/o progresin de diversos desrdenes neurolgicos. En este respecto, nuestro grupo de investigacin identific por primera vez la ruptura del gen PRR12, en una paciente con discapacidad intelectual, alteraciones neuropsiquitricas y mltiples malformaciones menores. Debido a esto, y a las caractersticas de la protena PRR12, con una funcin hasta la fecha totalmente desconocida, este es un blanco deseable para el anlisis de las vas de sealizacin en las que participa. Objetivo: Describir los genes que son potencialmente regulados por PRR12 y, a partir de ello, analizar las posibles vas y procesos de comunicacin neuronal afectados tras su inhibicin. Materiales y Mtodos: Se realiz una cuantificacin relativa de la expresin de PRR12 en cerebro de rata en diferentes estadios del desarrollo (embrin, neonatal y adulto), mediante Western blot y qPCR. Posteriormente se realiz la inhibicin de PRR12 en clulas C6 de glioblastoma de rata, mediante ARNi, con el fin de determinar los cambios en el perfil de expresin celular, mediante microarreglos de expresin. Resultados: PRR12 se encontr mayormente expresado en cerebro durante la etapa de embrin; adems de esto, se encontraron afectados mltiples genes tras su inhibicin, entre los que destacan aquellos involucrados en procesos biolgicos relacionados a comunicacin celular y de las vas de sealizacin de receptores de membrana acoplados a protena G. Conclusiones: PRR12 es probablemente un factor de transcripcin de remodelacin de la cromatina, con posible implicacin en el proceso de neurognesis, especialmente en procesos de comunicacin y diferenciacin celular.
Resumo:
Los adenovirus oncolfticos ofrecen un tratamiento muy prometedor para combatir al cncer. Estos virus se replican pobremente en clulas de ratn, por lo que para evaluar su eficacia para destruir tumores, usualmente se implantan clulas tumorales humanas en las cuales se replican los virus, pero con el inconveniente que se deben usar ratones inmunosuprimidos, para evitar que su sistema inmune elimine estas clulas por ser de diferente especie. Sin embargo, estos ratones no representan un modelo adecuado para evaluar la eficacia teraputica de dichos adenovirus en ensayos preclfnicos, ya que carecen de mecanismos de defensa propios del sistema inmune que pudiesen coadyuvar en la proteccin contra el tumor y/o eliminacin del adenovirus. Actualmente no existe un modelo de cncer de cervix en ratones silvestres (inmunocompetentes) en los cuales los tumores se desarrollen a partir de celulas murinas y que los virus oncolfticos se repliquen eficientemente, al igual que en las clulas humanas, y se permita evaluar su efecto antitumoral. Se ha demostrado que los genes E6 y E7 del HPV-16 facilitan la replicacin de los adenovirus. En este trabajo por primera vez se evalu6 1a capacidad de replicacin de un adenovirus oncolftico en Ia lfrrea celular murina TC-1 Ia cual posee los genes E6 y E7 del HPV-16. Demostramos que el adenovirus oncolitico Adhz60 indujo en Ia lfnea TC-1 un efecto citopatico evidente, disminuye importantemente su viabilidad celular, indujo la expresin de protenas virales tempranas y tardas, fue capaz de generar una progenie viral infectiva y de inducir apoptosis. Contribuciones y Conclusiones. Con nuestros resultados demostramos que la linea celular murina TC-1 es permisiva para la replican del virus oncolftico Adhz60. Por lo tanto, las clulas TC-1 pueden ser usadas como modelo tumoral para evaluar adenovirus oncoliticos en ratones inmunocompetentes.
Resumo:
Introduccin. La presente investigacin surge de la importancia que implica la irrigacin en relacin a la regeneracin del complejo dentino-pulpar. En la actualidad, una gran cantidad de artculos han enfocado sus objetivos en el efecto antibacteriano de soluciones irrigantes, sin embargo, son pocas las investigaciones que evalan el efecto de dichas soluciones sobre las clulas madre presentes en la pulpa dental. Objetivo. Evaluar el efecto citotxico de hipoclorito de sodio y EDTA sobre clulas madre de pulpa dental in vitro. Materiales y mtodos. Se utilizaron Clulas madre de pulpa dental cortesa de la Unidad de Odontologa Integral y Especialidades del Centro de Investigacin y Desarrollo en Ciencias de la Salud. Para la evaluacin de la citotoxicidad, se utiliz la solucin de EDTA a concentraciones de 1.7%, 1%, 0.5% y 0.1% y NaOCl al 0.25%, 0.15%, 0.1% y 0.5% por triplicado. Ambas molculas (EDTA y NaOCl) se incubaron con las clulas a 37 C, 5% de CO2 en una atmosfera a 95% de humedad durante 3 y 24 horas. Los controles negativos fueron incubados con PBS. Resultados. En los resultados se observ una alta toxicidad del NaOCl frente a las DPSCs a 3 y 24 horas de exposicin. As mismo se observ que la combinacin del NaOCl y el EDTA no disminuy el efecto citotxico sobre las clulas, a excepcin de la combinacin de EDTA .1% + NaOCl .05% la cual present un ligero aumento en la viabilidad celular. Por otra parte, todas las concentraciones evaluadas de la solucin de EDTA fueron menos toxicas cuando se incubaron durante 3 y 24 horas frente a las clulas. Conclusiones. De acuerdo a los resultados observados en el presente estudio podemos concluir lo siguiente: el NaOCl present alta citotoxicidad en todas sus concentraciones a las 3 y 24 horas de exposicin, el EDTA present una mayor viabilidad a las 3 y 24 horas cuando se utiliz al 0.5% y 0.10%, la combinacin del EDTA y NaOCl result menos citotxica cuando se utiliz al 0.1% y 0.5% respectivamente a las 3 horas de exposicin.
Resumo:
El bruxismo es definido como una parafuncin sobre los dientes que consiste en una oclusin repetida y daina para el sistema estomatogntico (Misch,2009). En este estudio tiene como objetivo Crear una herramienta de uso clnico para determinar la presencia de bruxismo, en base a la bsqueda a travs de factores etiolgicos. Con su uso, podremos ofrecer el mtodo para su deteccin, dando como beneficio a los pacientes en su diagnstico temprano, previniendo el avance de sus molestias y los daos provocados a su salud oral. De esta manera, ser posible que el odontlogo proporcione tratamientos no invasivos y por lo tanto, ofrecer la mejora en la calidad de vida.
Resumo:
El presente estudio pretende aportar evidencia a favor de la eficacia de las tcnicas cognitivo conductuales para disminuir la ansiedad que presentan los universitarios cuando estn presentando exmenes o proyectos finales. Se trabaj con un grupo de 7 universitarios de una ciudad del norte de Mxico, durante cinco sesiones en las que se aplicaron tcnicas cognitivo-conductuales. En los resultados se encontr que la ansiedad, las distorsiones del pensamiento y las ideas irracionales disminuyeron al finalizar el programa. Se concluye que las tcnicas cognitivo conductuales son eficaces para disminuir la ansiedad en los universitarios.
Resumo:
La motivacin es un tema complejo y relevante por su valor predictivo en el aprendizaje y ha sido conceptualizada en un continuo que va desde la motivacin intrnseca que es la tendencia hacia el dominio, el inters espontneo y la exploracin controlada por el yo hacia la motivacin extrnseca, resultado de fuentes externas que influyen en el comportamiento donde es crtico el ambiente acadmico. En su estudio, una de las propuestas ms aceptada es la teora metas de logro que intenta explicar por medio de metas, la persistencia, el esfuerzo en las tareas y el rendimiento acadmico del estudiante. Una evolucin de esta propuesta es el modelo 2x2 el que identifica las metas de maestra-aproximacin, maestra-evitacin, desempeoaproximacin y desempeo-evitacin. En las metas de desempeo de aproximacin y de evitacin, el estudiante se enfoca en la comparacin social y en general, se acepta que la motivacin del estudiante es producto de la interaccin de diversos componentes como las interacciones con profesores y compaeros as como la percepcin y creencias que estas experiencias producen. Por tanto, en el contexto escolar, las interacciones sociales profesor/estudiante y estudiante/estudiante y la autonoma en las actividades escolares son de gran relevancia en el logro del aprendizaje. En aos recientes, se ha extendido la investigacin sobre la motivacin sustentada en la combinacin de aspectos intrnsecos y extrnsecos aunque todava es insuficiente y en Mxico es prcticamente nula. El objetivo de este estudio fue analizar las relaciones entre las metas de logro maestra y desempeo con sus orientaciones de aproximacin y evitacin, el apoyo social percibido del profesor, del estudiante, la autonoma y el rendimiento acadmico. El diseo fue no experimental, correlacional y transversal. La muestra fue no probabilstica formada por 275 estudiantes universitarios. Se aplic un cuestionario de Metas de Logro y otro de Percepcin de apoyo social de forma grupal en una sola sesin. Los resultados mostraron relaciones positivas significativas entre la percepcin de apoyo del profesor y las metas de logro aproximacin, as como tambin la percepcin de apoyo de los estudiantes y las metas de maestra aproximacin.
