964 resultados para Mécanisme enzymatique
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Linfarctus du myocarde est une des consquences possibles de lischmie cardiaque; il se traduit par la mort des cardiomyocytes se situant en aval du blocus coronaire, puis par la formation dune cicatrice forme essentiellement de dpts de matrices extracellulaires scrtes par les myofibroblastes. Nestine est une protine filamenteuse intermdiaire de classe VI couramment associe la prolifration et la migration cellulaire. Chez lhomme et les rongeurs, la suite dun infarctus du myocarde, une sous-population de cardiomyocytes localise la zone infarcie/pri-infarcie exprimait la forme strie de nestine. Le but principal de cette tude tait de dterminer la source cellulaire des cardiomyocytes nestine (+) observe dans le cur infarci ainsi que le mécanisme de signalisation cellulaire sous-jacent impliqu dans lexpression de nestine. Lutilisation de souris transgnique a rvl que laugmentation des cardiomyocytes nestine (+) dans le cur infarci des souris ntait pas attribuable la diffrenciation de cellules souches/prognitrices nestine (+) en cardiomyocytes nestine (+). Le traitement des cardiomyocytes ventriculaires de rats nonataux avec lactivateur des protines kinases C PDBu et linhibition concomitante des voies p38 MAPK a men laugmentation du nombre de ces cellules exprimant nestine. De plus, une population importante de cardiomyocytes ventriculaires de rats nonataux a incorpor la bromodxoxyuridine, signe dune capacit rentrer dans le cycle cellulaire et synthtiser de lADN. Sur la base de ces observations, lapparition de cardiomyocytes nestine (+) dans le cur infarci des rongeurs et des hommes pourrait possiblement reflter une sous-population de cardiomyocytes en prolifration tentant de rgnrer le cur infarci.
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Lassociation dmontre rcemment entre les commotions crbrales dans le sport et le dveloppement possible de maladies neurodgnratives a suggr la possibilit que des altrations persistantes soient prsentes dans le cerveau de lathlte commotionn. En fait, des altrations neurophysiologiques ont rcemment t rvles au sein du cortex moteur primaire (M1) dathltes ayant un historique de commotions via la stimulation magntique transcrnienne (SMT). Plus prcisment, la priode silencieuse corticale (PSC), une mesure dinhibition lie aux rcepteurs GABAB, tait anormalement leve, et cette hyper-inhibition tait prsente jusqu 30 ans post-commotion. La PSC, et possiblement le GABA, pourraient donc savrer des marqueurs objectifs des effets persistants de la commotion crbrale. Toutefois, aucune tude ce jour na directement valu les niveaux de GABA chez lathlte commotionn. Ainsi, les tudes cliniques et mthodologiques composant le prsent ouvrage comportent deux objectifs principaux: (1) dterminer si linhibition excessive (GABA et PSC) est un marqueur des effets persistants de la commotion crbrale; (2) dterminer sil est possible de moduler linhibition intracorticale de faon non-invasive dans loptique de dvelopper de futurs avenues de traitements. Larticle 1 rvle une prservation des systmes sensorimoteurs, somatosensoriels et de linhibition lie au GABAA chez un groupe dathltes universitaires asymptomatiques ayant subi de multiples commotions crbrales en comparaison avec des athltes sans historique connu de commotion crbrale. Cependant, une atteinte spcifique des mesures lies au systme inhibiteur associ aux rcepteurs GABAB est rvle chez les athltes commotionns en moyenne 24 mois post-commotion. Dans larticle 2, aucune atteinte des mesures SMT lies au systme inhibiteur nest rvle en moyenne 41 mois aprs la dernire commotion crbrale chez un groupe dathltes asymptomatiques ayant subi 1 5 commotions crbrales. Bien quaucune diffrence entre les groupes nest obtenue quant aux concentrations de GABA et de glutamate dans M1 via la spectroscopie par rsonance magntique (SRM), des corrlations diffrentielles suggrent la prsence dun dsquilibre mtabolique entre le GABA et le glutamate chez les athltes commotionns. Larticle 3 a dmontr, chez des individus en bonne sant, un lien entre la PSC et la transmission glutamatergique, ainsi que le GABA et le glutamate. Ces rsultats suggrent que la PSC ne reflte pas directement les concentrations du GABA mesures par la SRM, mais quun lien troit entre la GABA et le glutamate est prsent. Larticle 4 a dmontr la possibilit de moduler la PSC avec la stimulation lectrique transcrnienne courant direct (STcd) anodale chez des individus en sant, suggrant lexistence dun potentiel thrapeutique li lutilisation de cette technique. Larticle 5 a illustr un protocole dvaluation des effets mtaboliques de la STcd bilatrale. Dans larticle 6, aucune modulation des systmes GABAergiques rvles par la SMT et la SRM nest obtenue suite lutilisation de ce protocole auprs dindividus en sant. Cet article rvle galement que la STcd anodale nengendre pas de modulation significative du GABA et du glutamate. En somme, les tudes incluent dans le prsent ouvrage ont permis dapprofondir les connaissances sur les effets neurophysiologiques et mtaboliques des commotions crbrales, mais galement sur le mécanisme daction des diverses mthodologies utilises.
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Les opiodes sont les analgsiques les plus efficaces dans le traitement des douleurs svres. Ils produisent leurs effets en ciblant spcifiquement les rcepteurs opiodes localiss tout le long de la voie de perception de la douleur o ils modulent la transmission de l'information douloureuse. La plupart des tudes dans ce domaine essaient de caractriser les rcepteurs opiodes l'tat isol de tout partenaire de signalisation. Cette thse, par contre, montre que le rcepteur opiode delta (DOR) peut former un complexe avec sa protine G et l'un de ses effecteurs impliqus dans la production de l'effet analgsique, le canal potassique rectification entrante active par les protines G (Kir3 ou GIRK). Aprs avoir tabli la prsence de ce complexe constitutif, on a ensuite caractris sa stabilit, modulation et rgulation suite une stimulation avec des agonistes opiodes. En premier lieu, on a caractris la transmission de l'information du rcepteur DOR, suite son activation par un agoniste, vers le canal Kir3. On a remarqu que cette transmission ne suit pas le modle de collision, gnralement accept, mais ncessite plutt un simple changement dans la conformation du complexe prform. Ensuite, on a dtermin que mme suite l'activation prolonge du rcepteur DOR par un agoniste complet, le complexe DOR/Kir3 maintenait son intgrit et a t reconnu par la arrestine (arr) comme une seule unit signaltique provoquant ainsi l'internalisation de DOR et Kir3 par un mécanisme clathrine et dynamine-dpendant. Ainsi, prises ensemble, ces donnes montrent que l'activation du rcepteur DOR dclenche non seulement l'activation de l'effecteur Kir3 mais galement un mécanisme de rgulation qui limine cet effecteur de la membrane plasmique.
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Une stratgie de synthse efficace de diffrents composs de type azabicyclo[X.Y.0]alkanone fonctionnaliss a t dveloppe. La stratgie synthtique implique la prparation de dipeptides par couplage avec des motifs vinyl-, allyl-, homoallyl- et homohomoallylglycine suivi dune raction de fermeture de cycle par mtathse permettant dobtenir des lactames macrocycliques de 8, 9 et 10 membres, qui subissent une iodolactamisation transannulaire menant lobtention de mimes peptidiques bicycliques portant un groupement iode. Des couplages croiss catalyss par des mtaux de transition ont t dvelopps pour la synthse dacides amins -insaturs nantiomriquement purs partir de liodoanaline. Ltude du mécanisme suggre que liodure subit une attaque du cot le moins striquement encombr de la lactame macrocyclique insature pour mener lobtention dun intermdiaire iodonium. La cyclisation se produit ensuite par une route minimisant les interactions diaxiales et la tension allylique. Liodolactamisation des diffrentes lactames macrocycliques insatures a men lobtention regio- et diastroslective dacides amins 5,5- et 6,6-iodobicycicliques. De plus, une imidate azabicyclo[4.3.1]alkane ponte de type anti-Bredt fut synthtise partir dune lactame macrocyclique insatur neuf membres. Les analyses cristallographiques et spectroscopiques des macrocycles 8, 9 et 10 membres, du compos iodobicyclique 5,5 ainsi que de limidate ponte, montrent bien le potentiel de ces dipeptides rigidifis de servir en tant que mimes des rsidus centraux de tours de type I, II, II et VI.
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La maladie cardiaque ischmique, la plus commune des maladies qui affectent le cur, est encore aujourdhui une importante cause de dcs dans les pays industrialiss. Une rponse cardio-mtabolique inflammatoire un changement aigu initi par une modification du mtabolisme nergtique du cur ischmique est accentue aprs que lapport en oxygne ait t rtabli. Parmi les altrations dltres dans le myocarde qui en rsultent, sont inclus laccumulation dacides gras non estrifis (AGNE) ainsi que leur oxydation au dtriment de lutilisation du glucose, ce qui amplifie la gnration despces ractives de loxygne (ROS). Les tissus en priphrie du cur tel que le tissu adipeux peuvent affecter ltendue des blessures au myocarde par la relche en circulation de substances bioactives comme les AGNE et ladiponectine. Le CD36 est le principal facilitateur de lentre dAGNE dans le cur et les adipocytes et constitue une importante cible mtabolique spcialement lors dun stress dischmie-reperfusion (I/R). Il a t rapport prcdemment par notre groupe quun ligand synthtique et slectif envers le CD36 exerce un effet protecteur puissant sur le systme vasculaire. Cependant, aucune tude in vivo na rapport deffet cardioprotecteur de ligands slectifs envers le CD36. Ainsi, ce projet visait valuer le rle et possiblement leffet cardioprotecteur de ligands slectifs du rcepteur CD36 sur la blessure au myocarde en I/R. Des souris CD36+/+ et CD36-/- ont t traites quotidiennement avec le EP 80317, le CP-3(iv) ou le vhicule pendant 14 jours avant de subir la ligature temporaire de lartre coronaire antrieure descendante gauche (LAD). Notre premire tude a montr que le EP 80317 exerce un effet cardioprotecteur puissant tel que montr par la rduction de la surface des lsions et lamlioration de la fonction cardiaque in vivo suivant la blessure au myocarde en I/R. De plus, le EP 80317 a rduit linternalisation totale dAGNE dans le myocarde, mesure in vivo par limagerie mtabolique cardiaque, en accord avec la diminution du niveau circulant dAGNE. Une rduction de la lipolyse rvle par une perfusion de radiotraceur de palmitate et une augmentation du niveau dexpression de gnes adipogniques et anti-lipolytiques appuient davantage leffet du EP 80317 dans la prvention de la mobilisation dltre dacides gras du tissu adipeux. Notre deuxime tude a investigu le mécanisme cardioprotecteur dune nouvelle gnration de ligands dots dune plus grande affinit de liaison envers le CD36. Cette tude a montr que le CP-3(iv) est aussi pourvu dun puissant effet cardioprotecteur comme le montre la rduction de la taille de linfarctus et lamlioration de la fonction cardiaque post-I/R du myocarde qui est fonction dune signalisation mtabolique et anti-oxydante de ladiponectine. En effet, laugmentation des principales voies de signalisation rgulant la scrtion de ladiponectine et des gnes antioxydants a t dmontre dans le tissu adipeux suivant lI/R du myocarde et un traitement avec le CP-3(iv). Lactivation de la protine kinase B ou Akt dans le myocarde avec la diminution de la gnration de ROS et de la signalisation de mort cellulaire appuient davantage le rle cardioprotecteur du CP-3(iv) dans lI/R du myocarde. En conclusion, le travail prsent dans cette thse soutient quune signalisation du CD36 par le EP 80317 et le CP-3(iv) pourrait savrer tre une nouvelle approche thrapeutique dans le traitement de la maladie cardiaque ischmique. Ces ligands synthtiques slectifs envers le CD36 provoquent un effet salutaire sur le myocarde ischmique par le biais dune amlioration du profil mtabolique dans les premires heures de la reperfusion. Le EP 80317 rduit le niveau dltre dAGNE et leur internalisation dans le cur en situation dexcs, tandis que le CP-3(iv) augmente le niveau bnfique dadiponectine et son effet cardioprotecteur.
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La diarrhe post-sevrage est une maladie dimportance dans lindustrie porcine et est principalement cause Escherichia coli O149. Le traitement habituellement utilis est la nomycine. Cependant, en raison de lantibiorsistance, les vtrinaires se tournent vers la colistine sulfate (CS). La CS lie les lipopolysaccharides (LPS) et provoque un dplacement des cations divalents causant la formation de pores entrainant la mort cellulaire. Le systme deux composantes PmrA/PmrB est le plus incrimin dans la rsistance la colistine en ajoutant un groupement 4-amino-4-doxy-L-arabinose (L-Ara4N) au lipide A des LPS, augmentant ainsi la charge du LPS et diminuant son affinit pour la CS. Lobjectif principal est dvaluer lacquisition de la rsistance la CS dE. coli in vitro et dans un modle in vivo. Nous avons utilis des souches associes des cas cliniques dE. coli O149 et avons cr 22 mutants rsistants la CS. La concentration minimale inhibitrice (CMI) a t mesure par une mthode de double dilution et compare au seuil de rsistance. Suite au squenage des gnes pmrA/pmrB, nous avons identifi sept nouveaux polymorphismes, trois dans PmrA : A80V, N128I, S144G et quatre dans PmrB : V87E, D148Y, D148V et T156M. Pour lessai in vivo, nous avons suivi une souche exprimentale ETEC:F4 (E. coli O149) et isol des E. coli de la flore commensale. Le squenage des gnes pmrA et pmrB de ces isolats a montr un polymorphisme spcifique, G15R et T156M respectivement. Cependant, plusieurs souches rcoltes possdaient une rsistance la CS, mais sans polymorphisme de PmrA/PmrB, suggrant dautre(s) mécanisme(s) de rsistance.
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Le diabte de type 2 (DT2) rsulte dune rsistance linsuline par les tissus priphriques et par un dfaut de scrtion de linsuline par les cellules -pancratiques. Au fil du temps, la compensation des lots de cellules pour la rsistance linsuline choue et entraine par consquent une baisse progressive de la fonction des cellules . Plusieurs facteurs peuvent contribuer la compensation de la cellule . Toutefois, la comprhension des mécanismes cellulaires et molculaires sous-jacents la compensation de la masse de la cellule reste ce jour inconnue. Le but de ce mmoire tait didentifier prcisment quel mécanisme pouvait amener la compensation de la cellule en rponse un excs de nutriments et plus prcisment laugmentation de sa prolifration et de sa masse. Ainsi, avec laugmentation de la rsistance linsuline et des facteurs circulants chez les rats de six mois perfuss avec du glucose et de lintralipide, lhypothse a t mise et confirme lors de notre tude que le facteur de croissance HB-EGF active le rcepteur de lEGF et des voies de signalisations subsquentes telles que mTOR et FoxM1 impliques dans la prolifration de la cellule -pancratique. Collectivement, ces rsultats nous permettent de mieux comprendre les mécanismes molculaires impliqus dans la compensation de la masse de la cellule dans un tat de rsistance linsuline et peuvent servir de nouvelles approches thrapeutiques pour prvenir ou ralentir le dveloppement du DT2.
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Problmatique: Le virus du papillome humain (VPH) est prsent dans prs de 50% des cancers de loropharynx. Le potentiel oncognique du VPH est encod dans les oncoprotines E6 et E7, qui agissent en modulant diffrents gnes, dont les gnes suppresseurs de tumeur p53 et pRb. Les cellules VPH positives dmontrent une altration au niveau de la signalisation de la rponse aux dommages lADN (RDA), un mécanisme de contrle dans larrt de la croissance des cellules ayant subit des dommages au niveau de leur ADN. Hypothse et objectifs : Nous croyons que les dfauts au niveau de la RDA des cancers VPH positifs peuvent tre exploits afin de sensibiliser prfrentiellement les cellules cancreuses aux traitements de radiothrapie. Cette stratgie de recherche ncessite llaboration dun modle cellulaire de carcinogense isognique pour le cancer de loropharynx que nous proposons de dvelopper et de caractriser. Ltude vise driver des lignes isogniques partir de kratinocytes primaires et cellules pithliales de loropharynx pour ensuite valider la carcinogense de notre modle in vitro & in vivo Mthodologie : Des lignes cellulaires de kratinocytes primaires et de cellules pithliales de loropharynx ont t successivement modifies par transduction afin de prsenter les mutations associes aux cancers de loropharynx induits par le VPH. Les cellules ont t modifies avec des lentivirus codants pour la tlomrase (hTERT), les oncognes E6, E7 et RasV12. Afin de valider la cancrogense in vitro de notre modle, des tudes dinvasion en matrigel et de croissance sans ancrage en agar mou ont t ralises. Les populations cellulaires transformes ont t ensuite introduites dans des souris immunodficientes afin dvaluer leur tumorognicit in vivo. Rsultats : partir des plasmides recombins construits par mthodes de clonage traditionnelle et de recombinaison Gateway , nous avons produit des lentivirus codants pour la tlomrase humaine (hTERT), les oncognes viraux E6 et E7 et loncogne Ras. Les kratinocytes primaires et cellules pithliales de loropharynx ont t infects successivement par transduction et slectionns. Nous avons valid lexpression de nos transgnes par mthode dimmunofluorescence, de Western Blot et de raction de polymrisation en chane quantitative en temps rel (qRT-PCR). Nous avons tabli trois lignes des cellules pithliales de loropharynx (HNOE) partir dchantillons tissulaires prlevs lors damygdalectomie (HNOE42, HNO45, HNOE46). Les cellules transduites avec le lentivirus exprimant le promoteur fort CMV/TO de loncogne RasV12 ont prsent un changement morphologique compatible avec une snescence prmature induite par loncogne Ras. En exprimant des quantits plus faibles du RasV12 mutant, la ligne cellulaire HEKn hTERT-E6-E7 PGK RasV12 a russi chapper la snescence induite par loncogne Ras. La population cellulaire exprimant HEKn hTERT-E6-E7-PGK RasV12 a prsent un phnotype malin en culture et ltude d'invasion, mais na pas dmontr de rsultats positifs ltude de croissance sans ancrage en agar mou ni en xnogreffe en souris immunodficientes. Conclusion : Nos rsultats dmontrent quen prsence des oncognes viraux E6 et E7, il y a un troisime mécanisme suppresseur de tumeur qui mdie la snescence induite par loncogne Ras. Nous avons identifi que la prsence de E6 seule ne suffit pas immortaliser les kratinocytes primaires humains (HEKn). Nous navons pas russi crer un modle in vitro de carcinogense pour les cancers de loropharynx induits par le VPH.
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La voie de signalisation Notch est conserve au cours de l'volution. Elle joue un rle cl dans le dveloppement, et elle est implique dans de nombreuses dcisions de destin cellulaire, dans le maintien des cellules souches, et dans le contrle de la prolifration et de la diffrenciation cellulaires. Une drgulation de la signalisation Notch est implique dans diverses maladies et cancers, y compris les tumeurs solides, comme les cancers du sein et du col de l'utrus, et les leucmies, comme la Leucmie Aigu Lymphoblastique des cellules T (LAL-T). Notch est un rcepteur transmembranaire activ par des ligands transmembranaires de la famille DSL (Delta/Serrate/Lag-2). Bien que plusieurs mutations oncogniques ont t identifies au niveau du rcepteur Notch, de nombreux cancers moduls par Notch demeurent ligand-dpendants. tonnamment, les mécanismes molculaires rgulant l'activation du ligand sont encore relativement peu caractriss par rapport ceux qui rgissent le rcepteur Notch lui-mme. Utilisant un essai de co-culture avec un rapporteur lucifrase de Notch, nous avons effectu le premier crible d'ARNi pan-gnomique visant spcifiquement identifier des rgulateurs des ligands de Notch dans la cellule mettrice du signal. Nous avons ainsi pu dcouvrir de nouvelles classes de rgulateurs communs pour les ligands Delta-like1 et 4. Ces rgulateurs comprennent des inhibiteurs de protases, des facteurs de transcription, et des gnes divers fonction inconnue, tels que Tmem128 Transmembrane protein 128 , ou fonction pralablement caractrise tels que la co-chaperonne molculaire Cdc37 Cell division cycle 37 homolog . Par la suite, nous avons dvelopp des cribles secondaires fonctionnels o nous avons dmontr l'importance de ces rgulateurs pour des vnements Notch-dpendants, comme la diffrenciation des cellules T normales, et la survie des cellules souches pr-leucmiques isoles partir d'un modle murin de LAL-T. En outre, nous avons prouv que les rgulateurs les plus forts du crible de survie sont galement ncessaires pour l'activit d'auto-renouvellement des cellules souches pr-leucmiques. Finalement, nous avons entam une caractrisation molculaire prliminaire de deux rgulateurs nouvellement identifis; Tmem128 et Cdc37 afin d'tudier leur mécanisme d'action sur les ligands. En conclusion, cette tude nous a permis d'identifier de nouveaux rgulateurs de la voie Notch qui pourraient servir de cibles thrapeutiques potentielles dans les cancers; tel qu'illustr par le modle LAL-T. La comprhension des dtails molculaires sous-jacents aux fonctions de ces rgulateurs sera essentielle afin de dvelopper des inhibiteurs pharmacologiques pour bloquer leur action et entraver la signalisation Notch dans le cancer.
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La raction de macrocyclisation est une transformation fondamentale en chimie organique de synthse. Le principal dfi associc la formation de macrocycles est la comptition inhrente avec la raction doligomrisation qui mne la formation de sousproduits indsirables. De plus, lutilisation de conditions de dilutions leves qui sont ncessaires afin dobtenir une cyclisation slective, sont souvent dcourageantes pour les applications lchelle industrielle. Malgr cet intrt pour les macrocycles, la recherche visant dvelopper des stratgies environnementalement bnignes, qui permettent dutiliser des concentrations normales pour leur synthse, sont encore rares. Cette thse dcrit le dveloppement dune nouvelle approche gnrale visant amliorer lefficacit des ractions de macrocyclisation en utilisant le contrle des effets de dilution. Une stratgie de sparation de phase qui permet de raliser des ractions des concentrations plus leves a t developpe. Elle se base sur un mlange de solvant aggrg contrl par les proprits du poly(thylne glycol) (PEG). Des tudes de tension de surface, spectroscopie UV et tagging chimique ont t ralises afin dlucider le mécanisme de sparation de phase. Il est propos que celui-ci fonctionne par diffusion lente du substrat organique vers la phase ou le catalyseur est actif. La nature du polymre co-solvant joue donc un rle crutial dans le contrle de laggrgation et de la catalyse La stratgie de sparation de phase a initiallement t tudie en utilisant le couplage oxidatif dalcynes de type Glaser-Hay co-catalys par un complexe de cuivre et de nickel puis a t transpose la chimie en flux continu. Elle fut ensuite applique la cycloaddition dalcynes et dazotures catalyse par un complexe de cuivre en batch ainsi quen flux continu.
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Les virus ont besoin dinteragir avec des facteurs cellulaires pour se rpliquer et se propager dans les cellules dhtes. Une tude de l'interactome des protines du virus d'hpatite C (VHC) par Germain et al. (2014) a permis d'lucider de nouvelles interactions virus-hte. L'tude a galement dmontr que la majorit des facteurs de l'hte n'avaient pas d'effet sur la rplication du virus. Ces travaux suggrent que la majorit des protines ont un rle dans d'autres processus cellulaires tel que la rponse inne antivirale et cibles pas le virus dans des mécanismes d'vasion immune. Pour tester cette hypothse, 132 interactant virus-htes ont t slectionns et valus par silenage gnique dans un criblage d'ARNi sur la production interferon-beta (IFNB1). Nous avons ainsi observ que les rductions de l'expression de 53 interactants virus-hte modulent la rponse antivirale inne. Une tude dans les termes de gne d'ontologie (GO) dmontre un enrichissement de ces protines au transport nuclocytoplasmique et au complexe du pore nuclaire. De plus, les gnes associs avec ces termes (CSE1L, KPNB1, RAN, TNPO1 et XPO1) ont t caractris comme des interactant de la protine NS3/4A par Germain et al. (2014), et comme des rgulateurs positives de la rponse inne antivirale. Comme le VHC se rplique dans le cytoplasme, nous proposons que ces interactions des protines associes avec le noyau confrent un avantage de rplication et bnficient au virus en interfrant avec des processus cellulaire tel que la rponse inne. Cette rponse inne antivirale requiert la translocation nuclaire des facteurs transcriptionnelles IRF3 et NF-B p65 pour la production des IFNs de type I. Un essai de microscopie a t dvelopp afin d'valuer leffet du silenage de 60 gnes exprimant des protines associs au complexe du pore nuclaire et au transport nuclocytoplasmique sur la translocation dIRF3 et NF-B p65 par un criblage ARNi lors dune cintique d'infection virale. En conclusion, ltude dmontre quil y a plusieurs protines qui sont impliqus dans le transport de ces facteurs transcriptionnelles pendant une infection virale et peut affecter la production IFNB1 diffrents niveaux de la rponse d'immunit antivirale. L'tude aussi suggre que l'effet de ces facteurs de transport sur la rponse inne est peut tre un mécanisme d'vasion par des virus comme VHC.
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La construction modulaire est une stratgie mergente qui permet la fabrication de matriaux ordonns lchelle atomique. Elle consiste en lassociation programme de sous-units molculaires via des sites ractifs judicieusement slectionns. Lapplication de cette stratgie a dores et dj produit des matriaux aux proprits remarquables, notamment les rseaux organiques covalents, dans lesquels des atomes de carbone et dautres lments lgers sont lis de manire covalente. Bien que des matriaux assembls par des interactions non-covalentes puissent tre prpars sous la forme de monocristaux macroscopiques de cette faon, ceci ntait pas possible dans le cas des rseaux organiques covalents. Afin de pallier cette lacune, nous avons choisi dtudier des ractions de polymrisation rversibles ayant lieu par un mécanisme daddition. En effet, lhypothse de dpart de cette thse suppose quun tel processus mule le phnomne de cristallisation classique rgi par des interactions non-covalentes et favorise la formation de monocristaux de dimensions importantes. Pour tester la validit de cette hypothse, nous avons choisi dtudier la polymrisation des composs polynitroso aromatiques puisque la dimrisation des nitrosoarnes est rversible et procde par addition. Dans un premier temps, nous avons revu en profondeur la littrature portant sur la dimrisation des nitrosoarnes. partir des donnes alors recueillies, nous avons conu, dans un deuxime temps, une srie de composs polynitroso ayant le potentiel de former des rseaux organiques covalents bi- et tridimensionnels. Les paramtres thermodynamiques propres leur polymrisation ont pu tre estims grce ltude de composs mononitroso modles. Dans un troisime temps, nous avons synthtis les divers composs polynitroso viss par notre tude. Pour y parvenir, nous avons eu dvelopper une nouvelle mthodologie de synthse des poly(N-arylhydroxylamines) les prcurseurs directs aux composs polynitroso. Dans un quatrime temps, nous avons tudi la polymrisation des composs polynitroso. En dpit de difficults dordre pratique causes par la polymrisation spontane de ces composs, nous avons pu identifier les conditions propices leur polymrisation en rseaux organiques covalents hautement cristallins. Plusieurs nouveaux rseaux covalents tridimensionnels ont ainsi t produits sous la forme de monocristaux de dimensions variant entre 30 m et 500 m, confirmant la validit de notre hypothse de dpart. Il a par consquent t possible de rsoudre la structure de ces cristaux par diffraction de rayons X sur monocristal, ce qui navait jamais t possible dans le pass pour ce genre de matriau. Ces cristaux sont remarquablement uniformes et les polymres qui les composent ont des masses molculaires extrmement leves (1014-1017 g/mol). Toutefois, la polymrisation de la majorit des composs polynitroso tudis a plutt conduit des solides amorphes ou des solides cristallins constitus de la forme monomrique de ces composs. Dautres composs nitroso modles ont alors t prpars afin dexpliquer ce comportement, et des hypothses ont t mises partir des donnes alors recueillies. Enfin, les structures de plusieurs composs polynitroso ayant cristalliss sous une forme monomrique ont t analyss en dtails par diffraction des rayons X. Notre stratgie, qui consiste en lutilisation de monomres ayant la capacit de polymriser spontanment par un processus daddition rversible, semble donc prometteuse pour obtenir de nouveaux rseaux covalents monocristallins partir de composs polynitroso ou dautres monomres de nature similaire. De plus, les rsultats prsents au cours de cette thse tablissent un lien entre la science des polymres et la chimie supramolculaire, en illustrant comment des structures ordonnes, covalentes ou non covalentes, peuvent toutes deux tre construites de faon prvisible.
Resumo:
Les maladies cardiovasculaires reprsentent la deuxime cause de mortalit en Amrique du Nord. Ceci peut s'expliquer par la consommation riche en gras des Nord-Amricains et par un apport lev en omga-6. Inversement, des populations qui ont un apport moindre en omga-6 et plus riche en omga-3, telles que les Japonais et les Inuits, ont une incidence peu leve de maladies cardiovasculaires. Les omga-3 s'avrent effectivement bnfiques pour prvenir l'apparition de maladies cardiovasculaires. Dans le cadre d'un infarctus du myocarde, les omga-3 sont bnfiques en prvention secondaire et s'avrent cardioprotecteurs lorsque consomms avant l'pisode d'infarctus. De manire utiliser les omga-3 de faon plus clinique, le but de la premire tude tait de vrifier si un mtabolite des omga-3 impliqu dans la rsolution de l'inflammation, la rsolvine D1, pouvait s'avrer cardioprotecteur lorsque donn au moment de l'infarctus. Effectivement, la rsolvine D1, donne juste avant l'ischmie, s'avre cardioprotectrice en entranant une diminution de l'inflammation, soit en favorisant la rsolution de l'inflammation, et en activant une voie de cardioprotection qui entrane la survie cellulaire. Par ailleurs, tant donn que la dite de la population canadienne est riche en omga-6, lobjectif de la deuxime tude tait de vrifier si l'effet de la rsolvine D1 est conserv en prsence d'un omga-6, l'acide linolique. Nos rsultats nous indiquent que la rsolvine D1 perd son effet cardioprotecteur en prsence de l'acide linolique. Celle-ci semble aggraver les lsions ischmiques, possiblement, par, la gnration de mtabolites pro-inflammatoires et vasoconstricteurs qui accrot les effets de l'ischmie. Ainsi, il est essentiel de tenir compte de l'apport en omga-6 pour envisager un traitement la rsolvine D1 et d'encourager une diminution des omga-6 dans l'alimentation au profit des omga-3. Enfin, la troisime tude de cette thse visait vrifier le mécanisme de cardioprotection des omga-3 afin de savoir si ce sont les mtabolites issus des omga-3 qui gnrent la cardioprotection. L'utilisation des inhibiteurs du mtabolisme des omga-3, soit la 15-lipoxygnase et la cyclo-oxygnase 2, inhibe la cardioprotection confre par une dite riche en omga-3. De plus, les inhibiteurs diminuent les concentrations de rsolvine D1 plasmatique. Puis, la rsolvine D1, donne en prsence des inhibiteurs, restaure la cardioprotection. De ce fait, les mtabolites gnrs par les omga-3, dont la rsolvine D1, sont importants dans leffet cardioprotecteur des acides gras omga-3. En conclusion, la rsolvine D1 peut s'avrer une option intressante pour bnficier des effets des omga-3 lorsque celle-ci est donne au moment de l'infarctus. D'ailleurs, les mtabolites, tels que la rsolvine D1, sont essentiels pour obtenir la cardioprotection avec les omga-3. Toutefois, l'alimentation des patients doit contenir moins domga-6 afin de bnficier des aspects cardioprotecteurs des omga-3. Les omga-6 sont trop prominents dans l'alimentation nord-amricaine, ce qui est nfaste pour le systme cardiovasculaire.
Resumo:
Le cancer du pancras est lun des plus chimiorsistants, avec un taux de survie sur 5 ans infrieur 5%. La chimiorsistance pourrait tre due la prsence de cellules initiatrices de tumeur (TICs), une petite sous-population des cellules tumorales possdant la capacit de rgnrer une nouvelle tumeur. Il a t dmontr que la metformine cible les TICs par un mécanisme non lucid. Il est connu que la metformine affecte le mtabolisme du carbone. Il a galement t dmontr que le mtabolisme du carbone, plus prcisment la glycine dcarboxylase (GLDC), est la fois ncessaire et suffisant lacquisition de proprits dinitiation tumorale. Nous proposons que la metformine cible les cellules initiatrices de tumeur en affectant le mtabolisme du carbone. Nous avons utilis des lignes cellulaires drives dun modle murin de cancer du pancras pour comparer lexpression gnique de lsions bnignes versus malignes. Les cellules malignes surexpriment Gldc. La metformine diminue lexpression de Gldc, et la surexpression de Gldc diminue la sensibilit la metformine dans un essai de sphres tumorales. La metformine induit une augmentation du ratio NADP+/NADPH, et la surexpression de Gldc empche cette augmentation. Nous proposons que la metformine diminue lexpression de Gldc, ce qui cause une diminution du flux du mtabolisme du carbone, et donc une diminution de la production de NADPH par ce dernier. Laugmentation du ratio NADP+/NADPH inhibe la synthse des acides gras et la rgnration de la glutathione, ce qui pourrait expliquer la diminution de la formation de sphres tumorales sous traitement metformine.
Resumo:
La voie de signalisation Ras/MAPK (Ras/mitogen-activated protein kinase) rgule une varit de protines intracellulaires qui jouent un rle important dans la croissance et la prolifration cellulaire. La rgulation inapproprie de cette voie de signalisation conduit au dveloppement de nombreux cancers comme le mlanome, qui est caractris par des mutations activatrices au niveau des gnes NRAS et BRAF. La protine kinase RSK (p90 ribosomal S6 kinase) est un composant central de la voie Ras/MAPK, mais son rle dans la croissance et la prolifration cellulaire nest pas bien compris. RSK a t montre pour participer la rsistance des mlanomes aux chimiothrapies, mais le mécanisme molculaire reste encore lucider. Nous montrons laide dun anticorps phospho-spcifique que MDM2 est phosphoryle en rponse des agonistes et des mutations oncogniques activant spcifiquement la voie Ras/MAPK. En utilisant des mthodes in vitro et in vivo, nous avons constat que RSK phosphoryle directement MDM2 sur les Srines 166 et 186, ce qui suggre que MDM2 est un substrat de RSK. La mutagnse dirige envers ces sites nous indique que ces rsidus rgulent lubiquitination de MDM2, suggrant que RSK rgule la stabilit de MDM2 et de p53. De plus, nous avons observ que linhibition de RSK conduit une augmentation du niveau protique de p53 aprs un dommage lADN dans les cellules de mlanomes. En conclusion, nos travaux suggrent un rle important de la protine kinase RSK dans la rgulation de MDM2 et de sa cible, p53. Ltude de ces mécanismes molculaires aidera mieux dfinir le rle de RSK dans la croissance tumorale, mais galement dans la rsistance aux agents chimiothrapeutiques.
