Novos parâmetros para o clareamento dental: avaliação da eficácia, citotoxicidade e efeitos moleculares

Pós-graduação em Reabilitação Oral - FOAR

Efeito de diferentes fontes luminosas e pré-condicionamento do esmalte na alteração de cor, penetração de H2O2 e citotoxicidade em dentes clareados

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Síntese, caracterização e avaliação da citotoxicidade de complexos de Pd(II) contendo ligantes fosfínicos de N,S - quelantes

Pós-graduação em Química - IQ

Estudo das células primárias dentais, viabilidade celular e bioatividade de materiais á base de silicato de cálcio

Pós-graduação em Odontologia - FOAR

GPC3 reduces cell proliferation in renal carcinoma cell lines

Background: Glypican 3 (GPC3) is a member of the family of glypican heparan sulfate proteoglycans (HSPGs). The GPC3 gene may play a role in controlling cell migration, negatively regulating cell growth and inducing apoptosis. GPC3 is downregulated in several cancers, which can result in uncontrolled cell growth and can also contribute to the malignant phenotype of some tumors. The purpose of this study was to analyze the mechanism of action of the GPC3 gene in clear cell renal cell carcinoma.Methods: Five clear cell renal cell carcinoma cell lines and carcinoma samples were used to analyze GPC3 mRNA expression (qRT-PCR). Then, representative cell lines, one primary renal carcinoma (786-O) and one metastatic renal carcinoma (ACHN), were chosen to carry out functional studies. We constructed a GPC3 expression vector and transfected the renal carcinoma cell lines, 786-O and ACHN. GPC3 overexpression was analyzed using qRT-PCR and immunocytochemistry. We evaluated cell proliferation using MTT and colony formation assays. Flow cytometry was used to evaluate apoptosis and perform cell cycle analyses.Results: We observed that GPC3 is downregulated in clear cell renal cell carcinoma samples and cell lines compared with normal renal samples. GPC3 mRNA expression and protein levels in 786-O and ACHN cell lines increased after transfection with the GPC3 expression construct, and the cell proliferation rate decreased in both cell lines following overexpression of GPC3. Further, apoptosis was not induced in the renal cell carcinoma cell lines overexpressing GPC3, and there was an increase in the cell population during the G1 phase in the cell cycle.Conclusion: We suggest that the GPC3 gene reduces the rate of cell proliferation through cell cycle arrest during the G1 phase in renal cell carcinoma.

Cytoxicity and Apoptotic Mechanism of Ruthenium(II) Amino Acid Complexes in Sarcoma-180 Tumor Cells

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Molecular markers of angiogenesis and metastasis in lines of oral carcinoma after treatment with melatonin

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Role of protein kinase A signaling pathway in cyclosporine nephrotoxicity

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Avaliação da atividade citotóxica e genotóxica de extratos brutos de metabólitos secundários de fungos endofíticos isolados da Eugenia jambolana em células de hepatocarcinoma murino (Hepa-1c1c7)

O Brasil apresenta regiões com grande diversidade geográfica proporcionando o desenvolvimento de diferentes espécies vegetais, favorecendo a busca por bioativos com fins terapêuticos. Nos últimos anos, fungos endofíticos vêm sendo considerados fontes importantes de produtos naturais, demonstrando atividades biológicas de interesses terapêuticos. Pesquisas apontam que extratos brutos oriundos de fungos endofíticos da Eugenia jambolana demonstram atividades antineoplásicas e antimicrobianas. No presente estudo verificou-se a atividade citotóxica e genotóxica de extratos brutos provenientes do metabolismo secundários dos fungos endofíticos isolados de partes da planta da Eugenia jambolana, como caule (Ej- c), folhas (Ej-f), fruto verde (Ej-fv) e fruto maduro (Ej-fm) por meio de experimentos in vitro, utilizando células de hepatocarcinoma murino selvagem (Hepa-1c1c7). Para avaliar a citotoxicidade dos extratos brutos foi realizado o teste do MTT, podendo ser observados diferentes perfis citotóxicos de acordo com a parte da planta e o tempo de exposição de 24 e 48 horas. No tempo de exposição de 24 horas as amostras de Ej-fv(1) e Ej-fv(3) apresentaram CI50 de 65,57 μg/ml e 85,75 μg/ml, respectivamente. Já para amostra Ej-fm(1) houve CI50= 46,53 μg/ml . Nas análises que correspondem o tempo de exposição de 48 horas os extratos brutos do caule Ej-c ( Ej-c(3) e Ej-c(5)) apresentaram CI50 nas concentrações de 84,65 μg/ml e 95,35 μg/ml, respectivamente. O composto Ej-c(1) também foi observado uma menor citotoxicidade na concentração de 100,0 μg/ml. A atividade citotóxica também foi observada nas amostras da folha Ej-f (Ej-f(1), Ej-f(2), Ej-f(3)) atingindo o CI50 nas concentrações de 95,54 μg/ml, 90,8, μg/ml e 26,91 μg/ml, respectivamente. O composto Ej-f(3) também apresentou atividade citotóxica de menor na concentração de 33,3 μg/ml. As amostras do fruto verde Ej-fv(1), Ej-fv(2), Ej-fv(3), Ej-fv(4) e ...

Citotoxicidade de cimentos retrobturados experimentais em fibroblastos V79: [recurso eletrônico]

Combining the characteristics of good adhesion and sealing of the AH Plus sealer the biological properties of the MTA, zinc oxide and calcium hydroxide, the purpose of this study was to evaluate the cytotoxicity of these associations. The specimens of the sealers and their associations were mixed and exposure to culture medium (82.4 mm2surface/mL) after the manipulation and incubated in a humidified incubator (37°C and 100% humidity) for 24 h. Chinese hamster lung fibroblasts (V79) were exposed to different dilutions of this extracts for 24 h and cell viability was measured by MTT test. The differences between the cell survival rates were statistically analyzed for Kruskal-Wallis and Dunn (p≤0.05). All sealers showed a significant difference with the group control, except the MTA. Cytotoxicity with the control group increased in the following order: AH Plus < AH Plus + Ca(OH) 2 < AH Plus + OxZn< AH Plus + MTA < MTA (p≤ 0,05). It was concluded that the addition of biological materials in order to improve the consistency of AH Plus for use in retro cavities its toxicity has not decreased significantly

Busca de atividade leishmanicida de substâncias obtidas de plantas

Diante da baixa eficácia e elevada toxicidade apresentada pelos fármacos antimoniais e anfotericina B, faz-se premente a pesquisa de novos agentes leishmanicidas. Para tanto, produtos naturais e sintéticos têm sido estudados na busca de novos protótipos antiparasitários. Este trabalho de conclusão de curso teve como objetivo avaliar a potencial ação leishmanicida de substâncias obtidas de Pterogyne nitens contra formas promastigotas de Leishmania Amazonensis e Leishmania chagasi e a ação citotóxica contra macrófagos da linhagem contínua J774. As amostras testadas, cedidas pelo NuBBE (Núcleo de Bioensaios, Biossíntese e Ecofisiologia de Produtos Naturais), foram obtidas por meio de técnicas de extração das diferentes partes da planta (flores, folhas e caule). Os ensaios biológicos em promastigotas e macrófagos J774 foram realizados pelo método colorimétrico utilizando-se MTT (Methyl Thiazolyl Blue). A leitura da densidade ótica (DO) foi realizada em espectrofotômetro a 490 nm e os resultados foram obtidos em absorbância. A porcentagem de citotoxidade (%C) foi calculada para determinação da Concentração Inibitória 50% (CI50). Os resultados foram comparados aos fármacos atualmente preconizados como segunda escolha de tratamento pelo Ministério da Saúde (pentamidina e anfotericina B), de acordo com o Manual de Vigilância das Leishmanioses, divulgado no portal do Ministério da Saúde. Os resultados obtidos corroboram o potencial farmacológico notável das substâncias obtidas de P. nitens para o uso terapêutico em doenças negligenciadas, tal como a leishmaniose

Avaliação da indução de apoptose pela desintegrina recombinante DisBa-01 em macrófagos e células tumorais

O câncer é causado pela proliferação descontrolada de células, demonstrando uma capacidade coletiva de invasão e metástase. Durante a metástase, as células malignas precisam resistir a anoikis, uma apoptose celular gerada por falta de adesão. No câncer, as integrinas influenciam as células do hospedeiro associadas ao tumor bem como as próprias células tumorais, tendo o potencial de modular a progressão tumoral, a sobrevivência celular, a invasão e a metástase. A integrina αvβ3 é expressa em diversos tumores humanos, mas está em níveis muito reduzidos ou mesmo ausente nos tecidos normais, sendo considerada um alvo privilegiado na terapia anti-tumoral. Células derivadas da medula óssea, como o monócito/macrófago, também expressam esta integrina, ainda que em níveis reduzidos. A desintegrina recombinante DisBa-01 atua principalmente sobre as integrinas αvβ3 e αIIbβ3, e parece possuir a capacidade de inibir a adesão celular de linhagens possuindo a integrina αvβ3 à vitronectina. Sendo assim, observou-se a apoptose que pode ser gerada pela inibição da adesão celular ou pela própria presença da desintegrina, um antagonista de integrina que afeta a adesão celular, em linhagem neoplásica e em linhagem imortalizada de macrófagos, utilizando os métodos de marcação com anexina V e técnica de TUNEL, bem como a presença de células viáveis através da técnica de MTT. As linhagens celulares utilizadas nesse experimento foram expostas a desintegrina DisBa-01 por 24 horas para realização dos testes e as populações celulares aderentes e não aderentes foram analisadas separadamente. Verificou-se uma diminuição na viabilidade celular quando ocorre perda de adesão e na presença da proteína, mas foi observado um resultado não significativo para a ocorrência de apoptose. A desintegrina DisBa-01 ocasiona uma diminuição na viabilidade celular, entretanto parece não ser por apoptose gerando anoikis

Atividade citotóxica e apoptótica de nitensidina A e B em células de carcinoma cervical imortalizadas pelo Papiloma Vírus Humano (HPV) e não infectadas

Câncer cervical é o segundo tipo mais comum em mulheres no mundo. Estudos apontam que a presença de certos tipos do HPV desempenha um papel central na formação do câncer. Apesar do grande sucesso da prevenção do câncer uterino com vacinas, o uso de produtos naturais para o tratamento de doenças é crescente e de grande importância econômica. Alcalóides guanidínicos isolados de Pterogyne nitens representam uma potencial fonte de novos tratamentos. O objetivo geral desse trabalho foi avaliar a atividade apoptótica induzida em células de carcinoma cervical infectadas (SiHa) e não infectadas pelo HPV (C33-A), tratadas com nitensidinas A e B, isoladas de folhas de Pterogyne nitens Tul. A citotoxicidade dos alcalóides foi avaliada utilizando o método de MTT. Para avaliar quantitativamente a apoptose e necrose celular, foi executado o ensaio de Anexina V por citometria de fluxo. Ambas as substâncias, nitensidinas A e B, apresentaram efeito citotóxico concentração-resposta em ambas as linhagens testadas (SiHa e C33A) e nos dois tempos de tratamento (24 horas e 48 horas). Não foi observada significância estatística quando comparados os perfis de ação citotóxica das duas substâncias em teste (nitensidinas A e B), em nenhuma das linhagens testadas (SiHa e C33A) e em nenhum dos dois tempos de tratamento (24 horas e 48 horas). Ambas as substâncias, nitensidina A e nitensidina B, apresentaram efeito indutor de apoptose precoce e, em menor número, de apoptose tardia/ necrose, em ambas as linhagens testadas (SiHa e C33A) e nos dois tempos de tratamento (24 horas e 48 horas)

Novas alternativas quimioterápicas para o tratamento do câncer através de compostos organometálicos de paládio

O câncer, manifestação originada pelo crescimento descontrolado de células, afeta milhões de indivíduos. Os macrófagos são as primeiras células a serem ativadas para participar de uma resposta imunológica propriamente dita, são células capazes de secretar mais de cem produtos biologicamente ativos, entre esses, espécies reativas de nitrogênio e citocinas que atuam no contexto da resposta imunológica e/ou inflamatória. Sabendo que compostos de paládio (II) podem apresentar potenciais atividades antitumorais, neste trabalho foram testado os compostos de fórmula geral PdI2 (tdmPz) e Pd (SCN)2 (tdmPz), quanto a atividade anti-inflamatória e antitumoral. Como droga padrão das reações realizadas foi utilizada a cisplatina. Foi determinada a ação destes compostos frente ao sistema imunológico através, de ensaios de determinação de índice de citotoxicidade mediano (IC50) pela técnica de MTT, óxido nítrico (NO) e determinação das citocinas pró-inflamatórias TNF- e IL-12. Além disso, foi determinada a atividade antitumoral dos compostos frente à célula tumoral de Ehrlich. Os resultados não mostraram produção de NO e das citocinas IL-12 e TNF- pelos macrófagos peritoneais de animais normais e animais portadores do tumor de Ehrlich na sua forma sólida. No que se referem à atividade tóxica dos compostos testados, estes mostraram efeito citotóxico sobre os macrófagos e sobre a linhagem tumoral testada. Sendo assim mesmo não havendo a produção de mediadores próinflamatórios, os compostos apresentaram uma considerável citotoxicidade frente às células tumorais de Ehrlich e macrófagos peritoneais

Busca de atividade leishmanicida de extrato, frações e subfrações obtidas da planta Baccharis trimera (Less.) DC

Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), leishmanioses são antropozoonoses e estão entre as seis doenças tropicais de maior importância no Velho Mundo e nas Américas. São endêmicas em 88 países e estima-se que sua prevalência seja de 12 milhões de casos no mundo. Nas duas últimas décadas, o número de casos tem aumentado, assim como sua ocorrência geográfica. No Brasil, é uma realidade em diversos estados, apresentando perfis epidemiológicos diferentes. A terapêutica empregada atualmente conta com poucos fármacos, em uso há mais de 40 anos, e que apresentam potencial nefro, hepato e cardiotóxico. Além disto, são contraindicados a idosos e gestantes, o que caracteriza mais um entrave à terapêutica atual. Tendo em vista a imensa biodiversidade brasileira, uma fonte alternativa para o tratamento destas e outras inúmeras enfermidades é a busca de novas moléculas por meio da pesquisa com extratos vegetais e seu fracionamento, a partir de diferentes espécies de plantas. Este trabalho avaliou a atividade leishmanicida do extrato acetato de etila, frações e subfrações obtidas da planta Baccharis trimera (Less.) DC sobre a espécie Leishmania amazonensis. Os ensaios biológicos foram realizados in vitro pelo método colorimétrico de MTT (Brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil-tetrazólio) utilizando formas promastigotas do parasito e macrófagos da linhagem J774, para estudos de citotoxicidade. Os testes foram realizados em triplicata, utilizando-se microplacas de 96 orifícios. Como resultado, três frações (CI50 = 23,56 μg/mL; 29,89 μg/mL; 42,31 μg/mL) e cinco subfrações (CI50 < 1,56 e CI50 = 5, 07 μg/mL ; 5,21 μg/mL; 24,61 μg/mL) apresentaram interessante potencial leishmanicida, sendo que duas destas subfrações também demonstraram baixa citotoxicidade (IS = 64,1). A partir de análises cromatográficas das frações e subfrações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)