Regulation of Nuclear Factor κB (NF-κB) Transcriptional Activity via p65 Acetylation by the Chaperonin Containing TCP1 (CCT)

The NF-κB family member p65 is central to inflammation and immunity. The purpose of this study was to identify and characterize evolutionary conserved genes modulating p65 transcriptional activity. Using an RNAi screening approach, we identified chaperonin containing TCP1 subunit η (CCTη) as a regulator of Drosophila NF-κB proteins, Dorsal and Dorsal-related immunity factor (Dif). CCTη was also found to regulate NF-κB-driven transcription in mammalian cells, acting in a promoter-specific context, downstream of IκB kinase (IKK). CCTη knockdown repressed IκBα and CXCL2/MIP2 transcription during the early phase of NF-κB activation while impairing the termination of CCL5/RANTES and CXCL10/IP10 transcription. The latter effect was associated with increased DNA binding and reduced p65 acetylation, presumably by altering the activity of histone acetyltransferase CREB-binding protein (CBP). We identified p65 lysines (K) 122 and 123 as target residues mediating the CCTη-driven termination of NF-κB-dependent transcription. We propose that CCTη regulates NF-κB activity in a manner that resolves inflammation.

The public records of the State of Connecticut ... : with the journal of the Council of Safety ... and an appendix /

Vol. 3 completed, and an index compiled by Forrest Morgan, after the death of Mr. Hoadly

Miscellanies, relating to Lancashire and Cheshire.

Includes index.

De controversia in curia militari inter Ricardum Le Scrope et Robertum Grosvenor milites: rege Ricardo Secundo, MCCCLXXXV-MCCCXC e recordis in turre Londinensi asservatis.

A third volume treating of Grosvenor and his witnesses was projected but never published. Cf. Dict. nat. biog.

Hearings relating to Madison Guaranty S & L and the Whitewater Development Corporation, Washington, DC phase : hearings before the Committee on Banking, Housing, and Urban Affairs, United States Senate, One Hundred Third Congress, second session.

Shipping list no.: 95-0029-P (v. 1), 95-0027-P (v. 2), 95-0194-P (v. 3, 11), 95-0187-P (v. 4, 9, 14), 95-0177-P (v. 5, 8, 13, 17), 95-0205-P (v. 6), 95-0176-P (v. 10, 15-16, 18), 95-0121-P (v. 12), 95-0188-P (v. 19), 95-0185-P (v. 20-21, 23), 95-0199-P (v. 22), 95-0195-P (v. 24).

Polymorphisms in the 5 '-untranslated region of the human serotonin receptor 1B (HTR1B) gene affect gene expression

We present evidence of complex balancing regulation of HTR1B transcription by common polymorphisms in its promoter. Computational analysis of the HTR1B gene predicted that a 50 segment, spanning common DNA sequence variations, T-261G, A-161T, and -182INS/DEL-181, contained a putative functional promoter. Using a secreted alkaline phosphatase (SEAP) reporter gene system, we found that the haplotype -261G_-182INS-181_A-161 enhanced transcriptional activity 2.3-fold compared with the haplotype T-261_-182INS-181_A-161. Conversely, -161T reversed this, and the net effect when -261G and -161T were in the same haplotype (-261G_-182INS-181_-161T) was equivalent to the major haplotype (T-261_-182INS-181_A-161). Electrophoretic mobility shift experiments showed that -261G and -161T modify the binding of transcription factors (TFs): -261G generates a new AP2 binding site, while alleles A-161 and -161T exhibit different binding characteristics to AP1. T-261G and A-161T were found to be in linkage disequilibrium (LD) with G861C in a European ancestry population. Interestingly, G861C has been reported to be associated with several psychiatric disorders. Our results indicate that HTR1B is the target of substantial transcriptional genetic regulation by common haplotypes, which are in LD with the HTR1B single-nucleotide polymorphism (SNP) most commonly used in association studies.

Proteomic analysis of k-casein micro-heterogeneity

The proteome of bovine milk is dominated by just six gene products that constitute approximately 95% of milk protein. Nonetheless, over 150 protein spots can be readily detected following two-dimensional electrophoresis of whole milk. Many of these represent isoforms of the major gene products produced through extensive posttranslational modification. Peptide mass fingerprinting of in-gel tryptic digests (using matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) in reflectron mode with alpha-cyano-4-hydroxycinnamic acid as the matrix) identified 10 forms of K-casein with isoelectric point (pl) values from 4.47 to 5.81, but could not distinguish between them. MALDI-TOF MS in linear mode, using sinapinic acid as the matrix, revealed a large tryptic peptide (mass > 5990 Da) derived from the C-terminus that contained all the known sites of genetic variance, phosphorylation and glycosylation. Two genetic variants present as singly or doubly phosphorylated forms could be distinguished using mass data alone. Glycoforms containing a single acidic tetrasaccharide were also identified. The differences in electrophoretic mobility of these isoforms were consistent with the addition of the acidic groups. While more extensively glycosylated forms were also observed, substantial loss of N-acetylneuraminic acid from the glycosyl group was evident in the MALDI spectra such that ions corresponding to the intact glycopeptide were not observed and assignment of the glycoforms was not possible. However, by analysing the pl shifts observed on the two-dimensional gels in conjunction with the MS data, the number of N-acetylneuraminic acid residues, and hence the glycoforms present, could be determined.

E2F suppression and Sp1 overexpression are sufficient to induce the differentiation-specific marker, transglutaminase type 1, in a squamous cell carcinoma cell line

Recently, E2F function has expanded to include the regulation of differentiation in human epidermal keratinocytes (HEKs). We extend these findings to report that in HEKs, Sp1 is a differentiation-specific activator and a downstream target of E2F-mediated suppression of the differentiation-specific marker, transglutaminase type 1 (TG-1). Deletion of elements between -0.084 to -0.034 kb of the TG-1 promoter disabled E2F1-induced suppression of promoter activity. Electrophoretic mobility shift assays (EMSAs) demonstrated that Sp1 and Sp3 bound this region. Protein expression analysis suggested that squamous differentiation was accompanied by increased Sp1/Sp3 ratio. Cotransfection of proliferating HEKs or the squamous cell carcinoma (SCC) cell line, KJD-1/SV40, with an E2F inhibitor (E2Fd/n) and Sp1 expression plasmid was sufficient to activate the TG-1 promoter. The suppression of Sp1 activity by E2F in differentiated cells appeared to be indirect since we found no evidence of an Sp1/E2F coassociation on the TG-1 promoter fragment. Moreover, E2F inhibition in the presence of a differentiation stimulus induced Sp1 protein. These data demonstrate that (i) Sp1 can act as a differentiation stimulus, (ii) E2F-mediated suppression of differentiation-specific markers is indirect via Sp1 inhibition and (iii) a combination of E2F inhibition and Sp1 activation could form the basis of a differentiation therapy for SCCs.

Quantitative analysis of DNA-protein interactions using double-labeled native gel electrophoresis and fluorescence-based imaging

We have developed a sensitive, non-radioactive method to assess the interaction of transcription factors/DNA-binding proteins with DNA. We have modified the traditional radiolabeled DNA gel mobility shift assay to incorporate a DNA probe end-labeled with a Texas-red fluorophore and a DNA-binding protein tagged with the green fluorescent protein to monitor precisely DNA-protein complexation by native gel electrophoresis. We have applied this method to the DNA-binding proteins telomere release factor-1 and the sex-determining region-Y, demonstrating that the method is sensitive (able to detect 100 fmol of fluorescently labeled DNA), permits direct visualization of both the DNA probe and the DNA-binding protein, and enables quantitative analysis of DNA and protein complexation, and thereby an estimation of the stoichiometry of protein-DNA binding.

High-precision TIMS U-series and AMS C-14 dating of a coral reef lagoon sediment core from southern South China Sea

Accurate dating of lagoon sediments has been a difficult problem, although lagoon profiles, usually with high deposition rates, have a great potential for high-resolution climate reconstruction. We report 26 high-precision TIMS U-series dates (on 25 coral branches) and five AMS C-14 dates (on foraminifera) for a 15.4-m long lagoon core from Yongshu Reef, Nansha area, southern South China Sea. All the dates are in the correct stratigraphical sequence, providing the best chronology so far reported for lagoon deposits. The results reveal a similar to 4000-a continuous depositional history, with sedimentation rates varying from 0.8 to 24.6 mm a(-1), with an average of 3.85 mm a(-1), which corresponds to an average net carbonate accumulation rate of similar to 2700 g CaCO3 m(-2) a(-1), significantly higher than the mean value (800 +/- 400 g CaCO3 m(-2) a(-1)) used for lagoons in general in previous studies of global carbonate budget. Episodes of accelerated depositions within the last 1000 years correlate well with strong storm events identified by U-series dates of storm-transported coral blocks in the area. However, in the longer term, the sedimentation rates during the past 1000 years were much higher than earlier on, probably due to more vigorous wave-reef interaction as a result of relative sea-level fall since 500 AD and expansion of reef flat area, supplying more sediments. The coral TIMS U-series ages and foraminifera AMS 14C dates reveal intriguing apparent radiocarbon reservoir ages (R) from 572 to 1052 years, which are much higher than global mean values of similar to 400 years. (c) 2006 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Growth hormone as a cytokine

1. The growth hormone (GH) receptor was the first of the class 1 cytokine receptors to be cloned. It shares a number of structural characteristics with other family members and common signalling mechanisms based on common usage of the Janus kinase 2 (JAK2). 2. Growth hormone receptor activation is initiated by GH-induced homodimerization of receptor molecules. This has enabled the creation of specific hormone antagonists that block receptor dimerization. 3. The details of the transcription factors used by the activated receptor are being revealed as a result of promoter analyses and electrophoretic mobility gelshift analysis. 4. Growth hormone receptors are widespread and their discovery in certain tissues has led to the assignment of new physiological roles for GH, Some of these involve local or paracrine roles for GH, as befits its cytokine status. 5. Four examples of such novel roles are discussed, These are: (i) the brain GH axis; (ii) GH and the vitamin B-12 axis; (iii) GH in early pre-implantation development; and (iv) GH in development of the tooth. 6. We propose that the view that GH acts through the intermediacy of insulin-like growth factor-1 is simplistic; rather, GH acts to induce an array of growth factors and their receptors and the composition of this array varies with tissue type and, probably, stage of development.

A ESPIRITUALIDADE ENQUANTO DIMENSÃO DA CULTURA ORGANIZACIONAL: ESTUDO DE CASO EM UMA INSTITUIÇÃO CONFESSIONAL DE ENSINO

A prática de espiritualidade no local de trabalho tem sido alvo de pesquisas inclusive no âmbito da administração por estar relacionada ao empenho e ao comprometimento dos funcionários de uma organização, o que se refere a aspectos da gestão organizacional. A espiritualidade no ambiente de trabalho também pode estar relacionada com aspectos da cultura organizacional, quando essa prática se torna um valor organizacional. Rego, Cunha e Souto (2007), destacam que um ambiente de trabalho que pratica a espiritualidade, desenvolve cinco dimensões de espiritualidade, sendo: o sentido de comunidade na equipe, o alinhamento do indivíduo com os valores da organização, o sentido de préstimo à comunidade, a alegria no trabalho e a oportunidade para a vida interior. O estudo objetivou identificar no contexto de uma organização se as dimensões de espiritualidade se manifestavam na percepção de seus colaboradores. Para isso, desenvolveu-se uma pesquisa qualitativa de caráter exploratório, com o método de estudo de caso em uma instituição confessional educacional da região do ABC Paulista. Por meio de entrevistas foram coletadas informações para análise quanto a sua cultura e a prática da espiritualidade em seu ambiente de trabalho. Para um maior reforço dos resultados da pesquisa, também foi desenvolvida uma análise documental da instituição e observações de campo. Foi possível constatar que a instituição confessional educacional pesquisada trata-se de uma organização que em sua cultura organizacional, possui valores de espiritualidade documentados, praticados e percebidos pelos colaboradores. Também constatou-se que as dimensões de espiritualidade abordadas no referencial teórico, são características percebidas pelos colaboradores na realidade da organização. Houve destaque para as dimensões de oportunidade para a vida interior e sentido de comunidade na equipe. Os gestores da organização demonstraram em seus depoimentos que se dedicam no desenvolvimento dessas dimensões e a percepção dos funcionários da instituição confirmam esse fenômeno. Assim, através dessas duas dimensões de espiritualidade, as outras três encontram base para seu desenvolvimento no contexto da instituição pesquisada. Esse resultado pode caracterizar um fenômeno em instituições confessionais educacionais, porém, a presente pesquisa obtém seu limite de campo e demográfico. Pesquisas futuras em instituições confessionais educacionais diferentes e em regiões diferentes, poderão contribuir para conclusões mais abrangentes.

QUALIDADE DE VIDA NO TRABALHO: COM A PALAVRA OS FUNCIONÁRIOS PÚBLICOS

O tema desta pesquisa é a Qualidade de Vida no Trabalho dos funcionários públicos da Secretaria de Saúde de Barra Mansa/RJ. Trata-se de um estudo de caso de natureza quanti-qualitativa, exploratória e descritiva que tem como objetivos compreender o que é a QVT na ótica do funcionário público, verificar que percepções ele possui acerca de sua própria QVT e, a partir daí, compreender se na esfera pública é possível construir um novo sentido para a QVT que se aproxime de um compromisso com a coletividade e com a vida. O modelo de QVT de Walton, a análise dos instrumentos de onze outras pesquisas realizadas em diversas instituições brasileiras e a coleta de sete depoimentos dos sujeitos pesquisados, acerca de suas histórias profissionais, suas impressões gerais sobre a QVT, orientaram a elaboração do instrumento utilizado nesta pesquisa. Coletaram-se 205 questionários válidos quantidade suficiente para a utilização da análise fatorial como método estatístico, por meio do software SPSS , além de mais dois depoimentos, em entrevistas abertas, os quais, somados aos sete já obtidos por ocasião da preparação do instrumento de pesquisa, foram utilizados na análise qualitativa que também se fez. Os principais resultados encontrados apontam que a QVT dos funcionários públicos pesquisados é de razoável a boa e que eles associam QVT a uma série de aspectos objetivos e subjetivos da vida no trabalho. Muitos deles estão presentes no modelo de Walton, porém emergiram alguns que vão além do que o modelo abrange. É exatamente nesta lacuna que parece ser possível construir novos sentidos para a QVT que a aproximam de um compromisso com a coletividade e com a vida, numa lógica diferente daquela individualista e instrumental que marcam sua origem no setor privado. A partir daí se abre a possibilidade de se pensar em políticas públicas participativas.

GÊNERO, RAÇA, DISCRIMINAÇÃO: O TOM DA COR NA DIREÇÃO DA ESCOLA PÚBLICA.

BRUNELLI, Conceição Aparecida Garcia: Gênero, raça, discriminação: o tom da cor na direção da escola pública. Mestrado em Educação. Universidade Metodista de São Paulo, São Bernardo do Campo - SP. 1 v. 244 p. 2007. Esse trabalho teve por objetivo investigar a trajetória das mulheres negras diretoras de escola pública e o processo de construção de sua identidade social, cultural, de gênero e raça. De fato, as mulheres negras em questão constroem suas identidades nadando entre águas profundas e revoltas: a das relações de gênero e a das relações raciais. A pesquisa permitiu-nos desvendar o processo seletivo pelo qual passam essas mulheres que conseguiram romper o duplo bloqueio formado pelas relações de gênero e de raça e atingiram a posição profissional de diretoras de escola pública. A questão central que norteia essa pesquisa diz respeito à trajetória de vida da mulher negra que optou pela carreira do magistério, as intercorrências encontradas ao longo de sua trajetória pessoal, de formação acadêmica e profissional, suas experiências, frustrações, expectativas, preconceitos e discriminações sofridos na caminhada até chegar ao exercício de sua atividade pública, sua ascensão social, o ingresso na carreira pública e as relações de poder que perpassam as questões de gênero e raça. Aborda ainda como essas intercorrências incidem sobre o processo de construção da identidade dessas mulheres negras e de suas relações com seus colegas brancos, homens e mulheres. A coleta de dados empíricos foi realizada através da história oral representada pela memória dessas mulheres, baseada nos depoimentos escritos e em entrevistas semi-estruturadas. Os depoimentos colhidos permitiram reunir material que foram interpretados segundo as relações de poder elaboradas por Foucault e que nos possibilitam a compreensão e uma reflexão do processo de construção das identidades individual e coletiva.