The Arabidopsis CBF Gene Family Is Composed of Three Genes Encoding AP2 Domain-Containing Proteins Whose Expression Is Regulated by Low Temperature but Not by Abscisic Acid or Dehydration1

We have identified two genes from Arabidopsis that show high similarity with CBF1, a gene encoding an AP2 domain-containing transcriptional activator that binds to the low-temperature-responsive element CCGAC and induces the expression of some cold-regulated genes, increasing plant freezing tolerance. These two genes, which we have named CBF2 and CBF3, also encode proteins containing AP2 DNA-binding motifs. Furthermore, like CBF1, CBF2 and CBF3 proteins also include putative nuclear-localization signals and potential acidic activation domains. The CBF2 and CBF3 genes are linked to CBF1, constituting a cluster on the bottom arm of chromosome IV. The high level of similarity among the three CBF genes, their tandem organization, and the fact that they have the same transcriptional orientation all suggest a common origin. CBF1, CBF2, and CBF3 show identical expression patterns, being induced very rapidly by low-temperature treatment. However, in contrast to most of the cold-induced plant genes characterized, they are not responsive to abscisic acid or dehydration. Taken together, all of these data suggest that CBF2 and CBF3 may function as transcriptional activators, controlling the level of low-temperature gene expression and promoting freezing tolerance through an abscisic acid-independent pathway.

Characterization of Transgenic Tobacco with an Increased α-Linolenic Acid Level1

Microsomal ω-3 fatty acid desaturase catalyzes the conversion of 18:2 (linoleic acid) to 18:3 (α-linolenic acid) in phospholipids, which are the main constituents of extrachloroplast membranes. Transgenic tobacco (Nicotiana tabacum) plants with increased 18:3 contents (designated SIIn plants) were produced through the introduction of a construct with the tobacco microsomal ω-3 fatty acid desaturase gene under the control of the highly efficient promoter containing the E12Ω sequence. 18:3 contents in the SIIn plants were increased by about 40% in roots and by about 10% in leaves compared with the control plants. With regard to growth at 15°C and 25°C and the ability to tolerate chilling at 1°C and 5°C, there were no discernible differences between the SIIn and the control plants. Freezing tolerance in leaves and roots, which was assessed by electrolyte leakage, was almost the same between the SIIn and the control plants. The fluidity of plasma membrane from the SIIn plants was almost the same as that of the control plants. These results indicate that an increase in the 18:3 level in phospholipids is not directly involved in compensation for the diminishment in growth or membrane properties observed under low temperatures.

Localization of Expression of Three Cold-Induced Genes, blt101, blt4.9, and blt14, in Different Tissues of the Crown and Developing Leaves of Cold-Acclimated Cultivated Barley1

Tissues expressing mRNAs of three cold-induced genes, blt101, blt14, and blt4.9, and a control gene, elongation factor 1α, were identified in the crown and immature leaves of cultivated barley (Hordeum vulgare L. cv Igri). Hardiness and tissue damage were assessed. blt101 and blt4.9 mRNAs were not detected in control plants; blt14 was expressed in control plants but only in the inner layers of the crown cortex. blt101 was expressed in many tissues of cold-acclimated plants but most strongly in the vascular-transition zone of the crown; blt14 was expressed only in the inner layers of the cortex and in cell layers partly surrounding vascular bundles in the vascular-transition zone; expression of blt4.9, which codes for a nonspecific lipid-transfer protein, was confined to the epidermis of the leaf and to the epidermis of the older parts of the crown. None of the cold-induced genes was expressed in the tunica, although the control gene was most strongly expressed there. Thus, the molecular aspects of acclimation differed markedly between tissues. Damage in the vascular-transition zone of the crown correlated closely with plant survival. Therefore, the strong expression of blt101 and blt14 in this zone may indicate a direct role in freezing tolerance of the crown.

Characterization of a Gene for Spinach CAP160 and Expression of Two Spinach Cold-Acclimation Proteins in Tobacco1

The cDNA sequence for CAP160, an acidic protein previously linked with cold acclimation in spinach (Spinacia oleracea L.), was characterized and found to encode a novel acidic protein of 780 amino acids having very limited homology to a pair of Arabidopsis thaliana stress-regulated proteins, rd29A and rd29B. The lack of similarity in the structural organization of the spinach and Arabidopsis genes highlights the absence of a high degree of conservation of this cold-stress gene across taxonomic boundaries. The protein has several unique motifs that may relate to its function during cold stress. Expression of the CAP160 mRNA was increased by low-temperature exposure and water stress in a manner consistent with a probable function during stresses that involve dehydration. The coding sequences for CAP160 and CAP85, another spinach cold-stress protein, were introduced into tobacco (Nicotiana tabacum) under the control of the 35S promoter using Agrobacterium tumefaciens-based transformation. Tobacco plants expressing the proteins individually or coexpressing both proteins were evaluated for relative freezing-stress tolerance. The killing temperature for 50% of the cells of the transgenic plants was not different from that of the wild-type plants. As determined by a more sensitive time/temperature kinetic study, plants expressing the spinach proteins had slightly lower levels of electrolyte leakage than wild-type plants, indicative of a small reduction of freezing-stress injury. Clearly, the heterologous expression of two cold-stress proteins had no profound influence on stress tolerance, a result that is consistent with the quantitative nature of cold-stress-tolerance traits.

Apoplastic Sugars, Fructans, Fructan Exohydrolase, and Invertase in Winter Oat: Responses to Second-Phase Cold Hardening

Changes in apoplastic carbohydrate concentrations and activities of carbohydrate-degrading enzymes were determined in crown tissues of oat (Avena sativa L., cv Wintok) during cold hardening. During second-phase hardening (−3°C for 3 d) levels of fructan, sucrose, glucose, and fructose in the apoplast increased significantly above that in nonhardened and first-phase-hardened plants. The extent of the increase in apoplastic fructan during second-phase hardening varied with the degree of fructan polymerization (DP) (e.g. DP3 and DP4 increased to a greater extent than DP7 and DP > 7). Activities of invertase and fructan exohydrolase in the crown apoplast increased approximately 4-fold over nonhardened and first-phase-hardened plants. Apoplastic fluid extracted from nonhardened, first-phase-hardened, and second-phase-hardened crown tissues had low levels, of symplastic contamination, as determined by malate dehydrogenase activity. The significance of these results in relation to increases in freezing tolerance from second-phase hardening is discussed.

Antifreeze glycoproteins inhibit leakage from liposomes during thermotropic phase transitions.

Antifreeze glycoproteins (AFGPs), found in the blood of polar fish at concentrations as high as 35 g/liter, are known to prevent ice crystal growth and depress the freezing temperature of the blood. Previously, Rubinsky et al. [Rubinsky, B., Mattioli, M., Arav, A., Barboni, B. & Fletcher, G. L. (1992) Am. J. Physiol. 262, R542-R545] provided evidence that AFGPs block ion fluxes across membranes during cooling, an effect that they ascribed to interactions with ion channels. We investigated the effects of AFGPs on the leakage of a trapped marker from liposomes during chilling. As these liposomes are cooled through the transition temperature, they leak approximately 50% of their contents. Addition of less than 1 mg/ml of AFGP prevents up to 100% of this leakage, both during chilling and warming through the phase transition. This is a general effect that we show here applies to liposomes composed of phospholipids with transition temperatures ranging from 12 degrees C to 41 degrees C. Because these results were obtained with liposomes composed of phospholipids alone, we conclude that the stabilizing effects of AFGPs on intact cells during chilling reported by Rubinsky et al. may be due to a nonspecific effect on the lipid components of native membranes. There are other proteins that prevent leakage, but only under specialized conditions. For instance, antifreeze proteins, bovine serum albumin, and ovomucoid all either have no effect or actually induce leakage. Following precipitation with acetone, all three proteins inhibited leakage, although not to the extent seen with AFGPs. Alternatively, there are proteins such as ovotransferrin that have no effect on leakage, either before or after acetone precipitation.

High resolution ultrastructural mapping of total calcium: electron spectroscopic imaging/electron energy loss spectroscopy analysis of a physically/chemically processed nerve-muscle preparation.

We report on a procedure for tissue preparation that combines thoroughly controlled physical and chemical treatments: quick-freezing and freeze-drying followed by fixation with OsO4 vapors and embedding by direct resin infiltration. Specimens of frog cutaneous pectoris muscle thus prepared were analyzed for total calcium using electron spectroscopic imaging/electron energy loss spectroscopy (ESI/EELS) approach. The preservation of the ultrastructure was excellent, with positive K/Na ratios revealed in the fibers by x-ray microanalysis. Clear, high-resolution EELS/ESI calcium signals were recorded from the lumen of terminal cisternae of the sarcoplasmic reticulum but not from longitudinal cisternae, as expected from previous studies carried out with different techniques. In many mitochondria, calcium was below detection whereas in others it was appreciable although at variable level. Within the motor nerve terminals, synaptic vesicles as well as some cisternae of the smooth endoplasmic reticulum yielded positive signals at variance with mitochondria, that were most often below detection. Taken as a whole, the present study reveals the potential of our experimental approach to map with high spatial resolution the total calcium within individual intracellular organelles identified by their established ultrastructure, but only where the element is present at high levels.

Core lipid structure is a major determinant of the oxidative resistance of low density lipoprotein.

The influence of thermally induced changes in the lipid core structure on the oxidative resistance of discrete, homogeneous low density lipoprotein (LDL) subspecies (d, 1.0297-1.0327 and 1.0327-1.0358 g/ml) has been evaluated. The thermotropic transition of the LDL lipid core at temperatures between 15 degrees C and 37 degrees C, determined by differential scanning calorimetry, exerted significant effects on the kinetics of copper-mediated LDL oxidation expressed in terms of intrinsic antioxidant efficiency (lag time) and diene production rate. Thus, the temperature coefficients of oxidative resistance and maximum oxidation rate showed break points at the core transition temperature. Temperature-induced changes in copper binding were excluded as the molecular basis of such effects, as the saturation of LDL with copper was identical below and above the core transition. At temperatures below the transition, the elevation in lag time indicated a greater resistance to oxidation, reflecting a higher degree of antioxidant protection. This effect can be explained by higher motional constraints and local antioxidant concentrations, the latter resulting from the freezing out of antioxidants from crystalline domains of cholesteryl esters and triglycerides. Below the transition temperature, the conjugated diene production rate was decreased, a finding that correlated positively with the average size of the cooperative units of neutral lipids estimated from the calorimetric transition width. The reduced accessibility and structural hindrance in the cluster organization of the core lipids therefore inhibits peroxidation. Our findings provide evidence for a distinct effect of the dynamic state of the core lipids on the oxidative susceptibility of LDL and are therefore relevant to the atherogenicity of these cholesterol-rich particles.

Desenvolvimento e avaliação de sorbets probióticos e simbióticos elaborados com polpa de Juçara (Euterpe edulis)

O objetivo deste trabalho foi desenvolver e avaliar diferentes formulações de sorbets probióticos e simbióticos a base de polpa de juçara (Euterpe edulis), de modo a combinar os efeitos benéficos à saúde dos compostos fenólicos deste fruto com os benefícios dos probióticos e prebióticos. Para isso, foram utilizados os microrganismos L. acidophilus e L. paracasei e a fibra polidextrose, além da elaboração de uma amostra controle sem tais elementos para efeito de comparação. Primeiramente, a polpa de juçara pasteurizada utilizada na produção dos sorbets foi avaliada de acordo com suas características físico-químicas e seus compostos bioativos, tendo apresentado resultados adequados para o emprego na matriz alimentícia em questão. Em seguida, os sorbets foram caracterizados através de diversos parâmetros. Assim, a análise centesimal mostrou sorbets com alto índice de carboidratos e baixo valor calórico, enquanto os teores de sólidos solúveis apresentaram-se coerentes em todas as formulações analisadas. Os valores de overrun e densidade aparente relevaram que a incorporação de ar dos sorbets não foi tão elevada quanto de um sorvete lácteo, embora as amostras adicionadas de polidextrose - capaz de mimetizar as propriedades de corpo e espessamento da gordura - tenham obtido resultados mais próximos aos gelados tradicionais. Foram ainda mensurados os efeitos do armazenamento dos produtos a -18 °C durante 120 dias, através de avaliações de pH, coloração instrumental, estabilidade dos compostos fenólicos e antocianinas e viabilidade dos probióticos. O pH das amostras manteve-se constante durante todo o experimento, com valores entre 4,4 e 4,8, enquanto os parâmetros de coloração caracterizaram as amostras como vermelhas e apontaram tendência à perda de luminosidade. Já os polifenóis e antocianinas apresentaram teores elevados, decorrentes da adição da polpa de juçara, sem a ocorrência de degradação destes compostos ao longo da estocagem das amostras sob congelamento. As populações de ambos os microrganismos adicionados apresentaram-se estáveis em cerca de 8 log UFC/ g durante todo o período de armazenamento, o que corresponde a um resultado bastante satisfatório e superior ao recomendado pela legislação brasileira. Por outro lado, a sobrevivência in vitro de tais probióticos quando submetidos aos fluidos gastrointestinais não apresentou resultados adequados para a garantia da funcionalidade destes produtos, com queda de viabilidade superior a 4 ciclos logarítmicos. A aceitabilidade sensorial e intenção de compra apresentaram resultados positivos para todas as formulações, com maior aceitação das amostras probióticas em relação ao controle e menor interesse pelas amostras com adição de prebiótico. Tal resultado demonstra que a incorporação destas bactérias em sorbets de juçara é capaz de melhorar a qualidade do produto, enquanto a adição de polidextrose pode diminuir sua aceitabilidade nas condições empregadas. Em síntese, os sorbets elaborados apresentaram resultados satisfatórios, demonstrando a viabilidade na produção deste tipo de alimento funcional adicionado de probióticos, prebiótico e rico em polifenóis, sendo a combinação de tais elementos capaz de potencializar os efeitos benéficos destes compostos e trazer vantagens fundamentais à microbiota intestinal e à saúde de quem os consome.

Produção e caracterização de biomateriais acelulares bioativos obtidos a partir da decelularização de placentas

A bioengenharia de tecidos baseia-se no uso de moléculas bioativas, células-tronco e biomateriais para reparação de tecidos e/ou órgãos. Biomateriais podem ser classificados de acordo com sua origem em sintéticos ou biológicos. Biomateriais biológicos podem ser produzidos por decelularização, que visa a remoção de células da matriz extracelular (MEC), a qual deve manter sua integridade química e física. Placentas são órgãos de grande interesse na bioengenharia de tecidos visto que são descartadas após o parto e possuem grande volume de matriz extracelular. Métodos de decelularização podem ser classificados em químicos, físicos e enzimáticos. Todos conhecidamente causam alterações na MEC, sendo que a associação deles é comumente utilizada. Este trabalho comparou diferentes protocolos e estabeleceu um método mais favorável para a decelularização de placentas caninas, visando a produção de um biomaterial para futuras aplicações clínicas. Inicialmente ambas as porções - materna e fetal - das placentas foram submetidas à 10 protocolos, que avaliaram variáveis como concentração e tempo de incubação em detergentes, diferentes gradientes de temperatura e a influência da perfusão versus imersão das soluções, na MEC remanescente. Com base na transparência do tecido e na ausência de núcleo celular em cortes histológicos, dois protocolos foram selecionados (I e II). Além dos critérios já mencionados, ambos os protocolos foram comparados quanto à quantidade de DNA remanescente na MEC decelularizada e à permanência e distribuição de algumas das proteínas da matriz. O detergente SDS foi o mais eficaz na remoção de células, embora não tenha sido suficiente para promover uma decelularização tecidual completa. O congelamento prévio das placentas requereu um maior tempo de incubação posterior das amostras nos distintos detergentes. Ambos métodos de perfusão e imersão foram eficazes na remoção das células, embora grande concentração de proteínas do citoesqueleto tenham permanecido retidas na matriz. As amostras processadas pelo protocolo I (SDS 1%, 5mM EDTA + 50mM TRIS + 0,5% antibiótico, e Triton X-100 1%) apresentaram maior preservação da organização estrutural da MEC quando comparadas àquelas processadas de acordo com o protocolo II (que diferiu do anterior pela utilização de solução contendo 0,05% tripsina ao invés de 50mM TRIS), esse último método entretanto foi o que melhor removeu as células das placentas, conforme observado em lâminas histológicas e demonstrado pela menor concentração de DNA. Tanto as porções materna quanto fetal submetidas à ambos protocolos, mantiveram as proteínas laminina, fibronectina e colágeno tipo I. O colágeno tipo III foi observado somente na porção fetal. Conclui-se que o protocolo II foi o mais eficaz no processo de decelularização de placentas caninas tendo promovido a remoção do conteúdo celular e diminuição da concentração de DNA na MEC remanescente. No entanto é necessário otimizar o tempo de incubação das placentas em soluções enzimáticas visando maior conservação do arranjo da matriz decelularizada. A análise da capacidade da MEC decelularizada por tal método para ser utilizada em bioengenharia de tecidos ainda deve ser avaliada in vitro e in vivo

Aplicação de testes de toxicidade com organismos marinhos para a análise de efluentes industriais lançados em áreas estuarinas

Com o objetivo de aplicar e avaliar a viabilidade de uso dos métodos disponíveis com organismos marinhos, no controle da toxicidade de efluentes líquidos que são lançados em ambientes estuarinos, foram realizados testes de toxicidade aguda com os crustáceos Mysidopsis juniae, Artemia sp, Temora stylifera e Acartia IiIljeborgi e testes de toxicidade crônica de curta duração com o equinodermo Lytechinus variegatus, utilizando-se os efluentes industriais de uma indústria siderúrgica, COSIPA e uma fábrica de fertilizantes, ULTRAFÉRTIL/JARDIM SÃO MARCOS, ambos lançados no estuário do Rio Cubatão. Dentre os organismos-testes utilizados, para avaliação do efeito tóxico agudo, o misidáceo M. juniae foi o mais sensível para ambos os efluentes, sendo que Artemia sp foi o menos sensível. Testes de toxicidade crônica com L. variegatus também se mostraram bastante úteis para avaliação de efeitos subletais. Os efluentes analisados apresentaram grande variabilidade durante o período de estudo, o que foi evidenciado através do cálculo do coeficiente de variação para testes com M. juniae. Foi avaliado, também, o efeito da salinidade sobre a sensibilidade dos crustáceos M. juniae e Artemia sp a agentes químicos (zinco e DSS) e aos efluentes industriais. A salinidade não interferiu significativamente nos resultados observados, com exceção de um experimento realizado a 15x10-3 com Artemia sp, com o efluente da COSIPA. Verificou-se, ainda, o possível efeito da utilização de salmoura obtida através dos processos de congelamento e evaporação da água do mar, sendo que o primeiro processo foi indicado para salinização de efluentes.

Análise funcional das proteínas HrcA, GroES/GroEL e DnaK/DnaJ em Caulobacter crescentus

O operon groESL de C. crescentus apresenta dupla regulação. A indução deste operon por choque térmico é dependente do fator sigma de choque térmico σ32. A temperaturas fisiológicas, a expressão de groESL apresenta regulação temporal durante o ciclo celular da bactéria e o controle envolve a proteína repressora HrcA e o elemento CIRCE (controlling inverted repeat of chaperonin expression). Para estudar a atividade da proteína repressora in vitro, produzimos e purificamos de E. coli a HrcA de C. creseentus contendo uma cauda de histidinas e a ligação especifica ao elemento CIRCE foi analisada em ensaios de migração retardada em gel de poliacrilamida (EMRGP). A quantidade de DNA retardada pela ligação a HrcA aumentou significativamente na presença de GroES/GroEL, sugerindo que estas proteínas modulam a atividade de HrcA. Corroboração desta modulação foi obtida analisando fusões de transcrição da região regulatória de groESL com o gene lacZ, em células de C. crescentus produzindo diferentes quantidades de GroES/EL. HrcA contendo as substituições Pro81 AJa e Arg87Ala, aminoácidos que se localizam no domínio putativo de ligação ao DNA da proteína, mostraram ser deficientes na ligação a CIRCE, tanto in vitro como in vivo. Em adição, HrcA Ser56Ala expressa na mesma célula juntamente com a proteína selvagem produziu um fenótipo dominante-negativo, indicando que a HrcA de C. crescentus liga-se a CIRCE como um oligômero, provavelmente um dímero. As tentativas de obtenção de mutantes nulos para os genes groESL ou dnaKJ falharam, indicando que as proteínas GroES/GroEL e DnaK/DnaJ são essenciais em C. crescentus, mesmo a temperaturas normais. Foram então construídas no laboratório as linhagens mutantes condicionais SG300 e SG400 de C. crescentus, onde a expressão de groESL e de dnaKJ, respectivamente, está sob controle de um promotor induzido por xilose (PxyIX). Estas linhagens foram caracterizadas quanto á sua morfologia em condições permissivas ou restritivas, assim como quanto à capacidade de sobrevivência frente a vários tipos de estresse. As células da linhagem SG300, exauridas de GroES/GroEL, são resistentes ao choque térmico a 42°C e são capazes de adquirir alguma termotolerância. Entretanto, estas células são sensíveis aos estresses oxidativo, salino e osmótico. As células da linhagem SG400, exauridas de DnaKlJ, são sensíveis ao choque térmico, à exposição a etanol e ao congelamento, e são incapazes de adquirir termotolerância. Além disso, tanto as células exauridas de GroES/GroEL quanto as exauridas de DnaK/DnaJ apresentam problemas na sua morfologia. As células de SG300 exauridas de GroES/GroEL formam filamentos longos que possuem constrições fundas e irregulares. As células de SG400 exauridas de DnaK/DnaJ são apenas um pouco mais alongadas que as células pré-divisionais selvagens e a maioria das células não possuem septo. Estas observações indicam bloqueio da divisão celular, que deve ocorrer em diferentes estágios em cada linhagem.

Phase diagram of a polydisperse soft-spheres model for liquids and colloids

The phase diagram of soft spheres with size dispersion is studied by means of an optimized Monte Carlo algorithm which allows us to equilibrate below the kinetic glass transition for all size distributions. The system ubiquitously undergoes a first-order freezing transition. While for a small size dispersion the frozen phase has a crystalline structure, large density inhomogeneities appear in the highly disperse systems. Studying the interplay between the equilibrium phase diagram and the kinetic glass transition, we argue that the experimentally found terminal polydispersity of colloids is a purely kinetic phenomenon.

Estabilidade química e funcional dos compostos bioativos da polpa de buriti congelada, liofilizada e atomizada

O buriti (Mauritia flexuosa L.) é um fruto rico em carotenoides, ácidos graxos e compostos fenólicos com grande potencial de industrialização. Entretanto, sua vida útil reduzida dificulta a comercialização e um maior aproveitamento. Dessa forma, tecnologias de processamento podem ser empregadas para que haja maior utilização e expansão do buriti. Este trabalho teve como objetivo caracterizar polpa de buriti congelada, liofilizada e atomizada, quantificando os compostos bioativos (carotenoides e ácidos graxos), a composição centesimal e mineral, além de avaliar a estabilidade química e funcional da polpa submetida a esses tratamentos ao longo do tempo de armazenamento. Polpas de buriti oriunda da Comunidade Boa Vista, zona rural do município de Arinos, MG, foram submetidas a três processamentos: congelamento (eleito como controle), liofilização e atomização (com adição de maltodextrina como coadjuvante de tecnologia). Após o processamento, as polpas foram acondicionadas em embalagens laminadas compostas por poliéster, alumínio e polietileno (25 x 25 cm), com capacidade para 100 g cada, e armazenadas a -23 °C para o congelamento e a temperatura ambiente para as polpas desidratadas. As análises físicas, químicas, nutricionais e funcionais foram realizadas logo após o processamento, para caracterização das polpas e nos períodos: 1, 14, 28, 42 e 56 dias, para avaliação da estabilidade. O delineamento experimental empregado constituiu-se de dois fatores (processamento e período) e a interação entre eles. Os dados foram analisados estatisticamente por meio da Análise de Variância Univariada (ANOVA) com nível de significância de 5 %. Constatou-se que durante a estocagem a polpa liofilizada apresentou maior brilho, menor opacidade, valores inferiores para o pH, menor variação da atividade de água e maior acidez titulável. Esses parâmetros são importantes indicadores de qualidade da polpa durante a sua estocagem, visto que dificultam o desenvolvimento microbiano. A adição da maltodextrina no processo de atomização acarretou maiores teores de sólidos solúveis em relação aos demais tratamentos. Os resultados demonstraram que, ao longo do armazenamento, a liofilização contribuiu para a melhor preservação dos carotenoides totais. A quantificação dos carotenoides e dos ácidos graxos na polpa congelada demonstrou que houve melhor preservação de carotenoides do tipo alfa e beta caroteno, dos ácidos graxos oleico, indicando maior valor nutricional para a alimentação humana. Apesar dos resultados satisfatórios para a polpa congelada, durante o tempo analisado a polpa congelada apresentou maiores perdas em relação à polpa liofilizada. Para a classe dos compostos fenólicos, a liofilização apresentou melhores resultados ao longo da estocagem. O uso de baixas temperaturas foi mais efetivo para a preservação dos compostos bioativos analisados. Portanto, pode-se concluir que o emprego da liofilização é a alternativa mais adequada entre as avaliadas, para o aproveitamento da polpa de buriti na indústria de alimentos, uma vez que esse tratamento preservou todos os constituintes avaliados durante a estocagem.

Fluorescent Biological Aerosol Particles in Coastal Canada and the Link to Atmospheric Ice Nuclei

Bioaerosols are a subgroup of atmospheric aerosols and are often linked to the spread of human, animal and plant diseases. Bioaerosols also may play an indirect effect on environmental processes, including the formation of precipitation and alteration of the global climate through their role as nuclei for cloud droplet formation. Several types of biological organisms (e.g., fungi and bacteria) have been shown to be effective ice nuclei (IN) and cloud condensation nuclei (CCN). During 21 days in August 2013 we participated in a collaborative international campaign at a rural, coastal site near the village of Ucluelet on the west coast of Vancouver Island, British Columbia, Canada. The experiments were conducted as part of the NETCARE project (the NETwork on Climate and Aerosols: Addressing Key Uncertainties in Remote Canadian Environments), in part to examine cloud nuclei properties of marine aerosol. The study was conducted from a mobile trailer located approximately 100 m from the coast. A suite of aerosol instrumentation was operated for approximately one month. Key instruments utilized as a part of this thesis include the wideband integrated bioaerosol sensor (WIBS-4A) and the multiple orifice uniform deposition impactor (MOUDI) coupled with an off-line droplet freezing technique (DFT) for the measurement of ice nucleation activity of particles in immersion mode. The WIBS measures the concentration and properties of individual fluorescent particles suspended in the air, which can serve as a proxy for airborne biological particle content. Particles shown to be fluorescent by the WIBS instrument were divided into seven categories based on the pattern of fluorescence each particle exhibited in the three fluorescent channels. Results of the WIBS analysis show that the fluorescent particle concentration in the region correlated well with IN number. The fluorescent particle concentration correlated well with the number of particles shown to be ice active as a function of both particle size and freezing temperature. Correlations involving marine aerosols and marine biological activity indicate that the majority of IN measured at the coastal site likely are not from have marine sources.