Caracterização da distribuição de alelos de loci STR do cromossomo Y com elevada taxa de mutação em uma amostra populacional do Rio de Janeiro

Marcadores genéticos presentes no cromossomo Y, como os microssatélites (Y-STRs) e polimorfismos de único nucleotídeo (Y-SNPs) são utilizados na caracterização de linhagens masculinas, visto que são transmitidos às gerações seguintes sem alterações, a menos que ocorram mutações (Singh et al., 2011; Mitchell & Hammer, 1996; Butler, 2009). Por isso, esses marcadores são amplamente empregados em diversas situações, destacando-se o uso constante dos Y-STRs na genética forense por apresentarem alta capacidade de discriminar linhagens. Recentemente, foram descritos 13 marcadores com taxas de mutação substancialmente superiores àquelas verificadas para loci STR do cromossomo Y, denominados Rapidly Mutating (RM) Y-STRs (Ballantyne et al., 2010; Kayser et al., 2012). Devido às taxas de mutação elevadas, os RM-YSTRs apresentam maior eficiência na discriminação entre indivíduos proximamente relacionados, pertencentes à mesma linhagem patrilínea. O presente trabalho buscou aprofundar o conhecimento acerca das características populacionais e mutacionais dos loci RM-YSTRs em amostra do Rio de Janeiro, contribuindo com estudos desta natureza na população brasileira. Realizou-se a análise de 13 loci do cromossomo Y em 258 indivíduos do sexo masculino, compondo 129 pares de pais e filhos, nascidos no estado do Rio de Janeiro. O DNA das amostras foi extraído, conforme os protocolos vigentes na rotina do LDD-UERJ. As sequências genéticas de interesse foram amplificadas pela técnica de reação em cadeira da polimerase (PCR) através da realização de três PCR multiplex, cujos produtos de amplificação foram separados por eletroforese em sequenciador automático ABI-3500 (Applied Biosystems). Para os pares pai/filho que apresentaram haplótipos mutados, empregou-se a técnica de sequenciamento para confirmação das mutações. Os loci RM-YSTR geraram um poder de discriminação de 1,0 na amostra analisada, o que significa que todos os 129 indivíduos da amostra populacional apresentaram haplótipos diferentes para tais marcadores, com frequências de 0,0077 e diversidade haplotípica igual a 1. Além disso, foram obtidos valores elevados de diversidade gênica para os 13 marcadores. A análise de distância genética e os resultados de AMOVA baseados nos valores de Fst demonstraram que os RM-YSTR não indicam subdivisão populacional e traços ancestrais comuns. Tais valores estão associados às elevadas taxas de mutação encontradas, cuja média foi de 2,11 x 10-2. Foi possível observar que os loci RM-YSTR são muito discriminativos na amostra miscigenada analisada, além de terem maior capacidade de diferenciar indivíduos do que outros conjuntos de marcadores normalmente usados em estudos populacionais e análises forenses. Sendo assim, é possível concluir que os marcadores RM-YSTR são promissores para discriminar indivíduos da mesma linhagem patrilínea, visto que devido às suas elevadas taxas mutacionais e poder de discriminação, são capazes de diferenciar indivíduos de maneira mais eficiente do que os outros conjuntos de STR. Porém, é necessário maior número de estudos para melhor caracterização destes loci em diferentes populações.

Fish recolonization in temperate Australian rockpools: a quantitative experimental approach

Understanding recolonization processes of intertidal fish assemblages is integral for predicting the consequences of significant natural or anthropogenic impacts on the intertidal zone. Recolonization of experimentally defaunated intertidal rockpools by fishes at Bass Point, New South Wales (NSW), Australia, was assessed quantitatively by using one long-term and two short-term studies. Rockpools of similar size and position at four sites within the intertidal zone were repeatedly defaunated of their fish fauna after one week, one month, and three months during two shortterm studies in spring and autumn (5 months each), and every six months for the long-term study (12 months). Fish assemblages were highly resilient to experimental perturbations—recolonizing to initial fish assemblage structure within 1−3 months. This recolonization was primarily due to subadults (30−40 mm TL) and adults (>40 mm TL) moving in from adjacent rockpools and presumably to abundant species competing for access to vacant habitat. The main recolonizers were those species found in highest numbers in initial samples, such as Bathygobius cocosensis, Enneapterygius rufopileus, and Girella elevata. Defaunation did not affect the size composition of fishes, except during autumn and winter when juveniles (<30 mm TL) recruited to rockpools. It appears that Bass Point rockpool fish assemblages are largely controlled by postrecruitment density-dependent mechanisms that indicate that recolonization may be driven by deterministic mechanisms.

Quantitative determination of the timing of otolith ring formation from marginal increments in four marine teleost species from northwestern Australia

The sectioned otoliths of four fish species from a tropical demersal trawl fishery in Western Australia revealed a series of alternating trans-lucent and opaque zones in reflected light. The translucent zones, referred to as growth rings, were counted to determine fish ages. The width of the opaque zone on the periphery of the otolith section as a proportion of the width of the previous opaque zone (index of completion) was used to determine the periodicity of growth-ring formation. This article describes a method for modeling changes in the index of ring completion over time, from which a parameter for the most probable time of growth-ring formation (with confidence intervals) can be determined. The parameter estimate for the timing of new growth-ring formation for Lethrinus sp. 3 was from mid July to mid September, for Lutjanus vitta from early July to the end of August, for Nemipterus furcosus from mid July to late September, and for Lutjanus sebae from mid July to mid November. The confidence intervals for the timing of formation of growth rings was variable between species, being smallest for L. vitta, and variable between fish of the same species with different numbers of growth rings. The stock assessments of these commercially important species relies on aging information for all the age classes used in the assessment. This study demonstrated that growth rings on sectioned otoliths were laid down annually, irrespective of the number of growth rings, and also demonstrated that the timing of ring formation for these tropical species can be determined quantitatively (with confidence intervals.

Quantitative and qualitative studies on the bacterial flora of fresh sardines

Plate counts at R T and 8 C on the skin with muscle and the gut contents of absolutely fresh sardines (Sardinella longiceps) caught off Cochin showed a seasonal variation when sampling was done over a period of 12 months. The counts of the gut contents ran parallel with those of the skin with muscle, but at a higher level of magnitude. Qualitatively, the analysis of 360 strains of bacteria isolated from the skin with muscle and 100 strains from the guts during a year's study revealed a very high preponderance of Gram negative rods, mainly of Achromobacter, Vibrio, and Pseudomonas groups. The percentage of Gram positive organism was very low or nil at times in the ocean fresh sardines.