The vascular targeting agent combretastatin-A4 and a novel cis-Restricted {beta}-Lactam Analogue, CA-432, induce apoptosis in human chronic myeloid leukemia cells and ex vivo patient samples including those displaying multidrug resistance

Combretastatin-A4 (CA-4) is a natural derivative of the African willow tree Combretum caffrum. CA-4 is one of the most potent antimitotic components of natural origin, but it is, however, intrinsically unstable. A novel series of CA-4 analogs incorporating a 3,4-diaryl-2-azetidinone (β-lactam) ring were designed and synthesized with the objective to prevent cis -trans isomerization and improve the intrinsic stability without altering the biological activity of CA-4. Evaluation of selected β-lactam CA-4 analogs demonstrated potent antitubulin, antiproliferative, and antimitotic effects in human leukemia cells. A lead β-lactam analog, CA-432, displayed comparable antiproliferative activities with CA-4. CA-432 induced rapid apoptosis in HL-60 acute myeloid leukemia cells, which was accompanied by depolymerization of the microtubular network, poly(ADP-ribose) polymerase cleavage, caspase-3 activation, and Bcl-2 cleavage. A prolonged G(2)M cell cycle arrest accompanied by a sustained phosphorylation of mitotic spindle checkpoint protein, BubR1, and the antiapoptotic proteins Bcl-2 and Bcl-x(L) preceded apoptotic events in K562 chronic myeloid leukemia (CML) cells. Molecular docking studies in conjunction with comprehensive cell line data rule out CA-4 and β-lactam derivatives as P-glycoprotein substrates. Furthermore, both CA-4 and CA-432 induced significantly more apoptosis compared with imatinib mesylate in ex vivo samples from patients with CML, including those positive for the T315I mutation displaying resistance to imatinib mesylate and dasatinib. In summary, synthetic intrinsically stable analogs of CA-4 that display significant clinical potential as antileukemic agents have been designed and synthesized.

Modulation of intracellular calcium homeostasis blocks autophagosome formation

Cellular stress responses often involve elevation of cytosolic calcium levels, and this has been suggested to stimulate autophagy. Here, however, we demonstrated that agents that alter intracellular calcium ion homeostasis and induce ER stress-the calcium ionophore A23187 and the sarco/endoplasmic reticulum Ca (2+)-ATPase inhibitor thapsigargin (TG)-potently inhibit autophagy. This anti-autophagic effect occurred under both nutrient-rich and amino acid starvation conditions, and was reflected by a strong reduction in autophagic degradation of long-lived proteins. Furthermore, we found that the calcium-modulating agents inhibited autophagosome biogenesis at a step after the acquisition of WIPI1, but prior to the closure of the autophagosome. The latter was evident from the virtually complete inability of A23187- or TG-treated cells to sequester cytosolic lactate dehydrogenase. Moreover, we observed a decrease in both the number and size of starvation-induced EGFP-LC3 puncta as well as reduced numbers of mRFP-LC3 puncta in a tandem fluorescent mRFP-EGFP-LC3 cell line. The anti-autophagic effect of A23187 and TG was independent of ER stress, as chemical or siRNA-mediated inhibition of the unfolded protein response did not alter the ability of the calcium modulators to block autophagy. Finally, and remarkably, we found that the anti-autophagic activity of the calcium modulators did not require sustained or bulk changes in cytosolic calcium levels. In conclusion, we propose that local perturbations in intracellular calcium levels can exert inhibitory effects on autophagy at the stage of autophagosome expansion and closure.

Novel role of androgens in mitochondrial fission and apoptosis

Androgen and androgen receptors (AR) play critical roles in the proliferation of prostate cancer through transcriptional regulation of target genes. Here, we found that androgens upregulated the expression of dynamin-related protein 1 (Drp1), which is involved in the induction of mitochondrial fission, a common event in mitosis and apoptosis. Clinical tissue samples and various prostate cancer cell lines revealed a positive correlation between Drp1 and AR levels. Treatment of androgen-sensitive cells with an AR agonist, R1881, and antagonist, bicalutamide, showed that Drp1 is transcriptionally regulated by androgens, as confirmed by an AR ChIP-seq assay. Live imaging experiments using pAcGFP1-Mito stably transfected LNCaP (mito-green) cells revealed that androgen did not induce significant mitochondrial fission by itself, although Drp1 was upregulated. However, when treated with CGP37157 (CGP), an inhibitor of mitochondrial Ca��⁺ efflux, these cells exhibited mitochondrial fission, which was further enhanced by pretreatment with R1881, suggesting that androgen-induced Drp1 expression facilitated CGP-induced mitochondrial fission. This enhanced mitochondrial fission was correlated with increased apoptosis. Transfection with dominant-negative (DN-Drp1, K38A) rescued cells from increased apoptosis, confirming the role of androgen-induced Drp1 in the observed apoptosis with combination treatment. Furthermore, we found that CGP reduced the expression of Mfn1, a protein that promotes mitochondrial fusion, a process which opposes fission. We suggest that androgen-increased Drp1 enhanced mitochondrial fission leading to apoptosis. The present study shows a novel role for androgens in the regulation of mitochondrial morphology that could potentially be utilized in prostate cancer therapy.

A vivência emocional dos enfermeiros nos cenários da prestação de cuidados ao doente oncológico: o caso dos enfermeiros de um serviço de oncologia médica do Instituto Português de Oncologia de Lisboa Francisco Gentil, E.P.E.

Com a presente investigação pretendemos conhecer a vivência das emoções dos enfermeiros nos cenários da prestação de cuidados ao doente oncológico e simultaneamente contribuir para uma melhoria das práticas de intervenção e de gestão emocional em enfermagem nos contextos de trabalho em Oncologia, procurando dar resposta à pergunta inicial de investigação: Qual a vivência emocional dos enfermeiros nos cenários da prestação de cuidados ao doente oncológico? Nas opções metodológicas optámos pelo paradigma qualitativo, onde a entrevista narrativa foi a técnica privilegiada de recolha de informação, tendo permitido compreender com profundidade a forma como os enfermeiros vivem a prestação de cuidados ao doente oncológico. As experiências emocionais consideradas mais marcantes foram na generalidade aquelas que mais penosas se constituíram para os entrevistados, relacionadas com uma relação mais próxima e profunda com o doente e com situações de morte e sofrimento. Consequentemente os sentimentos e emoções referidos foram na sua maioria negativa. Na prática de cuidar do doente oncológico verificou-se a influência marcada dos mitos sociais e pessoais associados à doença cancro, tendo sido reconhecida de forma global a complexidade e especificidade inerentes a esta prestação de cuidados, tão gratificante, quanto desgastante. O uso de mecanismos de gestão das experiências emocionais refletiu-se no recurso a estratégias pessoais e externas, usadas na sua maioria com o objetivo de o desgaste emocional. Foram sugeridas várias medidas de intervenção organizacional no reconhecer uníssono da necessidade de acompanhamento e suporte por parte da organização de saúde. Os resultados desta investigação acrescentam assim todo um conjunto de novos dados que ajudam na compreensão da problemática da vivência emocional dos enfermeiros, na certeza de que esta melhorará a prestação de cuidados ao doente oncológico, com consequente otimização organizacional. /ABSTRACT - With this present investigation we intend to study the emocional life of nurses while providing health care to oncological patients and simultaneously contribute to an improvement of the intervention and emotional management practices in nursing in the contexts of working in Oncology, trying to answer the initial question of the inquiry: What is the emotional life of nurses in health care scenerjy to oncological patients? As far as the methodology is concerned we chose the qualitative paradigm, in which the narrative interview was the privileged technique to gather information. That allowed us to deeply understand the way nurses live the providing of health care to the oncological patient, their emotional experiences, what they feel and express, what moves and consumes them, as well as the forms of emotional management. The most striking emotional experiences have, in general, been those considered most painful by the interviewed nurses, usually related to a closer and deeper relation with the patient and situations of death and suffering. The consequent feelings and emotions have been mostly negative. Health care provided to oncologic patients is strongly influenced by social and personal myths related to cancer and both the complexity and specificity inherent to this kind of health care has been acknowledged as rewarding, as consuming. The use of means of emotional management is visible in the resource to personal and external strategies, used to diminish the emotional consumption. They have also suggested some measures of organizational intervention in the unison recognition of the need of accompaniment and support from the health care institution. The results of this investigation, thus add whole a set of new data that helps in the understanding of the problematic of the emotional life of nurses, in the certainty that this will improve the providing of care to the oncolologically sick person, with consequent organizational optimization.

O binómio jornalista-editor de imagem na produção noticiosa televisiva: causas e consequências

Na era da convergência jornalística, as redações televisivas estão, ainda, a passar por diversos processos de transformações. Centrando esta problemáti-ca nos telejornalistas, verifica-se uma tendência crescente para que estes de-sempenhem funções e/ou tarefas que ainda há muito pouco tempo eram exe-cutadas por outros profissionais da informação televisiva. Esta agregação fun-cional verifica-se, nomeadamente, ao nível da edição de imagem de conteúdos noticiosos a serem transmitidos pela televisão. Neste contexto, na presente tese de doutoramento pretende-se, em termos gerais, apurar e compreender as causas e as consequências de serem os próprios jornalistas televisivos a desempenhar a edição de imagem de conteúdos noticiosos transmitidos pela televisão. Para isso, foi desenvolvida uma investigação empírica, tendo como campos de estudo as redações centrais da SIC e da TVI. Tal como o trabalho de campo permitiu concluir, os diversos fundamen-tos desta dinâmica são, de certa forma, incontornáveis. Contudo, esta investi-gação pretende também contribuir para que se reúnam as condições, ao nível da oferta formativa, que tornem as respetivas consequências consonantes com uma evolução profícua da atividade jornalística.

Contributos operários para a educa��ão popular em Portugal. O caso da Fábrica de Conservas S. Francisco, da empresa Júdice Fialho, em Portimão

Este artigo debruça-se sobre o período histórico do pós revolução de abril de 1974, a abril de 1976, usando como quadro concetual a noção de educa��ão popular e como contexto empírico a fábrica de conservas “S. Francisco” da empresa Júdice Fialho, localizada na cidade de Portimão. Pretende abrir algumas ideias para perceber de que forma o operariado se organizou em comissões de base, para lutar em defesa de melhores condições de vida e de trabalho. Pretende, ainda, compreender os mecanismos usados para desenvolver um processo educativo de aprendizagem autónoma e emancipatória relativa ao trabalho e à vida social.

A importância pedagógica das artes visuais no 2º ciclo do Ensino Básico: actividades desenvolvidas com estudantes do 6º ano na Escola Dr. António Francisco Colaço em Castro Verde

O objetivo deste trabalho teve como principal finalidade incluir a interpretação das obras de arte, nas suas diferentes dimensões, como componentes integradoras do conhecimento nas artes visuais. O contacto com a arte é um dos propósitos implícitos nesta proposta. A convicção da importância do contacto dos alunos com a obra de arte. Da educa��ão estética na formação integral do ser humano e na apetência pelo prazer das artes no seu contexto, assim como a constatação da ausência do diálogo com a obra de arte no programa da disciplina, conduziu-nos à elaboração, experimentação e reflexão sobre um conjunto de atividades de apreciação estética que envolveram a análise e interpretação de obras de arte, bem como com a transmissão de conhecimentos de história de arte, à execução de trabalhos de expressão plástica. As obras de arte, prestam-se a uma pluralidade de interpretações, desenvolvem a sensibilidade e a imaginação, desempenhando por isso um papel importante na experiência pessoal dos indivíduos. O convívio com a arte é um dos modos mais eficazes para a formação da personalidade e para a integração do indivíduo nos valores superiores da humanidade. É hoje quase lugar-comum a referência à importância das atividades expressivos-artísticas no desenvolvimento “harmonioso” da pessoa humana. Dada a natureza prática das atividades de desenho, de pintura e de criatividade, envolvem os alunos e criam um ambiente propício para a aprendizagem. Após a análise e reflexão dos resultados desta experiência, o estudo permite concluir que os alunos estão recetivos a este tipo de experiências e aprendizagens. O diálogo com a obra de arte, associado à transmissão de conhecimentos de história de arte e à realização de trabalhos de expressão plástica, contribui para o aumento do entusiasmo e motivação nos alunos, para o desenvolvimento das suas capacidades de perceção e interpretação de significados, para a superação de dificuldades nas suas produções plásticas e para o aumento da confiança e autoestima face às suas capacidades de expressão, o que torna fundamental a introdução deste tipo de atividades nas nossas atuais práticas letivas.

Francisco Fernandes Lopes (1884-1969), historiador do Algarve: contributo para a historiografia henriquina

São ainda muito incipientes os estudos sobre a vida e obra do médico olhanense Francisco Fernandes Lopes (1884-1969), uma das figuras mais interessantes do quadro cultural português da primeira metade do século XX. Na verdade, dificilmente poderemos caracterizá-lo apenas como “médico”, pois era um intelectual multifacetado e interessado nas mais diversas áreas do saber, assim como também é impossível descrevê-lo apenas como “olhanense”, pois a sua actividade intelectual extravasou largamente o âmbito local, regional e mesmo nacional. A presente dissertação, intitulada Francisco Fernandes Lopes (1884-1969), historiador do Algarve: contributo para a historiografia henriquina, tem dois objectivos principais, patentes no próprio título: compreender o homem, ou seja, elaborar um estudo biográfico sobre Fernandes Lopes, e analisar uma das suas facetas, a de historiador, mais concretamente no que concerne à sua obra acerca do Infante D. Henrique e a sua relação ao Algarve. No que respeita à biografia, pretende-se compreender a vida e obra de Francisco Fernandes Lopes através de uma análise concertada do seu percurso de vida, dos seus principais interesses e da sua actividade cultural e intelectual. Neste âmbito, é essencial ter em consideração que a vida de Fernandes Lopes se desenrolou mormente em Olhão, vila algarvia singular devido ao seu panorama arquitectónico único de açoteias, e que ele tanto se empenhou em divulgar, procurando que Olhão ocupasse um lugar de destaque no mapa do Algarve e, também, de Portugal. Relativamente à produção historiográfica tem particular destaque a temática henriquina, que foi a que mais ocupou Francisco Fernandes Lopes entre as décadas de 30 a 60 do século XX. Os seus estudos devem ser entendidos no âmbito de um período histórico muito específico – o Estado Novo – e tendo por base a evolução do pensamento historiográfico, assim como outros estudos similares e coetâneos que permitam formular uma comparação.

Costumes e foros de Riba-Côa : normativa e sociedade

Tese de doutoramento, História (História Medieval), Universidade de Lisboa, Faculdade de Letras, 2014

Development of novel antibacterial active, HaCaT biocompatible and biodegradable CA-g-P(3HB)-EC biocomposites with caffeic acid as a functional entity

We have developed novel composites by grafting caffeic acid (CA) onto the P(3HB)-EC based material and laccase from Trametes versicolor was used for grafting purposes. The resulting composites were designated as CA-g-P(3HB)-EC i.e., P(3HB)-EC (control), 5CA-g-P(3HB)-EC, 10CA-g-P(3HB)-EC, 15CA-g-P(3HB)-EC and 20CA-g-P(3HB)-EC. An FT-IR (Fourier-transform infrared spectroscopy) was used to examine the functional and elemental groups of the control and laccase-assisted graft composites. Evidently, 15CA-g-P(3HB)-EC composite exhibited resilient antibacterial activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial strains, respectively. Moreover, a significant level of biocompatibility and biodegradability of the CA-g-P(3HB)-EC composites was also achieved with the human keratinocytes-like HaCaT cells and soil burial evaluation, respectively. In conclusion, the newly developed novel composites with multi characteristics could well represent the new wave of biomaterials for medical applications, and more specifically have promising future in the infection free would dressings, burn and/or skin regeneration field due to their sophisticated characteristics.

Calcium, vitamin D, casein and whey protein intakes and periodontitis among Danish adults

Objective: To investigate whether intakes of Ca, vitamin D, casein and whey are associated with periodontitis and to investigate the possibility of interactions between them. Design: Cross-sectional study. An Internet-based, 267-item FFQ was used to assess dietary intake. Intakes of casein (32·0 g/d), whey proteins (9·6 g/d) and vitamin D (5·8 μg/d) were classified as within v. above the 50th percentile. Ca intake was classified as within v. below age-specific recommendations. Severe periodontitis was defined as having ≥2 inter-proximal sites with clinical attachment loss ≥6 mm (not on the same tooth) and ≥1 inter-proximal site with pocket depth ≥5 mm. Since vitamin D influences Ca absorption, models were stratified by lower and higher (<5·8 v. ≥5·8 µg/d) vitamin D intake. Setting Danish Health Examination Survey (DANHES) 2007–2008. Subjects Adult participants (n 3287) in the oral health study of DANHES 2007–2008. Results Intakes of Ca within recommendations (OR=0·76; 95 % CI 0·58, 0·99), whey ≥9·6 g/d (OR=0·75; 95 % CI 0·58, 0·97) and casein ≥32 g/d (OR=0·75 95 % CI 0·58, 0·97) were associated with lower likelihood of severe periodontitis after adjustment for age, gender, education, smoking, sucrose intake, alcohol consumption, number of teeth, daily brushing, regular visits to the dentist and chronic illness, irrespective of vitamin D intake levels. Intake of vitamin D alone was not associated severe with periodontitis. Conclusions Intakes of Ca, casein and whey protein were inversely associated with periodontitis. Consumption of foods rich in Ca, casein and whey (e.g. dairy foods) should be promoted, as they may contribute to the prevention of periodontitis. Further longitudinal studies are required to confirm these associations.

Calcium, vitamin D, casein and whey protein intakes and periodontitis among Danish adults

OBJECTIVE: To investigate whether intakes of Ca, vitamin D, casein and whey are associated with periodontitis and to investigate the possibility of interactions between them. DESIGN: Cross-sectional study. An Internet-based, 267-item FFQ was used to assess dietary intake. Intakes of casein (32.0 g/d), whey proteins (9.6 g/d) and vitamin D (5.8 mug/d) were classified as within v. above the 50th percentile. Ca intake was classified as within v. below age-specific recommendations. Severe periodontitis was defined as having >/=2 inter-proximal sites with clinical attachment loss >/=6 mm (not on the same tooth) and >/=1 inter-proximal site with pocket depth >/=5 mm. Since vitamin D influences Ca absorption, models were stratified by lower and higher (<5.8 v. >/=5.8 microg/d) vitamin D intake. SETTING: Danish Health Examination Survey (DANHES) 2007-2008. SUBJECTS: Adult participants (n 3287) in the oral health study of DANHES 2007-2008. RESULTS: Intakes of Ca within recommendations (OR=0.76; 95 % CI 0.58, 0.99), whey >/=9.6 g/d (OR=0.75; 95 % CI 0.58, 0.97) and casein >/=32 g/d (OR=0.75 95 % CI 0.58, 0.97) were associated with lower likelihood of severe periodontitis after adjustment for age, gender, education, smoking, sucrose intake, alcohol consumption, number of teeth, daily brushing, regular visits to the dentist and chronic illness, irrespective of vitamin D intake levels. Intake of vitamin D alone was not associated severe with periodontitis. CONCLUSIONS: Intakes of Ca, casein and whey protein were inversely associated with periodontitis. Consumption of foods rich in Ca, casein and whey (e.g. dairy foods) should be promoted, as they may contribute to the prevention of periodontitis. Further longitudinal studies are required to confirm these associations.

Deregulated expression of selected histone methylases and demethylases in prostate carcinoma

Prostate cancer (PCa), a leading cause of cancer-related morbidity and mortality, arises through the acquisition of genetic and epigenetic alterations. Deregulation of histone methyltransferases (HMTs) or demethylases (HDMs) has been associated with PCa development and progression. However, the precise influence of altered HMTs or HDMs expression and respective histone marks in PCa onset and progression remains largely unknown. To clarify the role of HMTs and HDMs in prostate carcinogenesis, expression levels of 37 HMTs and 20 HDMs were assessed in normal prostate and PCa tissue samples by RT-qPCR. SMYD3, SUV39H2, PRMT6, KDM5A, and KDM6A were upregulated, whereas KMT2A-E (MLL1-5) and KDM4B were downregulated in PCa, compared with normal prostate tissues. Remarkably, PRMT6 was the histone modifier that best discriminated normal from tumorous tissue samples. Interestingly, EZH2 and SMYD3 expression levels significantly correlated with less differentiated and more aggressive tumors. Remarkably, SMYD3 expression levels were of independent prognostic value for the prediction of disease-specific survival of PCa patients with clinically localized disease submitted to radical prostatectomy. We concluded that expression profiling of HMTs and HDMs, especially SMYD3, might be of clinical usefulness for the assessment of PCa patients and assist in pre-therapeutic decision-making.