925 resultados para Bainha de mielina Doenças - Teses
Resumo:
Os microRNAs (miRNAs) so pequenos RNAs no codificadores de protenas presentes na maioria dos eucariotos. Esses RNAs regulam a expresso gnica em nvel ps-transcricional atravs do silenciamento de mRNAs-alvo que possuem stios complementares s suas sequncias, atuando em praticamente todos os processos celulares. Embora a estrutura e funo dos miRNAs estejam bem caracterizadas, aspectos relacionados sua organizao genmica, evoluo e atuao em doenças so tpicos que apresentam enormes lacunas. Nesta tese, utilizamos abordagens computacionais para investigar estes temas em trs trabalhos. No primeiro, processamos e integramos um vasto volume de dados publicamente disponveis referentes aos miRNAs e genes codificadores de protenas para cinco espcies de vertebrados. Com isso, construimos uma ferramenta web que permite a fcil inspeo da organizao genmica dos miRNAs em regies inter e intragnicas, o acesso a dados de expresso de miRNAs e de genes codificadores de protenas (classificados em genes hospedeiros e no hospedeiros de miRNAs), alm de outras informaes pertinentes. Verificamos que a ferramenta tem sido amplamente utilizada pela comunidade cientfica e acreditamos que ela possa facilitar a gerao de hipteses associadas regulao dos miRNAs, principalmente quando esto inseridos em genes hospedeiros. No segundo estudo, buscamos compreender como o contexto genmico e a origem evolutiva dos genes hospedeiros influenciam a expresso e evoluo dos miRNAs humanos. Nossos achados mostraram que os miRNAs intragnicos surgem preferencialmente em genes antigos (origem anterior divergncia de vertebrados). Observamos que os miRNAs inseridos em genes antigos tm maior abrangncia de expresso do que os inseridos em genes novos. Surpreendentemente, miRNAs jovens localizados em genes antigos so expressos em um maior nmero de tecidos do que os intergnicos de mesma idade, sugerindo uma vantagem adaptativa inicial que pode estar relacionada com o controle da expresso dos genes hospedeiros, e como consequncia, expondo-os a contextos celulares e conjuntos de alvos diversos. Na evoluo a longo prazo, vimos que genes antigos conferem maior restrio nos padres de expresso (menor divergncia de expresso) para miRNAs intragnicos, quando comparados aos intergnicos. Tambm mostramos possveis associaes funcionais relacionadas ao contexto genmico, tais como o enriquecimento da expresso de miRNAs intergnicos em testculo e dos intragnicos em tecidos neurais. Propomos que o contexto genmico e a idade dos genes hospedeiros so fatores-chave para a evoluo e expresso dos miRNAs. Por fim, buscamos estabelecer associaes entre a expresso diferencial de miRNAs e a quimioresistncia em cncer colorretal utilizando linhagens celulares sensveis e resistentes s drogas 5-Fluoruracil e Oxaliplatina. Dentre os miRNAs identificados, o miR-342 apresentou nveis elevados de expresso nas linhagens sensveis Oxaliplatina. Com base na anlise dos alvos preditos, detectamos uma significativa associao de miR-342 com a apoptose. A superexpresso de miR-342 na linhagem resistente SW620 evidenciou alteraes na expresso de genes da via apopttica, notavelmente a diminuio da expresso do fator de crescimento PDGFB, um alvo predito possivelmente sujeito regulao direta pelo miR-342.
Resumo:
A terapia antiagregante comumente indicada na preveno e tratamento de doenças cardiovasculares. A dupla antiagregao com clopidrogrel e cido acetilsaliclico (AAS) tem sido frequentemente adotada em pacientes com Doena Arterial Coronariana (DAC), mas apresenta ineficcia em uma parcela significativa da populao com gentipo de respondedores. Essa falha teraputica nos leva a questionar se outros mecanismos moleculares podem estar influenciando na resposta a esses frmacos. Recentes estudos sugerem que pequenas sequncias de RNA no codificantes denominadas microRNAs (miRNAs) podem estar fortemente relacionadas com resposta ao tratamento frmaco-teraputico, controlando as protenas envolvidas na farmacocintica e farmacodinmica. Entretanto, os principais miRNAs que atuam na dinmica da resposta medicamentosa ainda no foram bem definidos. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de miRNAs no sangue total perifrico, procurando melhor esclarecer os mecanismos envolvidos na resposta aos antiagregantes plaquetrios AAS e clopidogrel. Para isso, selecionou-se pacientes com DAC, os quais apresentavam diferentes respostas dupla terapia de antiagregao determinadas pelo teste de agregao plaquetria. Baseados nos fentipos, os perfis de expresso de miRNAs foram comparados entre os valores da taxa de agregao categorizados em tercis (T) de resposta. O grupo T1 foi constitudo de pacientes respondedores, o T2 de respondedores intermedirios e o T3 de no respondedores. Os perfis de miRNAs foram obtidos aps sequenciamento de ltima gerao e os dados obtidos foram analisados pelo pacote Deseq2. Os resultados mostraram 18 miRNAs diferentemente expressos entre os dois tercis extremos. Dentre esses miRNAs, 10 deles apresentaram importantes alvos relacionados com vias de ativao e agregao plaquetria quando analisados pelo software Ingenuity. Dos 10 miRNAs, 4 deles, os quais apresentaram-se menos expressos no sequenciamento, demonstraram os mesmos perfis de expresso quando analisados pela reao em cadeia pela polimerase quantitativa (qPCR): hsa-miR-423-3p, hsa-miR-744-5p, hsa-miR- 30a-5p e hsa-let-7g-5p. A partir das anlises de predio de alvos, pde-se observar que os quatro miRNAs, quando menos expressos simultaneamente, predizem ativao da agregao plaquetria. Alm disso, os miRNAs hsa-miR- 423-5p, hsa-miR-744-5p e hsa-let-7g-5p mostraram correlao com o perfil lipdico dos pacientes que, por sua vez, apresentou influncia nos valores de agregao compreendidos no T3 de resposta a ambos os medicamentos. Sendo assim, conclui-se que maiores taxas de agregao plaquetria podem estar indiretamente relacionadas com os padres de expresso de hsa-miR- 423-3p, hsa-miR-744-5p e hsa-let-7g-5p. Sugere-se que a avaliao do perfil de expresso destes 3 miRNAs no sangue perifrico de pacientes com DAC possa predizer resposta teraputica inadequada ao AAS e ao clopidogrel
Resumo:
A acne vulgar uma das doenças cutneas mais comuns, apresentando como um de seus fatores fisiopatolgicos primrios a colonizao pelo microrganismo Propionibacterium acnes. Atualmente, tm-se buscado terapias alternativas para o combate ao P. acnes, destacando-se alguns cidos graxos, como o cido larico (LA). O LA uma molcula pouco solvel em gua, sendo possvel sua incorporao em lipossomas. Os lipossomas apresentam capacidade de encapsulao/ liberao de ativos e impedem a desidratao da pele, tornando-se ingredientes inovadores na rea de cosmticos. Foram preparados lipossomas de dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) contendo diferentes concentraes de LA, que variaram de 0 a 50% da concentrao total em mol, em quatro pHs: 9,0, 7,4, 5,0 e 3,0. Nestes pHs o estado de protonao do LA muda variando de 0 a -1. Os lipossomas foram extrusados por filtros com poros de 100 nm de dimetro visando obteno de vesculas unilamelares grandes (LUV). As LUV foram caracterizadas quanto a sua estabilidade em condies de prateleira, temperatura de transio de fase da bicamada, encapsulamento no interior aquoso, liberao do LA, difuso das vesculas na pele e seus aspectos morfolgicos foram caracterizados por espalhamento de raios-X a baixo ngulo (SAXS) e crio-microscopia eletrnica de transmisso. Estudos de estabilidade mostraram que independentemente da concentrao de LA, as formulaes so mais estveis em pHs mais altos, quando LA est em sua maioria na forma de laurato. Os experimentos de DSC revelaram que em pHs 3,0 e 5,0 e concentraes maiores de LA, a interao deste cido graxo com as bicamadas favorecida, havendo um aumento da temperatura de transio de fase (Tm) e diminuio da cooperatividade. Anlises de taxa de incorporao de sondas hidroflicas confirmaram a presena de um compartimento aquoso interno para as vesculas de DPPC:LA. O LA conseguiu permear a pele no perodo avaliado e pouco LA foi liberado das vesculas em condies de temperatura ambiente. A morfologia das LUV se mostrou bem diferente da esperada e se observaram vesculas com mais de uma bicamada e outros formatos que no o esfrico. Estes resultados podem auxiliar na otimizao das condies para uma formulao que poder ser usada no tratamento da acne, aumentando a eficcia do LA no stio alvo.
Resumo:
INTRODUO - A obesidade uma preocupao de sade pblica cada vez mais importante, em todo o mundo. A obesidade infantil, por sua vez, vem sendo associada a um alto risco de agravos infantis e de obesidade e doenças crnicas no transmissveis na fase adulta. Admite-se que o incio da vida seja um momento crtico e determinante para o risco do indivduo desenvolver sobrepeso ou obesidade. Entretanto, no est definido se existe algum perodo de maior vulnerabilidade na fase ps-natal e qual seria o melhor marcador do crescimento da criana para indicar uma possvel interveno precoce que possa minimizar o risco de desenvolver excesso de peso ou obesidade. OBJETIVO - Analisar as relaes existentes entre indicadores antropomtricos de crescimento no primeiro ano de vida e o desenvolvimento de excesso de peso no incio da idade escolar. MTODOS - Estudo de uma coorte histrica de uma unidade bsica de sade em So Paulo, Brasil. Os momentos analisados foram aos trs, seis e doze meses e aos sete anos de idade. Avaliou-se a velocidade de crescimento e o crescimento alcanado durante o primeiro ano de vida frente aos desfechos: excesso de peso e obesidade aos sete anos de idade. As variveis foram analisadas estatisticamente atravs do Coeficiente de Correlao de Pearson e das curvas ROC, alm de terem sido estimadas a sensibilidade, a especificidade e o risco relativo. RESULTADOS - Os Coeficientes de Correlao de Pearson do ganho de peso por ganho de comprimento nos perodos de 0 a 3 meses, 0 a 6 meses e 0 a 12 meses foram, respectivamente, 0,23 (IC 95 por cento : 0,13 a 0,33), 0,29 (IC 95 por cento : 0,19 a 0,39) e 0,34 (IC 95 por cento : 0,24 a 0,43), todos significantes estatisticamente. Os Coeficientes de Correlao de Pearson do escore z do ndice de Massa Corprea (IMC) para 3, 6 e 12 meses foram, respectivamente, 0,39 (IC 95 por cento : 0,29 a 0,48), 0,41 (IC 95 por cento : 0,32 a 0,50) e 0,42 (IC 95 por cento : 0,33 a 0,51). Para excesso de peso na idade escolar, a utilizao do marcador escore z do IMC aos 12 meses maior que 0,49 apresentou sensibilidade de 68,29 por cento (IC 95 por cento : 59,3 por cento a 76,4 por cento ), especificidade de 63,51 por cento (IC 95 por cento : 56,6 por cento a 70,0 por cento ) e risco relativo estimado de 2,31 (IC 95 por cento : 1,69 a 3,17). Para obesidade, o mesmo marcador apresentou sensibilidade de 76,47 por cento (IC 95 por cento : 62,5 por cento a 87,2 por cento ), especificidade de 56,89 por cento (IC 95 por cento : 50,9 por cento a 62,7 por cento ) e risco relativo estimado de 3,49 (IC 95 por cento : 1,90 a 6,43). CONCLUSES - O primeiro trimestre de vida se revelou como sendo o perodo mais crtico, entre os estudados, para o desenvolvimento de sobrepeso ou obesidade no incio da idade escolar. No entanto, o escore z do IMC acima de 0,49 aos 12 meses de vida se mostrou como o melhor marcador para esses dois desfechos.
Resumo:
A necropsia essencial para a identificao da causa de morte e dos processos que culminaram no bito do animal. O presente estudo visou pesquisa da real ocorrncia de morte sbita e inesperada em ces submetidos necropsia, e determinao da discrepncia entre as suspeitas dos proprietrios em relao ao estado de sade prvio e causa de morte de seus ces, quando comparadas s concluses necroscpicas. Este trabalho tambm focou nas alteraes morfolgicas e funcionais nas glndulas adrenais de ces necropsiados, a fim de se estudar a aplicao de possveis marcadores da resposta adrenal ao estresse sofrido pelo animal na iminncia do bito. Foram utilizados os dados de 82 ces necropsiados na FMVZ-USP para anlise da ocorrncia real de morte sbita nestes animais. As alteraes morfolgicas nas adrenais de 46 ces necropsiados foram avaliadas atravs de anlises morfomtricas e histopatolgicas. Tambm foram avaliados os ndices de proliferao e apoptose nas clulas do crtex adrenal em relao causa de morte do animal, atravs da marcao imunoistoqumica para o antgeno nuclear de proliferao celular (PCNA) e para BAX e Bcl-2, protenas envolvidas na regulao da apoptose. A anlise das alteraes funcionais sofridas pelas adrenais focou na quantificao das concentraes das catecolaminas adrenalina e noradrenalina na medula adrenal dos ces por cromatografia lquida de alta eficincia com deteco eletroqumica (CLAE-DE). Dentre os resultados encontrados, a suspeita do proprietrio de que seu co sofreu uma morte sbita e inesperada muito maior do que a real ocorrncia deste tipo de morte em ces, sendo o bito por decorrncia de complicaes de doenças muito mais frequente. As caractersticas morfomtricas das adrenais dos ces apresentaram maior influncia pelo peso corpreo do animal e pela presena ou ausncia de hiperplasia cortical do que pela associao com doenças crnicas ou condies agudas. Ces que vieram a bito em decorrncia de complicaes de doenças crnicas exibiram fibrose em regio corticomedular e focos de infiltrado inflamatrio, ausentes nos animais com morte sbita ou doenças agudas, alm de maior ocorrncia de hiperplasia adrenocortical. Ces que sofriam de alteraes cardacas crnicas apresentaram alteraes histopatolgicas significativas mais marcantes em suas adrenais, como necrose, fibrose e depleo vacuolar cortical. Por outro lado, a congesto severa nas adrenais foi um achado mais frequente nos animais previamente saudveis que sofreram morte sbita ou que vieram a bito por doenças agudas. A avaliao dos ndices de proliferao celular e apoptose no crtex das adrenais atravs da marcao imunoistoqumica para PCNA e BAX e Bcl-2, respectivamente, no apresentou potencial relevante para o estudo dos efeitos do estresse por doenças crnicas sobre as adrenais de ces. As concentraes de adrenalina e noradrenalina na medula adrenal se mostraram muito maiores em ces machos quando comparados s fmeas. Os achados deste estudo podem auxiliar nas concluses da necropsia, sendo especialmente relevantes em casos mdico-legais, nos quais todos os achados possveis devem ser relatados e analisados a fim de se prover um diagnstico preciso, seguro e incontroverso
Resumo:
A cardiomiopatia hipertrfica (CMH) uma doena geneticamente determinada, caracterizada por hipertrofia ventricular primria, com prevalncia estimada de 0.2% na populao geral. Qualquer portador tem 50% de chance de transmitir esta doena para seus filhos, o que torna cada vez mais relevante a importncia do estudo gentico dos indivduos acometidos e de seus familiares. J foram descritas diversas mutaes genticas causadoras de CMH, a maioria em genes que codificam protenas do sarcmero, e algumas mutaes mais raras em genes no sarcomricos. O objetivo desse estudo sequenciar as regies exnicas de genes candidatos, incluindo os principais envolvidos na hipertrofia miocrdica, utilizando o sequenciamento de nova gerao (Generation Sequencing); testar a aplicabilidade e viabilidade deste sistema para identificar mutaes j confirmadas e propor as provveis novas mutaes causadoras de CMH. Mtodos e resultados: 66 pacientes no aparentados portadores de CMH foram estudados e submetidos coleta de sangue para obteno do DNA para analisar as regies exmicas de 82 genes candidatos, utilizando a plataforma MiSeq (Illumina). Identificou-se 99 mutaes provavelmente patognicas em 54 pacientes includos no estudo (81,8%) relacionadas ou no a CMH, e distribudas em 42 genes diferentes. Destas mutaes 27 j haviam sido publicadas, sendo que 17 delas descritas como causadoras de CMH. Em 28 pacientes (42,4%) identificou-se mutao nos trs principais genes sarcomricos relacionados CMH (MYH7, MYBPC3, TNNT2). Encontrou-se tambm um grande nmero de variantes no sonminas de efeito clnico incerto e algumas mutaes relacionadas a outras enfermidades. Concluso: a anlise da sequencia dos exnos de genes candidatos, demonstrou ser uma tcnica promissora para o diagnstico gentico de CMH de forma mais rpida e sensvel. A quantidade de dados gerados o um fator limitante at o momento, principalmente em doenças geneticamente complexas com envolvimento de diversos genes e com sistema de bioinformtica limitado.
Resumo:
The micronutrient selenium is essential to human physiology. As the amino acid selenocysteine, it is inserted into selenoproteins with a wide range of functions including antioxidant capacity, thyroid hormone metabolism, improvement of immune system, brain function, fertility and reproduction. Low selenium status has been associated with increased risk for chronic diseases, such as cancer, type-2 diabetes and cardiovascular disease. In this context, several studies have been conducted in order to investigate if selenium supplementation could reduce the risk of such diseases. However, genetic variations may interfere in the response of individuals to a dietary intervention and must be considered as a important source of inter-individual variation. Therefore, this study was conducted was conducted to investigate the influence of genetic variations in selenoproteins genes on the response to an intervention with Brazil nuts, the richest source of selenium known in nature. The study included 130 healthy volunteers with both genders, aged 20 to 60 years old selected in University of So Paulo. They received nuts for 8 weeks, eating one nut a day, and did a washout period for more 8 weeks. All volunteers had a blood sampling collection every 4 weeks during 4 months, in a total of 5. The following analysis were done: anthropometric measurements, lipid profile, plasma malondialdehyde, plasma and erythrocyte Se, selenoprotein P, plasma and erythrocyte GPx activity, gene expression of GPX1, SEPP1, SELS and SEP15. The volunteers were also genotyped for SNPs rs1050450, rs3811699, rs1800699, rs713041, rs3877899, rs7579, rs34713741 and rs5845. Each unit of Brazil nut provided an average of 300 µg of selenium. All 130 volunteers completed the protocol. The concentrations of total cholesterol and glucose decreased after 8 weeks of supplementation. Moreover, HDL concentrations were higher for carriers of the variant T allele for GPX4_rs713041. The frequencies of the variant genotypes were 5,4% for rs1050450, rs3811699 e rs1088668, 10% for rs3877899, 19,2% for rs713041 e rs7579, 11,5% for rs5845 and 8,5% for rs34713741. The levels of the five biomarkers increased significantly after supplementation. In addition, erythrocyte GPx activity was influenced by rs1050450, rs713041 and rs5845; erythrocyte selenium was influenced by rs5845 and plasma selenium by rs3877899. Gene expression of GPX1, SEPP1 and SEP15 were higher after supplementation. The SNP rs1050450 influenced GPX1 mRNA expression and rs7579 influenced SEPP1 mRNA expression. Therefore, it can be concluded that the supplementation with one of Brazil nut for 8 weeks was efficient to reduce total cholesterol and glucose levels and to increase the concentrations of the main biomarkers of selenium status in healthy adults. Furthermore, our results suggest that GPX4_rs713041 might interfere on HDL concentrations and GPx1 activity, GPX1_rs1050450 might interfere on GPx1 activity, SEP15_rs5845 might interfere on GPx1 activity and erythrocyte selenium and SEPP1_3877899 might interfere on plasma Se levels. Therefore, the effect of genetic variations should be considered in future nutritional interventions evaluating the response to Brazil nut supplementation.
Resumo:
Introduo: A microbiota intestinal possui grande diversidade de bactrias, predominantemente dos filos Bacteroidetes e Firmicutes, com mltiplas funes. A alimentao pode alterar sua composio e funo. Alto teor de gordura saturada altera a permeabilidade intestinal, eleva os lipopolissacardeos e predispe inflamao subclnica crnica. Dieta rica em fibras, como a vegetariana, induz elevao de cidos graxos de cadeia curta e benefcios metablicos. Objetivos: Para analisar a composio da microbiota intestinal de adventistas com diferentes hbitos alimentares e associ-los inflamao subclnica e resistncia insulina, esta tese incluiu: 1) reviso dos mecanismos que associam a alimentao microbiota intestinal e ao risco cardiometablico; 2) verificao da composio da microbiota intestinal segundo diferentes hbitos alimentares e de associaes com biomarcadores de doenças cardiometablicas; 3) avaliao da associao entre a abundncia de Akkermansia muciniphila e o metabolismo da glicose; 4) anlise da presena de entertipos e de associaes com caractersticas clnicas. Mtodos: Este estudo transversal incluiu 295 adventistas estratificados segundo hbitos alimentares (vegetariano estrito, ovo-lacto-vegetariano e onvoro). Foram avaliadas associaes com dados clnicos, bioqumicos e inflamatrios. O perfil da microbiota foi obtido por sequenciamento do gene 16S rRNA (Illumina Miseq). Resultados: 1) H evidncias de que as relaes entre dieta, inflamao, resistncia insulina e risco cardiometablico so em parte mediadas pela composio da microbiota intestinal. 2) Vegetarianos apresentaram melhor perfil clnico quando comparados aos onvoros. Confirmou-se maior abundncia de Firmicutes e Bacteroidetes, que no diferiram segundo a adiposidade corporal. Entretanto, vegetarianos estritos apresentaram mais Bacteroidetes, menos Firmicutes e maior abundncia do gnero Prevotella quando comparados aos outros dois grupos de hbitos alimentares. Entre os ovo-lactovegetarianos verificou-se maior proporo de Firmicutes especialmente do gnero Faecalibacterium. Nos onvoros, houve super-representao do filo Proteobacteria (Succinivibrio e Halomonas) comparados aos vegetarianos. 3) Indivduos normoglicmicos apresentaram maior abundncia de Akkermansia muciniphila que aqueles com glicemia alterada. A abundncia desta bactria correlacionou-se inversamente glicemia e hemoglobina glicosilada. 4) Foram identificados trs entertipos (Bacteroides, Prevotella e Ruminococcaceae), similares queles previamente descritos. As concentraes de LDL-C foram menores no entertipo 2, no qual houve maior frequncia de vegetarianos estritos. Discusso: 1) Conhecimentos sobre participao da microbiota na fisiopatologia de doenças podero reverter em estratgias para manipul-la para promover sade. 2) Apoia-se a hiptese de que hbitos alimentares se associam favorvel ou desfavoravelmente a caractersticas metablicas e inflamatrias do hospedeiro via alteraes na composio da microbiota intestinal. Sugerimos que a exposio a alimentos de origem animal possa impactar negativamente nas propores de comunidades bacterianas. 3) Sugerimos que a abundncia da Akkermansia muciniphila possa participar do metabolismo da glicose. 4) Reforamos que a existncia de trs entertipos no deva ser especfica de certas populaes/continentes. Apesar de desconhecido o significado biolgico destes agrupamentos, as correlaes com o perfil lipdico podem sugerir sua utilidade na avaliao do risco cardiometablico. Concluses: Nossos achados fortalecem a ideia de que a composio da microbiota intestinal se altera mediante diferentes hbitos alimentares, que, por sua vez, esto associados a alteraes nos perfis metablicos e inflamatrios. Estudos prospectivos devero investigar o potencial da dieta na preveno de distrbios cardiometablicos mediados pela microbiota.
Resumo:
Diferentes abordagens tericas tm sido utilizadas em estudos de sistemas biomoleculares com o objetivo de contribuir com o tratamento de diversas doenças. Para a dor neuroptica, por exemplo, o estudo de compostos que interagem com o receptor sigma-1 (Sig-1R) pode elucidar os principais fatores associados atividade biolgica dos mesmos. Nesse propsito, estudos de Relaes Quantitativas Estrutura-Atividade (QSAR) utilizando os mtodos de regresso por Mnimos Quadrados Parciais (PLS) e Rede Neural Artificial (ANN) foram aplicados a 64 antagonistas do Sig-1R pertencentes classe de 1-arilpirazis. Modelos PLS e ANN foram utilizados com o objetivo de descrever comportamentos lineares e no lineares, respectivamente, entre um conjunto de descritores e a atividade biolgica dos compostos selecionados. O modelo PLS foi obtido com 51 compostos no conjunto treinamento e 13 compostos no conjunto teste (r = 0,768, q = 0,684 e rteste = 0,785). Testes de leave-N-out, randomizao da atividade biolgica e deteco de outliers confirmaram a robustez e estabilidade dos modelos e mostraram que os mesmos no foram obtidos por correlaes ao acaso. Modelos tambm foram gerados a partir da Rede Neural Artificial Perceptron de Multicamadas (MLP-ANN), sendo que a arquitetura 6-12-1, treinada com as funes de transferncia tansig-tansig, apresentou a melhor resposta para a predio da atividade biolgica dos compostos (rtreinamento = 0,891, rvalidao = 0,852 e rteste = 0,793). Outra abordagem foi utilizada para simular o ambiente de membranas sinpticas utilizando bicamadas lipdicas compostas por POPC, DOPE, POPS e colesterol. Os estudos de dinmica molecular desenvolvidos mostraram que altas concentraes de colesterol induzem reduo da rea por lipdeo e difuso lateral e aumento na espessura da membrana e nos valores de parmetro de ordem causados pelo ordenamento das cadeias acil dos fosfolipdeos. As bicamadas lipdicas obtidas podem ser usadas para simular interaes entre lipdeos e pequenas molculas ou protenas contribuindo para as pesquisas associadas a doenças como Alzheimer e Parkinson. As abordagens usadas nessa tese so essenciais para o desenvolvimento de novas pesquisas em Qumica Medicinal Computacional.
Resumo:
A Ceratoconjuntivite Seca (KCS Keratoconjunctivitis Sicca) uma desordem imunomediada e resulta de alteraes do componente aquoso do filme lacrimal e da deficincia dos componentes lipdicos e mucoso.Seu diagnstico baseado no Teste Lacrimal de Schirmer (TLS) e no Teste de Ruptura do Filme Lacrimal (TRFL) e tem como sinais clnicos: secreo mucopurulenta, hiperemia conjuntival, blefaroespasmos, fotofobia, incmodo, dor, vascularizao, opacidade corneana e pigmentao, alm de cegueira em casos avanados. O tratamento convencional consiste em aplicaes dirias de Ciclosporina 0,2% ou Tacrolimus 0,03% (pomada ou colrio oftlmicos), que apesar de controlar a doena, so custosos, no curativos e exigem alto comprometimento da interao paciente-proprietrio. A terapia celular usando clulas-tronco (CT) traz uma nova esperana para doenças sem tratamento efetivo. Neste trabalho utilizamos CT mesenquimais (CTM) obtidas a partir de membrana amnitica (CTMA) de ces obtidas a partir do descarte destes tecidos em campanhas de castraes em diferentes tempos gestacionais, sem formao tumoral quando submetidas ao teste tumorignico durante 60 dias. Dois animais com KCS crnica foram tratados com duas injees de CTMA com intervalo de 30 dias, sendo a primeira de 0,5x106 clulas e a segunda de 1x106 clulas em cada glndula. Na segunda semana aps a terapia foi observado aumento da TLS sugerindo um benficio da terapia que foi diminuindo com o passar das semanas. O TRFL oscilou durante os testes e no apresentou diferenas significativas. A terapia celular utilizando CTMA de ces melhorou a condio ocular nos dois casos em momentos e parmetros variados, com repercusso na melhoria da superfcie, mas no houve regresso do quadro clnico. Investigaes futuras em estgios menos avanados da doena podem ajudar a elucidar os mecanismos pelos quais esse efeito foi obtido
Resumo:
A obesidade comum atualmente um dos problemas de sade pblica mais importante no mundo, frequentemente associada a outros distrbios tais como hipertenso, diabetes, doenças cardiovasculares e cncer. Apesar da alta prevalncia de obesidade em diversas populaes, muitos dos estudos relacionados aos seus fatores de risco genticos foram realizados com indivduos de ascendncia europeia ou asitica, mas foram poucos os realizados com populaes de origem africana ou nativas americanas. Nosso trabalho tem por objetivo geral investigar potenciais fatores de risco genticos associados ao sobrepeso e obesidade em populaes afrodescendentes remanescentes de quilombos do Vale do Ribeira - SP, comunidades rurais semi-isoladas, previamente bem caracterizadas do ponto de vista clnico, genealgico e gentico-populacional. Nossa amostra constituiu-se de 759 indivduos, pertencentes a doze populaes de remanescentes de quilombos (Abobral, So Pedro, Galvo, Ivaporunduva, Pedro Cubas, Andr Lopes, Nhunguara, Sapatu, Piles, Maria Rosa, Poa e Reginaldo), dos quais foram obtidos amostras de DNA, dados clnicos, informaes genealgicas e medidas antropomtricas. A investigao dos fatores de risco genticos associados ao sobrepeso/obesidade foi realizada por duas abordagens: (1) estudo de associao baseado em famlias (N = 584, 59 famlias) e (2) estudo de associao populacional com indivduos no aparentados (N=305). Foram selecionados para estudo nove polimorfismos em oito genes candidatos: LEP rs2167270, LEPR rs1137101, ADRB2 rs1042713, PPARG rs1801282, PLIN1 rs2289487, RETN rs1862513, INSIG2 rs7566605, FTO rs1121980 e FTO rs1421085. As anlises de associao baseadas em famlia indicaram que, nessas populaes, apenas o polimorfismo PLIN1 rs2289487 est associado significativamente com o grupo de risco em relao razo cintura-quadril (RCQ >=0,85 para mulheres e >=0,90 para homens; P=0,013). Aparentemente no existem trabalhos anteriores que verificaram a associao deste polimorfismo com a obesidade por essa metodologia. As anlises do estudo populacional com indivduos no aparentados mostraram associao significativa entre: (i) o alelo G no polimorfismo LEPR rs1137101 e a variao do ndice de massa corporal (IMC; P=0,027); (ii) o alelo G do polimorfismo LEPR rs1137101 e o fentipo de sobrepeso/obesidade (IMC>=25 Kg/m; P=0,027); (iii) o alelo G no polimorfismo ADRB2 rs1042713 e o fentipo de risco (IMC>=25 Kg/m; P=0,029); (iv) o polimorfismo PLIN1 rs2289487 (gentipo GG) e os menores valores do IMC (P=0,025); (v) o polimorfismo FTO rs1121980 (alelo G) e o fentipo de risco (IMC>=25 Kg/m), assim como a variao do IMC (P=0,037 e P=0,022 respectivamente); e (vi) o alelo A no polimorfismo FTO rs1421085 e maiores valores da circunferncia da cintura (Cc; P=0,016) e da razo cintura-quadril (RCQ; P=0,030). Tomados em conjunto, nossos resultados sugerem a participao dos genes LEP, LEPR, ADRB2, PLIN1 e FTO no aumento da predisposio ao sobrepeso e obesidade nas populaes remanescentes de quilombos. Por fim, as elevadas estimativas de herdabilidade dos trs fentipos investigados (IMC=33%, Cc=33% e RCQ=70%) reforam a relevncia do papel dos fatores genticos no acmulo de gordura corporal. O trabalho apresentado resultado de uma investigao cuidadosa sobre os componentes genticos associados regulao do peso corporal em uma populao brasileira afrodescendente (com caractersticas histricas, ambientais e genticas peculiares), corroborando a hiptese de que a obesidade comum nas populaes quilombolas do Vale do Ribeira condicionada por um mecanismo polignico modulado por fatores ambientais importantes como o sedentarismo e a transio nutricional
Resumo:
Como as pessoas percebem as outras relevante no processo de ensino aprendizagem e nas interaes sociais como um todo. Essas percepes definem a maneira com que as pessoas reagem umas s outras. Em particular, a avaliao da percepo de professores colabora na compreenso das atitudes do professor diante dos comportamentos de seus alunos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a percepo de professores sobre a influncia gentica e ambiental em comportamentos relevantes no processo educacional: personalidade, inteligncia, dificuldades de aprendizagem, problemas de comportamento e doenças mentais. Para tanto, o questionrio The NatureNurture Question:Teachers perceptions of how genes and the environment influence educationally relevant behavior foi adaptado lngua portuguesa do Brasil e aplicado para 501 professores de todos os nveis de ensino, do estado de So Paulo. Os resultados demonstraram que os professores atriburam influncias genticas e ambientais em propores aproximadamente iguais considerando todos os domnios, personalidade e dificuldades e aprendizagem. Atriburam maior influncia gentica inteligncia e doenças mentais, bem como maior influncia ambiental aos problemas de comportamento. Metade dos participantes afirmou ter estudado aspectos da gentica em sua formao para professor. A maioria dos professores declarou que ter um aluno com dificuldade de aprendizagem geneticamente influenciada afetaria seu mtodo de instru-lo. Os professores percebem que genes e ambiente criao so imprescindveis nos comportamentos de seus alunos, reconhecendo, inclusive, a interatividade dos dois fatores, informaes importantes para o delineamento de aes na formao dos mesmos possveis intervenes no mbito educacional.
Resumo:
Este estudo teve como objetivos (a) identificar mecanismos pelos quais rearranjos cromossmicos citogeneticamente equilibrados possam estar associados de maneira causal a determinados quadros clnicos e (b) contribuir para a compreenso dos mecanismos de formao desses rearranjos. Para isso, foram estudados 45 rearranjos cromossmicos citogeneticamente equilibrados (29 translocaes, 10 inverses e seis rearranjos complexos), detectados em pacientes que apresentavam malformaes congnitas, comprometimento do desenvolvimento neuropsicomotor ou dficit intelectual. Foram 31 rearranjos cromossmicos espordicos, trs familiais que segregavam com o quadro clnico e mais 11 rearranjos cromossmicos herdados de genitores fenotipicamente normais. Inicialmente os pontos de quebra desses rearranjos foram mapeados por hibridao in situ fluorescente (FISH). A busca por microdelees e duplicaes genmicas foi realizada por a-CGH. A investigao dos pontos de quebra prosseguiu com a aplicao da tcnica de Mate-Pair Sequencing (MPS), que permite localizar as quebras em segmentos de 100 pb - 1 kb, na maioria dos casos. Para obter os segmentos de juno das quebras no nvel de pares de bases, os segmentos delimitados por MPS foram sequenciados pelo mtodo de Sanger. A anlise por aCGH revelou microdelees ou microduplicaes localizadas nos cromossomos rearranjados, em 12 dos 45 pacientes investigados (27%). A anlise de 27 rearranjos por MPS permitiu a caracterizao dos pontos de juno das quebras. MPS expandiu o nmero de pontos de quebra, detectados por anlise do caritipo ou aCGH, de 114 para 156 (em resoluo < 2kb, na maioria dos casos). O nmero de pontos de quebra/rearranjo variou de 2 a 20. Os 156 pontos de quebra resultaram em 86 variantes estruturais equilibradas e outras 32 variantes no equilibradas. Perdas e ganhos de segmentos submiscroscpicos nos cromossomos rearranjados constituram a principal causa ou, provavelmente, contriburam para o quadro clnico de 12 dos 45 pacientes. Em cinco desses 12 rearranjos foram detectadas por MPS a interrupo de genes j relacionados doena, ou provvel alterao de sua regio reguladora, contribundo para o quadro clnico. Em quatro dos 33 rearranjos no associados a perdas ou ganhos de segmentos, a anlise por MPS revelou a interrupo de genes que j foram anteriormente relacionados a doenças, explicando-se, assim, as caractersticas clnicas dos portadores; outro rearranjo pode ter levando alterao da expresso gnica de gene sensvel a dosagem e ao quadro clnico. Um rearranjo cromossmico familial, identificado na anlise aps bandamento G como uma translocao equilibrada, t(2;22)(p14;q12), segregava com quadro de atraso do desenvolvimento neuropsicomotor e dificuldade de aprendizado associados a dismorfismos. A combinao das anlises por FISH, aCGH e MPS revelou que se tratava, na verdade, de rearranjo complexo entre os cromossomos 2, 5 e 22, incluindo 10 quebras. A segregao de diferentes desequilbrios submicroscpicos em indivduos afetados e clinicamente normais permitiu a compreenso da variabilidade clnica observada na famlia. Rearranjos equilibrados detectados em indivduos afetados, mas herdados de genitores clinicamente normais, so, em geral, considerados como no tendo relao com o quadro clnico, apesar da possibilidade de desequilbrios cromossmicos gerados por permuta desigual na meiose do genitor portador do rearranjo. Neste trabalho, a investigao de 11 desses rearranjos por aCGH no revelou perdas ou ganhos de segmentos nos cromossomos rearranjados. No entanto, a anlise por aCGH da portadora de um desses rearranjos - inv(12)mat - revelou deleo de 8,7 Mb no cromossomo 8, como causa de seu fentipo clnico. Essa deleo estava relacionada com outro rearranjo equilibrado tambm presente em sua me, independente da inverso. Para compreender os mecanismos de formao de rearranjos citogeneticamente equilibrados, investigamos os segmentos de juno no nvel de pares de base. A anlise por MPS que levou, na maioria dos casos, ao mapeamento dos pontos de quebras em segmentos <1kb permitiu o sequenciamento pelo mtodo de Sanger de 51 segmentos de junes de 17 rearranjos. A ocorrncia de blunt fusions ou inseres e delees <10 pb, e a ausncia de homologia ou a presena de micro homologia de 2 pb a 4 pb de extenso indicaram o mecanismo de juno de extremidades no homlogas (non-homologous end joinging; NHEJ), na maioria das 51 junes caracterizadas. As caractersticas de trs dos quatro rearranjos mais complexos, com 17-20 quebras, indicaram sua formao pelo mecanismo de chromothripsis. Este estudo mostra a importncia da anlise genmica de variaes de nmero de cpias por microarray, juntamente com o mapeamento dos pontos de quebra por MPS, para determinar a estrutura de rearranjos cromossmicos citogeneticamente equilibrados e seu impacto clnico. O mapeamento dos segmentos de juno por MPS, permitindo o sequenciamento pelo mtodo de Sanger, foi essencial para a compreenso de mecanismos de formao desses rearranjos
Resumo:
Crianas e adolescentes com HIV/AIDS necessitam de uma abordagem compreensiva e singular, pois particularidades como a revelao do diagnstico, o estigma gerado pela doena, as consultas mdicas frequentes, o uso dirio de medicaes e os seus efeitos colaterais so aspectos que necessitam ser avaliados, quando se trata da qualidade de vida relacionada sade-QVRS. A incluso da avaliao da qualidade de vida relacionada sade dessa populao, com instrumentos viveis e padronizados, pode identificar parmetros para um cuidado integral e de acordo com as necessidades individuais. A presente pesquisa teve como objetivo validar o instrumento do mdulo especfico do DISABKIDS de mensurao da Qualidade de Vida Relacionada Sade de Crianas e Adolescentes brasileiros com HIV, denominado \"Viver com HIV\". Trata-se de um estudo metodolgico, do tipo validao de instrumento para o qual utilizamos a adaptao metodolgica descrita pelo projeto europeu DISABKIDS. Participaram da validao de face e contedo 15 especialistas com formao diversificada na rea da sade, os quais foram convidados a analisar a importncia dos itens selecionados e a adequao para a faixa etria e populao, classificando-os de acordo com a relevncia, clareza e aplicabilidade de seu contedo para a populao em estudo. Na validao semntica, participaram 16 crianas e adolescentes e seus respectivos pais ou cuidadores que seguiam em tratamento em uma Unidade Especializada em Tratamento de Doenças Infecciosas de um hospital universitrio do Estado de So Paulo. Esta etapa consistiu em analisar, em cada item do instrumento, os termos empregados, por meio de entrevistas com a populao para a qual o instrumento se destinou. O instrumento foi validado e aceito tanto na validao de face e contedo quanto na semntica. A avaliao da qualidade de vida de crianas e adolescentes com HIV primordial para melhor conduo do tratamento, para isto, faz-se necessria utilizao de um instrumento adequado para a faixa etria e especfico para a condio HIV. A avaliao da qualidade de vida relacionada sade primordial para o manejo de crianas e adolescentes com HIV, e o instrumento \"Viver com HIV\" poder se constituir em uma ferramenta vlida e confivel para mensurao da qualidade de vida relacionada sade de crianas e adolescentes que vivem com HIV, podendo melhorar a qualidade da assistncia em sade e o acompanhamento dessa populao
Resumo:
Introduo: A polpa farincea do jatob-do-cerrado (Hymenaea stigonocarpa Mart.) apresenta alto teor de fibra alimentar, em mdia 60 g/100 g, que so importantes para a reduo do risco e controle de doenças crnicas no transmissveis (DCNT). A extruso termoplstica neutraliza aromas intensos, proporciona a formao de amido resistente, aumenta a fibra alimentar solvel e melhora a textura do produto final. Objetivo: Estudar o efeito das farinhas de jatob-do-cerrado in natura (FIN) e extrusada (FE) no metabolismo lipdico e parmetros fermentativos em hamsters, bem como verificar a resposta glicmica em humanos aps a extruso. Mtodos: Processo de extruso: velocidade de 200 rpm; matriz com 4 mm de dimetro; taxa de compresso 3:1; alimentao constante de 70 gramas/minuto; temperatura de 150 C; proporo farinha de jatob-do-cerrado e amido de milho: 70:30 por cento e umidade a 25 por cento . Foi realizado um experimento animal com hamsters durante 21 dias, em que se analisou alguns parmetros do metabolismo lipdico e colnico (fermentativos) dos animais, divididos em quatro grupos experimentais, se diferenciando pela dieta. As dietas controle (GC), in natura (GFI) e extrusada (GFE) eram hipercolesterolemizantes (13,5 por cento de gordura de coco e 0,1 por cento de colesterol) e a dieta referncia (GR) com leo de soja como fonte lipdica, no. Todas as dietas apresentavam 15 por cento de fibra alimentar, sendo que as dietas GR e GC tinham como fonte de fibra a celulose, e as dietas GFI e GFE tiveram as prprias fibras como fonte. A resposta glicmica em humanos foi verificada por meio do ensaio do ndice glicmico e carga glicmica da FE, com dez voluntrios saudveis que consumiram 25 gramas de carboidratos disponveis do alimento teste (farinha extrusada) ou do po branco como alimento controle. Resultados: No foi observada diferena significativa entre o peso final, ingesto diria mdia e total, ganho de peso e CEA entre os animais dos quatro grupos. A concentrao de triglicerdeos foi menor em 41 por cento e 38 por cento nos animais que receberam as dietas GFI e GFE, em relao aqueles que receberam a dieta GC, assim como tambm para o colesterol total (55 por cento e 47 por cento ), LDL-c (70 por cento e 53 por cento ) e no-HDL-c (63 por cento e 49 por cento ) sricos, lipdeos totais hepticos (39 por cento e 45 por cento ) e o peso dos fgados dos animais tambm foi menor (21 por cento em ambos os grupos). No houve diferena no colesterol heptico e excretado nas fezes dos animais dos quatro grupos. Os animais do GFE excretaram 57 por cento mais cidos biliares nas fezes que os animais do GC. Com relao aos parmetros fermentativos, observou-se maior excreo de fibras (1,24 0,08 e 1,52 0,09 gramas) nos animais dos grupos GR e GC respectivamente, em relao aos do GFI e GFE (0,50 e 0,48 gramas), porm o escore fecal (3,50 0,19 e 3,38 0,18) e o grau de fermentao (54 e 52 por cento ) foi maior nos animais dos grupos GFI e GFE. Houve uma maior produo de AGCC no ceco dos animais dos grupos GFI e GFE (80 e 57,5 mol/g de ceco respectivamente) e maior diminuio do pH no contedo cecal nos animais do grupo GFI (7,49 0,10), em relao ao GC (8,06 0,13). Os cidos actico e propinico, estiveram presentes em maior quantidade no ceco dos animais dos grupos GFI (58,5 e 6,1 mol/g de ceco) e GFE (42,5 e 6,6 mol/g de ceco) e os animais do GFI produziram mais cido butrico (15 mol/g de ceco), em relao aos demais grupos. Quanto resposta glicmica da farinha ps extruso, no houve diferena entre a rea de resposta glicmica da farinha extrusada e do po branco, o ndice glicmico da farinha extrusada (glicose como controle) foi classificado como moderado, e a carga glicmica (na poro de 30 gramas), baixa. Concluso: As FIN e FE favoreceram a reduo do colesterol total, LDL-c, no-HDL-c e dos triglicerdeos sricos, alm da diminuio do acmulo de lipdeos hepticos. Foi observado tambm aumento expressivo na formao de AGCC e no grau de fermentao. A FE proporcionou um aumento na excreo de cidos biliares nas fezes e apresentou ndice glicmico moderado e baixa carga glicmica.
