Posttranslational amino acid epimerization: enzyme-catalyzed isomerization of amino acid residues in peptide chains.

Since ribosomally mediated protein biosynthesis is confined to the L-amino acid pool, the presence of D-amino acids in peptides was considered for many years to be restricted to proteins of prokaryotic origin. Unicellular microorganisms have been responsible for the generation of a host of D-amino acid-containing peptide antibiotics (gramicidin, actinomycin, bacitracin, polymyxins). Recently, a series of mu and delta opioid receptor agonists [dermorphins and deltorphins] and neuroactive tetrapeptides containing a D-amino acid residue have been isolated from amphibian (frog) skin and mollusks. Amino acid sequences obtained from the cDNA libraries coincide with the observed dermorphin and deltorphin sequences, suggesting a stereospecific posttranslational amino acid isomerization of unknown mechanism. A cofactor-independent serine isomerase found in the venom of the Agelenopsis aperta spider provides the first major clue to explain how multicellular organisms are capable of incorporating single D-amino acid residues into these and other eukaryotic peptides. The enzyme is capable of isomerizing serine, cysteine, O-methylserine, and alanine residues in the middle of peptide chains, thereby providing a biochemical capability that, until now, had not been observed. Both D- and L-amino acid residues are susceptible to isomerization. The substrates share a common Leu-Xaa-Phe-Ala recognition site. Early in the reaction sequence, solvent-derived deuterium resides solely with the epimerized product (not substrate) in isomerizations carried out in 2H2O. Significant deuterium isotope effects are obtained in these reactions in addition to isomerizations of isotopically labeled substrates (2H at the epimerizeable serine alpha-carbon atom). The combined kinetic and structural data suggests a two-base mechanism in which abstraction of a proton from one face is concomitant with delivery from the opposite face by the conjugate acid of the second enzymic base.

Amperometric detection of stimulus-induced quantal release of catecholamines from cultured superior cervical ganglion neurons.

Amperometry has been used for real-time electrochemical detection of the quantal release of catecholamines and indolamines from secretory granules in chromaffin and mast cells. Using improved-sensitivity carbon fiber electrodes, we now report the detection of quantal catecholamine release at the surface of somas of neonatal superior cervical ganglion neurons that are studded with axon varicosities containing synaptic vesicles. Local application of a bath solution containing high K+ or black widow spider venom, each of which greatly enhances spontaneous quantal release of transmitter at synapses, evoked barrages of small-amplitude (2-20 pA), short-duration (0.5-2 ms) amperometric quantal "spikes". The median spike charge was calculated as 11.3 fC. This figure corresponds to 3.5 x 10(4) catecholamine molecules per quantum of release, or approximately 1% that evoked by the discharge of the contents of a chromaffin granule.

Fate of a redundant gamma-globin gene in the atelid clade of New World monkeys: implications concerning fetal globin gene expression.

Conclusive evidence was provided that gamma 1, the upstream of the two linked simian gamma-globin loci (5'-gamma 1-gamma 2-3'), is a pseudogene in a major group of New World monkeys. Sequence analysis of PCR-amplified genomic fragments of predicted sizes revealed that all extant genera of the platyrrhine family Atelidae [Lagothrix (woolly monkeys), Brachyteles (woolly spider monkeys), Ateles (spider monkeys), and Alouatta (howler monkeys)] share a large deletion that removed most of exon 2, all of intron 2 and exon 3, and much of the 3' flanking sequence of gamma 1. The fact that two functional gamma-globin genes were not present in early ancestors of the Atelidae (and that gamma 1 was the dispensible gene) suggests that for much or even all of their evolution, platyrrhines have had gamma 2 as the primary fetally expressed gamma-globin gene, in contrast to catarrhines (e.g., humans and chimpanzees) that have gamma 1 as the primary fetally expressed gamma-globin gene. Results from promoter sequences further suggest that all three platyrrhine families (Atelidae, Cebidae, and Pitheciidae) have gamma 2 rather than gamma 1 as their primary fetally expressed gamma-globin gene. The implications of this suggestion were explored in terms of how gene redundancy, regulatory mutations, and distance of each gamma-globin gene from the locus control region were possibly involved in the acquisition and maintenance of fetal, rather than embryonic, expression.

Imobilização do fungo Penicillium citrinum CBMAI 1186 e lipase de Pseudomonas fluorescens em biopolímeros para aplicações em biocatálise

Diversos biomateriais podem ser aplicados como suportes na imobilização de células totais de fungos filamentosos ou enzimas isoladas, visando a manutenção e o prolongamento da atividade enzimática em processos biocatalíticos. Exemplos promissores de biomateriais são a fibroína da seda e o alginato de sódio. A fibroína é um material protéico com alta estabilidade térmica, elasticidade, resistência à tensão, não sofre ataque microbiano, baixo custo de purificação e alta tenacidade, o alginato é um biopolímero versátil, devido a suas propriedades gelificantes em soluções aquosas. Assim, neste trabalho empregou-se micélios do fungo derivado de ambiente marinho, Penicillium citrinum CBMAI 1186, livres e imobilizados em biopolímeros (fibra de algodão, fibra de fibroína da seda e fibra de paina) na biorredução quimiosseletiva, regiosseletiva e enantiosseletiva da ligação α,β-C=C de enonas α,β-, α,β,γ,δ- e di-α,β-insaturadas previamente sintetizados pela a reação de condensação aldólica. Foi possível a utilização do fungo P. citrinum CBMAI 1186 na redução quimiosseletiva, regiosseletiva e enantiosseletiva da ligação dupla carbono-carbono de sistemas α,β-insaturados. A imobilização do fungo P. citrinum CBMAI 1186 em biopolímeros (algodão, fibroína da seda, paina e quitosana) permitiu a prolongamento da atividade celular do fungo. O protocolo desenvolvido foi capaz de obter compostos até então descritos apenas por síntese clássica. Também foi realizado reações de resolução enzimática de derivados de haloidrinas por diferentes lipases microbianas de: Pseudomonas fluorescens, Candida cylindracea, Rhizopus niveus e Aspergillus niger. A lipase de P. fluorescens foi imobilizada em esferas de fibroína do bicho da seda (método 1, via adsorção) e em blenda com alginato de cálcio (método 2, via encapsulação) em diferentes condições, tais como, variação de solvente, variação da quantidade de enzima imobilizada e tempo de reação. As condições otimizadas foram empregadas em diferentes haloidrinas, rendendo elevados excessos enantioméricos (ee > 99%) e alta razão enanantiomérica (E > 200) para os produtos acetilados. Foi possível desenvolver um protocolo simples, barato e prático para a síntese enantiosseletiva de haloidrina reforçando a versatilidade da fibroína e do alginato como suportes de imobilização para catalisadores heterogêneos. Também foi possível utilizar a lipase imobilizada (método 2) na reação de transesterificação para obtenção do biodiesel etílico. As melhores condições para o bom funcionamento do biocatalisador foram: 30% do biocatalisador, 20% de n-hexano, relação óleo e etanol de 1:4 a 32 ºC por 48 h em agitação magnética (400 rpm). Essas condições permitiram a formação de 42% de rendimento do biodiesel etílico. O biocatalisador apresentou algumas limitações reacionais, tais como, fragilidade frente a elevadas temperaturas (> 32 ºC) e prolongado tempo de agitação magnética. Porém, permaneceu apto no meio por 4 ciclos consecutivas. Conclui-se que os biomateriais (fibroína, alginato e quitosana) podem ser utilizados como alternativas versáteis na imobilização de micélios de fungos filamentoso e de enzimas isoladas para aplicações em biocatalíticas.

Efeitos do ramipril sobre a doença periodontal induzida experimentalmente em ratos

A doença periodontal (DP) corresponde a um grupo de doenças inflamatórias que acomete as estruturas periodontais de proteção e de suporte e pode levar à perda dentária. A etiologia está relacionada à placa dentobacteriana que leva à produção de grande quantidade de citocinas pró-inflamatórias importantes na destruição tecidual. A angiotensina (Ang) II também pode contribuir para a inflamação e destruição tecidual no periodonto agindo como mediador chave. A utilização de drogas que atuem na cascata do sistema renina-angiotensina (SRA) poderia interferir no estado de saúde ou inflamação do tecido mole, na perda óssea alveolar e na expressão gênica dos componentes do SRA e mediadores inflamatórios. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi investigar se o ramipril, um inibidor da enzima conversora de angiotensina (ECA), altera a progressão da DP induzida experimentalmente em ratos. Foi utilizado o modelo de indução da DP por colocação de ligadura ao redor do primeiro molar inferior direito de ratos. Os grupos com 10 animais cada, foram divididos em tratados com ramipril (via gavagem 10 mg/kg/dia) ou água (veículo) durante 14 e 21 dias e o grupo Sham submetido à indução fictícia da DP. Outros quatro grupos foram submetidos ao pré-tratamento com ramipril durante os períodos de 7 e 14 dias e após a indução da DP e tratados por 14 ou 21 dias. As metodologias de avaliação foram: extração de RNA total, transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase quantitativa (RTqPCR), análises histológica e da perda óssea alveolar. Os dados foram analisados por meio de gráficos e os resultados foram submetidos à análise unidirecional de variância (ANOVA) e representaram médias e respectivos desvios-padrão. Diferenças entre os grupos foram consideradas estatisticamente significativas quando p < 0,05. Com base nos resultados obtidos pode-se concluir que o ramipril foi capaz de reduzir a progressão da perda óssea no grupo tratado por 21 dias (DP-21d-Rami), entretanto houve aumento do processo inflamatório, além de alteração da expressão de RNAm de ECA-2 e do receptor Mas, alguns mediadores do processo inflamatório, como COX2 e VEGF, e os receptores VEGF-R1 e VEGF-R2.

Uzbekistán: la configuración de un nuevo estado. Especial referencia al estatus de la mujer

Uzbekistan has a long and interesting heritage of ancient civilization linked to the historic “Silk Road”, through which transited people, goods, ideas and cultures. The major cities of the Silk Road - Samarkand, Bukhara, and Khiva are testimonies of the past and leave a deep impression on any visitor. As time goes by, Uzbekistan has become a key country in the whole Central Asian region, because it possesses mineral, agricultural and natural resources and has a huge potential for development. It is rich in energy resources such as oil and gas, but it is very difficult to commercialize them due to its landlocked position. The historical legacy of the Republic of Uzbekistan is a valuable heritage. The above mentioned ancient cities used to be centers of science and art, where important architects created palaces, mosques, madrassas, minarets, and mausoleums of the Islamic style, that still exist today. This cultural wealth is an element of internal cohesion and external outreach towards Islamic heritage, related to such Muslim countries as Turkey and the Gulf States. Moreover, this historical and architectural heritage has enormous economic potential for tourism, which can contribute to strengthen the relations of cooperation and friendship between Uzbekistan and the International Society. The influence of tradition and culture has still a huge impact on the society. This can be felt for example, in the traditional gender roles distribution. As a result of which, meńs presence in the areas of decision making is still slightly higher than womeńs one...

The assignment of credit through bills of exchange and transmission documents in Andalusi Law

The exchange traffic was a practice that suited the modus vivendi of caravanners and traders in the Islamic world. The inclusion of the Iberian.Peninsula into the most important commercial routes of Muslims – such as the silk route through the North Africa – provides a very solid reason to deepen in the study of the sources that have been preserved about the role that certain credit instruments, which represented an alternative to the coin, might have played in trade centres.

New York, April 1990: A Photographic Record

Aquestes fotografies de Nova York i de Boston, totes en blanc i negre, es van fer en abril del 1990, amb una cambra rèflex Asahi Pentax Spotmatic II amb objectiu de 50 mm, tot fent servir negatius Kodak Safety Film 5063. El Museu de la Universitat d’Alacant en conserva una col·lecció completa; vuitanta-set còpies fotogràfiques de 32 x 24 cm amb tintes Ultrachrome sobre paper Ilford Gold Fibre Silk de 310 gr/m² realitzades al “Estudio Paco Mora” de València l’any 2015, amb digitalització prèvia a partir dels negatius originals mitjançant un escàner Haselblad Flextight X 1 a una resolució de 3.200 punts per polzada.

Souvenir de Paris, novembre 1973

Aquestes fotografies de París, totes en color, es van fer en novembre del 1973 amb una cambra rèflex Asahi Pentax Spotmatic II amb objectiu de 50 mm, tot fent servir diapositives Orwo, Kodak i Agfa. El Museu de la Universitat d’Alacant en conserva una col·lecció completa; 147 còpies fotogràfiques de 32 x 24 cm amb tintes Ultrachrome sobre paper Ilford Gold Fibre Silk de 310 gr/m² realitzades al “Estudio Paco Mora” de València l’any 2015, amb digitalització prèvia a partir de les diapositives originals mitjançant un escàner Haselblad Flextight X 1 a una resolució de 3.200 punts per polzada.

The hours of work problem in five major industries

Includes bibliographical references.

Letter from Thomas Hollis to the Curators of Harvard College, 1762 July 21

Thomas Hollis V (1720-1774), widely known as Thomas Hollis of Lincoln’s Inn, was a very generous donor to Harvard College, particularly its library. This letter, which appears to have accompanied a package, demonstrates that he also donated prints to the College. Hollis wrote: "N.B. the Ludlow, Sydney, Marvell, & Cleopatra are struck on paper made from white & colored silk rags, the produce of premiums of the Society, the noble Society for promoting arts & commerce."

I. Embroidered pocketbook, 1774

This series contains one rectangular, embroidered pocketbook with foldover flaps embroidered with wool thread in green, red, blue, purple, and cream colors. The interior is lined with pink silk and has cardboard inserts. "FISHER AMES 1774" is embroidered on one of the interior flaps of the wallet. This object was most likely made for Fisher Ames by a female member of his family or a friend, possibly to commemorate his graduation from Harvard in 1774. A child’s leather glove that was inserted in one of the pockets is also housed in HUM 96 Box 1.

Maqāmāt : manuscript, undated

بسم الله الرحمن الرحيم اللهم انا نحمدك على ما علمت في البيان والهمت في البيان كما نحمدك على ما مبعت في الغطا... :Incipit

Muqaddimah fī al-shudūd al-ḥarīr al-khāliṣah wa-bayʻihā li-man yalbasuhā / lil-Shaykh ʻUmar ibn Yūsuf al-Ḥanafī : manuscript, 1760

Unbound.

Central Asia on New Delhi's Geostrategic Radar. EUCAM Commentary No. 18, October 2011

Central Asia today holds much strategic interest for India as an emerging 21st Century regional and global power. Despite being a latecomer in what some see as a new ‘Great Game’, New Delhi is keen to reconstruct the ‘Silk Route’. While Indo-Central Asian relations go back to antiquity when cultural, commercial and political ties thrived, post-independence India was physically cut off from Afghanistan and West Asia. It remained embroiled in domestic preoccupations and the insurgency in Jammu and Kashmir, all of which led to a limited foreign policy until the early nineties and a belated rediscovery of the region.