Analysis by confocal microscopy of the behavior of heat shock protein 70 within the nucleus and of a nuclear matrix polypeptide during prolonged heat shock response in HeLa cells.

By means of confocal laser scanning microscopy and indirect fluorescence experiments we have examined the behavior of heat-shock protein 70 (HSP70) within the nucleus as well as of a nuclear matrix protein (M(r) = 125 kDa) during a prolonged heat-shock response (up to 24 h at 42 degrees C) in HeLa cells. In control cells HSP70 was mainly located in the cytoplasm. The protein translocated within the nucleus upon cell exposure to hyperthermia. The fluorescent pattern revealed by monoclonal antibody to HSP70 exhibited several changes during the 24-h-long incubation. The nuclear matrix protein showed changes in its location that were evident as early as 1 h after initiation of heat shock. After 7 h of treatment, the protein regained its original distribution. However, in the late stages of the hyperthermic treatment (17-24 h) the fluorescent pattern due to 125-kDa protein changed again and its original distribution was never observed again. These results show that HSP70 changes its localization within the nucleus conceivably because it is involved in solubilizing aggregated polypeptides present in different nuclear regions. Our data also strengthen the contention that proteins of the insoluble nucleoskeleton are involved in nuclear structure changes that occur during heat-shock response.

Uso de micorrizas e rizóbio em cultivo consorciado de eucalipto e sesbânia: I - Crescimento, absorção e tranferência de nitrogênio entre plantas

Realizou-se um experimento em casa de vegetação para avaliar os efeitos de fungos micorrízicos arbusculares (FMAs) e rizóbio na produção de matéria seca, na absorção e na eficiência de utilização de N por plantas de Eucalyptus grandis e Sesbania virgata, cultivadas em consorciação. Avaliou-se, também, a transferência de N da sesbânia para o eucalipto, utilizando-se o isótopo 15N. Os tratamentos constaram da inoculação, ou não, com FMAs em ambas as espécies de plantas e da inoculação, ou não, com rizóbio na sesbânia. Utilizaram-se vasos plásticos subdivididos em três compartimentos (A, B e C), cada um com 2 L de capacidade. Os compartimentos A e B foram separados por uma parede plástica e entre os compartimentos B e C foi colocada uma tela com poros de 40 mm que permitiu somente a passagem de hifas, mas não de raízes. A sesbânia foi cultivada com suas raízes subdivididas entre o compartimento A e B e o eucalipto foi cultivado no compartimento C. No compartimento A, foram adicionados 7 mg kg-1 de 15N-(NH4)2SO4 com 99 % de 15N. As plantas foram avaliadas aos 100 dias. Nos tratamentos com inoculação com o rizóbio, com FMAs ou com FMAs + rizóbio, foram observados, nas plantas de eucalipto, aumentos na produção de matéria seca total de 119, 223 e 209 %, respectivamente, e aumentos no conteúdo de N de 125, 247 e 310 %, respectivamente, quando comparados aos resultados do tratamento-controle. Nas plantas de sesbânia, foram observados aumentos no conteúdo de N e decréscimo na relação C/N em todos os tratamentos inoculados com os microrganismos. A eficiência de utilização de N foi maior nas plantas de eucalipto quando inoculadas com FMAs e não variou com os tratamentos nas plantas de sesbânia. Foi observada a transferência de 15N das plantas de sesbânia para o eucalipto em todos os tratamentos.

Cardiac paraganglioma: diagnostic work up and review of the literature.

Paraganglioma of the heart are potentially invasive, highly vascularized tumors for which complete resection may be curative. Derived from the cardiac wall in most instances, resectability can be assessed after integration of the data provided by MRI in T2 sequence, and coronarography. A fully documented case of a large cardiac pheochromocytoma of the left atrium and AV groove is reported and the pertinent literature on the subject is here presented.

Annual Report of the Iowa Highway Research Board Research and Development Activities FY 2009

The Highway Division of the Iowa Department of Transportation (Iowa DOT) engages in research and development for two reasons: first, to find workable solutions to the many problems that require more than ordinary, routine investigation; and second, to identify and implement improved engineering and management practices. This report, entitled ―Iowa Highway Research Board Research and Development Activities FY2009‖ is submitted in compliance with Sections 310.36 and 312.3A, Code of Iowa, which direct the submission of a report of the Secondary Road Research Fund and the Street Research Fund, respectively. It is a report of the status of research and development projects in progress on June 30, 2009. It is also a report on projects completed during the fiscal year beginning July 1, 2008 and ending June 30, 2009. Detailed information on each of the research and development projects mentioned in this report is available from the Research and Technology Bureau, Highway Division, Iowa Department of Transportation. All approved reports are also online for viewing at: www.iowadot.gov/operationsresearch/reports.aspx.

Dinâmica da calagem superficial em um latossolo vermelho distrófico

As alterações químicas do solo após a calagem superficial variam de acordo com o tempo e precipitações pluviais. Com o objetivo de avaliar as alterações das características químicas de um Latossolo Vermelho distrófico textura média de camada superficial arenosa, foi instalado um experimento em blocos ao acaso, com quatro doses de calcário dolomítico (0; 2,4; 4,8 e 7,2 t ha-1) e três repetições, em 1999, no município de Alto Paraná, região noroeste do Paraná. O calcário foi distribuído sobre resíduos de Brachiaria decumbens nas entrelinhas de um pomar de laranja em formação. As parcelas experimentais foram constituídas de 310 m², compostas por 15 plantas em três linhas com cinco plantas cada. As amostras de solo foram coletadas nas entrelinhas das três plantas centrais da parcela nas camadas de 0-0,05, 0,05-0,10, 0,10-0,20, 0,20-0,40 e 0,40-0,60 m de profundidade, aos 4, 12, 18, 24, 31 e 37 meses após a distribuição do calcário, correspondendo alternadamente às épocas de amostragens de solo em períodos de alta e baixa precipitação pluvial. As análises de variância foram efetuadas por meio do modelo matemático de blocos ao acaso no esquema de parcela subsubdividida com medidas repetidas no tempo (ano, época do ano em função da precipitação pluvial e doses de calcário), utilizadas nas análises de regressões pela técnica dos polinômios ortogonais. Os resultados mostraram que a máxima alteração das características químicas do solo foi obtida a partir de doses de calcário superiores ao dobro da necessidade de calcário, convencionalmente determinada pelo método de saturação por bases para elevá-la a 70 %, na profundidade de 0,20 m. A amostragem de solo após o período de maior precipitação pluvial foi indispensável ao ajuste dos dados da saturação por bases na camada de 0-0,05 m. As alterações dos teores de Ca2+ limitaram-se à camada de 0-0,10 m, enquanto os teores de Mg2+ aumentaram progressivamente do primeiro ao terceiro ano a 0-0,60 m de profundidade. Os teores de Mg2+ mantiveram-se associados à correção da acidez do solo (pH e H + Al) e à elevação dos valores de saturação por bases na profundidade de 0,10-0,20 m, na qual foi constatada a menor relação de Ca2+/Mg2+ (1,06). A máxima resposta da calagem superficial ocorreu no terceiro ano da aplicação da calagem superficial e na camada de 0-0,10 m identificada pelos modelos de regressão quadrática, momento em que se identificou o estabelecimento de uma frente de alcalinização na camada de 0,10-0,20 m por meio dos modelos de regressão linear. O método empregado de parcelas subsubdivididas no tempo permitiu a descrição da dinâmica da calagem no perfil do solo.

Agonist-induced internalization and recycling of the glucagon-like peptide-1 receptor in transfected fibroblasts and in insulinomas.

Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) is the most potent stimulator of glucose-induced insulin secretion and its pancreatic beta-cell receptor is a member of a new subfamily of G-protein-coupled receptors which includes the receptors for vasoactive intestinal polypeptide, secretin and glucagon. Here we studied agonist-induced GLP-1 receptor internalization in receptor-transfected Chinese hamster lung fibroblasts using three different approaches. First, iodinated GLP-1 bound at 4 degrees C to transfected cells was internalized with a t 1/2 of 2-3 min following warming up of the cells to 37 degrees C. Secondly, exposure to GLP-1 induced a shift in the distribution of the receptors from plasma membrane-enriched to endosomes-enriched membrane fractions, as assessed by Western blot detection of the receptors using specific antibodies. Thirdly, continuous exposure of GLP-1 receptor-expressing cells to iodinated GLP-1 led to a linear accumulation of peptide degradation products in the medium following a lag time of 20-30 min, indicating a continuous cycling of the receptor between the plasma membrane and endosomal compartments. Potassium depletion and hypertonicity inhibited transferrin endocytosis, a process known to occur via coated pit formation, as well as GLP-1 receptor endocytosis. In contrast to GLP-1, the antagonist exendin-(9-39) did not lead to receptor endocytosis. Surface re-expression following one round of GLP-1 receptor endocytosis occurred with a half-time of about 15 min. The difference in internalization and surface re-expression rates led to a progressive redistribution of the receptor in intracellular compartments upon continuous exposure to GLP-1. Finally, endogenous GLP-1 receptors expressed by insulinoma cells were also found to be internalized upon agonist binding. Together our data demonstrate that the GLP-1 receptor is internalized upon agonist binding by a route similar to that taken by single transmembrane segment receptors. The characterization of the pathway and kinetics of GLP-1-induced receptor endocytosis will be helpful towards understanding the role of internalization and recycling in the control of signal transduction by this receptor.

Multiples hyperplasies nodulaires focales hépatiques associées à une agénésie congénitale de la veine porte [Multiple focal nodular hyperplasia of the liver associated with congenital absence of the portal vein]

We report the 32nd case of congenital absence of portal vein in an 18-year-old female adult associated with multiple focal nodular hyperplasia of the liver. The association of various hepatic tumors has been observed in half of the publications about congenital absence of portal vein. Hepatic tumors seem to result from systemic diversion of portal vein flow with a resultant increase of arterial flow causing important vascular and nutritif changes the liver and consequent parenchymal transformation.

Efeito de alterações nas características do solo sobre a degradação de hexaclorobenzeno

Alterações das características de solo contaminado com hexaclorobenzeno foram promovidas para estudo dos efeitos sobre a comunidade microbiana e sobre a degradação do composto. Essas alterações foram efetuadas pela adição de fontes de matéria orgânica, adição de cal ou alagamento das amostras de solo, em laboratório. Analisaram-se a atividade e a densidade microbiana, bem como a degradação total (mineralização) e parcial (transformação em metabólitos) do hexaclorobenzeno. A mineralização do hexaclorobenzeno foi analisada por meio da adição de uma solução de 14C-hexaclorobenzeno às amostras de solo, captura do 14CO2 e quantificação por Espectrometria de Cintilação em Líquido. A formação de metabólitos do hexaclorobenzeno nas amostras de solo foi estudada por meio da extração destas amostras e da análise dos extratos por Cromatografia Gasosa. A atividade microbiana foi analisada por meio da medida da respiração dos microrganismos e da densidade microbiana, pela contagem no número de unidades formadoras de colônias (UFC) das amostras de solo. A atividade microbiana foi maior nas amostras com adição de bagaço de cana-de-açúcar (máximo de 310 mg g-1 de CO2 no solo), assim como a densidade de bactérias (máximo de 152 x 10³ UFCs g-1 de solo) e de fungos (máximo de 167 x 10³ UFCs g-1 de solo). A adição de vermicomposto, a adição de cal e o alagamento das amostras não influíram na atividade ou na densidade microbiana. Não se observou mineralização ou formação de metabólitos de hexaclorobenzeno. Portanto, a adição de matéria orgânica estimulou a comunidade microbiana, mas não resultou em degradação do hexaclorobenzeno.

LKB1 and AMPK differentially regulate pancreatic β-cell identity.

Fully differentiated pancreatic β cells are essential for normal glucose homeostasis in mammals. Dedifferentiation of these cells has been suggested to occur in type 2 diabetes, impairing insulin production. Since chronic fuel excess ("glucotoxicity") is implicated in this process, we sought here to identify the potential roles in β-cell identity of the tumor suppressor liver kinase B1 (LKB1/STK11) and the downstream fuel-sensitive kinase, AMP-activated protein kinase (AMPK). Highly β-cell-restricted deletion of each kinase in mice, using an Ins1-controlled Cre, was therefore followed by physiological, morphometric, and massive parallel sequencing analysis. Loss of LKB1 strikingly (2.0-12-fold, E<0.01) increased the expression of subsets of hepatic (Alb, Iyd, Elovl2) and neuronal (Nptx2, Dlgap2, Cartpt, Pdyn) genes, enhancing glutamate signaling. These changes were partially recapitulated by the loss of AMPK, which also up-regulated β-cell "disallowed" genes (Slc16a1, Ldha, Mgst1, Pdgfra) 1.8- to 3.4-fold (E<0.01). Correspondingly, targeted promoters were enriched for neuronal (Zfp206; P=1.3×10(-33)) and hypoxia-regulated (HIF1; P=2.5×10(-16)) transcription factors. In summary, LKB1 and AMPK, through only partly overlapping mechanisms, maintain β-cell identity by suppressing alternate pathways leading to neuronal, hepatic, and other characteristics. Selective targeting of these enzymes may provide a new approach to maintaining β-cell function in some forms of diabetes.-Kone, M., Pullen, T. J., Sun, G., Ibberson, M., Martinez-Sanchez, A., Sayers, S., Nguyen-Tu, M.-S., Kantor, C., Swisa, A., Dor, Y., Gorman, T., Ferrer, J., Thorens, B., Reimann, F., Gribble, F., McGinty, J. A., Chen, L., French, P. M., Birzele, F., Hildebrandt, T., Uphues, I., Rutter, G. A. LKB1 and AMPK differentially regulate pancreatic β-cell identity.

Ex XIIII. T. Livii Decadibus. Prima, tertia, quarta, in qua praeter fragmenta III, & X libri, quae in Germania nuper reperta, hic etiam continentur, multa adulterina expunximus, multa vera recepimus, quae in aliis non habentur. Epitome singulorum librorum XIIII Decadum. Historia omnium XIIII Decadum in compendium redacta ab L. Floro. Polybii lib. V de rebus Romanis latinitate donati à Nicolao Perotto. Index copiosissimus rerum omnium memorabilium...

[Histoire romaine (latin). 1518-1533]

Ex XIIII. T. Livii Decadibus. Prima, tertia, quarta, in qua praeter fragmenta III, & X libri, quae in Germania nuper reperta, hic etiam continentur, multa adulterina expunximus, multa vera recepimus, quae in aliis non habentur. Epitome singulorum librorum XIIII Decadum. Historia omnium XIIII Decadum in compendium redacta ab L. Floro. Polybii lib. V de rebus Romanis latinitate donati à Nicolao Perotto. Index copiosissimus rerum omnium memorabilium...

[Histoire romaine (latin). 1518-1533]

Annual Report of the Iowa Highway Research Board Research and Development Activities FY 2010

The Highway Division of the Iowa Department of Transportation (Iowa DOT) engages in research and development for two reasons: first, to find workable solutions to the many problems that require more than ordinary, routine investigation; and second, to identify and implement improved engineering and management practices. This report, entitled ―Iowa Highway Research Board Research and Development Activities FY2009‖ is submitted in compliance with Sections 310.36 and 312.3A, Code of Iowa, which direct the submission of a report of the Secondary Road Research Fund and the Street Research Fund, respectively.

The Mont-Mort metapelites: Variscan metamorphism and geodynamic context (Brianconnais basement, Western Alps, Switzerland)

The Mont-Mort metapelites are one of the best preserved relies of the Variscan unit in the Brianconnais basement. These micaschists crystallized during a poly-phase metamorphic cycle, under amphibolite facies conditions. Mineral parageneses and geothermobarometric calculations indicate a two-stage evolution. Stage (1) (550-600 degrees C and 5-8 kbar) is documented by assemblages of zoned garnet, staurolite, kyanite(?), biotite, muscovite, quartz and pla gioclase. Stage (2) (550-600 degrees C and 2 kbar) is illustrated by assemblages of andalusite, sillimanite, muscovite, biotite. This metamorphic evolution is characterized by a nearly isothermal decompression path, terminating with the formation of andalusite-bearing veins. U-Pb monazite dates at 330 Ma and Ar-40/Ar-39 muscovite dates at 290-310 Ma (without substantial evidence of argon resetting) point to Variscan metamorphism and yield an estimate of the time interval between the thermal peak and the retrogression stage within this part of the Brianconnais basement. Restoring the Brianconnais and other Alpine basement units within an existing geodynamic model of Cordillera construction and destruction, it is possible to understand better the transition from a medium pressure/high temperature regime (collision with a peak metamorphism around 330 Ma) to low-P/high-T conditions (decompression in an extensional regime) with high geothermal gradient, as recorded by the successive Variscan parageneses within the Mont-Mort metapelites.