Produção de embriões por fecundação in vitro e ativação partenogenética visando o isolamento de células tronco embrionárias felinas

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Maturação nuclear de ovócitos de cadelas em estro e anestro submetidos à maturação in vitro

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Maturação in vitro de ovócitos equinos : comparação entre os meios TCM 199, SOFaa e HTF:BME, e avaliação de FSH bovino, FSH equino e do hormônio de crescimento equino por meio da transferência de ovócitos

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Sinalização celular para apoptose em linhagem celular de adenocarcinoma (MCF-7) e carcinoma ductal invasivo de mama (ZR 7531) tratados com alcalódes isolados de Pterogyne nitens

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Bioprospecção de produtos naturais e sintéticos em modelos celulares de citotoxicidade, genotoxicidade, apoptose e quimioprevenção do câncer

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Expressão gênica e viabilidade de folículos ovarianos pré-antrais de Sapajus apella congelados e cultivados in vitro

O objetivo do presente estudo foi desenvolver um protocolo de congelação para a preservação de folículos pré-antrais de Sapajus apella (macaco-prego). Para este fim, fragmentos ovarianos foram expostos à diferentes soluções crioprotetoras, adicionadas ou não por antioxidantes (selênio e trolox), congelados e cultivados in vitro por 24/horas. Análises morfológicas, ultraestruturais, de viabilidade e estresse oxidativo foram desenvolvidas. A coleta do material foi realizada no Centro Nacional de primatas (CENP) e nove macacos-prego maduras e saudáveis foram usadas. Biopsias ovarianas de 1 mm³ foram coletadas por laparoscopia exploratória. Os folículos coletados foram classificados de acordo com sua fase de desenvolvimento em primordial, primário ou secundário. A viabilidade folicular foi observada através da utilização de marcadores fluorescentes (Iodeto de propídeo e Hoechst) qRT-PCR foi usado para avaliar a expressão de hormônios e fatores de crescimento. O TEAC foi usado para mensurar o estresse oxidativo no tecido. Os resultados mostraram que a solução congelação contendo trolox não afetou a morfologia folicular e expressão gênica. A criopreservação resultou em elevadas taxas de viabilidade folicular quando o trolox estava presente na solução, porém a expressão de genes codificando BMP4 e KL foi negativamente afetada. Nossos achados mostraram um efeito favorável da adição do trolox à solução de congelação. Entretanto, a viabilidade folicular e expressão gênica foram afetados após cultivo in vitro.

Maturação in vitro de oócitos bovinos em meios suplementados com quercetina e seu efeito sobre o desenvolvimento embrionário

A quercetina é um flavonoide, amplamente encontrada em frutas, vegetais, grãos, flores, com elevada concentração no vinho tinto, e tem sido caracterizada funcionalmente pela atividade antioxidante. Para avaliação da maturação nuclear e do desenvolvimento embrionário bovino, os oócitos foram maturados por 22h na presença de quercetina (0,4, 2, 10 e 50µM), cisteamina (100µM) e na ausência dos antioxidantes. Os oócitos maturados foram corados com Hoechst para avaliação da maturação in vitro. Para avaliação do desenvolvimento embrionário, os oócitos foram fertilizados e cultivados in vitro, as taxas de desenvolvimento embrionário foram determinadas no sétimo dia de cultivo e o percentual de eclosão e o número de células dos embriões no oitavo dia. Os níveis de glutationa (GSH) dos oócitos foram mensurados por emissão de fluorescência com CMF₂HC. A porcentagem de maturação nuclear (±89%) não diferiu entre os grupos. O desenvolvimento embrionário variou entre os tratamentos, o percentual de blastocisto foi superior (P<0,05) nos grupos tratados com 0,4, 2, 10 e 50∝M de quercetina (56,9, 59,5, 53,6 e 49,6%, respectivamente) e com 100∝M de cisteamina (50,4%) em relação ao grupo controle (42,3%). Na comparação entre os dois antioxidantes, a quercetina (0,4 e 2µM) foi superior na produção de embriões (56,9 e 59,5%, respectivamente) em comparação com cisteamina (50,4%). As taxas de embriões eclodidos foram similares (P>0,05) entre os grupos (±63,0%). O número médio de células dos embriões também foi similar entre os grupos (±233). Os níveis intracelulares de GSH foram superiores nos oócitos maturados com cisteamina, mas similares entre os oócitos tratados com quercetina e o controle. A suplementação da maturação in vitro com antioxidantes melhora as taxas de blastocistos. A quercetina foi superior à cisteamina, que, por sua vez, foi superior ao controle. Mas os níveis de GSH foram superiores somente nos oócitos tratados com cisteamina.

Imunolocalização do fator de crescimento semelhante à insulina (IGF-I) e do fator de crescimento epidermal (EGF) em ovários caninos e seus efeitos sobre a maturação in vitro de oócitos: avaliação nuclear

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Efeito do fator de crescimento IGF-I sobre a maturação in vitro de oócitos caninos (Canis familiaris): avaliação da maturação nuclear e citoplasmática

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos do diâmetro oocitário, configuração da cromatina em VG e avaliação da atividade quinase p34cdc2 na maturação in vitro de oócitos caninos

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FMVZ

A new fibrin sealant as a three-dimensional scaffold candidate for mesenchymal stem cells

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Artificial activation of bovine and equine oocytes with cycloheximide, roscovitine, strontium, or 6-dimethylaminopurine in low or high calcium concentrations

Knowledge on parthenogenetic activation of oocytes is important to improve the efficiency of nuclear transfer (NT) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) because artificial activation of oocyte (AOA) is an essential step to achieve embryo production. Although different procedures for AOA have been established, the efficiency of in vitro production of embryos remains low, especially in equines and Bos taurus bovines. In an attempt to improve the techniques of NT and ICSI in bovine and equine species, we tested different combinations of drugs that had different mechanisms of action for the parthenogenetic activation of oocytes in these animals. The oocytes were collected, in vitro matured for 24 to 30 h and activated artificially, in the presence of low or high concentrations of calcium, with combinations of calcium ionophore (ionomycin) with cycloheximide, roscovitine, strontium, or 6-dimethylaminopurine (6-DMAP). For assessment of activation rates, oocytes were stained with Hoechst 33342 and observed under an inverted microscope. We showed that all combinations of drugs were equally efficient in activating bovine oocytes, with the best results obtained when high concentrations of calcium were adopted. For equine oocytes, high concentrations of calcium were not beneficial for the parthenogenetic activation and the combination of ionomycin with either 6-DMAP or roscovitine was effective in inducing artificial activation of oocytes. We believe that our preliminary findings provide some clues for the development of a better AOA protocol to be used with these species.

Expressão gênica e potencial de desenvolvimento in vitro dos complexos cúmulos-oócitos ovinos tratados com roscovitina

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação dos efeitos antitumorais de extratos brutos produzidos por fungos endofíticos isolados de Eugenia jambolana em células de hepatocarcinoma murino (Hepa-1c1c7)

Pós-graduação em Biociências e Biotecnologia Aplicadas à Farmácia - FCFAR

Meiotic arrest of sheep oocytes using roscovitine under different medium compositions

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)