Preliminary X-ray crystallographic analysis of 2-methylcitrate synthase from Salmonella typhimurium

Analysis of the genomic sequences of Escherichia coli and Salmonella typhimurium has revealed the presence of several homologues of the well studied citrate synthase (CS). One of these homologues has been shown to code for 2-methylcitrate synthase (2-MCS) activity. 2-MCS catalyzes one of the steps in the 2-methylcitric acid cycle found in these organisms for the degradation of propionate to pyruvate and succinate. In the present work, the gene coding for 2-MCS from S. typhimurium (StPrpC) was cloned in pRSET-C vector and overexpressed in E. coli. The protein was purified to homogeneity using Ni-NTA affinity chromatography. The purified protein was crystallized using the microbatch-under-oil method. The StPrpC crystals diffracted X-rays to 2.4 A resolution and belonged to the triclinic space group P1, with unit-cell parameters a = 92.068, b = 118.159, c = 120.659 A, alpha = 60.84, beta = 67.77, gamma = 81.92 degrees. Computation of rotation functions using the X-ray diffraction data shows that the protein is likely to be a decamer of identical subunits, unlike CSs, which are dimers or hexamers.

Crystal structure of Salmonella typhimurium 2-methylcitrate synthase: Insights on domain movement and substrate specificity

2-Methylcitric acid (2-MCA) cycle is one of the well studied pathways for the utilization of propionate as a source of carbon and energy in bacteria such as Salmonella typhimurium and Escherichia coli. 2-Methylcitrate synthase (2-MCS) catalyzes the conversion of oxaloacetate and propionyl-CoA to 2-methylcitrate and CoA in the second step of 2-MCA cycle. Here, we report the X-ray crystal structure of S. typhimurium 2-MCS (StPrpC) at 2.4 A resolution and its functional characterization. StPrpC was found to utilize propionyl-CoA more efficiently than acetyl-CoA or butyryl-CoA. The polypeptide fold and the catalytic residues of StPrpC are conserved in citrate synthases (CSs) suggesting similarities in their functional mechanisms. In the triclinic P1 cell, StPrpC molecules were organized as decamers composed of five identical dimer units. In solution, StPrpC was in a dimeric form at low concentrations and was converted to larger oligomers at higher concentrations. CSs are usually dimeric proteins. In Gram-negative bacteria, a hexameric form, believed to be important for regulation of activity by NADH, is also observed. Structural comparisons with hexameric E. coil CS suggested that the key residues involved in NADH binding are not conserved in StPrpC. Structural comparison with the ligand free and bound states of CSs showed that StPrpC is in a nearly closed conformation despite the absence of bound ligands. It was found that the Tyr197 and Leu324 of StPrpC are structurally equivalent to the ligand binding residues His and Val, respectively, of CSs. These substitutions might determine the specificities for acyl-CoAs of these enzymes. (C) 2010 Elsevier Inc. All rights reserved.

Com a palavra a oposição : a obstrução como recurso para se fazer ouvir

Analisa o papel desempenhado pela oposição e pela minoria nas decisões democráticas tomadas pelo Plenário da Câmara dos Deputados, em votações de matérias que não são consensuais. Tomando por base a votação do Projeto de Lei Complementar 308 de 2006, sobre a Contribuição Social da Saúde, discute as razões pelas quais o governo não conseguiu a aprovação da matéria.

Urkiolaenea: Sistemas multidispositivo para negocios tradicionales

“Urkiolaenea: Sistemas multidispositivo para negocios tradicionales” es un proyecto realizado en la empresa OrekaI.T. dentro de un contexto formativo, ya que a su vez es el proyecto con el que finalizo mis estudios de Ingeniería Informática. Con él, se ha pretendido dar respuesta a las necesidades de un cliente real que dispone de un negocio tradicional.En este caso, Urkiolaenea, una negocio de alojamiento rural que requería de una imagen renovada en Internet para lograr ser más competitiva en el ámbito del turismo rural, además de un sistema de gestión para mejorar sus procesos de negocio. Por otra parte, con este proyecto no sólo se ha buscado cumplir con las expectativas del cliente sino ir más allá, buscando las soluciones más adecuadas ante el mercado actual en Internet, dominado por los dispositivos móviles inteligentes. Por ello, gran parte de los esfuerzos realizados en este proyecto se han enfocado en conseguir que Urkiolaenea sea accesible cómodamente por cualquier persona, independientemente del dispositivo desde el que acceda.

Influencia de la edad y la menopausia en el origen de la Dehiscencia del Canal Semicircular Superior

145 p. : il., col.

Coleta Seletiva Solidária de resíduos recicláveis dirigida à rede estadual de ensino do Rio de Janeiro - estudo de caso.

O aumento da demanda de água, energia, bem como a mudança na composição e na quantidade dos resíduos, associados aos impactos socioambientais que eles provocam, tornaram-se um dos grandes desafios atuais para a sociedade e, em particular, para as escolas públicas. Nesse contexto, o governo do estado do Rio de Janeiro, dentro de seu Plano Estadual de Gerenciamento Integrado de Resíduos Sólidos, criou o Programa Coleta Seletiva Solidária (PCSS), em outubro de 2009, realizado em parceria entre o Instituto Estadual do Ambiente (INEA), a Universidade do Estado do Rio de Janeiro (UERJ) e a Secretaria de Estado de Educação (SEEDUC). Este Programa assessora a implantação da Coleta Seletiva Solidária (CSS) de materiais recicláveis nos municípios do estado. O eixo-escolas, uma das suas linhas de ações, assessora a implantação da CSS na rede estadual, conforme determina o Decreto Estadual 40.645/07. Considerando os problemas relacionados aos resíduos e a exigência legal, boa parte das escolas estaduais não implantaram ainda a Coleta Seletiva Solidária, por diversos fatores. O objetivo da pesquisa é estudar o modelo de Coleta Seletiva proposto pelo PCSS nas escolas da rede estadual de ensino do Rio de Janeiro. Como estudo de caso, esse modelo foi aplicado no Colégio Estadual Souza Aguiar (CESA). Utilizou-se da pesquisa-ação como abordagem metodológica e o instrumento de coleta de dados foi o questionário dirigido aos participantes das oficinas de capacitação na UERJ. No CESA foram aplicados questionários aos alunos e acompanhado o processo de implantação da CSS através da observação participante. Conclui-se que os resultados da pesquisa não podem ser generalizados para toda a rede estadual de ensino do Rio de Janeiro. Contudo, ele possibilitou identificar questões importantes e sugerir recomendações para o aperfeiçoamento do modelo estudado. Destaca-se a importância de formalizar o compromisso institucional dos dirigentes das escolas com a implantação da CSS, contribuindo com a formação de cidadãos comprometidos com a sustentabilidade socioambiental do estado do Rio de Janeiro.

Do luxo ao lixo: uma análise da aplicabilidade e gestão da coleta seletiva solidária no âmbito de escolas públicas estaduais no Rio de Janeiro

Dos muitos problemas socioambientais, a geração e destinação de resíduos sólidos é um dos que mais afetam os agrupamentos humanos, principalmente nas grandes cidades. No Brasil, por um lado, políticas públicas vêm sendo implantadas, buscando encontrar soluções para tal problema. Por outro lado, acredita-se que a educação seja instrumento importante e necessário na organização social e na formação da cidadania. Dessa forma, este trabalho faz uma análise das ações necessárias e do processo de gestão para a coleta seletiva solidária em escolas públicas estaduais, pela aplicação do Decreto Estadual n. 40.645/07, o qual estabelece o descarte seletivo de materiais recicláveis nos órgãos públicos estaduais do Rio de Janeiro e sua destinação a grupos de catadores de recicláveis. Para isso, serviu-se da observação de um número pré-determinado de escolas localizadas no Grande Méier, na região metropolitana da cidade do Rio de Janeiro, e de cooperativas de catadores dessa mesma região. Nesse sentido, o presente trabalho parte de uma reflexão acerca da sociedade globalizada de produção e consumo, fazendo uma análise crítica da Política Nacional de Resíduos Sólidos (PNRS), tecendo um diálogo desta com a Política Nacional de Educação Ambiental (PNEA) e com o Código de Defesa do Consumidor (CDC), considerando a atividade de Coleta Seletiva Solidária (CSS) como proposta de política pública de inclusão social e interesse ambiental. Sendo assim, identifica dificuldades, possibilidades e conflitos inerentes à questão dos resíduos sólidos, associadas às questões do consumo.

Atores e agendas da política externa brasileira para a África e a instrumentalização da cooperação em segurança alimentar (2003-2010)

Durante os dois mandatos presidenciais de Luiz Inácio Lula da Silva (2003-2010), percebeu-se, em virtude de pressões intra e extraburocráticas e de causalidades sistêmicas, maior acentuação do esboroamento da histórica condição insular do Ministério das Relações Exteriores (MRE). A participação de novos entes que não o Itamaraty na configuração da política externa, notadamente em seu vetor de execução, enseja novas agendas cooperativas e processos decisórios. Atores da burocracia federal, como os ministérios, vocalizam preferências que influenciam o jogo interburocrático e têm o condão de estabelecer possíveis pontes com a instituição diplomática, unidade de decisão por excelência. Na perspectiva intraburocrática, a ascensão de corrente de ação e de pensamento dos autonomistas, frente aos institucionalistas pragmáticos, permite escolhas de inserção internacional como o reforço da perspectiva sul-sul, na qual se inserem as parcerias com a África, o que indica a inexistência de monolitismo de opiniões no interior do MRE. Essa dinâmica faz-se presente e é necessária para o entendimento da Cooperação Brasileira para o Desenvolvimento Internacional (CBDI), tipo de Cooperação Sul-Sul (CSS) do Brasil que tem na Cooperação Técnica, Científica e Tecnológica (CTC&T) em segurança alimentar uma de suas modalidades mais atuantes e complexas. Convencionada como instrumento de política externa durante a ascendência dos autonomistas, corrente influenciada por quadros do Partido dos Trabalhadores, a cooperação em segurança alimentar teve o continente africano como locus primordial de manifestação. Embasado na internacionalização de políticas públicas domésticas, o compartilhamento de conhecimentos nas agendas de combate à fome, de combate à pobreza e de desenvolvimento agrário é fenômeno tributário da abertura da caixa preta estatal, o que ratifica o argumento de que há correlação entre níveis de análise. As diversas iniciativas cooperativas para com parceiros da outra margem do Atlântico Sul, eivadas de componente retórico de promoção de ordem internacional menos assimétrica, donde também subjace a busca consecução de interesses diretos e indiretos dos formuladores diplomáticos, guardam relação com as diretrizes mais gerais da política externa articulada no período estudado nesta dissertação.

A new low-power highly linear mixer design using differential derivative superposition

This paper presents the analysis and design of a new low power and highly linear mixer topology based on a newly reported differential derivative superposition method. Volterra series and harmonic balance are employed to investigate its linearisation mechanism and to optimise the design. A prototype mixer has been designed and is being implemented in 0.18μm CMOS technology. Simulation shows this mixer achieves 19.7dBm IIP3 with 10.5dB conversion gain, 13.2dB noise figure at 2.4GHz and only 3.8mW power consumption. This performance is competitive with already reported mixers.

The Kiloparsec-scale structure of 3C 286

We present radio images of the compact steep spectrum (CSS) quasar 3C 286 acquired with the Very Large Array (VLA) at 8.4 and 22.5 GHz. The source exhibits a two-sided core-jet structure with a bright central component and two extended components one to the east (P.A. 100degrees) and another to the southwest (P.A. -116degrees). From the compact core, an extension runs towards the southwest component up to similar to 0.7 arcsecond. The emission between the primary central component and the southwest component exhibits a knotty structure. A gradual change of the jet position angles from -135degrees to -120degrees in the inner southwest jet suggests a local bend. The position angle changes of the major eastern components E2 and E1 suggest that the eastern jet likely follows a curved trace. The bends in the jet trace may be associated with a relativistic precession or some interaction between the jet and the ambient matter. A mean spectral index of alpha(8.4)(22.5) similar to -0.76 (S-nu proportional to nu(alpha)) is estimated for the core component. Steep spectra are also obtained for the extended southwest component (2.6", P.A. -116degrees) and eastern component (0.8", P.A. 100degrees), with alpha(8.4)(22.5) similar to -0.88 and alpha(8.4)(22.5) similar to -1.79, respectively. The radio morphologies and spectral index distributions suggest that the core seen in our images is likely to be the beamed inner jet while the real nucleus is dimmed by it beaming away from us.

高性能树脂环状预聚体和含官能团芳香环状低聚物的合成与表征

芳香环状低聚物的合成是应现代航天、航空、电子、机械等高技术领域对先进复合材料的需求而在八十年代末期发展起来的研究领域，其特有的结构和性能决定了芳香环状低聚物的广泛应用前景。芳香环状低聚物不仅在开环聚合制备先进树脂基复合材料方面具有重要的应用价值，而且在其侧链上引入各种官能团，开展其在功能材料方面的研究也具有十分重要的意义。本文以开拓这类新型芳香大环化合物的应用为目的，“假高稀”条件下，合成了22种新型结构的芳香大环化合物，并对它们进行了精确的结构表征。本文从开环聚合制备高性能树脂的思想出发，以6氟双酚A为单体合成了一系列的含氟聚芳醚环状预聚体，环状低聚物的产率达到74%，并在1 wt%的联苯二酚钾的引发下，进行快速地熔融开环聚合，得到了重均分子量约为6万，分子量分布约为2.6的线性含氟聚芳醚；本文设计了酮亚胺路线合成得到了聚醚醚酮(PEEK)环状预聚体。开创了由AA，BB型单体一步法合成PEEK环状中间体的新方法，这种合成方法具有反应时间短，所得环状低聚物的环尺寸较小，环张力较大，易于进行开环聚合的特点。PEEK环状预聚体成功地进行了阴离子开环聚合得到高分子量的线性聚合物，这一新方法的开拓将把PEEK在先进复合材料领域的实际应用向前推进一步。建立了一套先进的分析芳香环状低聚物的方法，结合质谱、核磁、GPC、单晶X．射线衍射和DSC等手段表征了各种环状低聚物并揭示了环状低聚物的组成。本文着重研究了激光质谱(MALDI-TOF MS)和电喷雾质谱(ESI MS)在芳香环状低聚物分析中的应用，特别在基质的选择上，经对比研究表明1,8,9-葸三酚是分析芳香环状低聚物的最为有效的基质，并已广泛地应用在我们的研究工作中，同时还发现了一种适用于芳香环状聚酯分析的新型基质，α-氰基-4-羟基肉桂酸。用软硬酸碱理论解释了芳香环状低聚物与不同阳离子的亲合选择性。本文首次运用电喷雾质谱来分析芳香环状低聚物，证明电喷雾质谱与激光质谱有明显的互补性，是继激光质谱之后新发现的表征芳香大环化合物的有效手段，特别适用于含极性基团的芳香大环化合物的表征，进一步完善了芳香大环化合物的表征体系。自从美国G.E.公司利用环状聚碳酸酯的开环聚合制备线性聚碳酸酯以来，大多数芳香环状低聚物的开环聚合是经阴离子途径进行的，聚合后部分引发剂的端基残存于聚合产物中，常用的阴离子引发剂含有无机盐和酚氧碱金属离子，这些基团的存在将对聚合物的加工和性能带来一定的影响，因而探索其它的开环聚合途径具有重要意义。本文在“假高稀”条件下，高选择性地合成CSA、CSK和CSS三种含硫醚键的芳香环状低聚物，通过四圆衍射首次对含硫醚键芳香环状二聚体的晶体结构进行了研究，结果表明这些含硫醚键的芳香环状低聚物为缺乏环张力的大环。自由基聚合反应是重要的聚合方法之一，本文通过CSA和CSK环状低聚物的开环聚合深入、细致地研究了通过硫醚交换反应进行的自由基开环聚合，并利用顺磁共振波谱证实了其自由基开环聚合的性质。本文合成了一系列含溴、硝基、羧基及磺酸钠基团的芳香环状低聚物，以期开拓非开环聚合用的芳香大环化合物的研究领域。另外在芳香环状聚醚的合成新方法上做出了创新性的工作，首次通过界面缩聚方法高产率地合成了含硝基的芳香环状聚醚砜，并对芳香大环化合物的化学反应，修饰改性及功能化研究进行了探索。

Online study of the formation of PA6 droplets in PP matrix under shear flow

Breakup process of polyamide 6 (PA6) in polypropylene (PP) matrix under shear flow was online studied by using a Linkam CSS 450 stage equipped with optical microscopy. Both tip streaming and fracture breakup modes of PA6 droplets were observed in this study. It was reported that the droplet would break up by tip streaming model when the radio of the droplet phase viscosity to the matrix phase viscosity (n(r) = n(d)/n(m)) is smaller than 0.1 (Taylor, Proc R Soc London A 1934, 146, 501; Grace, Chem Eng Commun 1982, 14, 225; Bartok and Mason, J Colloid Sci 1959, 14, 13; Rumscheidt and Mason, J Colloid Sci 1961, 16, 238; de Bruijn, Chem Eng Sci 1993, 48, 277). However, the tip streaming model was observed even when the viscosity ratio was much greater than 0.1 (n(r) = 1.9). In this study for the tip streaming mode, small droplets were ruptured from the tip of the mother droplet. On the other hand, the mother droplet was broken into two or more daughter droplets with one or several satellite droplets between them for the fracture mode. It was found that PA6 droplet was much elongated at first, and then broke up via tip streaming or fracture to form daughter droplets or small satellite droplets with the shape of fiber or ellipse.

含硫、磷壳聚糖新衍生物的制备、结构与抑菌活性关系研究

由于化学农药和抗生素兽药残留问题严重影响着环境和人类健康，生物农药和兽药的开发迫在眉睫。壳聚糖无毒、无污染、可生物降解，已经成为这一方向研究热点。但是，目前对壳聚糖抑菌活性的研究大都集中于分子量和脱乙酰度对其活性的影响，而对壳聚糖衍生物的研究相对较少。本文制备了壳聚糖磺酰胺类、酰基异硫氰酸酯类和α-氨基烷基膦酸酯类共计40余种新型壳聚糖含硫、磷衍生物，研究了它们对6种真菌（棉花枯萎病菌、番茄早疫病菌、葡萄炭疽病菌、姜叶斑点病菌、黄瓜灰霉病菌、芦笋茎枯病）和4种细菌（大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、八叠球菌）的抑菌活性，结果发现，所有衍生物的抑菌活性均强于壳聚糖原料，其中4种新型衍生物对于真菌具有较强抑制活性，其抑制率大于或接近阳性对照武夷菌素；10余种衍生物对于细菌有较强的杀菌、抑菌活性，如4-HBSA(l)CMCS、4-HBSA(l)CSS等对四种细菌具有广谱性，效果接近甚至强于阳性对照诺氟沙星。 对影响因素、构效关系和机理进行了深入探讨。衍生物的分子量、浓度、溶解性、α-位C原子空间位阻、吸电子空间诱导效应、烷基链的增长、等因素变化均会对抑菌活性产生重大影响。

Antimicrobial activity of hydroxylbenzenesulfonailides derivatives of chitosan, chitosan sulfates and carboxymethyl chitosan

Chitosan, carboxymethyl chitosan (CIVICS) and chitosan sulfates (CSS) with different molecular weight were modified by reacting with 4-hydroxyl-5-chloride-1,3-benzene-disulfo-chloride or 2-hydroxyl-5-chloride-1,3 -benzene-disulfo-chloride to give 12 kinds of new hydroxylbenzenesulfonailides derivatives of them. The preparation conditions of the derivatives were discussed in this paper, and their structures were characterized by FT-IR and C-13 NMR spectroscopy. The solubility of the derivatives was measured in the experiment. In addition, their antimicrobial activities against four bacteria and five crop-threatening pathogenic fungi were tested in the experiment. Besides, the rule and mechanism of their antibacterial activities were discussed in this paper. (C) 2009 Published by Elsevier B.V.

Synthesis and antifungal properties of sulfanilamide derivatives of chitosan

Sulfanilamide derivatives of chitosan (2-(4-acetamido-2-sulfanimide)-chitosan (HSACS, LSACS), 2-(4-acetamido-2-sulfanimide)-6-sulfo-chitosan (HSACSS, LSACSS) and 2-(4-acetamido-2-sulfanimide)-6-carboxymethyl-chitosan (HSACMCS, LSACMCS)) were prepared using different molecular weights of chitosan (CS), carboxymethyl chitosan (CMCS) and chitosan sulfates (CSS) reacted with 4-acetamidobenzene sulfonyl chloride in dimethylsulfoxide solution. The structures of the derivatives were characterized by FT-IR spectroscopy and elemental analysis, which showed that the substitution degree of sulfanilamide group of HSACS, HSACSS, HSACMCS, LSACS, LSACSS and LSACMCS were 0.623, 0.492, 0.515, 0.576, 0.463 and 0.477, respectively. The solubility of the derivatives (pH < 7.5) was higher than that of chitosan (pH < 6.5). The antifungal activities of the derivatives against Aiternaria solani and Phomopsis asparagi were evaluated based on the method of Jasso et al. in the experiment. The results indicated that all the prepared sulfanilamide derivatives had a significant inhibiting effect on the investigated fungi in the polymer concentration range from 50 to 500 mu g mL(-1). The antifungal activities of the derivatives increased with increasing the molecular weight, concentration or the substitution degree. The sulfanilamide derivatives of CS, CMCS and CSS show stronger antifungal activities than CS, CMCS and CSS. (C) 2007 Elsevier Ltd. All rights reserved.