Cloning and characterization of a zebrafish homologue of human AQP1: a bifunctional water and gas channel

Chen LM, Zhao J, Musa-Aziz R, Pelletier MF, Drummond IA, Boron WF. Cloning and characterization of a zebrafish homologue of human AQP1: a bifunctional water and gas channel. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 299: R1163-R1174, 2010. First published August 25, 2010; doi:10.1152/ajpregu.00319.2010.-The mammalian aquaporins AQP1, AQP4, and AQP5 have been shown to function not only as water channels but also as gas channels. Zebrafish have two genes encoding an AQP1 homologue, aqp1a and aqp1b. In the present study, we cloned the cDNA that encodes the zebrafish protein Aqp1a from the 72-h postfertilization (hpf) embryo of Danio rerio, as well as from the swim bladder of the adult. The deduced amino-acid sequence of aqp1a consists of 260 amino acids and is 59% identical to human AQP1. By analyzing the genomic DNA sequence, we identified four exons in the aqp1a gene. By in situ hybridization, aqp1a is expressed transiently in the developing vasculature and in erythrocytes from 16 to 48 h of development. Later, at 72 hpf, aqp1a is expressed in dermal ionocytes and in the swim bladder. Western blot analysis of adult tissues reveals that Aqp1a is most highly expressed in the eye and swim bladder. Xenopus oocytes expressing aqp1a have a channel-dependent (*) osmotic water permeability (P(f)*) that is indistinguishable from that of human AQP1. On the basis of the magnitude of the transient change in surface pH (Delta pHS) that were recorded as the oocytes were exposed to either CO(2) or NH(3), we conclude that zebrafish Aqp1a is permeable to both CO(2) and NH(3). The ratio (Delta pHS*)CO2/P(f)* is about half that of human AQP1, and the ratio (Delta pHS*)NH3/P(f)* is about one-quarter that of human AQP1. Thus, compared with human AQP1, zebrafish Aqp1a has about twice the selectivity for CO(2) over NH(3).

Macrophage migration inhibitory factor is up-regulated in human first-trimester placenta stimulated by soluble antigen of Toxoplasma gondii, resulting in increased monocyte adhesion on villous explants

Considering the potential role of macrophage migration inhibitory factor (MIF) in the inflammation process in placenta when infected by pathogens, we investigated the production of this cytokine in chorionic villous explants obtained from human first-trimester placentas stimulated with soluble antigen from Toxoplasma gondii (STAg). Parallel cultures were performed with villous explants stimulated with STAB, interferon-gamma (IFN-gamma), or STAB plus IFN-gamma. To assess the role of placental MIF on monocyte adhesiveness to human trophoblast, explants were co-cultured with human myelomonocytic THP-1 cells in the presence or absence of supernatant from cultures treated with STAB (SPN), SPN plus anti-MIF antibodies, or recombinant MIF. A significantly higher concentration of MIF was produced and secreted by villous explants treated with STAB or STAB plus IFN-gamma after 24-hour culture. Addition of SPN or recombinant MIF was able to increase THP-1 adhesion, which was inhibited after treatment with anti-MIF antibodies. This phenomenon was associated with intercellular adhesion molecule expression by villous explants. Considering that the processes leading to vertical dissemination of T. gondii remain widely unknown, our results demonstrate that MIF production by human first-trimester placenta is up-regulated by parasite antigen and may play an essential role as an autocrine/paracrine mediator in placental infection by T. gondii.

Small bowel injury associated to allergy is triggered by platelet-activating factor, mast cells, neutrophils and protected by nitric oxide

Allergy to components of the diet is followed by gut inflammation which in children, sometimes progress to mucosal lesions and anaphylaxis. In newborns suffering of cow`s milk allergy, bloody stools, rectal. bleeding and ulcerations are found. The rat systemic anaphylaxis is a suitable model to study the intestinal lesions associated to allergy. In the present study we used this model to investigate some mechanisms involved. We found that 15 min after antigen challenge of sensitized rats, hemorrhagic lesions develop in the small intestine. The lesions were more severe in jejunum and ileum compared to duodenum. Pretreatment of the rats with a platelet-activating factor-receptor antagonist (WEB-2170) reduced the lesions whereas inhibition of endogenous nitric oxide by L-NAME, greatly increased the hemorrhagic lesions and mortality. Both, lesions and mortality were reversed by L-arginine. The hemorrhagic lesions were also significantly reduced by the mast cell stabilizers, disodium cromoglycate and ketotifen as well as by neutrophils depletion (with anti-PMN antibodies) or inhibition of selectin binding (by treatment with fucoidan). Thus, the intestinal hemorrhagic lesions in this model are dependent on ptatelet-activating factor, mast cell granule-derived mediators and neutrophils. Endogenous nitric oxide and supplementation with L-arginine has a protective role, reducing the lesions and preventing mortality. These results contributed to elucidate mechanisms involved in intestinal lesions which could be of relevance to human small bowel injury associated to allergy. (c) 2007 Elsevier B.V. All rights reserved.

Differential Antitumor Effects of IgG and IgM Monoclonal Antibodies and Their Synthetic Complementarity-Determining Regions Directed to New Targets of B16F10-Nex2 Melanoma Cells

Malignant melanoma has increased incidence worldwide and causes most skin cancer-related deaths. A few cell surface antigens that can be targets of antitumor immunotherapy have been characterized in melanoma. This is an expanding field because of the ineffectiveness of conventional cancer therapy for the metastatic form of melanoma. In the present work, antimelanoma monoclonal antibodies (mAbs) were raised against B16F10 cells (subclone Nex4, grown in murine serum), with novel specificities and antitumor effects in vitro and in vivo. MAb A4 (IgG2ak) recognizes a surface antigen on B16F10-Nex2 cells identified as protocadherin beta(13). It is cytotoxic in vitro and in vivo to B16F10-Nex2 cells as well as in vitro to human melanoma cell lines. MAb A4M (IgM) strongly reacted with nuclei of permeabilized murine tumor cells, recognizing histone 1. Although it is not cytotoxic in vitro, similarly with mAb A4, mAb A4M significantly reduced the number of lung nodules in mice challenged intravenously with B16F10-Nex2 cells. The V(H) CDR3 peptide from mAb A4 and V(L) CDR1 and CDR2 from mAb A4M showed significant cytotoxic activities in vitro, leading tumor cells to apoptosis. A cyclic peptide representing A4 CDR H3 competed with mAb A4 for binding to melanoma cells. MAb A4M CDRs L1 and L2 in addition to the antitumor effect also inhibited angiogenesis of human umbilical vein endothelial cells in vitro. As shown in the present work, mAbs A4 and A4M and selected CDR peptides are strong candidates to be developed as drugs for antitumor therapy for invasive melanoma.

Delivery care in Quang Ninh province, Northern Vietnam : resources and access to safe care.

Every mother and child has the right to survive childbirth which requires skilled birth attendants together with referral and available emergency obstetric care (EmOC). The objective of the study was to describe delivery care routines at different levels in the health care system in Quang Ninh province, Northern Vietnam. The design was cross sectional using a structured questionnaire. Two districts in Quang Ninh province with 40 Community Health Centres (CHC), three district hospitals and one region hospital was included in the study, in total 138 (CHC n=105 and hospitals n=33) health care providers participated. In our study 20% (CHC) of the health care providers assisting deliveries at CHC were midwives and health care provider’s in our study further report to have assisted at less then 10 deliveries/year (81% of respondents at CHC). Findings show that the health care provider’s routines and care for women during labour and delivery vary and that there is a need for re-training and that women in labour should be cared for by health care providers with adequate training like midwifery. In our study CHC had poor resources to provide basic or comprehensive EmOC. Our findings indicate that there is a need for re-training in delivery care among health care providers and since the number of deliveries at CHC is few they should be handled by someone who is a skilled birth attendant. Our findings also show a variation in care routines during labour and delivery among health care providers at CHC and hospital levels and this also show the need for re-training and support from proper authorities in order to improve maternal and newborn health.

Participação Infantil: experiência de pesquisa realizada em organização social na Zona Oeste do Rio de Janeiro

Este trabalho se propõe a ser um fio na teia de reflexões que tecem o debate sobre a participação infantil a partir do ponto de vista das crianças em co-operação com adultos. Sua trama se compõe de campos distintos e autônomos - infância, direito social e participação -, que se cruzam e inter-relacionam, investigados no âmbito de uma experiência realizada na organização social Fundação Xuxa Meneghel, que tem como eixo central de suas ações a promoção e a proteção de crianças e adolescentes que vivem em situação de vulnerabilidade social na Zona Oeste do município do Rio de Janeiro. Trata-se de uma micro-experiência, que pretende compreender o ser criança em relação aos seus direitos humanos e sociais, observando sua influência nas práticas sociais presentes na nossa cultura. O direito à participação infantil - entendida como ferramenta para a auto-proteção e a promoção das crianças como sujeitos plenos exercitando a cidadania - se materializou numa investigação em que as concepções metodológicas convencionais foram se re-construindo por meio das vozes infantis em diálogo com seus pares e com os adultos. As crianças apresentaram seus pontos de vista e as significações que atribuem ao seu entorno e a suas possibilidades e limites de participar de forma genuína nas suas principais instâncias de socialização: família, escola e comunidade. A experiência se constitui numa provocação do olhar para as identidades e as culturas das crianças que dela participaram, para suas vivências expressas por representações de ações e emoções contextualizadas no tempo e no espaço, numa tentativa de compor com elas - e ampliando para todas as crianças da instituição - uma compreensão do que significa o direito de participar, ensinado e apreendido em perspectiva social e cultural.

Using an animated pedagogical agent to interact affectively with the student

This work proposes an animated pedagogical agent that has the role of providing emotional support to the student: motivating and encouraging him, making him believe in his self-ability, and promoting a positive mood in him, which fosters learning. This careful support of the agent, its affective tactics, is expressed through emotional behaviour and encouragement messages of the lifelike character. Due to human social tendency of anthropomorphising software, we believe that a software agent can accomplish this affective role. In order to choose the adequate affective tactics, the agent should also know the student’s emotions. The proposed agent recognises the student’s emotions: joy/distress, satisfaction/disappointment, anger/gratitude, and shame, from the student’s observable behaviour, i. e. his actions in the interface of the educational system. The inference of emotions is psychologically grounded on the cognitive theory of emotions. More specifically, we use the OCC model which is based on the cognitive approach of emotion and can be computationally implemented. Due to the dynamic nature of the student’s affective information, we adopted a BDI approach to implement the affective user model and the affective diagnosis. Besides, in our work we profit from the reasoning capacity of the BDI approach in order for the agent to deduce the student’s appraisal, which allows it to infer the student’s emotions. As a case study, the proposed agent is implemented as the Mediating Agent of MACES: an educational collaborative environment modelled as a multi-agent system and pedagogically based on the sociocultural theory of Vygotsky.

Um olhar crítico sobre a concessão urbanística em São Paulo: formulação pelo executivo, audiências públicas e regulamentação pelo legislativo

A temática urbana no Brasil foi legitimada pela Constituição Federal em 1988 e pela Lei Federal do Estatuto da Cidade, em 2001. Depois disso, as formulações das legislações municipais, em relação a planos diretores participativos e à regulamentação de instrumentos urbanísticos específicos, têm sido acompanhadas com a promessa de um enfrentamento das desigualdades que integram o cenário urbano brasileiro. Esta dissertação pretende analisar, dentro do contexto supracitado, o processo de formulação e regulamentação do instrumento de intervenção urbana denominado “concessão urbanística”, considerando três momentos distintos. Primeiro: sua origem no Executivo durante a gestão Marta Suplicy (PT, 2001-2004) e sua inserção no Plano Diretor Estratégico de São Paulo (2002-2012). Segundo: a estratégia das gestões José Serra (PSDB, 2005-2006) e Gilberto Kassab (DEM, 2006-2008/2009-atual) de promover a “revitalização” do centro de São Paulo, por meio do projeto Nova Luz, utilizando a concessão urbanística. Terceiro: desde o período das discussões realizadas pela Sociedade Civil quando o projeto de lei sobre a concessão urbanística (projeto de lei nº 87 de 2009) foi enviado à Câmara de Vereadores até o de sua regulamentação pelo Legislativo (Lei Municipal nº 14.917 de 2009). Ao investigar esse processo, a dissertação pretende contribuir para a análise sobre a inclusão da concessão urbanística na agenda pública governamental, considerando as estratégias de atores da Sociedade Civil para influenciar as ações do Governo Municipal. O objetivo é alcançar uma melhor compreensão das limitações na produção de políticas públicas urbanas no contexto democrático pós-Constituição de 1988 e pós-Estatuto da Cidade de 2001.

A agenda das metas e indicadores educacionais: disseminação, atores e desafios

Nos últimos vinte anos vem acontecendo, em âmbito mundial, uma mudança na compreensão do conceito de direito humano à educação. Tradicionalmente esse entendimento envolvia basicamente o acesso aos níveis obrigatórios de escolarização. Hoje, é crescente o consenso de que não só o acesso é fundamental, mas também a qualidade do aprendizado de cada criança e jovem. Assim sendo, as metas e indicadores, que permitem que se quantifique a trajetória e as expectativas de melhorias na educação, ganharam uma dimensão central nos esforços de acompanhamento do cumprimento do direito à educação em todo o mundo. Assim, a presente dissertação tem por objetivo analisar como os atores sociais e governamentais na América Latina como um todo e no Brasil especificamente têm lidado com o uso de metas e indicadores educacionais, enquanto elemento relevante para monitorar o cumprimento do direito humano à educação.

Relativização da coisa julgada nas ações declaratórias de paternidade

O presente trabalho objetiva apresentar à problemática envolvendo a existência de dois direitos fundamentais constitucionalmente garantidos (direito à filiação e a coisa julgada) que, devido ao surgimento de uma técnica científica, o exame de DNA, passouse a refletir qual direito deve prevalecer diante do outro e de uma possível relativização da coisa julgada material. Para tanto se faz necessário a análise dos princípios constitucionais envolvidos na relação, o princípio da segurança jurídica e, por outro lado, o princípio da dignidade da pessoa humana. Trata-se de um movimento que envolve uma ampla discussão doutrinária, bem como a jurisprudência competente, que serão devidamente apresentados.

Courts as healthcare policy-makers: the problem, the responses to the problem and problems in the responses

This article starts by analysing healthcare litigation in Brazil by means of a literature review of articles that contribute with empirical findings on this phenomenon. Based on this review, I argue that health care litigation in Brazil makes the public health system less fair and rational. In the second part of this article, I discuss the three most overarching responses to control the level of litigation and its impact on the public health system: (i) the public hearing held by the Supreme Federal Court and the criteria the court established thereafter; (ii) the recommendations by the National Council of Justice aimed at building courts’ institutional capacity; and (iii) the enactment of the Federal Law 12.401/11, which created a new health technology assessment system. I argue that latter is the best response because it keeps the substantive decisions on the allocation of healthcare resources in the institution that is in the best position to make them. Moreover, this legislation will make the decisions about provision of health treatments more explicit, making easier for courts to control the procedure and the reasons for these decisions.

O princípio da publicidade e a participação na administração pública

O presente trabalho investiga a possibilidade de aumentar o espectro de participação política na Administração, pela consideração de que o Estado brasileiro tem fins, objetivos a realizar e é uma democracia do tipo “procedimental-deliberativa”, em que o povo deve participar das decisões que afetem sua vida. Além disso, a realização do interesse geral só tem a ganhar em eficácia se as decisões estatais escaparem, o mais possível, da lógica tecnocrática do “segredo administrativo”, porque, graças à participação dos interessados, pelo conhecimento dos dados concretos e dos fatores humanos e técnicos que condicionam uma decisão, estes podem trazer algum elemento que a modifique, obrigando a Administração a explicar os motivos de sua ação, facilitando, assim, a execução. Por isso, estuda-se, tanto o significado do princípio democrático quanto do princípio da publicidade, as formas possíveis de participação dos cidadãos na Administração e as concretizações da publicidade administrativa em direito de saber, direito de controle e direito de participar do processo administrativo.

A justiciabilidade dos direitos sociais no sistema interamericano: desafios e perspectivas

O presente trabalho sopesa a justiciabilidade dos direitos sociais no Sistema Interamericano. Para que tal análise pudesse ser realizada, em primeiro lugar, foi necessária a compreensão do que sejam direitos sociais (principalmente direito à saúde) e como derivam dos direitos fundamentais. Essa foi a melhor maneira de introduzir o tema para que houvesse real compreensão do motivo pelo qual seria complicada a existência de decisões que se referissem à violação de direitos sociais. O trabalho se desenvolve de forma a apresentar o Sistema Interamericano, suas formas de buscar proteger os direitos sociais e também de garantir sua manutenção. Por fim, o trabalho ainda apresenta conceitos como reserva do possível, soberania nacional e teoria do custo dos direitos como sendo obstáculos para a existência de decisões que privilegiam os direitos sociais. A conclusão da presente pesquisa, ainda não que fechada por conta de seu dinamismo, constatou que os obstáculos apresentados pela maioria da doutrina, em verdade, não serviriam de motivo para a não observância dos direitos sociais nas fundamentações das decisões do Sistema Interamericano, restando somente a possibilidade de um não desejo de intromissão em política pública interna.

A efetividade das decisões da corte interamericana de direitos humanos em relação ao direito à propriedade coletiva de comunidades indígenas e tribais

O presente trabalho analisará o cumprimento das decisões da Corte Interamericana de Direitos Humanos sobre o direito à propriedade coletiva de comunidades indígenas e tribais. Para isto será caracterizado em primeiro lugar o direito à propriedade coletiva no Sistema Intermaericano de Direitos Humanos. Em seguida serão analisadas as sentenças, abordado os fatos de cada caso e as medidas determinadas pela Corte. Os relatórios de monitoramento do cumprimento das decisões serão analisados, determinando quais medidas estabelecidas pela Corte foram cumpridas para que seja discutida a eficácia das decisões da Corte Interamericana de Direitos Humanos sobre este direito.

Net Neutrality Compendium: Human Rights, Free Competition and the Future of the Internet

The ways in which Internet traffic is managed have direct consequences on Internet users’ rights as well as on their capability to compete on a level playing field. Network neutrality mandates to treat Internet traffic in a non-discriminatory fashion in order to maximise end users’ freedom and safeguard an open Internet. This book is the result of a collective work aimed at providing deeper insight into what is network neutrality, how does it relates to human rights and free competition and how to properly frame this key issue through sustainable policies and regulations. The Net Neutrality Compendium stems from three years of discussions nurtured by the members of the Dynamic Coalition on Network Neutrality (DCNN), an open and multistakeholder group, established under the aegis of the United Nations Internet Governance Forum (IGF).