Formulation of Pseudomonas chlororaphis strains for improved shelf life

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Rhamnolipids Production by a Pseudomonas eruginosa LBI Mutant: Solutions and Homologs Characterization

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos da injeção de 3 amino 1,2,4 triazole (ATZ), inibidor da catalase, na área septal medial na ingestão de água e na excreção renal de água e eletrólitos induzidos pela estimulação colinérgica também da área septal medial

A área septal medial (ASM), situada no prosencéfalo, está envolvida na regulação cardiovascular e no controle do balanço hidroeletrolítico. Esta área é rica em receptores colinérgicos e a ativação dos mesmos induz ingestão de água, natriurese e anti-diurese. Existem evidências experimentais de que as espécies reativas de oxigênio possam participar do controle de respostas fisiológicas. Resultados recentes de nosso laboratório demonstraram que uma espécie reativa de oxigênio, o peróxido de hidrogênio (H2O2), injetada na ASM reduz a ingestão de água induzida por carbacol (agonista colinérgico) também injetado na ASM. No presente projeto propomos estudar os efeitos do aumento da produção endógena de H2O2 na ASM nos efeitos dipsogênico, natriurético e anti-diurético do carbacol injetado na ASM. O inibidor da catalase, 3 amino 1,2,4 triazole (ATZ) será injetado na ASM para aumentar os níveis endógenos de H2O2

Produção e aplicação de ramnolipídios produzidos por Pseudomonas aeruginosa LBI 2A1

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Avaliação do efeito do tratamento com surfactante químico e Pseudomonas aeruginosa LBI na toxicidade de solo contaminado com óleo lubrificante usado

Petroleum and its subproducts are considered a treat for the environmental quality because of the many environmental accidents that may occur during exploitation, transport and storage. A common remediation technique used in the contaminated areas is based on the use of surfactants, mainly the chemical ones, because they have low production costs. In the other hand, some microorganisms have indicate capacities of producing surfactants that emulsify substances and as result, offer a bigger contact surface for the microbiota degradation. This biossurfactants stand out in comparison with the chemical surfactants because they present lower micelar concentration values, are more tolerant for temperature and pH variation, because they are biodegradable, have low toxicity, higher emulsification and hydrocarbon solubilization index. In this way, after the surfactant application, a toxicity evaluation have to be made to identify the treatment effects. In soil, the activity of some microbial enzymes can show the environmental behavior of the contaminant under different treatment conditions. Dehydrogenase is one example of those enzymes that can demonstrate indirectly the effect of the pollutant on the soil microorganisms. The aim of this paper was to evaluate the toxicity after the addition of a surfactant and/or Pseudomonas aeruginosa LBI in soil contaminated by a mineral automotive lubricant. The previous mentioned bacteria are a potential biossurfactant (rhamnolipid) producer. In order to evaluate the toxicity, the dehydrogenase test was run. In this test, trifeniltetrazolium compound (TTC) after utilized as an electron acceptor, turns into trifenil formazan (TPF), that can be indirectly quantified using the absorbance measured by the spectrophotometer UV-visible. In this way, it was possible to quantify the dehydrogenase activity from the contaminated soil samples... (Complete abstract click electronic access below)

Síntese e estudo da diapocinina como um inibidor da NADPH Oxidase em neutrófilos e células mononucleares de sangue periférico

Apocynin, a methoxy-catechol originally extracted from the root of Picrorhiza kurroa, has been used as an inhibitor of the NADPH oxidase complex in phagocytic and nonphagocytic cells. Its mechanism of inhibition is linked to their prior activation through the action of peroxidases leading to oxidation of the dimeric product, diapocynin. In this study, dipocinina was synthesized and investigated its effect as an inhibitor of activation NADPH oxidase in neutrophils (PMN) and peripheral blood mononuclear cells (PBMC). The synthesis of diapocinina was performed by oxidation of apocinina by potassium persulphate in the midst of water for 5 minutes at room temperature. The precipitate was filtered and washed with water and methanol. Diapocinina was characterized by mass spectrometry. PMN and PBMC were obtained from peripheral blood of healthy donors and purified for gelatin sedimentation, or centrifugation with Histopaque ®, the red cells were lysed with ice water or ammonium chloride. Diapocinina or apocinina were incubated with opsonized zymosan, activation of PMNs and release of superoxide anion, these monitored by chemiluminescent assay dependent lucigenina. We found that diapocinina inhibitor was no better than the apocinina in PMN. However, diapocinina was more efficient than apocinina as an inhibitor of NADPH oxidase in PBMC. In conclusion, whereas PBMC are relatively poor compared with peroxidases PMN, our results are consistent with the need for oxidation apocinina for its effect as an inhibitor of NADPH oxidase

Caracterização de Bacteriófagos Infectando Isolados Clínicos de Pseudomonas aeruginosa Armazenados em uma Coleção de Cultura

To isolate, to concentrate and to purify bacteriophages from isolates of P. aeruginosa; To observe the capacity of bacteriophages to infect isolates of P. aeruginosa susceptible and multiresitant to antimicrobial; To caractherize bacteriphages by electronic microscopy techniques. 10 isolates of Pseudomonas aeruginosa from LEMC culture collection were submitted to the experiments of ideal temperature for the lyse region appearance in the MaConkey culture plate and 2 extraction methods for the concentration of the phages, clorophorm (Silankorva) and filtration plus centrifugation (Bergan). Three infected clinical isolates of multiresistant P. aeruginosa an one susceptible isolate ( PA01) were evaluated by 3 transmission electron microscopy techniques to caractherize phages morphologically (“on grid”, “on drop” and direct extraction from the lyse region of the culture plate). The ideal temperature to obtain lyses region was 37°C. The stock solutions, obtained through the methodologies of Sillankorva and Bergan, had satisfactory results in infecting the multiresistant isolate and the negative control. Among the 3 techniques of electronic microscopy tested the direct from the lyse plate was the best to obtain the micrography of the phages

Apocinina versus diapocinina como inibidor da produção de peróxido de hidrogênio e ácido hipocloroso por neutrófilos ativados

Apocynin has been used as an efficient inhibitor of the multi-enzymatic complex NADPH oxidase in many experimental models involving phagocytic and nonphagocytic cells. The mechanism of inhibition has been linked with the previous activation of apocynin through the action of cellular peroxidases leading to the formation of a dimeric oxidation product, diapocynin. In this study we compared apocynin with pure diapocynin regarding their effects as scavenger of hydrogen peroxide and hypochlorous generated by glucose/glucose oxidase and myeloperoxidase respectively, and as inhibitors of the production of hydrogen peroxide and hypochlorous acid by activated neutrophils. The production of hydrogen peroxide was measured by the oxidation of the fluorescent substance Amplex Red and the production of hypochlorous acid by was measured as taurine-chloramine derivative using the chromogenic substrate 3,3’,5,5’- tetramethylbenzidine (TMB). Neutrophils (1 x106 cells/mL) were pre-incubated in PBS buffer supplemented with 1 mM calcium chloride, 0.5 mM magnesium chloride, 1 mg/mL glucose and 5 mM taurine in the presence or absence of inhibitors. The reactions were triggered by adding the soluble stimulus Forbol Miristate Acetate PMA or zymosan and incubated by additional 30 minutes. We found that pure diapocynin was not better than apocynin regarding its scavenger and inhibitory properties. These results suggest that the formation of diapocynin is not essential for the action of apocynin as inhibitor of NADPH oxidase activation

Avaliação da atividade antiproliferativa dos extratos de Croton urucurana Baillon

O termo câncer refere-se a um conjunto de doenças que atingem e matam milhões de pessoas em todo o mundo. Esta doença é caracterizada pela proliferação descontrolada de células que não respondem mais aos estímulos externos e internos que controlam a proliferação, diferenciação e morte celular. O aumento da expectativa de vida da população é um dos fatores que contribuem para a crescente incidência de câncer no mundo já que o desenvolvimento desta doença está relacionado com o envelhecimento do organismo. O câncer é a segunda maior causa de morte na população mundial e diante de tal índice, fica clara a necessidade de desenvolvimento de novos quimioterápicos. Cerca de 60% das drogas anticâncer são derivadas de produtos naturais, demonstrando assim o grande potencial destes produtos no desenvolvimento de novas drogas anticâncer. Este projeto teve como objetivo avaliar a atividade anticâncer dos extratos brutos e frações obtidas da espécie vegetal Croton urucurana Bailon. Os extratos brutos diclorometânico (EBD) e etanólico (EBE) foram avaliados em ensaio de citotoxicidade in vitro em cultura de células tumorais humanas. Os dois extratos apresentaram atividade in vitro, porém somente o EBD foi submetido ao processo cromatográfico de fracionamento, sendo as frações obtidas deste processo submetidas ao teste antiproliferativo in vitro. O EBD também foi utilizado para avaliar sua atividade em modelo de tumor sólido de Ehrlich. Neste teste, esse extrato apresentou inibição do crescimento tumoral apenas com a menor dose. Como o EBE também apresentou atividade antiproliferativa in vitro, é importante dar continuidade aos estudos com este extrato, com o objetivo de avaliar sua atividade em modelos experimentais in vivo

Estudo dos micronutrientes na produção de ramnolipídios por mutante de Pseudomonas aeruginosa LBI

Os biossurfactantes apresentam inúmeras vantagens, como baixa toxicidade, biodegradabilidade e alta estabilidade, mas não são amplamente utilizados devido ao custo de produção. A utilização de substratos baratos, linhagens mutantes que associados à otimização das condições de cultivo pode levar a uma redução nos custos, possibilitando assim a substituição dos surfactantes sintéticos pelos biológicos. Uma maneira empregada para maximizar a produção dos biossurfactantes é a limitação de nutrientes. Os esforços empregados nesse sentido são direcionado para as proporções carbono: nitrogênio, entretanto os efeitos dos elementos traços são pouco conhecidos. Devido a esses fatores, o presente trabalho avaliou a importância dos seguintes elementos traços: ferro, zinco, cobalto, cobre, manganês e do sal citrato de sódio dihidratado, nas fermentações realizadas utilizando o mutante de Pseudomonas aeruginosa LBI 2A1. Para tanto foram realizadas fermentações em frascos Erlenmeyer, onde se utilizou diferentes concentrações desses elementos. A influência dos mesmos na produção de ramnolipídios foi constatada, uma vez que a produção desse biotensoativo foi aumentada em mais de três vezes alterando apenas a concentração de um único elemento traço (Fe). Os experimentos realizados permitem, também, inferir a respeito das melhores concentrações desses micronutrientes para a produção de ramnolipídios

Prostaglandina E2 em cães portadores de linfoma multicêntrico submetidos ao protocolo quimioterápico de Madison-Wisconsin associado ou não a um inibidor de COX-2

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Uso de composto de poda de árvore e lodo de esgoto como substratos na formação de mudas de sangra d'água (Croton urucurana Baill.) irrigadas com três lâminas de água

Pós-graduação em Agronomia (Ciência do Solo) - FCAV

Atividade antibacteriana in vitro de extratos e substâncias isoladas de espécies de Croton frente Staphylococcus aureus causador de mastite bovina

Pós-graduação em Medicina Veterinária - FCAV

Estudo da especificidade e toxicidade do inibidor de hipusinação GC7 utilizando o modelo de Saccharomyces cerevisiae

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)