T cell receptor delta gene rearrangement and T early alpha (TEA) expression in immature alpha beta lineage thymocytes: implications for alpha beta/gamma delta lineage commitment.

Mature T cells comprise two mutually exclusive lineages expressing heterodimeric alpha beta or gamma delta antigen receptors. During development, beta, gamma, and delta genes rearrange before alpha, and mature gamma delta cells arise in the thymus prior to alpha beta cells. The mechanism underlying commitment of immature T cells to the alpha beta or gamma delta lineage is controversial. Since the delta locus is located within the alpha locus, rearrangement of alpha genes leads to deletion of delta. We have examined the rearrangement status of the delta locus immediately prior to alpha rearrangement. We find that many thymic precursors of alpha beta cells undergo VDJ delta rearrangements. Furthermore, the same cells frequently coexpress sterile T early alpha (TEA) transcripts originating 3' of C delta and 5' of the most upstream J alpha, thus implying that individual alpha beta lineage cells undergo sequential VDJ delta and VJ alpha rearrangements. Finally, VDJ delta rearrangements in immature alpha beta cells appear to be random, supporting models in which alpha beta lineage commitment is determined independently of the rearrangement status at the TCR delta locus.

Toxicidade de inseticidas utilizados na cultura do tomateiro a Trichogramma pretiosum

O objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade dos inseticidas acetamipride (0,05 g L-1 de i.a.), clorfenapir (0,12 g L-1 de i.a.), imidaclopride (1,16 g L-1 de i.a.), tiaclopride (0,48 g L-1 de i.a.) e tiametoxam (0,05 g L-1 de i.a.) a Trichogramma pretiosum em diferentes fases imaturas. Ovos de Anagasta kuehniella foram aderidos em cartelas de cartolina azul e expostos ao parasitismo de T. pretiosum por 48 horas. Os ovos supostamente parasitados, contendo os parasitóides no período de ovo-larva e nas fases de pré-pupa e pupa, foram imersos nas caldas químicas e em água (testemunha) por cinco segundos, e mantidos em câmara climatizada a 24±1ºC, UR de 70±10% e 12 horas de fotófase. Clorfenapir e imidaclopride reduziram em 76,0% e 64,4%, respectivamente, a emergência de indivíduos da geração F1 de T. pretiosum. A razão sexual dos indivíduos da geração F1 não foi afetada por nenhum dos compostos avaliados, variando de 0,7 a 0,8. Clorfenapir reduziu em aproximadamente 50% a taxa de parasitismo de T. pretiosum da geração F1. Acetamipride e tiametoxam foram inofensivos ao parasitóide e podem ser utilizados em associação com essa espécie no controle de pragas na cultura do tomateiro.

Níveis de proteína bruta para juvenis de pirarucu

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de quatro níveis de proteína sobre o crescimento de juvenis de pirarucu, Arapaima gigas. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com de quatro tratamentos (32,7%, 39,3%, 43,4% e 48,6% de proteína bruta), três repetições cada. Foram utilizados 120 peixes, com peso médio inicial de 120,6±3,5 g, distribuídos homogeneamente em 12 tanques-rede de 1 m³ cada, contendo dez peixes por tanque. Após 45 dias, os resultados indicaram que as dietas com 48,6% de proteína resultaram em melhor ganho de peso, crescimento específico e composição corporal diferenciada. A conversão alimentar e a eficiência da ração não produziram diferenças entre os tratamentos. O nível de proteína na ração que produz máximo crescimento é de 48,6%.

Degradabilidade in situ da matéria seca, da proteína bruta e da fibra de alguns alimentos

O objetivo deste trabalho foi determinar os parâmetros cinéticos da degradação, in situ, da matéria seca, da proteína bruta e da fibra em detergente neutro das silagens de milho e de capim-elefante, do feno de capim-Tifton 85 e do farelo de soja. Foram utilizados três bovinos adultos, fistulados no rúmen, com peso vivo médio de 400 kg. Os alimentos foram pesados em sacos de náilon, incubados todos de uma vez e retirados nos tempos 0, 2, 4, 8, 16, 24, 48 e 72 horas, após a incubação dos volumosos, e 0, 2, 4, 8, 16, 24 e 48 horas, após incubação do farelo de soja. Os resíduos dos sacos foram analisados quanto ao conteúdo de matéria seca, proteína bruta e fibra em detergente neutro. A matéria seca e a proteína bruta do farelo de soja apresentaram potencial de degradação elevado, assim como a proteína bruta da silagem de milho. Destacou-se a elevada fração não-degradável da fibra em detergente neutro do feno de capim-Tifton 85 e, portanto, sua baixa degradabilidade potencial da matéria seca. O teor de fibra em detergente neutro e suas características cinéticas exercem acentuado efeito sobre a digestão dos alimentos.

Beta-lactam resistance mechanisms of methicillin-resistant Staphylococcus aureus.

In vitro and in vivo activity of amoxicillin and penicillin G alone or combined with a penicillinase inhibitor (clavulanate) were tested against five isogenic pairs of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) producing or not producing penicillinase. Loss of the penicillinase plasmid caused an eight times or greater reduction in the MICs of amoxicillin and penicillin G (from greater than or equal to 64 to 8 micrograms/ml), but not of the penicillinase-resistant drugs methicillin and cloxacillin (greater than or equal to 64 micrograms/ml). This difference in antibacterial effectiveness correlated with a more than 10 times greater penicillin-binding protein 2a affinity of amoxicillin and penicillin G than of methicillin and a greater than or equal to 90% successful amoxicillin treatment of experimental endocarditis due to penicillinase-negative MRSA compared with cloxacillin, which was totally ineffective (P less than .001). Amoxicillin was also effective against penicillinase-producing parent MRSA, provided it was combined with clavulanate. Penicillinase-sensitive beta-lactam antibiotics plus penicillinase inhibitors might offer a rational alternative treatment for MRSA infections.

Transgenic reexpression of GLUT1 or GLUT2 in pancreatic beta cells rescues GLUT2-null mice from early death and restores normal glucose-stimulated insulin secretion.

GLUT2-null mice are hyperglycemic, hypoinsulinemic, hyperglucagonemic, and glycosuric and die within the first 3 weeks of life. Their endocrine pancreas shows a loss of first phase glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) and inverse alpha to beta cell ratio. Here we show that reexpression by transgenesis of either GLUT1 or GLUT2 in the pancreatic beta cells of these mice allowed mouse survival and breeding. The rescued mice had normal-fed glycemia but fasted hypoglycemia, glycosuria, and an elevated glucagon to insulin ratio. Glucose tolerance was, however, normal. In vivo, insulin secretion assessed following hyperglycemic clamps was normal. In vitro, islet perifusion studies revealed that first phase of insulin secretion was restored as well by GLUT1 or GLUT2, and this was accompanied by normalization of the glucose utilization rate. The ratio of pancreatic insulin to glucagon and volume densities of alpha to beta cells were, however, not corrected. These data demonstrate that 1) reexpression of GLUT1 or GLUT2 in beta cells is sufficient to rescue GLUT2-null mice from lethality, 2) GLUT1 as well as GLUT2 can restore normal GSIS, 3) restoration of GSIS does not correct the abnormal composition of the endocrine pancreas. Thus, normal GSIS does not depend on transporter affinity but on the rate of uptake at stimulatory glucose concentrations.

Dietas de baixa proteína no desempenho de frangos criados em diferentes temperaturas

O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho de frangos, entre 42 e 49 dias, alimentados com dietas de baixa proteína e criados em diferentes temperaturas. Foram utilizados 360 frangos, machos, Cobb-500, distribuídos em um delineamento inteiramente ao acaso em esquema fatorial 3x3 (temperatura ambiente de 20, 25 e 32ºC e dietas com teores de proteína bruta de 18,0, 16,5 e 15,0%), com quatro repetições de dez aves cada. As dietas com baixa proteína prejudicaram o desempenho e a eficiência de retenção de nitrogênio dos frangos criados em 32ºC. Os rendimentos de carcaça e de coxa e sobrecoxa foram maiores nas aves criadas a 32ºC. Os demais cortes e a deposição de gordura abdominal não foram alterados. O estresse por calor reduziu o teor de proteína e aumentou o de gordura na coxa e sobrecoxa, ao passo que os teores protéicos não alteraram a composição bromatológica dos cortes. A utilização de dietas com baixa proteína piora o desempenho de frangos, de 42 a 49 dias, criados em estresse por calor. No entanto, essas dietas podem ser utilizadas em frangos criados em 20 ou 25ºC, pois não alteram o desempenho, a qualidade da carcaça e diminuem a excreção de nitrogênio.

T cell receptor V beta repertoire in mice lacking endogenous mouse mammary tumor provirus.

When endogenous mouse mammary tumor virus (MMTV) superantigens (SAg) are expressed in the first weeks of life an efficient thymic deletion of T cells expressing MMTV SAg-reactive T cell receptor (TcR) V beta segments is observed. As most inbred mouse strains and wild mice contain integrated MMTV DNA, knowing the precise extent of MMTV influence on T cell development is required in order to study T cell immunobiology in the mouse. In this report, backcross breeding between BALB.D2 (Mtv-6, -7, -8 and -9) and 38CH (Mtv-) mice was carried out to obtain animals either lacking endogenous MMTV or containing a single MMTV locus, i.e. Mtv-6, -7, -8 or -9. The TcR V beta chain (TcR V beta) usage in these mice was analyzed using monoclonal antibodies specific for TcR V beta 2, V beta 3, V beta 4, V beta 5, V beta 6, V beta 7, V beta 8, V beta 11, V beta 12 and V beta 14 segments. Both Mtv-8+ mice and Mtv-9+ mice deleted TcR V beta 5+ and V beta 11+ T cells. Moreover, we also observed the deletion of TcR V beta 12+ cells by Mtv-8 and Mtv-9 products. Mtv-6+ and Mtv-7+ animals deleted TcR V beta 3+ and V beta 5+ cells, and TcR V beta 6+, V beta 7+ and V beta 8.1+ cells, respectively. Unexpectedly, TcR V beta 8.2+ cells were also deleted in some backcross mice expressing Mtv-7. TcR V beta 8.2 reactivity to Mtv-7 was shown to be brought by the 38CH strain and to result from an amino acid substitution (Asn-->Asp) in position 19 on the TcR V beta 8.2 fragment. Reactivities of BALB.D2 TcR V beta 8.2 and 38CH TcR V beta 8.2 to the exogenous infectious viruses, MMTV(SW) and MMTV(SHN), were compared. Finally, the observation of increased frequencies of TcR V beta 2+, V beta 4+ and V beta 8+ CD4+ T cell subsets in Mtv-8+ and Mtv-9+ mice, and TcR V beta 4+ CD4+ T cells in Mtv-6+ and Mtv-7+ mice, when compared with the T cell repertoire of Mtv- mice, is consistent with the possibility that MMTV products contribute to positive selection of T cells.

Toxicidade de óleos essenciais de Piper aduncum e Piper hispidinervum em Sitophilus zeamais

Óleos essenciais de Piper aduncum L. e Piper hispidinervum C.DC. (Piperaceae) foram avaliados quanto ao efeito inseticida em Sitophilus zeamais Motsch. por ação de contato, fumigação e tópica. Na determinação da DL50 e CL50, foi utilizada a análise de Probit. Médias porcentuais de mortalidade dos insetos foram comparadas por meio da análise de regressão linear e superposição das barras do erro padrão. S. zeamais foi mais suscetível ao efeito de contato do óleo de P. hispidinervum em relação ao de P. aduncum, obtendo-se CL50 de 0,51 e 2,87 mL cm- 2 de óleo, respectivamente. Mortalidade próxima a 100% foi obtida nas concentrações de 20 e 30% do óleo de P. hispidinervum. Quanto ao efeito fumigante, a susceptibilidade foi maior no óleo de P. aduncum do que no de P. hispidinervum. Houve diferença significativa entre os óleos somente nas concentrações de 0,1 e 1,0. A DL50 foi semelhante nos dois óleos essenciais por aplicação tópica. No entanto, a mortalidade foi maior com P. aduncum. Óleos essenciais de P. aduncum e P. hispidinervum possuem efeito inseticida em S. zeamais, mas as respostas dependem da concentração e do método de exposição a que o inseto seja submetido.

Degradabilidade ruminal da matéria seca, da fração fibrosa e da proteína bruta de forrageiras

O objetivo deste trabalho foi avaliar a degradabilidade ruminal da matéria seca, da fibra em detergente neutro, da fibra em detergente ácido e da proteína bruta da alfafa (Medicago sativa), aveia-preta (Avena strigosa), leucena (Leucaena leucocephala) e guandu (Cajanus cajan). Amostras de 3 g das forragens foram incubadas no rúmen de três novilhos por períodos de 0, 6, 12, 24, 36, 48 e 72 horas. As degradabilidades efetivas da matéria seca da alfafa e da aveia, para a taxa de passagem de 5% por hora, foram elevadas (acima de 60%). A leucena e o guandu apresentaram valores inferiores, 50,9 e 56,0%, respectivamente. A partir de 24 horas de incubação, a aveia se destacou com maior desaparecimento da fibra em detergente neutro e da fibra em detergente ácido, e ainda apresentou as mais elevadas taxas de degradação efetiva destas frações. A aveia foi a forragem que apresentou maior degradabilidade da matéria seca, da fibra em detergente neutro, da fibra em detergente ácido e da proteína bruta no rúmen. O guandu, entretanto, foi a forragem com as piores taxas de degradação.

Caracterização bioquímica de linhagens de soja com alto teor de proteína

O objetivo deste trabalho foi caracterizar bioquimicamente duas isolinhas de soja com alto teor de proteína. O aumento do teor de proteína nas isolinhas foi acompanhado por redução no teor de óleo e de carboidratos totais. Em relação à composição aminoacídica, o aumento do teor de proteína promoveu acréscimo em todos os aminoácidos, exceto glicina, alanina, metionina, cisteína e tirosina, mantendo a relação enxofre/nitrogênio. A quantificação dos polipeptídios mostrou que o aumento do teor de proteína manteve inalterado o teor das proteínas 7S, promoveu aumento no teor das proteínas 11S e, conseqüentemente, da relação 11S/7S. Pode haver melhoria na qualidade do farelo de soja das isolinhas, uma vez que as proteínas 11S têm melhor qualidade nutricional do que as proteínas 7S.