Comparison of an ELISA and an LC/MS/MS method for measuring tacrolimus concentrations and making dosage decisions in transplant recipients

This study compared an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to a liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) technique for measurement of tacrolimus concentrations in adult kidney and liver transplant recipients, and investigated how assay choice influenced pharmacokinetic parameter estimates and drug dosage decisions. Tacrolimus concentrations measured by both ELISA and LC/MS/MS from 29 kidney (n = 98 samples) and 27 liver (n = 97 samples) transplant recipients were used to evaluate the performance of these methods in the clinical setting. Tacrolimus concentrations measured by the two techniques were compared via regression analysis. Population pharmacokinetic models were developed independently using ELISA and LC/MS/MS data from 76 kidney recipients. Derived kinetic parameters were used to formulate typical dosing regimens for concentration targeting. Dosage recommendations for the two assays were compared. The relation between LC/MS/MS and ELISA measurements was best described by the regression equation ELISA = 1.02 . (LC/MS/MS) + 0.14 in kidney recipients, and ELISA = 1.12 . (LC/MS/MS) - 0.87 in liver recipients. ELISA displayed less accuracy than LC/MS/MS at lower tacrolimus concentrations. Population pharmacokinetic models based on ELISA and LC/MS/MS data were similar with residual random errors of 4.1 ng/mL and 3.7 ng/mL, respectively. Assay choice gave rise to dosage prediction differences ranging from 0% to 30%. ELISA measurements of tacrolimus are not automatically interchangeable with LC/MS/MS values. Assay differences were greatest in adult liver recipients, probably reflecting periods of liver dysfunction and impaired biliary secretion of metabolites. While the majority of data collected in this study suggested assay differences in adult kidney recipients were minimal, findings of ELISA dosage underpredictions of up to 25% in the long term must be investigated further.

4,6,8,10,16-penta- and 4,6,8,10,16,18-hexamethyldocosanes from the cane beetle Antitrogus parvulus - Cuticular hydrocarbons with unprecedented structure and stereochemistry

[GRAPHICS] The major cuticular hydrocarbons from the cane beetle species Antitrogus parvulus were deduced to be 4,6,8,10,16,18-hexa- and 4,6,8,10,16-pentamethyldocosanes 2 and 3, respectively. Isomers of 2,4,6,8-tetramethylundecanal 27, 36, and 37, derived from 2,4,6-trimethylphenol, were coupled with the phosphoranes 28 and 29 to furnish alkenes and, by reduction, diastereomers of 2 and 3. Chromatographic and spectroscopic comparisons confirmed 2 as either 6a or 6b and 3 as either 34a or 34b.

GLUT4 recycles via a trans-Golgi network (TGN) subdomain enriched in Syntaxins 6 and 16 but not TGN38: Involvement of an acidic targeting motif

Insulin stimulates glucose transport in fat and muscle cells by triggering exocytosis of the glucose transporter GLUT4. To define the intracellular trafficking of GLUT4, we have studied the internalization of an epitope-tagged version of GLUT4 from the cell surface. GLUT4 rapidly traversed the endosomal system en route to a perinuclear location. This perinuclear GLUT4 compartment did not colocalize with endosomal markers (endosomal antigen I protein, transferrin) or TGN38, but showed significant overlap with the TGN target (t)-soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors (SNAREs) Syntaxins 6 and 16. These results were confirmed by vesicle immunoisolation. Consistent with a role for Syntaxins 6 and 16 in GLUT4 trafficking we found that their expression was up-regulated significantly during adipocyte differentiation and insulin stimulated their movement to the cell surface. GLUT4 trafficking between endosomes and trans-Golgi network was regulated via an acidic targeting motif in the carboxy terminus of GLUT4, because a mutant lacking this motif was retained in endosomes. We conclude that GLUT4 is rapidly transported from the cell surface to a subdomain of the trans-Golgi network that is enriched in the t-SNAREs Syntaxins 6 and 16 and that an acidic targeting motif in the C-terminal tail of GLUT4 plays an important role in this process.

Chapter 16: Prophylactic Human Papillomavirus Vaccines

Candidate prophylactic vaccines based on papillomavirus L1 virus-like particles (VLPs) are currently in human clinical trials. The main long-term goal of the vaccine is to reduce the incidence of cervical cancer and its precursors. In animal papillomavirus models, systemic immunization with L1 VLPs can induce high titers of neutralizing antibodies that confer protection against high-dose experimental papillomavirus challenge. In humans, systemic vaccination with L1 VLPs has been well tolerated and induced high serum antibody titers (at least 40 times higher than titers seen following natural infection). A recent proof of principle HPV16 L1 VLP efficacy trial has shown excellent protection against persistent HPV16 infection and associated cytological abnormalities. Large scale efficacy trials of L1 VLPs from HPV16 and 18 (the HPV types found most frequently in cervical cancer), with or without HPV6 and 11 (the HPV types responsible for most genital warts), are planned. If the results of these large trials support the encouraging results of the early trials, they should lead to a commercial prophylactic HPV vaccine. Implementation issues may include how to make the vaccine available in the developing world, where the majority of cervical cancer cases occur, the appropriate age of vaccination, and the role of male vaccination. Because a VLP vaccine is likely to provide type-specific protection, increasing the number of cancer-associated HPV types in the vaccine is a likely approach to broadening the protection to additional types. There will probably also be efforts to develop alternative vaccine formulations better suited to implementation in developing countries as well as attempts to develop vaccines with a therapeutic activity against established HPV infection because a combined prophylactic/therapeutic vaccine may be expected to have an even greater impact than a purely prophylactic vaccine on HPV induced disease.

Identification of slow and fast-acting toxins in a highly ciguatoxic barracuda (Sphyraena barracuda) by HPLC/MS and radiolabelled ligand binding

A barracuda implicated in ciguatera fish poisoning in Guadeloupe was estimated to have an overall flesh toxicity of 15 MUg/g using mouse bioassay. A lipid soluble extract was separated into two toxic fractions, FrA and FrB, on a LH20 Sephadex column eluted with dichloromethane/methanol (1:1). When intraperitoneal injected into mice, FrA provoked symptoms characteristic of slow-acting ciguatoxins, whereas FrB produced symptoms indicative of fast-acting toxins (FAT). High performance liquid chromatography/mass spectrometry/radio-ligand binding (HPLC/MS/RLB) analysis confirmed the two fractions were distinct, because only a weak overlap of some compounds was observed. HPLC/MS/RLB analysis revealed C-CTX-1 as the potent toxin present in FrA, and two coeluting active compounds at m/z 809.43 and 857.42 in FrB, all displaying the characteristic pattern of ion formation for hydroxy-polyethers. Other C-CTX congeners and putative hydroxy-polyether-like compounds were detected in both fractions, however, the RLB found them inactive. C-CTX-1 accounted for >90% of total toxicity in this barracuda and was confirmed to be a competitive inhibitor of brevetoxin binding to voltage-sensitive sodium channels (VSSCs) with a potency two-times lower than P-CTX-1. However, FAT active on VSSCs and

A????es premiadas no 16?? Concurso Inova????o na Gest??o P??blica Federal 2011

Este livro re??ne as dez iniciativas premiadas no 16?? Concurso Inova????o na Gest??o P??blica Federal. Nesta 16?? edi????o, o Concurso conta com os apoios da Embaixada da Fran??a, da Embaixada da Noruega, da Ag??ncia de Coopera????o Internacional Alem?? (GIZ) e da Ag??ncia Brasileira de Coopera????o (ABC), que premiam os primeiros colocados com visitas t??cnicas. A ENAP tamb??m premia os vencedores com vagas nos cursos de Especializa????o em Gest??o P??blica e Desenvolvimento Gerencial , publica????es da Escola, livro contendo os relatos das iniciativas, certificado, divulga????o no Banco de Solu????es do s??tio do Concurso, assinatura de um ano da Revista do Servi??o P??blico (RSP) e Selo Inova????o

Texto para discuss??o 16: novos padr??es gerenciais no setor p??blico: medidas do governo americano orientadas para o desempenho e resultados

O estudo realizado envolve um benchmarking de novos padr??es gerenciais adotados pelo governo dos Estados Unidos, notadamente no que se refere a formas inovadoras de gest??o, de controle de gest??o, de gest??o or??ament??ria e de avalia????o institucional. Para a realiza????o do presente trabalho, os autores valeram-se de consulta bibliogr??fica a livros e documentos produzidos nos ??ltimos cinco anos, cabendo destacar, dentre os diversos documentos citados nas refer??ncias bibliogr??ficas e notas, os estudos produzidos pela National Academy of Public Administration ??? NAPA e pelo General Accounting Office ??? GAO sobre o processo de ???reinven????o do governo??? americano. Integram, tamb??m, o presente trabalho informa????es obtidas atrav??s de participa????o em semin??rios e palestras conduzidas pela NAPA e pela Virginia Polytechnic Institute and State University, no per??odo de 03 a 14 de junho de 1996, no ??mbito de projeto de Avalia????o de Programas P??blicos Orientada para Resultados, desenvolvido pela Escola Brasileira de Administra????o P??blica da Funda????o Get??lio Vargas (EBAP/FGV) para o Tribunal de Contas da Uni??o (TCU) do Brasil. Tais palestras inclu??ram, dentre outros assuntos, a vis??o geral da avalia????o no ??mbito do governo federal americano; o papel do Office of Management and Budget (OMB) na avalia????o e mensura????o de desempenho; a evolu????o da auditoria interna e externa, bem como a avalia????o de programas efetuada pela Rand Corporation. Finalmente, ainda no ??mbito do programa referido, foram utilizados materiais e informa????es coletadas a partir de entrevistas efetuadas em organiza????es governamentais como, dentre outras, o U.S. Department of Health and Human Services, e em organiza????es particulares que realizam avalia????o de programas, por for??a de contratos de presta????o de servi??os, como o Urban Institute, a Mathematic Policy Research e a Maximus, todas situadas em Washington D.C

Programa do curso de forma????o para os cargos de especialista em pol??ticas p??blicas e gest??o governamental: 16?? Edi????o - 2011

O Curso de Forma????o dos Especialistas em Pol??ticas P??blicas e Gest??o Governamental (EPPGGs) constitui a segunda etapa do Concurso P??blico para ingresso no cargo e tem como objetivo selecionar e preparar quadros de alta ger??ncia para o ingresso na Administra????o P??blica Federal

Cat??logo de Cursos Enap - 1993: Programa Nacional de Treinamento do Servidor P??blico - PNTS

Esta programa????o teve como fulcro o Programa Nacional de Treinamento do Servidor P??blico (PNTS), cujo decreto de cria????o estabelece que ele deve promover a????es voltadas para a qualifica????o e a profissionaliza????o dos servidores da administra????o direta, aut??rquica e fundacional. Ela se reveste de car??ter estrat??gico, como instrumento de mobiliza????o dos servidores, no esfor??o de eleva????o dos n??veis de efici??ncia e efic??cia da a????o governamental. A programa????o ora apresentada resultou de levantamentos realizados pela Subsecretaria de Recursos Humanos da Secretaria da Administra????o Federal e a ENAP, em conjunto com os ??rg??os de recursos humanos do SIPEC

SargSUS: sistema de apoio ?? constru????o do relat??rio anual de gest??o do SUS

O Sistema de Apoio ?? Elabora????o do Relat??rio Anual de Gest??o do SUS (SargSUS) consiste em uma ferramenta eletr??nica desenvolvida em meados de 2009, pela Secretaria de Gest??o Estrat??gica e Participativa do Minist??rio da Sa??de (SGEP/MS). A natureza inovadora do sistema SargSUS est?? na possibilidade concreta que sua utiliza????o tem de promover a integra????o das a????es dos diversos setores das secretarias de sa??de, quando da elabora????o do Relat??rio de Gest??o, integra????o das informa????es existentes em bases de dados distintas, da indu????o do processo de articula????o dos instrumentos de planejamento, qualificando a tomada de decis??o. Outro aspecto a ser destacado diz respeito ao apoio ?? participa????o e ao controle social e subs??dio ao trabalho, interno e externo, de controle e auditoria, fazendo com que, em 2013, 100% dos gestores do SUS adotassem a ferramenta para a presta????o de contas junto aos conselhos de sa??de

Resolu????o n?? 7, de 16 de junho de 2014: disciplina os procedimentos a serem adotados para a contrata????o de pessoas f??sicas prestadoras de servi??os t??cnicos profissionais especializados em car??ter eventual, e para a concess??o da Gratifica????o por Encargo de Curso ou Concurso (GECC)

Os procedimentos para a contrata????o de pessoas f??sicas prestadoras de servi??os t??cnicos profissionais especializados em car??ter eventual e para a concess??o da GECC est??o estabelecidos na Resolu????o n?? 7, de 16 de junho de 2014.

Decreto n?? 85.524, de 16 de dezembro de 1980: aprova o Estatuto da Funda????o Centro de Forma????o do Servidor P??blico - FUNCEP

Fica aprovado o Estatuto da Funda????o Centro de Forma????o do Servidor P??blico - FUNCEP, que com este baixa, assinado pelo Diretor-Geral do Departamento Administrativo do Servi??o P??blico - DASP.

Remifentanil versus dexmedetomidina como coadjuvantes de técnica anestésica padronizada em pacientes com obesidade mórbida

Justificativa e objetivos: comparou-se a ação de duas drogas coadjuvantes da anestesia, remifentanil e dexmedetomidina, na recuperação anestésica e na evolução do pH e da PaCO2, em pacientes com obesidade mórbida que foram submetidos à cirurgia de Capella. Método: o estudo foi aleatório, prospectivo e duplamente encoberto. Noventa e dois pacientes foram designados a um de dois grupos e submetidos à técnica anestésica (geral/peridural) padronizada. O grupo Remifentanil (Grupo R) e o da Dexmedetomidina (Grupo D) receberam infusão contínua por via venosa destas drogas (0,1 µg.kg-1.min-1 e 0,5 µg.kg-1.h-1 peso ideal mais 30% para ambas) logo após a intubação traqueal. Os pacientes foram monitorizados com pressão arterial média invasiva, oximetria de pulso, EEG bispectral (BIS), capnografia, estimulador de nervo periférico e ECG. Foram avaliados: 1) diferentes tempos de recuperação anestésica (abertura dos olhos, reinicio da respiração espontânea, tempo de extubação traqueal, tempo para de alta da sala de recuperação pós-anestésica e hospitalar), 2) a evolução da gasometria arterial, e 3) analgesia pós-operatória. Resultados: oitenta e oito pacientes foram avaliados. Os pacientes do grupo R apresentaram abertura ocular precoce (9,49 ± 5,61 min versus 18,25 ± 10,24 min, p < 0,0001), menor tempo para reiniciar a ventilação espontânea (9,78 ± 5,80 min versus 16,58 ± 6,07 min, p < 0,0001), e menor tempo para a extubação traqueal (17,93 ± 10,39 min versus 27,53 ± 13,39 min, p < 0,0001). Não houve diferença quanto ao tempo para alta anestésica (105,18 ± 50,82 min versus 118,69 ± 56,18 min) e para alta hospitalar (51,13 ± 6,37 horas versus 52,50 ± 7,09 horas). Os dois grupos apresentaram diminuição dos valores de pH e da PaO2 imediatamente após a extubação traqueal comparados com valores pré-operatórios, e que se manteve até a alta da SRPA. O grupo D apresentou valores maiores de PaCO2 após a extubação traqueal, comparados com valores pré-operatórios no mesmo grupo (p < 0,05), divergente do Grupo R; 41% dos pacientes do Grupo R e 60% do Grupo D (p < 0,02) requisitaram medicação analgésica de resgate no primeiro dia de pós-operatório. Conclusões: na população avaliada, a associação de remifentanil em técnica anestésica padronizada resultou em recuperação anestésica mais rápida, manutenção dos valores de PaCO2 durante o período pós-operatório imediato e menor consumo de analgésicos de resgate no período pós-operatório, quando comparada à dexmedetomidina.

Identificação Química em Nível Molecular de Amostras de Maconha por ESI-FT-ICR MS

mais consumida no país, e proscrita pela Lei n° 11.343 de 23 de agosto de 2006 (chamada de “nova lei de droga”), onde todos os isômeros, sais, éteres e ésteres do ∆9-Tetrahidrocannabinol (THC), princípio ativo, foram proscritos. O método utilizado pela Polícia Civil do Estado do Espírito Santo para a identificação de cannabinóides é o teste colorimétrico, por meio de solução básica de Salt Fast Blue B, o qual apresenta resultados falsos negativos e falsos positivos. A técnica de espectrometria de massas de altíssima resolução e exatidão de massas (ESI(-)FTICR MS), permite detectar os principais cannabinóides na forma de molécula desprotonada, íon [M-H]-. Alguns íons que podem ser identificados são: [CBN - H]- de m/z 309 (CBN = cannabinol); [THC - H]- de m/z 313 (THC = tetrahidrocannabinol) e [CBD - H]- de m/z 313; [CBC - H]- de m/z 327 (CBC = cannabicromeno); [CBEA - H]- de m/z 345 (CBEA = ácido cannabielsóico); [CBNA - H]- de m/z 353 (CBNA = ácido cannabinólico); [THCA - H]- de m/z 357 (THCA = ácido tetrahidrocannabinólico); [8α, 11-Bis-hydroxy-∆9-THC-A - H]- de m/z 389); [∆9-THCA +C2H2O - H]- de m/z 357; e dímeros com m/z de 637, 653, 673, 681, 685 e 717. Foram encontrados adulterantes identificados como [M + N + H]+ : 491; [2M + N + H]+ : 819 e [3M + N + H]+ : 1147, onde M = OTHC (328Da C21H28O3) e N = Nicotina (162Da C10H14N2), além de lidocaína e cocaína. Ainda foram identificados alguns noncannabinóides como Cannflavino A e B e ácidos graxos como palmítico, oleico, linolênico e gama-linolênico nos extratos de sementes de Cannabis. Este estudo tem o objetivo de identificar o perfil químico de amostras de maconha, apreendidas pela Polícia Civil do Estado do Espírito Santo, por ESI(±)-FT-ICR MS.