901 resultados para Ultracentrifugation analytique
Resumo:
Dans cet article, on cherche la viabilité analytique du Jeu à Deux Niveaux - JDN pour examiner la situation brésilienne dans l'Organisation Mondiale du Commerce - OMC. on cherche à voir, en même temps, si le perfectionnement des institutions démocratiques brésiliennes en ce qui concerne le processus de formulation de la politique extérieure sera capable d'améliorer la réponse aux demandes des groupes d'intérêt et d'élargir la compétence technique de la diplomatie brésilienne dans les négociations commerciales internationales. on cherche aussi à savoir si ce perfectionnement peut faire monter la crédibilité et la légitimité internationale des démarches brésiliennes au sein de l'OMC, dans le sens de tourner en leur faveur les régimes internationaux. Pour cela, on analyse le contentieux des brevets pharmaceutiques mené contre les États-Unis au sein de l'OMC.
Resumo:
In bacteria, fungi, plants, and apicomplexan parasites, the aromatics compounds, such as aromatics amino acids, are synthesized through seven enzymes from the shikimate pathway, which are absent in mammals. The absence of this pathway in mammals make them potential targets for development of new therapy against infectious diseases, such as tuberculosis, which is the world's second commonest cause of death from infectious disease. The last enzyme of shikimate pathway is the chorismate synthase (CS), which is responsible for conversion of the 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate to chorismate. Here, we report the crystallographic structure of CS from Mycobacterium tuberculosis (MtCS) at 2.65 angstrom resolution. The MtCS structure is similar to other CS structures, presenting beta-alpha-beta sandwich structural topology, in which each monomer of MtCS consists of a central helical core. The MtCS can be described as a tetramer formed by a dimer of dimers. However, analytical ultracentrifugation studies suggest the MtCS is a dimer with a more asymmetric shape than observed on the crystallographic dimer and the existence of a low equilibrium between dimer and tetramer. Our results suggest that the MtCS oligomerization is concentration dependent and some conformational changes must be involved on that event. (c) 2005 Elsevier B.V. All rights reserved.
Resumo:
The 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase catalyses the sixth step of the shikimate pathway that is responsible for synthesizing aromatic compounds and is absent in mammals, which makes it a potential target for drugs development against microbial diseases. Here, we report the phosphate binding effects at the structure of the 5-enolpyruvyl shikimate-3-phosphate synthase from Mycobacterium tuberculosis. This enzyme is formed by two similar domains that close on each other induced by ligand binding, showing the occurrence of a large conformation change. We have monitored the phosphate binding effects using analytical ultracentrifugation, small angle X-ray scattering and, circular dichroism techniques. The low resolution results showed that the enzyme in the presence of phosphate clearly presented a more compact structure. Thermal-induced unfolding experiments followed by circular dichroism suggested that phosphate rigidified the enzyme. Summarizing, these data suggested that the phosphate itself is able to induce conformational change resulting in the closure movement in the M. tuberculosis 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase. (c) 2006 Elsevier B.V. All rights reserved.
Resumo:
Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de membrana sinovial caprina (MSC) infectadas com o vírus de artrite encefalite caprina (CAEV), pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose (UCCS) para utilização em ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidas à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e a especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,6% e 88,5%, respectivamente. A nova técnica, criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva e de baixo custo para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, e constitui uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes.
Resumo:
Proteins containing the classical nuclear localization sequences (NLSs) are imported into the nucleus by the importin-α/β heterodimer. Importin-α contains the NLS binding site, whereas importin-β mediates the translocation through the nuclear pore. We characterized the interactions involving importin-α during nuclear import using a combination of biophysical techniques (biosensor, crystallography, sedimentation equilibrium, electrophoresis, and circular dichroism). Importin-α is shown to exist in a monomeric autoinhibited state (association with NLSs undetectable by biosensor). Association with importin-β (stoichiometry, 1:1; K D = 1.1 × 10 -8 M) increases the affinity for NLSs; the importin-α/β complex binds representative monopartite NLS (simian virus 40 large T-antigen) and bipartite NLS (nucleoplasmin) with affinities (K D = 3.5 × 10 -8 M and 4.8 × 10 -8 M, respectively) comparable with those of a truncated importin-α lacking the autoinhibitory domain (T-antigen NLS, K D = 1.7 × 10 -8 M; nucleoplasmin NLS, K D = 1.4 × 10 -8 M). The autoinhibitory domain (as a separate peptide) binds the truncated importin-α, and the crystal structure of the complex resembles the structure of full-length importin-α. Our results support the model of regulation of nuclear import mediated by the intrasteric autoregulatory sequence of importin-α and provide a quantitative description of the binding and regulatory steps during nuclear import.
Resumo:
Inclut la bibliographie
Resumo:
Incluye Bibliografía
Resumo:
The urea effect on the giant extracellular hemoglobin of Glossoscolex paulistus (HbGp) stability was studied by analytical ultracentrifugation (AUC) and small angle X-ray scattering (SAXS). AUC data show that the sedimentation coefficient distributions curves c (S), at 1.0mol/L of urea, display a single peak at 57 S, associated to the undissociated protein. The increase in urea concentration, up to 4.0mol/L, induces the appearance of smaller species, due to oligomeric dissociation. The sedimentation coefficients and molecular masses are 9.2S and 204kDa for the dodecamer (abcd)3, 5.5S and 69kDa for the tetramer (abcd), 4.1S and 52kDa for the trimer (abc) and 2.0 S and 17kDa for the monomer d, respectively. SAXS data show initially a decrease in the I(0) values due to the oligomeric dissociation, and then, above 4.0mol/L of denaturant, for oxy-HbGp, and above 6.0mol/L for cyanomet-HbGp, an increase in the maximum dimension and gyration radius is observed, due to the unfolding process. According to AUC and SAXS data the HbGp unfolding is described by two phases: the first one, at low urea concentration, below 4.0mol/L, characterizes the oligomeric dissociation, while the second one, at higher urea concentration, is associated to the unfolding of dissociated species. Our results are complementary to a recent report based on spectroscopic observations. © 2012 Elsevier B.V.
Resumo:
The thermal denaturation and aggregation of the HbGp, in the oxy- and cyanomet-forms, was investigated by DSC, AUC, DLS, optical absorption and CD, in the pH range from 5.0 to 7.0. Oxy-HbGp has a denaturation process partially reversible and dependent on the temperature. DSC melting curve is characterized by a single peak with Tc value of 333.4±0.2K for oxy-HbGp, while two peaks with Tc values of 332.2±0.1 and 338.4±0.2K are observed for cyanomet-HbGp, at pH 7.0. In acidic pH oxy- and cyanomet-HbGp are more stable showing higher Tc values and aggregation. AUC data show that, HbGp, at pH 7.0, upon denaturation, remains undissociated at 323K, presenting oligomeric dissociation at 333 (12±3% of tetramer and 88±5% of whole HbGp) and 343K (70±5% of monomer and 30±2% of trimer). DLS data show that the lag period before aggregation is dependent on the temperature and HbGp concentration. Optical absorption and CD results show that the increase of temperature leads to the oxy-HbGp oxidation and aggregation, above 331K, in acidic pH. CD data, for HbGp, present a greater thermal stability in acid medium than at neutral pH, with similar Tc values for both oxidation forms. Our data are consistent with previous studies and represents an advance in understanding the thermal stability of oligomeric HbGp structure. © 2012 Elsevier B.V.
Resumo:
Le monde traverse un changement d’époque. Face aux déséquilibres économiques, distributifs et environnementaux du mode de développement prédominant, la communauté internationale vient d’adopter le Programme de développement durable à l’horizon 2030 et ses 17 objectifs. Le document que la Commission économique pour l’Amérique latine et les Caraïbes (CEPALC) présente aux états membres à l’occasion de sa trente-sixième session a pour but d’apporter un complément analytique à ce Programme dans la perspective structuraliste du développement et de l’optique des pays d’Amérique latine et des Caraïbes. Les propositions contenues dans ce document sont centrées sur la nécessité de promouvoir un changement structurel progressif qui favorise l’incorporation du savoir à la production, garantisse l’inclusion sociale et combatte les effets néfastes du changement climatique. Les réflexions et les propositions visant à avancer sur la voie d’un nouveau mode de développement sont axées sur la promotion de l’égalité et de la pérennité de l’environnement. La création de biens publics mondiaux et leurs équivalents à l’échelle régionale, ainsi que l’application de politiques nationales sont au coeur d’une vision structuraliste qui est appelée à évoluer vers un keynésianisme mondial et une stratégie de développement centrée sur un élan majeur pour l’environnement.
Resumo:
Dissertação que investiga e problematiza as práticas discursivas e os processos de constituição e subjetivação de sujeitos docentes envolvidos no discurso pedagógico sobre Formação de Professores no contexto do Movimento de Reestruturação Curricular do Curso de Pedagogia da UFPA, no período de 1992 a 2001. Parte das seguintes questões: Qual a proveniência do discurso pedagógico sobre formação de professores no interior do Movimento de Reestruturação Curricular do Curso de Pedagogia da Ufpa? Como este surge, para responder a que urgência histórica? Qual sua emergência? Que tipo docente, em particular, se deseja? Qual sua identidade? Que processos ou técnicas de subjetivação são postos em ação para a constituição desse particular sujeito docente? Quais técnicas de governança e práticas de si são postas em funcionamento para produzi-lo, fabricá-lo? O que se prescreve a esse docente, o que ele deve ser? Assume a pedagogia como poderosa tecnologia de subjetivação e produção de sujeitos docentes e para responder a tais questões toma a arqueogenealogia, bem como a análise enunciativa do acontecimento discursivo de perspectiva foucaultiana, como substrato e fio condutor teórico-metodológico e analítico. A análise se concentra em fontes documentais institucionais do referido movimento de reestruturação curricular e outros que se constituem como campo de presença, interrogando o discurso pedagógico, através de suas formas concretas de aparição, em sua materialidade, naquilo que produz, seus objetos discursivos, problematizando seu caráter produtivo de sujeitos. Como resultado, evidencia que a subjetividade docente no campo da pedagogia é continuamente produzida em uma cadeia entre práticas discursivas e não discursivas, e que dispositivos pedagógicos de produção de tais subjetividades, como o dispositivo de governamentalidade e o dispositivo de moralidade, se materializam em seus pressupostos teóricos, em suas proposições temáticas, prescrições didáticas, curriculares, avaliativas, enfim, em adjetivações e predicativos direcionados ao sujeito docente como objeto do discurso pedagógico.
Resumo:
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Resumo:
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Resumo:
Este artigo analisa os debates historiográficos travados em 1923 por ocasião das comemorações da adesão do Pará à Independência do Brasil. Para isso, retoma os usos, pela intelectualidade paraense da época, dos mitos políticos da Antiguidade clássica, como as Guerras Púnicas, e de uma série de conceitos veiculados internacionalmente nos anos de 1910 e 1920, em obras políticas e literárias: "paz cartaginesa" em Keynes (1919), "terra desolada" em Elliot (1922) e ainda as imagens de Cartago na obra de Flaubert (1862). Mais do que um exercício de erudição, esse repertório analítico significou um longo e atribulado processo de construção da "moderna" identidade nacional na Amazônia.
Resumo:
O presente trabalho se circunscreve no âmbito da História da infância, mas precisamente na do estado do Pará, que se caracteriza enquanto uma área ainda carente de produções acadêmicas, o que contribui para justificar a intenção e a relevância em construí-lo. A problemática do estudo se debruçou em descobrir: quais os discursos veiculados sobre a infância paraense nos jornais “A Província do Pará” e a “Folha do Norte”, no período 1900-1910? O seu objetivo geral é analisar os discursos veiculados pelos jornais “A Província do Pará” e “Folha do Norte” sobre a infância paraense no período compreendido entre 1900-1910. Já enquanto objetivos específicos têm-se: mapear os fatos mais recorrentes sobre os quais a criança se tornava assunto nos jornais paraenses do período de 1900-1910; analisar à luz da teoria bakhtiniana aspectos discursivos dos anúncios, colunas, galeria, notícias e propagandas contidos nos jornais “A Província do Pará” e “Folha do Norte”, a fim de evidenciar os discursos implícitos e explícitos relacionados à infância no período investigado; perceber, por meio dos discursos dos jornais escolhidos, aspectos inerentes à infância no que tange ao lugar da criança em relação à escola, à família e à sociedade no contexto pesquisado; e evidenciar o tratamento dispensado à infância das diferentes classes sociais a partir dos discursos veiculados pelos jornais “A Província do Pará” e “Folha do Norte”, na primeira década do século XX. A análise das peças, num total de 39, foi fundamentada na perspectiva analítico-discursiva de Mikhail Bakhtin (1997; 2004). Nas peças analisadas: anúncios, notícias, propagadas e na galeria infantil foi possível perceber que na constituição destas circulavam uma infinidade de discursos que contribuíam para mostrar o valor atribuído à infância pelos jornais “A Província do Pará” e “Folha do Norte”. A exemplo, tem-se o discurso do higienismo, da valorização do trabalho enquanto prática dignificante, regenerante e moralizante, o discurso ideológico da mulher como cuidadora, do cientificismo em detrimento do conhecimento popular, entre outros. Percebeu-se que socialmente à infância era concebida a partir da classe social na qual o sujeito estava inserido, ou seja, no caso da criança pobre, notou-se que esta era sempre tratada como um sujeito que estava “largado a própria sorte”, sem perspectivas de um futuro, tendo em vista que ela sempre vai ser tida como a “desafortunada”, a “infeliz”, “a pobre creança; já a da classe economicamente mais favorecida é sempre vista como a bela, formosa, ingênua, bem cuidada e como um ser que terá um futuro promissor.