Simple tandem DNA repeats and human genetic disease.

The human genome contains many repeated DNA sequences that vary in complexity of repeating unit from a single nucleotide to a whole gene. The repeat sequences can be widely dispersed or in simple tandem arrays. Arrays of up to 5 or 6 nt are known as simple tandem repeats, and these are widely dispersed and highly polymorphic. Members of one group of the simple tandem repeats, the trinucleotide repeats, can undergo an increase in copy number by a process of dynamic mutation. Dynamic mutations of the CCG trinucleotide give rise to one group of fragile sites on human chromosomes, the rare folate-sensitive group. One member of this group, the fragile X (FRAXA) is responsible for the most common familial form of mental retardation. Another member of the group FRAXE is responsible for a rarer mild form of mental retardation. Similar mutations of AGC repeats give rise to a number of neurological disorders. The expanded repeats are unstable between generations and somatically. The intergenerational instability gives rise to unusual patterns of inheritance--particularly anticipation, the increasing severity and/or earlier age of onset of the disorder in successive generations. Dynamic mutations have been found only in the human species, and possible reasons for this are considered. The mechanism of dynamic mutation is discussed, and a number of observations of simple tandem repeat mutation that could assist in understanding this phenomenon are commented on.

Aspectos facilitadores e dificultadores do trabalho em equipe em Unidade de Alta Densidade Tecnológica

O trabalho em equipe representa estratégia para superação da frágil articulação entre profissionais, sendo potencializado pela prática colaborativa entre agentes e gestão participativa. Entretanto, os arranjos organizacionais não favorecem a interação entre os profissionais e dificultam o trabalho em equipe. A magnitude dos agravos cardiovasculares por serviços regulados e estruturados, pautados num enfoque multiprofissional em saúde, a carência de publicações científicas sobre trabalho em equipe na atenção hospitalar, a potência do trabalho em equipe para responder às demandas reais de saúde justificam investigações a respeito do trabalho em equipe de saúde em Unidade Coronariana, particularizando a compreensão de aspectos que dificultam e facilitam esse trabalho. Assim, esta pesquisa teve como objetivo analisar o trabalho em equipe, desenvolvido em unidade hospitalar de alta densidade tecnológica, segundo a perspectiva da equipe de saúde. É um estudo descritivo, utilizando dados qualitativos e quantitativos, realizado em Unidade Coronariana de um Hospital público, de ensino, de nível terciário, referência para atendimento de alta densidade tecnológica. A população constituiu-se de profissionais da equipe multiprofissional que atuavam na referida unidade há, pelo menos, um ano, sendo excluídos aqueles que se encontravam afastados do trabalho à época da coleta dos dados e os não localizados após três tentativas para agendamento da entrevista. Utilizou-se a Técnica do Incidente Crítico, e os dados primários foram coletados por meio de entrevista semiestruturada. A análise dos dados fundamentou-se em análise de conteúdo. Participaram do estudo 45 profissionais da equipe de saúde, sendo 20 técnicos/auxiliares de enfermagem; 11 médicos; nove enfermeiros; quatro fisioterapeutas e um psicólogo. Das entrevistas, emergiram 49 situações, das quais 38 (77,6%) receberam referências negativas e 11 (22,4%), positivas; 385 comportamentos, sendo 209 (54,2%) positivos e 176 (45,8%) negativos; além de 182 consequências que receberam 131 (71,9%) referências negativas e 51 (28,1%) positivas. As referências positivas indicam aspectos que facilitam o trabalho em equipe e as negativas, aqueles que dificultam. Foram considerados facilitadores do trabalho em equipe colaborar/relacionar-se com os outros profissionais, desenvolver assistência ao paciente conforme a competência profissional, relacionamento entre agentes pautado na prática colaborativa e comunicação. Aspectos como baixa colaboração entre profissionais, gerenciamento inadequado de agentes, despreparo profissional no atendimento à parada cardiorrespiratória/emergência, divergências nas condutas terapêuticas, limitação de recursos materiais e agir de maneira descomprometida com o trabalho dificultam o trabalho em equipe. Conclui-se que, apesar do predomínio de situações e consequências negativas relativas à dinâmica do trabalho em equipe nessa Unidade Coronariana, a ênfase em comportamentos positivos, favoráveis ao trabalho em equipe, evidencia investimento e esforço para superar dificuldades, na perspectiva da potência do trabalho em equipe para atingir a finalidade do trabalho em saúde. A partir dos resultados, acredita-se que aspectos relativos à formação/capacitação profissional e à organização do serviço precisam favorecer o trabalho em equipe, estando a centralidade do processo de trabalho dessa equipe nas relações entre agentes

EIA-RIMA insuficiente como avaliação de impactos ambientais enquanto busca de sustentabilidade urbana: o caso de São Sebastião

O presente trabalho comprova que o atual instrumento EIA-RIMA - Estudo de Impacto Ambiental e seu respectivo Relatório de Impacto Ambiental, é insuficiente enquanto busca de sustentabilidade urbana no Litoral Norte do Estado de São Paulo, especificamente no município de São Sebastião. O método de analise dos EIA-RIMA sempre enfatizam os ganhos econômicos e atenuam os impactos negativos, apesar das fragilidades naturais, estruturais e restrições legais incidentes. A tese comprova que os instrumentos utilizados no âmbito do processo de licenciamento ambiental dos empreendimentos, como a ampliação do porto comercial de São Sebastião, estão pouco comprometidos com o real desenvolvimento sustentável da cidade e região. As especificidades geográficas, sobretudo as facilidades de interface do território terrestre com o marítimo, proporcionadas pelas características naturais do Canal de São Sebastião, sempre ofereceram condições privilegiadas para o abrigo de embarcações, característica decisiva na escolha do lugar como cidade portuária, vinculada aos mais importantes ciclos econômicos do país. Agora, em 2015, está prestes a entrar em um novo ciclo, principalmente com a ampliação do porto comercial, duplicação da rodovia dos Tamoios e da SP-055 e a exploração da camada pré-sal na Bacia de Santos. A região já apresenta todos os problemas de uma ocupação acelerada em um território ambientalmente frágil, localizado em estreita faixa litorânea, composta de um lado pela Serra do Mar e do outro pelo Oceano Atlântico. Se não houver um planejamento urbano e regional que considere as características e capacidade de suporte deste território, a zona costeira entrará em colapso. Saber dosar o uso de suas potencialidades sem esgotá-las será o desafio de nossa geração. Os Estudos de Impactos Ambientais precisam ser aperfeiçoados para que ações mitigadoras alcancem muito mais do que o mínimo, alinhadas a investimentos, tecnologias inovadoras, infraestruturas necessárias e obrigatórias que sejam pensadas de maneira conjunta e cumulativa nas diversas esferas do poder, com efetiva participação pública, caso contrário, o crescente interesse econômico e político tenderá à destruição irreversível do patrimônio histórico e natural deste território. O EIA está se transformando em um poderoso instrumento político de ordenamento territorial que acaba por definir critérios e parâmetros de uso e ocupação, desempenhando uma função que não lhe compete, além de aprofundar o desencontro entre uma vida urbana de qualidade e um ambiente equilibrado em nome do desenvolvimento econômico e a serviço dos interesses privados.

Reutilização de baterias automotivas como fonte alternativa de energia.

Atualmente um dos principais objetivos na área de pesquisa tecnológica é o desenvolvimento de soluções em favor do Meio Ambiente. Este trabalho tem por objetivo demonstrar a reutilização e consequentemente o aumento da vida útil de uma bateria Chumbo-Ácido, comumente instaladas em veículos automóveis, bem como beneficiar locais e usuários remotos onde o investimento na instalação de linhas de transmissão se torna inviável geográfica e economicamente, utilizando a luz solar como fonte de energia. No entanto a parte mais suscetível a falhas são as próprias baterias, justamente pela vida útil delas serem pequenas (em torno de 3 anos para a bateria automotiva) em comparação com o restante do sistema. Considerando uma unidade que já foi usada anteriormente, a possibilidade de falhas é ainda maior. A fim de diagnosticar e evitar que uma simples bateria possa prejudicar o funcionamento do sistema como um todo, o projeto considera a geração de energia elétrica por células fotovoltaicas e também contempla um sistema microcontrolado para leitura de dados utilizando o microcontrolador ATmega/Arduino, leitura de corrente por sensores de efeito hall da Allegro Systems, relés nas baterias para abertura e fechamento delas no circuito e um sistema de alerta para o usuário final de qual bateria está em falha e que precisa ser reparada e/ou trocada. Esse projeto foi montado na Ilha dos Arvoredos SP, distante da costa continental em aproximadamente 2,0km. Foram instaladas células solares e um banco de baterias, a fim de estudar o comportamento das baterias. O programa pôde diagnosticar e isolar uma das baterias que estava apresentando defeito, a fim de se evitar que a mesma viesse a prejudicar o sistema como um todo. Por conta da dificuldade de locomoção imposta pela geografia, foi escolhido o cartão SD para o armazenamento dos dados obtidos pelo Arduino. Posteriormente os dados foram compilados e analisados. A partir dos resultados apresentados podemos concluir que é possível usar baterias novas e baterias usadas em um mesmo sistema, de tal forma que se alguma das baterias apresentar uma falha o sistema por si só isolará a unidade.

Micrornas 9a, 9b, 9c And 315 Regulate Expression Of A Reporter For The Neuronal Microtubule-Associated Protein Futsch/map1b

Fragile X syndrome (FXS) is the most common form of inherited mental retardation in humans. FXS is caused by loss of the Fragile X Mental Retardation Protein (FMRP), an important regulator of neuronal mRNA translation. Patients with FXS display cognitive deficits including memory problems. Protein synthesis-dependent long-term changes in synaptic plasticity are involved in the establishment and maintenance of long-term memory. One prevalent theory of FXS pathology predicts that FMRP is required to negatively regulate the translation of important mRNAs at the synapse. We are investigating microRNAs (miRNAs) as a potential regulator of synaptic FMRP-regulated mRNAs that have previously been described as being crucial to the process of synaptic plasticity. The general hypothesis underlying this thesis is that FMRP may negatively regulate the expression of futsch (the Drosophila homologue of the microtubule-associated protein gene MAP1B) via the miRNA pathway. The first step we took in testing this hypothesis was to confirm that futsch is subject to miRNA-mediated translational control. Using in silico target analysis, we predicted that several neuronally expressed miRNAs target the futsch mRNA 3'UTR and repress expression of Futsch protein. Then, using an in vitro luciferase reporter system, we showed that miR-315 and members of the miR-9 family selectively down-regulated futsch reporter translation. We have confirmed by site- directed mutagenesis that the miRNA interaction with the futsch 3'UTR is specific to the miRNA seed region binding site. Interestingly, reduction of FMRP levels by RNAi had no effect on futsch 3'UTR reporter expression. Together, these data suggest regulation of futsch expression by the miRNA pathway might be independent of FMRP activity. However, additional experiments need to be completed to confirm these preliminary results.

Electrohydrodynamic Atomization for Improved Macromolecular Drug Delivery

With advances in drug research, the use of biological therapeutics is becoming a reality. Unfortunately, methods for processing and delivering these fragile macromolecules often limit their therapeutic potential. For this dissertation, we explore the aerosolization of macromolecules by way of electrohydrodynamic atomization (EHDA) and how this method can be used to process and deliver therapeutics. EHDA employs a high voltage to break a column of liquid into drops. It was unknown if or how the residual charge left of the resulting droplets would affect lung cells. An in vitro experiment was conducted to spray aerosolized DNA, by way of EHDA, onto human derived lungs cells to test for immunogenic and toxic effects. The lung cells displayed no immunogenic or toxic response to the DNA or high voltage. Previous researchers have used EHDA to aerosolize proteins with mixed results. This work sets forth a simplified thermodynamic theory and provides recommendations to pharmaceutical companies on how to design more stable protein formulations for aerosol processing or delivery. Finally, a new method of producing liposomes was created. It constructs the liposome one layer at a time. The inside of the liposome is sprayed by EHDA, with the lipid and drug in solution together. As the sprayed monolayer passes through a pool containing a solution of lipid in water, the second part of the bilayer attaches to the inner layer creating a complete bilayer liposome.

Regulation of Synaptogenesis by the miRNA Pathway and FMR/P Bodies

Post-transcriptional regulation of mRNA is facilitated by different mechanisms, such as microRNA (miRNA) induced gene silencing or fragile X mental retardation protein (FMRP) mediated repression either independent of or acting through cytoplasmic RNA Processing bodies (P bodies). DPTP99A, Lar, and Wg have known functions during synaptogenesis and may be targets of miR-8. Here, we provide evidence that miR-8 regulates DPTP99A in vitro. Non-endogenous miR-8 expressed using an UAS driver regulates Lar. Endogenous miR-8 may regulate DPTP99A in vivo. Here we show that FMRP is capable of colocalizing with the P body components: DCP1, HPat, and Me31B, but not CCR4. We also show that RNAi against HPat and Me31B but not CCR4 and DCP1 are required for FMRP’s repression of a translational reporter in vivo. This functional analysis provides additional insight into another aspect of FMRP’s and P bodies’ ability to cooperatively control repression of mRNA targets.

La valorización de los espacios naturales como pretexto para el desarrollo urbanístico en el sudeste de España

El objetivo de este trabajo es exponer algunas de las claves que explican los impactos ambientales de la actividad turística en la costa mediterránea española. Se analiza la instrumentalización del turismo por parte de la industria de la construcción a partir de la implementación de una serie de pautas de actuación puestas al servicio de un principio básico: el sometimiento de la conservación de los espacios naturales más frágiles y valorados a los intereses del capitalismo inmobiliario. Este argumento se ilustra mediante la exposición, desde una perspectiva histórica, geográfica y sociológica, de las dinámicas presentes en Calpe y Torrevieja: dos municipios de la Provincia de Alicante, situada en la Comunidad Valenciana, en el sudeste de España.

Rules and orders respecting the Steward, Cook & Butler of Harvard College, [1686]

These regulations are a revision of the original 1650 rules that laid out the duties of the Steward, Butler, and Cook. In these updated regulations, the Rector and Tutor are now responsible for signing off on the Steward's accounts rather than the President and Fellows.

College commons records, 1765-1829 (inclusive)

This volume, containing chronologically arranged papers mounted and bound around 1840, provides comprehensive documentation of the College commons around the turn of the 19th century. In particular, the volume documents the role the Steward played in overseeing the Commons. The records chiefly consist of the quarter reports of the Committee assigned to review the Steward’s accounts. Other documents include lists of utensils, bills for dinners for the Corporation, Overseers, and Commencement, regulations, lists of abatements for students’ quarterly bills, and information on kitchen staff.

Student accounts in commons, 1772-1778

This small volume, sewn without a backing, contains student accounts in commons, with the dates students entered and left the College.

Requests to stop commons, 1775

Requests from Tutors John Wadsworth, Caleb Gannett, and Stephen Hall to the Steward, dated March 20, March 25, and April 4, 1775, to stop the commons of students. Reasons given include illness and absence from the College.

Draft of report from Committee appointed by the Corporation to revise the Laws relating to Commons at the meeting of April 6, 1778, April 17, 1778

This report contains changes to the regulations proposed by a Committee of the Corporation at the April 6, 1778 meeting of the Corporation (these regulations can be found in the College commons records, Box 1). The proposed changes were to the articles concerning the reporting of damages to utensils by the waiters, and the requirement for the Steward to present a quarterly inventory of the utensils.

Letter from Steward Caleb Gannett to President and Fellows, [1780]

This letter from Gannett, written shortly after he assumed the duties of the Steward, contains questions to the President and Fellows regarding his duties as Steward. He also discusses the impact of the post-Revolutionary War economic situation, describing the rapid rise of prices of goods.

Requests for abatement of commons, November 13, 1781

Request from Tutor John Mellen (Harvard College Class of 1770) for an abatement of his commons for his absence from the College due to illness and request from Eleazer James (Harvard College Class of 1778) for an abatement of his commons due to absence from the College.