Ex vivo profiling of CD8(+)-T-cell responses to human cytomegalovirus reveals broad and multispecific reactivities in healthy virus carriers

Human cytomegalovirus (HCMV) can establish both nonproductive (latent) and productive (lytic) infections. Many of the proteins expressed during these phases of infection could be expected to be targets of the immune response; however, much of our understanding of the CD8(+)-T-cell response to HCMV is mainly based on the pp65 antigen. Very little is known about T-cell control over other antigens expressed during the different stages of virus infection; this imbalance in our understanding undermines the importance of these antigens in several aspects of HCMV disease pathogenesis. In the present study, an efficient and rapid strategy based on predictive bioinformatics and ex vivo functional T-cell assays was adopted to profile CD8(+)-T-cell responses to a large panel of HCMV antigens expressed during different phases of replication. These studies revealed that CD8(+)-T-cell responses to HCMV often contained multiple antigen-specific reactivities, which were not just constrained to the previously identified pp65 or IE-1 antigens. Unexpectedly, a number of viral proteins including structural, early/late antigens and HCMV-encoded immunomodulators (pp28, pp50, gH, gB, US2, US3, US6, and UL18) were also identified as potential targets for HCMV-specific CD8(+)-T-cell immunity. Based on this extensive analysis, numerous novel HCMV peptide epitopes and their HLA-restricting determinants recognized by these T cells have been defined. These observations contrast with previous findings that viral interference with the antigen-processing pathway during lytic infection would render immediate-early and early/late proteins less immunogenic. This work strongly suggests that successful HCMV-specific immune control in healthy virus carriers is dependent on a strong T-cell response towards a broad repertoire of antigens.

Estimates of global and regional potential health gains from reducing multiple major risk factors

Background Estimates of the disease burden due to multiple risk factors can show the potential gain from combined preventive measures. But few such investigations have been attempted, and none on a global scale. Our aim was to estimate the potential health benefits from removal of multiple major risk factors. Methods We assessed the burden of disease and injury attributable to the joint effects of 20 selected leading risk factors in 14 epidemiological subregions of the world. We estimated population attributable fractions, defined as the proportional reduction in disease or mortality that would occur if exposure to a risk factor were reduced to an alternative level, from data for risk factor prevalence and hazard size. For every disease, we estimated joint population attributable fractions, for multiple risk factors, by age and sex, from the direct contributions of individual risk factors. To obtain the direct hazards, we reviewed publications and re-analysed cohort data to account for that part of hazard that is mediated through other risks. Results Globally, an estimated 47% of premature deaths and 39% of total disease burden in 2000 resulted from the joint effects of the risk factors considered. These risks caused a substantial proportion of important diseases, including diarrhoea (92%-94%), lower respiratory infections (55-62%), lung cancer (72%), chronic obstructive pulmonary disease (60%), ischaemic heart disease (83-89%), and stroke (70-76%). Removal of these risks would have increased global healthy life expectancy by 9.3 years (17%) ranging from 4.4 years (6%) in the developed countries of the western Pacific to 16.1 years (43%) in parts of sub-Saharan Africa. Interpretation Removal of major risk factors would not only increase healthy life expectancy in every region, but also reduce some of the differences between regions, The potential for disease prevention and health gain from tackling major known risks simultaneously would be substantial.

Epitope-blocking enzyme-linked immunosorbent assays for the detection of serum antibodies to West Nile virus in multiple avian species

We report the development of epitope-blocking enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) for the rapid detection of serum antibodies to West Nile virus (WNV) in taxonomically diverse North American avian species. A panel of flavivirus-specific monoclonal antibodies (MAbs) was tested in blocking assays with serum samples from WNV-infected chickens and crows. Selected MAbs were further tested against serum samples from birds that represented 16 species and 10 families. Serum samples were collected from birds infected with WW or Saint Louis encephalitis virus (SLEV) and from noninfected control birds. Serum samples from SLEV-infected birds were included in these experiments because WNV and SLEV are closely related antigenically, are maintained in similar transmission cycles, and have overlapping geographic distributions. The ELISA that utilized MAb 3.11126 potentially discriminated between WW and SLEV infections, as all serum samples from WNV-infected birds and none from SLEV-infected birds were positive in this assay. Assays with MAbs 2132 and 6B6C-1 readily detected serum antibodies in all birds infected with WNV and SLEV, respectively, and in most birds infected with the other virus. Two other MAbs partially discriminated between infections with these two viruses. Serum samples from most WNV-infected birds but no SLEV-infected birds were positive with MAb 3.676, while almost all serum samples from SLEV-infected birds but few from WNV-infected birds were positive with MAb 6B5A-5. The blocking assays reported here provide a rapid, reliable, and inexpensive diagnostic and surveillance technique to monitor WNV activity in multiple avian species.

Molecular basis of sulfonylurea herbicide inhibition of acetohydroxyacid synthase

Acetohydroxyacid synthase (AHAS) (acetolactate synthase, EC 4.1.3.18) catalyzes the first step in branchedchain amino acid biosynthesis and is the target for sulfonylurea and imidazolinone herbicides. These compounds are potent and selective inhibitors, but their binding site on AHAS has not been elucidated. Here we report the 2.8 Angstrom resolution crystal structure of yeast AHAS in complex with a sulfonylurea herbicide, chlorimuron ethyl. The inhibitor, which has a K-i of 3.3 nM blocks access to the active site and contacts multiple residues where mutation results in herbicide resistance. The structure provides a starting point for the rational design of further herbicidal compounds.

14-3-3 acts as an intramolecular bridge to regulate cdc25B localization and activity

One of the major regulators of mitosis in somatic cells is cdc25B. cdc25B is tightly regulated at multiple levels. The final activation step involves the regulated binding of 14-3-3 proteins. Previous studies have demonstrated that Ser-323 is a primary 14-3-3 binding site in cdc25B, which influences its activity and cellular localization. 14-3-3 binding to this site appeared to interact with the N-terminal domain of cdc25B to regulate its activity. The presence of consensus 14-3-3 binding sites in the N-terminal domain suggested that the interaction is through direct binding of the 14-3-3 dimer to sites in the N-terminal domain. We have identified Ser-151 and Ser-230 in the N-terminal domain as functional 14-3-3 binding sites utilized by cdc25B in vivo. These low affinity sites cooperate to bind the 14-3-3 dimer bound to the high affinity Ser-323 site, thus forming an intramolecular bridge that constrains cdc25B structure to prevent access of the catalytic site. Loss of 14-3-3 binding to either N-terminal site relaxes cdc25B structure sufficiently to permit access to the catalytic site, and the nuclear export sequence located in the N-terminal domain. Mutation of the Ser-323 site was functionally equivalent to the mutation of all three sites, resulting in the complete loss of 14-3-3 binding, increased access of the catalytic site, and access to nuclear localization sequence.

Repair of three pathologic fractures in a dog with multiple myeloma

Three pathological fractures occurred secondary to osteolytic lesions of multiple myeloma. Two long bone fractures were each stabilised using interlocking nail fixation augmented with polymethyl meth acral ate bone cement. One vertebral fracture was stabilised using Steinmann pins and PMMA. Successful stabilisation, rapid return to function and improvement in quality of life occurred in all fractures. The patient survived approximately eight months on concurrent chemotherapy.

Multiple ordered phases in Langmuir-Blodgett films of cadmium arachidate at elevated temperatures

Using synchrotron X-ray grazing incidence diffraction, superlattice structures have been observed to develop in Langmuir-Blodgett films of cadmium arachidate as the temperature is raised. The previously reported superstructure in the stacked lamellae at room temperature changes at about 70 degreesC and there are further changes at about 90 and 103 degreesC before the major phase transition from stacked lamellae to hexagonally packed rods occurs at 107 degreesC (Langmuir 1997, 13, 1602). Between 70 and 103 degreesC there is a 1 x 10 one-dimensional in-plane superstructure, which is commensurate with the local structure and has an interlayer shift along [01] by a distance of b (of the local structure) at lower temperatures, and a further shift at about 90 degreesC. At lower (

Configurações territoriais múltiplas: reflexões a partir de O Anti-édipo : capitalismo e esquizofrenia de Gilles Deleuze e Félix Guattari

Este texto lança algumas reflexões sobre os axiomas do capitalismo que permitem descodificar todas as convenções das sociedades chamadas “selvagens”, e realizar as promessas de poder das sociedades déspotas, “bárbaras”. Simultaneamente, o capitalismo, provoca uma multiplicação das fraturas territoriais e de globalizações de toda ordem. Nessa descodificação de todos os valores, os fluxos (sociais, econômicos, políticos) liberados pelo capitalismo hesitam entre, de um lado, uma descodificação que levaria a uma desterritorialização radical dos processos e, de outro lado, um reaparecimento e re-atualização conservadora desses fluxos liberados pelo próprio processo de “criação destrutiva”.

Entre prescrições e singularizações : o trabalho em vias da criação

O presente texto enfoca a necessidade de tornar visíveis as múltiplas atividades industriosas atualizadas por parte dos trabalhadores em ambiente laboral regulado e ordenado, considerando as dramáticas dos usos de si como formuladoras de possíveis criações. Problematiza a incessante tensão entre instituído e instituinte como paradoxo constituinte das relações de trabalho. Aborda o que se passa nos processos de trabalho apoiando-se em alguns conceitos da abordagem ergológica e da obra de M. Foucault. Formula uma visão sobre os mundos do trabalho hoje que nos permite pensá-lo como luta cotidiana por modos de viver que afirmem a vida como tendência criadora.

Olhares sobre Jongos e Caxambus: Processos educativos nas práticas religiosas afro-brasileiras

Este estudo foi elaborado a partir da proposta de fortalecimento das relações comunitárias entre a Universidade Federal do Espírito Santo e as comunidades jongueiras e caxambuzeiras. Destina-se a apresentar a pesquisa realizada em territórios negros sob a inspiração do Jongo e do Caxambu, reconhecidos como Patrimônio Imaterial do Brasil pelo Instituto do Patrimônio Histórico e Artístico Nacional (Iphan). A pesquisa foi desenvolvida no norte do Estado do Espírito Santo e tem como recurso analítico e conceitual estudos sobre etnicidade no campo da educação. Sua proposta é ampliar e constituir-se como base para a implementação da Lei nº. 10.639/2003, considerando a descrição das categorias religiosidade, territorialidade, memórias, cultura negra, cultura popular e tradição, com base nas narrativas dos sujeitos. Relaciona as práticas culturais do jongo e do caxambu como elementos importantes para a reconstrução da história do negro no Sudeste brasileiro. O tema de investigação foi construído sob a inspiração teórica dos estudos culturais referenciados em Stuart Hall (2008), Canclini (1997), Santos (2008, 2009), Certeau (2005) e na produção simbólica das interpretações sociais, das fronteiras étnicas para descrever as diferenças percebidas pelos sujeitos. Trabalhou-se basicamente propondo as múltiplas interpretações a partir do vivido. O estudo reforça a importância das africanidades na formação de professores e a discussão do Patrimônio Imaterial do Jongo como possibilidades de saberes-fazeres no campo do currículo escolar. Os caminhos da pesquisa partem de uma base etnográfica, conjugando a metodologia da história oral temática com a pesquisa participante e a pesquisa ação, interligando as memórias dos sujeitos, suas narrativas e vivências ao fazer pedagógico no cotidiano das comunidades. Ressalta a relação intercultural e territorial que identifica jongueiros e caxambuzeiros. Os resultados da pesquisa descrevem as condições dessas práticas, da visibilidade das políticas culturais, da produção das identidades jongueiras no norte do Estado do Espírito Santo, sob o ponto de vista dos sujeitos elencados.

Redes de saberesfazeres, complexidade e tensões : os cotidianos do ensino médio de uma escola pública do Espírito Santo

A ciência com suas verdades passou a ser um artefato essencial nos cotidianos escolares. Esses saberes se enredam com outros saberes que despotencializados e silenciados, permanecem nos interstícios do discurso hegemônico da modernidade na escola causando tensões. Potencializar a ocorrência dessas redes nesses cotidianos pode intensificar essas tensões e assim abalar esse domínio da ciência. Os muitos caminhos possíveis de serem percorridos nas tessituras desprivilegiam quaisquer saberes e fazeres que se pretendem exclusivos. Assumindo a metáfora das redes, os praticantes da escola podem potencializar as inter-relações que ocorrem na vida. A remoção de instâncias de poder hierárquico de saberes, enredando-os e o compartilhamento solidário das práticasteoriaspráticas, não significa a diluição da autoridade. Agora a autoridade cumpre um novo papel que é de constituir uma rede de relações de autoridade partilhada. Desejamos perceber esses múltiplos sentidos e problematizar o quão potentes são ou não para a vida. Participamos juntamente com os alunos e alunas das aulas e posteriormente, os convidamos para conversasentrevistas, gravando e fotografando esses momentos. Percorremos, nos turnos matutino e noturno, todos os seus espaçostempos, nos conectando nas redes que se tecem. Optamos por estar nas turmas de ensino médio de formação geral e nas turmas de ensino médio na modalidade Educação de Jovens e Adultos. As entrevistasconversas foram feitas com três alunos ao mesmo tempo, sempre de uma mesma turma, para que se estabelecesse uma conversa e para que a produção de sentidos dos cotidianos da escola pudesse ser mais potencializada. Dos alunos entrevistados, estão entre os seus desejos mais comuns para além dos saberes científicos, as atividades esportivas, artísticas, literárias, religiosas, cursos de formação profissional, dança, canto, campanhas educativas, passeios. As relações de amizade e outros modos relacionais como entre professores e alunos, têm sido citados com grande frequência, pelos estudantes, nas entrevistasconversas. Não tem se conseguido implantar na sua totalidade os preceitos da modernidade nos escola. Há, portanto, um visível esgotamento do monopólio do comportamento científico nos cotidianos da escola pública pesquisada. São nesses espaçostempos escolares nos quais pode se dar a experiência. Apesar do discurso moderno na escola produzir mecanismos que impedem a experiência, esse controle é acompanhado de diversos mecanismos de escapes. É pela “voz” dos alunos que se apresentam as ausências da escola. A “voz” dos estudantes é a grande presença na escola e sua grande potência. Talvez esse seja o maior desperdício no contexto educacional escolar.