Characterization of glutaraldehyde-immobilized chymotrypsin and an in-situ immobilized enzyme reactor using capillary electrophoresis-based peptide mapping

La digestion enzymatique des protéines est une méthode de base pour les études protéomiques ainsi que pour le séquençage en mode « bottom-up ». Les enzymes sont ajoutées soit en solution (phase homogène), soit directement sur le gel polyacrylamide selon la méthode déjà utilisée pour l’isolation de la protéine. Les enzymes protéolytiques immobilisées, c’est-à-dire insolubles, offrent plusieurs avantages tels que la réutilisation de l’enzyme, un rapport élevé d’enzyme-sur-substrat, et une intégration facile avec les systèmes fluidiques. Dans cette étude, la chymotrypsine (CT) a été immobilisée par réticulation avec le glutaraldehyde (GA), ce qui crée des particules insolubles. L’efficacité d’immobilisation, déterminée par spectrophotométrie d’absorbance, était de 96% de la masse totale de la CT ajouté. Plusieurs différentes conditions d’immobilisation (i.e., réticulation) tels que la composition/pH du tampon et la masse de CT durant la réticulation ainsi que les différentes conditions d’entreposage tels que la température, durée et humidité pour les particules GA-CT ont été évaluées par comparaison des cartes peptidiques en électrophorèse capillaire (CE) des protéines standards digérées par les particules. Les particules de GA-CT ont été utilisés pour digérer la BSA comme exemple d’une protéine repliée large qui requit une dénaturation préalable à la digestion, et pour digérer la caséine marquée avec de l’isothiocyanate de fluorescéine (FITC) comme exemple d’un substrat dérivé afin de vérifier l’activité enzymatique du GA-CT dans la présence des groupements fluorescents liés au substrat. La cartographie peptidique des digestions par les particules GA-CT a été réalisée par CE avec la détection par absorbance ultraviolet (UV) ou fluorescence induite par laser. La caséine-FITC a été, en effet, digérée par GA-CT au même degré que par la CT libre (i.e., soluble). Un microréacteur enzymatique (IMER) a été fabriqué par immobilisation de la CT dans un capillaire de silice fondu du diamètre interne de 250 µm prétraité avec du 3-aminopropyltriéthoxysilane afin de fonctionnaliser la paroi interne avec les groupements amines. Le GA a été réagit avec les groupements amine puis la CT a été immobilisée par réticulation avec le GA. Les IMERs à base de GA-CT étaient préparé à l’aide d’un système CE automatisé puis utilisé pour digérer la BSA, la myoglobine, un peptide ayant 9 résidus et un dipeptide comme exemples des substrats ayant taille large, moyenne et petite, respectivement. La comparaison des cartes peptidiques des digestats obtenues par CE-UV ou CE-spectrométrie de masse nous permettent d’étudier les conditions d’immobilisation en fonction de la composition et le pH du tampon et le temps de réaction de la réticulation. Une étude par microscopie de fluorescence, un outil utilisé pour examiner l’étendue et les endroits d’immobilisation GA-CT dans l’IMER, ont montré que l’immobilisation a eu lieu majoritairement sur la paroi et que la réticulation ne s’est étendue pas si loin au centre du capillaire qu’anticipée.

Studies on in situ precipitated silica filled rubber composites with special reference to NR, NBR and SBR

Precipitated silica is the most promising alternative for carbon black in tyre tread compounds due to its improved performance in terms of rolling resistance and wet grip.But its poor processability is a serious limitation to its commercial application.This thesis suggests a novel route for the incorporation of silica in rubbers,i.e.,precipitation of silica in rubber latex followed by coagulation of the latex to get rubber-silica maseterbatch.Composites with in situ precipitated silica showed improved processability and mechanical properties,when compared to conventional silica composites.

Stringed bed suspended bioreactors (SBSBR)for in situ nitrification in penaeid and non-penaeid hatchery systems

For establishing nitrification in prawn (non-penaeid, salinity 10–15 ppt) and shrimp (penaeid, salinity 30–35 ppt) larval production systems, a stringed bed suspended bioreactor (SBSBR) was designed, fabricated, and validated. It was fabricated with 5 mm polystyrene and low density polyethylene beads as the substrata for ammonia and nitrite oxidizing bacterial consortia, respectively, with an overall surface area of 684 cm2. The reactors were activated in a prototype activator and were transported in polythene bags to the site of testing. Performance of the reactors activated with the nitrifying bacterial consortia AMONPCU-1 (ammonia oxidizers for non-penaeid culture) and NIONPCU-1 (nitrite oxidizers for non-penaeid culture) was evaluated in a Macrobrachium rosenbergii larval rearing system and those activated with AMOPCU-1 (ammonia oxidizers for penaeid culture) and NIOPCU-1 (nitrite oxidizers for penaeid culture) in a Penaeus monodon seed production system. Rapid setting up of nitrification could be observed in both the static systems which resulted in a higher relative per cent survival of larvae

Raman spectra of KTP crystal in an in situ electric field

Raman spectra of the KTP single crystal are recorded in electric fields (dc and ac) applied along the polar axis c. Spectra with the laser beam focused near the cathode end, anode end and the centre of the crystal are recorded. The cathode end of the crystal develops a spot ‘grey track’ where the laser beam is focused after a lapse of 5 h from the application of a dc electric field of 38 V/cm. The spectra recorded at the cathode end after the application of field show variations in intensity of bands. A new band appears at 177 cm21. Changes in band intensities are explained on the basis of changes in polarizability of the crystal due to the movement of K1 ions along the polar axis. K1 ions accumulate at the cathode end, where the ‘Grey track’ formation occurs. The intensity enhancement observed for almost all bands in the ac field is attributed to the improvement of crystalline quality.

Elaboración de software para la supervisión in situ de ejercicios prácticos de análisis de estructuras con enunciado personalizado

Se expone la experiencia de los autores en el desarrollo de las clases prácticas de análisis de estructuras, en la asignatura ESTRUCTURAS II de la ETS de Arquitectura de la Universidad de Granada, consistente en el desarrollo de ejercicios prácticos semanales con enunciados personalizados para cada alumno, previa elaboración de software que permite la supervisión y corrección in situ de los mismos. El objetivo de la metodología docente que se presenta, es la mejora de los tradicionalmente muy bajos índices de rendimiento académico, en las asignaturas de Análisis de Estructuras, en las escuelas de ingeniería y arquitectura, propiciando la participación activa del alumnado en el desarrollo de las clases mediante el planteamiento y resolución de ejercicios prácticos semanales de enunciado personalizado

Tratamiento del deslizamiento epifisiario capital femoral con fijación in situ versus luxación quirúrgica

Introducción: El Deslizamiento Epifisiario Capital Femoral es la enfermedad de la cadera más común en adolescentes entre los 9 y 16 años. Es de causa idiopática, más frecuente en hombres, se clasifica en 4 estadios según criterios clínicos y radiológicos. Se buscó evaluar la evolución de los deslizamientos moderados y severos tratados con una de las dos técnicas propuestas. Metodología Se realizó un estudio descriptivo con pacientes que fueron llevados a fijación in situ o luxación controlada entre 2008 y 2011. Resultados: Se incluyeron 26 pacientes, los cuales el 65.4% se les realizó luxación quirúrgica controlada y el 34.6% fijación in situ. El 70,6% de pacientes tenían DECF inestable y 70,5% tenían desplazamiento severo. La evaluación de la escala WOMAC para dolor, rigidez y capacidad funcional encontró mejores beneficios para el grupo de fijación in situ, estadísticamente significativos (p<0,05), no solo en términos de dolor, rigidez y capacidad funcional sino menor frecuencia de complicaciones. Las complicaciones más frecuentes en el grupo de luxación quirúrgica controlada fueron un caso de infección, 7 casos (41,2%) de necrosis avascular de cabeza femoral, 5 casos (29,4%) de condrolisis y 2 casos (11,8%) de pseudoartrosis; En el grupo de fijación in situ, solo 1 (11,1%) presentó Infección del Sitio Operatorio y 1 (11,1%) Condrolisis. Resultados significativos solo para necrosis avascular. Discusión: Los pacientes con deslizamientos moderados y severos manejados con fijación in situ tuvieron una mejor resultado con menor proporción de complicaciones.

Compromisos internacionales adquiridos por Colombia en el convenio sobre diversidad biológica en cuanto a conservación IN SITU y ejecuciones del país para el cumplimiento de los mismos

El cuidado del Medio Ambiente es un tema que desde las últimas décadas ha venido tomando cada vez más importancia en el mundo entero. Después de dos devastadoras guerras Mundiales y de una acelerada industrialización de países que hoy se constituyen como los más desarrollados a nivel global, la Comunidad Internacional se ha puesto a través de los años en la tarea de reunirse y tratar de encontrar soluciones a los problemas que afectan hoy el Medio Ambiente y su conservación en todo el mundo. Desde la creación de las Naciones Unidas en 1945, se pensó en darle un espacio a la discusión del cuidado del planeta y fue en 1972 cuando se decidió crear el Programa de las naciones Unidas para el Medio Ambiente PNUMA1. La Conferencia de las Naciones Unidas sobre el Medio Ambiente y el Desarrollo (CNUMAD)2 hecha en 1992 fue tal vez la reunión más importante que propuso una actividad concreta de los Estados para el cuidado ambiental, tuvo la oportunidad de convocar a 172 gobiernos y a otras organizaciones que para ese entonces ya se interesaban por este tema de talla mundial.

In situ (enciclopèdia audiovisual de les ciències i les tècniques) : telecomunicacions. 'In situ (enciclopedia audiovisual de las ciencias y las técnicas) : telecomunicaciones'.

Este vídeo forma parte de la Enciclopedia Audiovisual de las Ciencias y las Técnicas, y se estructura en capítulos de cuatro minutos. Cada capítulo expone el estudio de un objeto o fenómeno científico y propone: recordatorios, definiciones, exploraciones para entender mejor un funcionamiento, animaciones para representar fenómenos complejos, descubrimientos y aplicaciones y puntos que remiten a otros capítulos de la enciclopedia directamente relacionados con el tema que se trata. Los capítulos incluidos en este volumen son: el teléfono; la red telefónica; la fibra óptica; el cable submarino; el teléfono móvil; la red digital; la codificación digital; la telemática; Internet; proveedores de Internet; motor de búsqueda; compresión y descompresión; el transporte de los datos y, satélites de telecomunicaciones.

In situ (enciclopèdia audiovisual de les ciències i les tècniques) : informàtica. 'In situ (enciclopedia audiovisual de las ciencias y las técnicas) : informática'.

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In situ (enciclopèdia audiovisual de les ciències i les tècniques) : cervell i comunicació nerviosa. 'In situ (enciclopedia audiovisual de las ciencias y las técnicas) : cerebro y comunicación nerviosa'.

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In situ (enciclopèdia audiovisual de les ciències i les tècniques) : química, cosmètica i higiene. 'In situ (enciclopedia audiovisual de las ciencias y las técnicas) : química, cosmética e higiene'.

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In situ (enciclopèdia audiovisual de les ciències i les tècniques) : origen i evolució de la vida. 'In situ (enciclopedia audiovisual de las ciencias y las técnicas) : origen y evolución de la vida'.

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In situ (enciclopèdia audiovisual de les ciències i les tècniques) : electricitat. 'In situ (enciclopedia audiovisual de las ciencias y las técnicas) : electricidad'.

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