Conjugação e validação de controle isotípico IgG1-FITC para uso em citometria de fluxo

Em meados da década de 50 iniciou-se o desenvolvimento da citometria de fluxo, tecnologia que permite verificar características físico-químicas de células ou partículas suspensas em meio fluido. Esta tecnologia utiliza anticorpos monoclonais marcados com fluorocromos como ferramenta de investigação em diversas análises e necessita de controles isotípicos para definição da região negativa (background). Estes controles são constituídos por imunoglobulinas de mesmo isotipo e fluorocromo dos anticorpos testes, sendo o isotiocianato de fluoresceína (FITC) o marcador fluorescente mais utilizado na conjugação de anticorpos. Os controles isotípicos têm como função definir a fluorescência inespecífica (células negativas) e as regiões fluorescentes (células positivas). No presente estudo foi selecionado anticorpo monoclonal murino (AcMm) dirigido contra antígeno eritrocitário canino, produzido no Laboratório de Anticorpos Monoclonais do Hemocentro de Botucatu, o qual reage positivamente com hemácias de cães, mas nunca com leucócitos humanos, tendo, portanto, potencial utilidade como controle negativo em citometria de fluxo. A purificação do AcMm da subclasse IgG1 foi feita por cromatografia de afinidade em Proteína-A Sepharose, e o controle da purificação realizado por eletroforese em géis de ágarose e poliacrilamida (SDS-PAGE). A imunoglobulina purificada foi conjugada ao FITC e filtrado em coluna de Sephadex G-25 para separação das proteínas marcadas e não-marcadas. O AcMm conjugado foi testado contra hemácias de cães, e o êxito da conjugação comprovado por testes de fluorescência, sendo a mediana de positividade de 94,70. Frente a leucócitos humanos a mediana de positividade foi 0,03 contra 0,50 dos reagentes comerciais. Os testes estatísticos não-paramétricos de Wilcoxon e correlação de Spearman comprovaram a eficiência e validam o controle isotípico produzido em comparação aos reagentes comerciais testados.

Diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina pelas técnicas de imunoistoquímica e PCR em tecidos cutâneos em associação com a RIFI e ELISA-teste

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

A new species of Ctenobrycon Eigenmann, 1908 (Characiformes: Characidae) from the rio Orinoco basin, Venezuela

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)

Karyotypic diversity in four species of the genus Gymnotus Linnaeus, 1758 (Teleostei, Gymnotiformes, Gymnotidae): physical mapping of ribosomal genes and telomeric sequences

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)

Substrate distribution in fungus chambers in nests of Atta bisphaerica Forel, 1908 (Hym., Formicidae)

Substrate distribution was studied in three adult colonies of the leaf-cutting ant Atta bisphaerica Forel, 1908 using dye. Some supply holes were mapped using baits made from small plastic straws impregnated with citric pulp. Two holes, equidistant from one another, were then selected in each nest. The colonies were excavated completely 24 h after bait placement. During excavation, fungus chambers were checked for dye. We observed that the dyed baits were distributed in all sectors and at all depths regardless of where the baits had been placed. This supported the hypothesis that toxic baits placed in a single supply hole are uniformly distributed throughout the colony.

Ontogenetic shifts in the digestive tube and diet of Bryconamericus stramineus Eigenmann, 1908 (Osteichthyes, Characidae)

Aim: Studies on feeding of early life stages are very important to the understanding of the biology and trophic ecology of fish species. Therefore, the aim of this work is to describe the development of the digestive tube, and to characterize the diet of larvae and juveniles of Bryconamericus stramineus Eigenmann, 1908 of the upper Parana River floodplain; Methods: Larvae were obtained from, monthly samples during nychthemeral cycles with four-hour interval between samplings from February/91 to February/92, utilizing a conical-cylindrical plankton net; Results: At the preflexion stage, larvae at approximately 4.00 mm SL, showed a morphologically undifferentiated straight tube, with the anterior region more dilated. At the flexion stage a differentiation in the anterior region of the digestive tube occurs, with the intestine wall getting thicker (8.30 mm SL). The formation of pyloric caeca occurs at 9.00 mm SL. At the postflexion stage the first loop is formed at 9.25 mm SL and the second loop at about 10.00 mm SL. Bryconamericus stramineus consumed mainly cladocerans, also ingesting copepods, rotifers, nematodes, algae, insects and inorganic particles. Along the development, there was an increase in the number of food items and a diversification in the number of consumed taxa; Conclusions: Changes in the diet of B. stramineus larvae were not observed, being them zooplanktivores during all the initial development. However, an increase of large preys, such as insects larvae, was observed at the end of the larval period and in juveniles, suggesting a tendency towards invertivory. Larvae and juveniles preferentially fed during the night.

Ultrastructural studies of the mandibular glands of the minima, media and soldier ants of Atta sexdens rubropilosa (Forel 1908)

The mandibular glands of Hymenoptera are structures associated with the mandibles and constitute part of the salivary glands system. Histological studies in workers of Atta sexdens rubropilosa revealed that this gland contains two portions: a secretory and a storage portion or reservoir. Both portions are connected by means of canaliculi. The object of the present work was the study of the ultratructure of the mandibular glands of minima, media and soldier ant of A. s. rubropilosa by TEM techniques. The glands, in the three castes studied, possess a reservoir, constituted by a simple pavementous epithelium surrounded by the cuticular intima and the secretory portion is constituted by cells of rounded shape. The secretory cells, mainly of minima and soldier, were rich in smooth endoplasmic reticulum. The media worker and soldier presented a large number of mitochondria, of varying shape. Well-developed Golgi complexes were also present in the soldiers. The secretory cells in minima, media and soldier were provided with collecting intracellular canaliculi, which were linked to the reservoir through the extracellular portion. The cytoplasm of the canaliculi-forming cell was poor in organelles. In the individuals of the three castes of A. s. rubropilosa, the presence of lipid secretion granules suggested, beyond the other functions, also a possible pheromonal action. The different roles executed by the different insect castes are directly dependent on the glandular products and, consequently, on the secretory cellular characteristics. (c) 2005 Elsevier Ltd. All rights reserved.

The intramandibular gland of leaf-cutting ants (Atta sexdens rubropilosa Forel 1908)

The eusociality developed in Hymenoptera and Isoptera is driven by an efficient interaction between exocrine glands and jointed appendages, both in close interaction with the environment. In this context, the mandible of ants plays an important role, since, in addition to being the main jointed appendage, it possess glandular functions. As an example we might name the two glands associated with the mandible: the mandibular and the intramandibular glands. The intramandibular gland is found inside the mandible and consists of a hypertrophied secretory epithelium and secretory cells in the mandible's lumen. The secretion of the secretory epithelium is liberated through intracuticular ducts that open at the base of hairs at the mandible's surface. The secretion of the intramandibular gland (epithelium and secretory cells) reacted positively to tests for the detection of polysaccharides and proteins, thus suggesting that it consists of glycoproteins. The ultrastructure of the secretor epithelium presents variations related to the developmental stage of the individual, showing a large number of ribosomes and microvilli close to the cuticle in young individuals, while in the older specimens it was possible to note the formation of ail intracellular reservoir. These variations of secretory epithelium, as also the interaction between the cellular groups inside the mandible, are important information about this gland in leaf-cutting ants. (c) 2005 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Ovary and oocyte maturation of the tick Amblyomma brasiliense Aragao, 1908 (Acari: Ixodidae)

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Cerebellar Cognitive Affective Syndrome in Machado Joseph Disease: Core Clinical Features

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Adenocalymma ubatubensis Assis & Semir, a new species of Bignoniaceae from Ubatuba, São Paulo state, Brazil

Adenocalymma ubatubensis, a new species from southeastern coastal Brazil, is described and illustrated. The species is distinguished by its large pseudostipules and calyx without nectaries.

Validade das equações preditivas da frequência cardíaca máxima para crianças e adolescentes

FUNDAMENTO: Ausência de estudos na literatura validando equações preditivas da frequência cardíaca máxima (FCmáx) em crianças e adolescentes. OBJETIVO: Analisar a validade das equações preditivas da FCmáx 220 - idade e 208 - (0,7 x idade) em meninos com idades entre 10 e 16 anos. MÉTODOS: Um teste progressivo de esforço máximo foi realizado em 69 meninos com idades entre 10 e 16 anos, aparentemente saudáveis e ativos. A velocidade inicial do teste foi de 9 km/h com incrementos de 1 km/h a cada três minutos. O teste foi mantido até a exaustão voluntária, considerando-se como FCmáx a maior frequência cardíaca atingida durante o teste. A FCmáx medida foi comparada com os valores preditos pelas equações 220 - idade e 208 - (0,7 x idade) através da ANOVA, medidas repetidas. Resultados: Os valores médios da FCmáx (bpm) foram: 200,2 ± 8,0 (medida), 207,4 ± 1,5 (220 - idade) e 199,2 ± 1,1 (208 - (0,7 x idade)). A FCmáx predita pela equação 220 - idade foi significantemente maior (p < 0,001) que a FCmáx medida e que a FCmáx predita pela equação (208 - (0,7 x idade)). A correlação entre a FCmáx medida e a idade não foi estatisticamente significativa (r = 0,096; p > 0,05). CONCLUSÃO: A equação 220 - idade superestimou a FCmáx medida e não se mostrou válida para essa população. A equação 208 - (0,7 x idade) se mostrou válida apresentando resultados bastante próximos da FCmáx medida. Estudos futuros estudos com amostras maiores poderão comprovar se a FCmáx não depende da idade para essa população, situação em que o valor constante de 200 bpm seria mais apropriado para a FCmáx.

Condition factor of Astyanax intermedius Eigenmann, 1908 (OSTEICHTHYES, CHARACIDAE) parasitised by Paracymothoa astyanaxi Lemos de Castro, 1955 (CRUSTACEA, CYMOTHOIDAE) in the Grande River, Serra do Mar State Park - Santa Virgínia Unit, São Paulo, Brazil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Avaliação do efeito da piscicultura em sistemas aquáticos em Assis e Cândido Mota, São Paulo, por indicador de qualidade da água e análise estatítica multivariada

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Redescription of Astyanax goyacensis Eigenmann, 1908 (Ostariophysi: Characiformes: Characidae)

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)