Sinalização da MAPK/ERK na diferenciaçãao da oligodendroglia: efeitos de inibidores da MEK sobre a morfologia e distribuição de proteínas de oligodendrócitos/mielina in vitro

A via de sinalização da cinase regulada por fatores extracelulares, da família das proteínas cinases ativadas por mitógenos (MAPK/ERK) é importante tanto para a sobrevivência como para a progressão da diferenciação de oligodendrócitos. Neste trabalho, a via da MAPK/ERK foi avaliada na oligodendroglia in vitro com a utilização de inibidores da MEK. A morfologia celular, assim como a distribuição de proteínas foram analisadas em diferentes estágios de maturação da oligodendroglia. Culturas primárias de oligodendrócitos foram tratadas com os inibidores da MEK PD98059 ou U0126, aos 5 ou 11dias in vitro (div), por 30min, 24 ou 48h. A oligodendroglia foi distinguida com marcadores estágio-específicos: A2B5, 23nucleotídeo cíclico 3 fosfodiesterase (CNPase) e proteína básica de mielina (MBP), e classificada de acordo com sua morfologia em diferentes estágios de desenvolvimento. O tratamento aumentou significativamente o número de células com morfologia mais imatura e diminuiu o número de células maduras. Além disso, aumentou o número de células redondas e sem prolongamentos as quais não puderam ser classificadas em nenhum dos estágios de desenvolvimento da oligodendroglia. Os efeitos mais evidentes foram observados logo após o menor tempo de tratamento. Células redondas eram positivas para CNPase e MBP, porém não foram marcadas com A2B5 ou com NG2, indicando que seriam células maduras incapazes de estender ou manter seus prolongamentos. De fato, estas mudanças foram acompanhadas por alterações na distribuição de proteínas de oligodendrócitos como a MBP e a CNPase, assim como alterações em proteínas de citoesqueleto, como actina, tubulina e na cinase de adesão focal (FAK). A MBP foi observada nas células tratadas em um padrão de distribuição desorganizado e disperso, oposto ao padrão contínuo que é observado nas células das culturas controle. Além disso, o tratamento causou uma desorganização na distribuição da CNPase, actina e tubulina. Nas células das culturas controle, estas proteínas apresentam um padrão organizado compondo as estruturas de citoqueleto semelhantes a nervuras. Após um pequeno período de tratamento (30min), actina e tubulina apresentaram o mesmo padrão de marcação puntiforme que a CNPase apresentou. O tratamento também reduziu os pontos de adesão focal demonstrados pela FAK. Com o decorrer do tratamento, após 24 e 48h, actina e tubulina aparentavam estar se reorganizando em um padrão filamentar. Estes resultados indicam um efeito importante da via da MAPK/ERK na ramificação e alongamento dos prolongamentos dos oligodendrócitos, com possíveis consequências para a formação da bainha de mielina.

Statistical analyses to support guidelines for marine avian sampling: Final report. [Digital Supplements A-G attached]

Interest in development of offshore renewable energy facilities has led to a need for high-quality, statistically robust information on marine wildlife distributions. A practical approach is described to estimate the amount of sampling effort required to have sufficient statistical power to identify species specific “hotspots” and “coldspots” of marine bird abundance and occurrence in an offshore environment divided into discrete spatial units (e.g., lease blocks), where “hotspots” and “coldspots” are defined relative to a reference (e.g., regional) mean abundance and/or occurrence probability for each species of interest. For example, a location with average abundance or occurrence that is three times larger the mean (3x effect size) could be defined as a “hotspot,” and a location that is three times smaller than the mean (1/3x effect size) as a “coldspot.” The choice of the effect size used to define hot and coldspots will generally depend on a combination of ecological and regulatory considerations. A method is also developed for testing the statistical significance of possible hotspots and coldspots. Both methods are illustrated with historical seabird survey data from the USGS Avian Compendium Database.

USE OF TSIM IN DIGITAL SIMULATION.

In this paper we shall discuss the use of the TSIM simulation software for modelling large-scale industrial processes. The discussion draws on our recent experience of modelling a large plant in the food-processing industry. We shall focus on those features of software organization and software engineering which proved to be particularly necessary for the execution of this project, and illustrate the extent to which the use of TISM facilitated the implementation of these features. We shall also make some general remarks about the 'life-cycle' of models resulting from projects of this kind.

Wave digital filter model of the entire auditory periphery

A model of the auditory periphery assembled from analog network submodels of all the relevant anatomical structures is described. There is bidirectional coupling between networks representing the outer ear, middle ear and cochlea. A simple voltage source representation of the outer hair cells provides level-dependent basilar membrane curves. The networks are translated into efficient computational modules by means of wave digital filtering. A feedback unit regulates the average firing rate at the output of an inner hair cell module via a simplified modelling of the dynamics of the descending paths to the peripheral ear. This leads to a digital model of the entire auditory periphery with applications to both speech and hearing research.

A closely integrated digital image capture device for embedded applications

A modular image capture system with close integration to CCD cameras has been developed. The aim is to produce a system capable of integrating CCD sensor, image capture and image processing into a single compact unit. This close integration provides a direct mapping between CCD pixels and digital image pixels. The system has been interfaced to a digital signal processor board for the development and control of image processing tasks. These have included characterization and enhancement of noisy images from an intensified camera and measurement to subpixel resolutions. A highly compact form of the image capture system is in an advanced stage of development. This consists of a single FPGA device and a single VRAM providing a two chip image capturing system capable of being integrated into a CCD camera. A miniature compact PC has been developed using a novel modular interconnection technique, providing a processing unit in a three dimensional format highly suited to integration into a CCD camera unit. Work is under way to interface the compact capture system to the PC using this interconnection technique, combining CCD sensor, image capture and image processing into a single compact unit. ©2005 Copyright SPIE - The International Society for Optical Engineering.