Hypoxic modulation of ca(2+) signaling in human venous and arterial endothelial cells

Our understanding of vascular endothelial cell physiology is based on studies of endothelial cells cultured from various vascular beds of different species for varying periods of time. Systematic analysis of the properties of endothelial cells from different parts of the vasculature is lacking. Here, we compare Ca(2+) homeostasis in primary cultures of endothelial cells from human internal mammary artery and saphenous vein and how this is modified by hypoxia, an inevitable consequence of bypass grafting (2.5% O(2), 24 h). Basal [Ca(2+)]( i ) and store depletion-mediated Ca(2+) entry were significantly different between the two cell types, yet agonist (ATP)-mediated mobilization from endoplasmic reticulum stores was similar. Hypoxia potentiated agonist-evoked responses in arterial, but not venous, cells but augmented store depletion-mediated Ca(2+) entry only in venous cells. Clearly, Ca(2+) signaling and its remodeling by hypoxia are strikingly different in arterial vs. venous endothelial cells. Our data have important implications for the interpretation of data obtained from endothelial cells of varying sources.

Polymer-drug conjugates: towards a novel approach for the treatment of endrocine-related cancer

The last decade has seen successful clinical application of polymer–protein conjugates (e.g. Oncaspar, Neulasta) and promising results in clinical trials with polymer–anticancer drug conjugates. This, together with the realisation that nanomedicines may play an important future role in cancer diagnosis and treatment, has increased interest in this emerging field. More than 10 anticancer conjugates have now entered clinical development. Phase I/II clinical trials involving N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide (HPMA) copolymer-doxorubicin (PK1; FCE28068) showed a four- to fivefold reduction in anthracycline-related toxicity, and, despite cumulative doses up to 1680 mg/m2 (doxorubicin equivalent), no cardiotoxicity was observed. Antitumour activity in chemotherapy-resistant/refractory patients (including breast cancer) was also seen at doxorubicin doses of 80–320 mg/m2, consistent with tumour targeting by the enhanced permeability (EPR) effect. Hints, preclinical and clinical, that polymer anthracycline conjugation can bypass multidrug resistance (MDR) reinforce our hope that polymer drugs will prove useful in improving treatment of endocrine-related cancers. These promising early clinical results open the possibility of using the water-soluble polymers as platforms for delivery of a cocktail of pendant drugs. In particular, we have recently described the first conjugates to combine endocrine therapy and chemotherapy. Their markedly enhanced in vitro activity encourages further development of such novel, polymer-based combination therapies. This review briefly describes the current status of polymer therapeutics as anticancer agents, and discusses the opportunities for design of second-generation, polymer-based combination therapy, including the cocktail of agents that will be needed to treat resistant metastatic cancer.

Dairy fat: perceptions and realities.

Milk provides many key nutrients but the saturated and trans fatty acids in milk fat are associated with perceived negative effects on human health, especially cardiovascular disease. Recent epidemiological studies and dietary intervention trials challenge this perception, however; available evidence does not support the concept that consumption of saturated fats or dairy products adversely affects the risk of coronary heart disease (although replacing some saturated fats with mono or polyunsaturated fats is likely to provide benefit). Furthermore, the trans fats found in dairy products are consumed in very low amounts and do not appear to have the negative health effects associated with the consumption of industrial sources of trans fat. Milk fat is an excellent source of oleic acid that originates mainly by endogenous synthesis from stearic acid, but increasing the milk fat content of unsaturated fatty acids requires dietary formulations that bypass rumen biohydrogenation. Recent research indicates that long-chain omega-3 fatty acids and conjugated linoleic acids have potential beneficial effects in health maintenance and the prevention of chronic diseases. Enhancing the milk fat content of these fatty acids offers exciting possibilities, but educating consumers about inaccurate and inappropriate generalisations about fat remains the primary challenge. Finally, individuals do not simply consume milk-fat-derived fatty acids on their own, but rather as components in dairy foods which are highly complex and may contain many beneficial ingredients. Overall, dairy products are critical in providing many of the essential nutrients in the human diet. Nevertheless, dairy products vary in their nutrient composition, including fat, and this needs to be considered in the context of dietary recommendations and our need to consume a balanced diet.

Is there a gold social seal? The financial effects of additions to and deletions from social stock indices

This study investigates the financial effects of additions to and deletions from the most well-known social stock index: the MSCI KLD 400. Our study makes use of the unique setting that index reconstitution provides and allows us to bypass possible issues of endogeneity that commonly plague empirical studies of the link between corporate social and financial performance. By examining not only short-term returns but also trading activity, earnings per share, and long-term performance of stocks that are involved in these events, we bring forward evidence of a ‘social index effect’ where unethical transgressions are penalized more heavily than responsibility is rewarded. We find that the addition of a stock to the index does not lead to material changes in its market price, whereas deletions are accompanied by negative cumulative abnormal returns. Trading volumes for deleted stocks are significantly increased on the event date, while the operational performances of the respective firms deteriorate after their deletion from the social index.

An isotope dilution model for partitioning phenylalanine and tyrosine uptake by the mammary gland of lactating dairy cows

An isotope dilution model for partitioning phenylalanine and tyrosine uptake by the mammary gland of the lactating dairy cow is constructed and solved in the steady state. The model contains four intracellular and four extracellular pools and conservation of mass principles are applied to generate the fundamental equations describing the behaviour of the system. The experimental measurements required for model solution are milk secretion and plasma flow rate across the gland in combination with phenylalanine and tyrosine concentrations and plateau isotopic enrichments in arterial and venous plasma and free and protein bound milk during a constant infusion of [1-(13)C]phenylalanine and [2,3,5,6-(2)H]tyrosine tracer. If assumptions are made, model solution enables determination of steady state flows for phenylalanine and tyrosine inflow to the gland, outflow from it and bypass, and flows representing the synthesis and degradation of constitutive protein and hydroxylation. The model is effective in providing information about the fates of phenylalanine and tyrosine in the mammary gland and could be used as part of a more complex system describing amino acid metabolism in the whole ruminant.

Taxon surrogates among Amazonian mammals: Can total species richness be predicted by single orders?

Limited financial sources and the difficulty in performing complete surveys, allied to the speed of habitat fragmentation and the urgent necessity in select conservation areas, create the necessity of using some methodologies which bypass these problems. One possibility is the use of surrogate taxa that might be used as indicator of others groups richness and even total richness of an area. We investigated if the use of surrogate taxon is useful among seven mammal orders in Amazon. We tested through Pearson`s correlation (Bonferroni`s adjusted) if (1) there was a correlation between richness of total species and some order; (2) there was a significant pair wise correlation between species richness of each order; and (3) the combination of two orders would give better results as a surrogate for the total richness. The correlations found, in general, were positive. It means that the increase in the richness of an order was followed by its increase in another order, as well as in the total species richness. Only Didelphimorphia was significantly correlated with the total species richness. In the pair wise analyses only one assembly, Primates and Artiodactyla, was significantly correlated with total richness. Since indicator species are more effective within taxonomic groups (life-history characteristics are likely to be more different among than within major taxonomic groups), we suggest that an indicator group might be chosen for each one. In this case, for mammals from Amazon, it would be Didelphimorphia. (C) 2008 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Conversion of CD95 (Fas) Type II into Type I signaling by sub-lethal doses of cycloheximide

CD95 (Fas/Apo-1)-mediated apoptosis was shown to occur through two distinct pathways. One involves a direct activation of caspase-3 by large amounts of caspase-8 generated at the DISC (Type I cells). The other is related to the cleavage of Bid by low concentration of caspase-8, leading to the release of cytochrome c from mitochondria and the activation of caspase-3 by the cytochrome c/APAF-1/caspase-9 apoptosome (Type 11 cells). It is also known that the protein synthesis inhibitor cycloheximide (CHX) sensitizes Type I cells to CD95-mediated apoptosis, but it remains contradictory whether this effect also occurs in Type II cells. Here, we show that sub-lethal doses of CHX render both Type I and Type II cells sensitive to the apoptogenic effect of anti-CD95 antibodies but not to chemotherapeutic drugs. Moreover, Bcl-2-positive Type II cells become strongly sensitive to CD95-mediated apoptosis by the addition of CHX to the cell culture. This is not the result of a restraint of the anti-apoptotic effect of Bcl-2 at the mitochondrial level since CHX-treated Type II cells still retain their resistance to chemotherapeutic drugs. Therefore, CHX treatment is granting the CD95-mediated pathway the ability to bypass the mitochondria requirement to apoptosis, much alike to what is observed in Type I cells. (c) 2007 Elsevier Inc. All rights reserved.

The Trojan horse method in nuclear astrophysics: recent results

Difficulties in cross-section measurements at very low energies, when charged particles are involved, led to the development of some indirect methods. The Trojan horse method (THM) allows us to bypass the Coulomb effects and has been successfully applied to several reactions of astrophysical interest. A brief review of the THM applications is reported together with some of the most recent results.

Patientens upplevelser efter en gastric byass operation : en kvalitativ intervjustudie

Syftet med studien var att beskriva patientens upplevelser efter en gastric bypass operation. En empirisk studie med kvalitativ ansats genomfördes, där intervjuer skedde med sex personer som genomfört en gastric bypass operation. Data analyserades genom kvalitativ innehållsanalys. Under intervjuerna framkom att informanterna upplevde att operationen inte hade någon negativ inverkan på deras vardagliga liv. De upplevde en ökad livskvalitet och förbättrad hälsa som lett till ett mer fysiskt aktivt liv. Viktnedgången tillsammans med omgivningens positiva reaktioner på den nya kroppen hade stärkt deras självförtroende. Den största förändringen informanterna upplevde i det vardagliga livet var deras förändrade matvanor. De beskrev att maten var i fokus och att de planerade sin vardag efter måltiderna. De följder som framkom upplevdes inte som något stort problem, utan viktminskningen och de positiva hälsoupplevelserna dominerade. Informanterna kände sig välinformerade och hade realistiska förväntningar på operationen, samt var förberedda på de konsekvenser som kunde uppstå. Studien visar att den specialiserade vården på överviktskliniker kan bidra till att underlätta tiden efter operationen för patienten. Det framkom att informanterna upplevde en kunskapsbrist om gastric bypass operationer bland sjukvårdspersonal, inom primärvård och slutenvård. För att patienten ska känna trygghet och förtroende är det därför viktigt att öka kunskapen om överviktsoperationer bland hälso- och sjukvårdspersonal.

Perfil plasmático da ICAM-1 e da VCAM-1 no pós-operatório cardíaco de lactentes submetidos à circulação extracorpórea

Introdução – Grande parte da população de crianças portadoras de defeitos cardíacos congênitos torna-se criticamente doente durante o primeiro ano de vida e necessita tratamento cirúrgico. No entanto, durante cirurgias cardíacas, ocorre uma resposta inflamatória intensa desencadeada pelo período de circulação extracorpórea (CEC), o que provoca disfunção de órgãos e tecidos. Os neutrófilos assumem um papel importante e complexo neste período, envolvendo a ligação às células endoteliais, ativação e liberação de mediadores inflamatórios. Esse processo é iniciado e mantido através de moléculas de adesão específicas, como a molécula de adesão intercelular-1 (ICAM-1) e a molécula de adesão celular-vascular-1 (VCAM-1). Formas solúveis destas moléculas apresentam variações de seus níveis durante cirurgias cardíacas com uso de CEC. Há poucos dados na literatura relacionados ao comportamento destas moléculas após cirurgia cardíaca com uso de CEC em lactentes, estando seu significado no plasma ainda por ser decifrado. Objetivos – Mensurar os níveis plasmáticos das moléculas de adesão solúveis ICAM-1 e VCAM-1 em condições basais e após exposição ao circuito de CEC em lactentes submetidos à cirurgia cardíaca para correção de defeitos cardíacos congênitos. Comparar os níveis plasmáticos destas moléculas entre pacientes acianóticos e cianóticos. Métodos – Foram estudados 21 lactentes, durante o período de junho de 1998 a março de 1999, submetidos à cirurgia cardíaca com uso de CEC. Foram analisados os níveis plasmáticos da ICAM-1 e da VCAM-1 solúveis pelo método de ELISA, na indução anestésica, ao término da CEC e 8 e 26 horas após o término da CEC. Resultados – As patologias cardíacas congênitas mais comuns foram defeito do septo atrioventricular e tetralogia de Fallot. As médias de idade e de peso foram 6,6 meses e 5,8 Kg. As medianas dos tempos de CEC e de clampeamento de aorta foram, respectivamente, 87 e 53 minutos. Todos os lactentes utilizaram inotrópicos. As medianas dos tempos de intubação e de internação foram 72 horas e 21 dias. A taxa de mortalidade dos pacientes foi de 9,5%. Os níveis basais da ICAM-1 e da VCAM-1 foram significativamente mais elevados do que aqueles considerados normais (P<0,0001). Os níveis da ICAM-1 diminuíram significaticamente ao término da CEC (P<0,001), voltando a aumentar significativamente 8 horas após o término deste período (P<0,005), sem no entanto, alcançar os valores basais 26 horas depois. A VCAM-1 apresentou comportamento semelhante. No entanto, 26 horas após CEC houve diminuição significativa de seus níveis em relação ao valor identificado 8 horas após tal período (P<0,005). Não houve diferença estatisticamente significativa quanto aos valores das moléculas entre pacientes acianóticos e cianóticos (P>0,1). Não houve associação entre os valores das moléculas e as variáveis perioperatórias e os desfechos clínicos. Conclusões – Os níveis plasmáticos das moléculas de adesão solúveis ICAM-1 e VCAM-1 são aumentados em lactentes com cardiopatias congênitas acianóticas e cianóticas no seu estado basal. Os níveis plasmáticos de ICAM-1 e VCAM-1 solúveis variam após exposição ao circuito de CEC em lactentes submetidos à cirurgia cardíaca para correção de cardiopatias congênitas, apresentando um comportamento característico nestes pacientes. Não há diferenças no comportamento das moléculas entre pacientes acianóticos e cianóticos.

Desenhos de mercado de gás natural e o caso brasileiro

Este trabalho tem como objetivo analisar os principais fatores envolvidos no desenvolvi- mento e funcionamento da indústria de gás natural, para então detectar e diagnosticar as principais falhas existentes no mercado brasileiro de gás. A análise é realizada a partir da caracterização dos diversos desenhos de mercado da indústria de gás natural presentes no mundo (desde a estrutura totalmente verticalizada até a mais competitiva, com a presença de mercados de atacado e varejo). Pontos importantes são ressaltados tais como os princípios de precificação do gás em cada modelo, as práticas regulatórias empregadas e as principais estruturas surgidas. Destas, destacam-se as relações entre os agentes nos mercados de varejo competitivos, o livre acesso, o bypass físico e comercial e o surgimento do mercado spot. Essa linha de trabalho culmina com a análise da atual estrutura do mercado de gás natural no Brasil, assim como possíveis desenhos que essa indústria poderá atingir a médio e longo prazos dependendo dos mecanismos regulatórios utilizados. Para isso, são apresentados os modelos de gás existentes e a interação entre eles. Ressalta-se, também, a importância do livre acesso para o desenvolvimento do setor no Brasil.

Ativação linfocitária durante a cirurgia de revascularização miocárdica : papel da circulação extracorpórea

Introdução: Sabe-se que a cirurgia de revascularização miocárdica está associada com alteração dos mediadores inflamatórios e da função imunitária, com ativação precoce dos linfócitos que poderia ser responsável pela linfopenia e diminuição da atividade dos linfócitos no pós-operatório. A elevação enzimática está diminuída na cirurgia sem circulação extracorpórea mas este achado não está associado a melhor evolução clínica. Nesta tese, testamos a hipótese de que a cirurgia de revascularização miocárdica realizada sem circulação extracorpórea pode levar a uma ativação linfocitária de menor intensidade do que a cirurgia com circulação extracorpórea. Métodos: A resposta da ativação linfocitária foi estudada durante o período trans e pósoperatório em 28 pacientes randomizados para cirurgia de coronária sem circulação extracorpórea (n=13) ou cirurgia convencional com circulação extracorpórea (n=15), utilizando citometria de fluxo para determinar a expressão de CD25, CD26, CD69 e DR em linfócitos T (CD3+) e B (CD19+), em sangue periférico. No mesmo período foram realizadas dosagens de troponina I por quimioluminescência e realizado ecocardiograma uni-bidimensional antes e após a cirurgia. Resultados: Não houve diferença estatisticamente significativa para nenhum dos marcadores de ativação linfocitária quando comparados os grupos operados sem ou com circulação extracorpórea (ANOVA bicaudal para medidas repetidas, p>0,05). Considerando todos os pacientes estudados, houve uma elevação da expressão proporcional de CD25 e CD69 em linfócitos T (CD3+) e B (CD19+). Nos linfócitos T, o valor proporcional médio mais elevado (+ EP) de CD69 foi observado 6 horas após terem sido completadas as anastomoses (+75 + 476%) e CD25 teve uma elevação mais gradual, com o pico de seu valor médio (+48 + 24 %) ocorrendo 24 horas após a revascularização. Em linfócitos B, o pico do valor médio de CD69 (+104 + 269 %) ocorreu também após o fim das anastomoses. CD25 teve seu pico de valor médio (+150 + 773 %) 112 horas após a revascularização e seu último valor medido ainda estava elevado. A expressão de CD26 em linfócitos T teve um aparente declínio nos seus valores proporcionais médios (-42 + 32 %) 12 horas após o fim das anastomoses. Não houve diferença significativa na elevação enzimática entre os dois grupos (teste estatístico >0,05). No ecocardiograma, o grupo operado sem circulação extracorpórea apresentou diminuição do volume diastólico (p=0,001) de da fração de ejeção (P=0,012), enquanto no grupo com circulação extracorpórea, diminuíram os volumes diastólico (p=0,006) e sistólico (p=0,01). Conclusões: 1) Comparando a cirurgia de revascularização miocárdica com circulação extracorpórea, a cirurgia sem circulação extracorpórea não reduz a ativação dos linfócitos. 2) A cirurgia de revascularização miocárdica produz uma ativação precoce dos linfócitos, com aumento da expressão de CD69 e CD25 em linfócitos T (CD3+) e B (CD19+), em sangue periférico. A elevação precoce de CD69, e elevação mais tardia de CD25, pode indicar duas partes de uma seqüência de ativação linfocitária. 3) O comportamento das enzimas cardíacas e dos achados ecocardiográficos não sugere benefício da cirurgia sem circulação extracorpórea sobre o dano miocárdio.

Reuse-based test planning for core-based systems-on-chip

Electronic applications are currently developed under the reuse-based paradigm. This design methodology presents several advantages for the reduction of the design complexity, but brings new challenges for the test of the final circuit. The access to embedded cores, the integration of several test methods, and the optimization of the several cost factors are just a few of the several problems that need to be tackled during test planning. Within this context, this thesis proposes two test planning approaches that aim at reducing the test costs of a core-based system by means of hardware reuse and integration of the test planning into the design flow. The first approach considers systems whose cores are connected directly or through a functional bus. The test planning method consists of a comprehensive model that includes the definition of a multi-mode access mechanism inside the chip and a search algorithm for the exploration of the design space. The access mechanism model considers the reuse of functional connections as well as partial test buses, cores transparency, and other bypass modes. The test schedule is defined in conjunction with the access mechanism so that good trade-offs among the costs of pins, area, and test time can be sought. Furthermore, system power constraints are also considered. This expansion of concerns makes it possible an efficient, yet fine-grained search, in the huge design space of a reuse-based environment. Experimental results clearly show the variety of trade-offs that can be explored using the proposed model, and its effectiveness on optimizing the system test plan. Networks-on-chip are likely to become the main communication platform of systemson- chip. Thus, the second approach presented in this work proposes the reuse of the on-chip network for the test of the cores embedded into the systems that use this communication platform. A power-aware test scheduling algorithm aiming at exploiting the network characteristics to minimize the system test time is presented. The reuse strategy is evaluated considering a number of system configurations, such as different positions of the cores in the network, power consumption constraints and number of interfaces with the tester. Experimental results show that the parallelization capability of the network can be exploited to reduce the system test time, whereas area and pin overhead are strongly minimized. In this manuscript, the main problems of the test of core-based systems are firstly identified and the current solutions are discussed. The problems being tackled by this thesis are then listed and the test planning approaches are detailed. Both test planning techniques are validated for the recently released ITC’02 SoC Test Benchmarks, and further compared to other test planning methods of the literature. This comparison confirms the efficiency of the proposed methods.

A avaliação da efetividade da política de ressarcimento ao Sistema Único de Saúde

A necessidade de coibir o descontrole do mercado dos planos de saúde tornou-se uma questão importante no cenário nacional, na década de 90. Desta forma, 10 anos após a criação do Sistema Único de Saúde (SUS), em um contexto de pressões e de baixa regulação dos planos de saúde, instituiu-se a Lei no 9.656/1998, uma legislação inédita no Brasil, pois regulou as atividades das operadoras de planos de saúde (OPSs) em nível nacional. Dentre outras questões, a Lei estabeleceu a política de ressarcimento ao SUS, impondo no Artigo no 32 o ressarcimento pelas OPSs das despesas geradas ao SUS quando um beneficiário usa a rede pública para um procedimento coberto pelo seu plano. No entanto, esta política é parte dos conflitos que se situa no limite dos interesses entre o setor privado e público: as OPSs já em 1998 moveram uma ação direta de inconstitucionalidade contra a mesma e têm recorrido frequentemente ao judiciário para não pagarem os valores cobrados pela Agência Nacional de Saúde Suplementar (ANS). Após 12 anos da Lei, ainda não se conhece o seu real impacto. Portanto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a efetividade da política de ressarcimento ao SUS. A metodologia utilizada baseou-se na avaliação de dados produzidos pela ANS e pelo Ministério da Saúde/DATASUS, e das entrevistas realizadas com gerentes da rede pública e privada. Apesar das ações da ANS, os resultados apontaram a reduzida efetividade da política em termos financeiros, jurídicos e sobre o seu público-alvo. Apenas 22% do cobrado às OPSs foi restituído ao Sistema Único de 1999 a 2006, a política é vista como inconstitucional pelo mercado e tem reduzido impacto sobre as OPSs, o SUS e os beneficiários. Questões como os valores da tabela única nacional de equivalência de procedimentos (TUNEP), a inconstitucionalidade do ressarcimento e a opção do beneficiário pelo uso do SUS foram explicitadas pelos gestores de planos de saúde como fatores geradores de resistência das OPSs frente à política. Os dirigentes públicos afirmaram a importância da mesma para tutela de beneficiários e do SUS, como de ter viabilizado a construção do Cadastro de Beneficiários da ANS, porém, reconhecem os seus baixos resultados. Recomenda-se a manutenção do ressarcimento ao Sistema Único como um instrumento para coibir empresas que procuram contornar as exigências legais da Agência Reguladora, a qual atua promovendo a defesa do interesse público na assistência suplementar à saúde. No entanto, a mesma deve sofrer as devidas reformulações e devem ser estabelecidos consensos entre o SUS e o setor suplementar.