Contribution of transmembrane and cytoplasmic domains to membrane protein association

Membrane proteins are critical to every aspect of cell physiology, with their association mediating important biological functions. The transmembrane and cytoplasmic domains are known to be important for their association. In order to characterize their role in detail, we have applied different biophysical techniques in detergent micelles to two model systems. The first study involves FcRγ, a single transmembrane domain protein existing as a disulfide linked homodimer. We investigated the role of a conserved transmembrane polar residue and the cytoplasmic tail in FcRγ homo-interactions. Our results by various biophysical techniques including SDS-PAGE, circular dichroism and sedimentation equilibrium in detergent micelles indicate importance of both the transmembrane polar residue and cytoplasmic tail in maintaining proper conformation for FcRγ homo-interactions. A contrasting second study was on L-selectin, another single transmembrane domain protein with a large extracellular domain and a short cytoplasmic tail. Previous cross-linking experiments indicate its possible dimerization. However, the purified fragment of L-selectin and corresponding mutants did not dimerize when analyzed by TOXCAT assay, sedimentation equilibrium and fluorescence resonance energy transfer. It was likely that the presence of juxtamembrane positively charged residues led to decreased migrational rates in SDS PAGE. In conclusion, complementary biophysical techniques should be used with care when studying membrane protein association in detergent micelles. As an extension to our study on L-selectin, we also investigated its interaction with Calmodulin (CaM) in detergent micelles. CaM was found to interact with different detergents. We applied fluorescence and NMR spectroscopy to characterize the interaction of both the apo and Ca 2+ bound form of CaM, with commonly used detergents, below and above their respective critical micelle concentrations. The interaction of apo-CaM with detergents was found to vary with the nature of the detergent head group, whereas Ca2+-CaM interacted with individual detergent molecules irrespective of the nature of their head group. NMR titration experiments of CaM with detergents indicated involvement of specific residues from the N-lobe, linker and C-lobe of CaM. ^

L -Sox5 and Sox6: Architectural transcription factors in chondrogenesis

Transcription factors often determine cell fate and tissue development. Chondrogenesis is the developmental process by which cartilages form. Recently, gene targeting studies have shown that two transcription factors, L-Sox5 and Sox6, play essential and redundant roles in chondrogenesis in vivo by converting precartilaginous cell condensations into cartilages. Both are highly similar High-Mobility-Group (HMG)-domain proteins that bind and subsequently bend DNA containing the 7bp HMG site (A/T)(A/T)CAA(A/T)G. They have no transactivation domain, but homo- and hetero-dimerize and preferentially bind DNA containing two HMG sites. They are thought to play an architectural role in transactivation by facilitating long-range DNA and protein interactions. To understand their molecular mechanism of action, we investigated how phasing, orientation, and spacing between HMG sites affect L-Sox5 and Sox6 DNA-binding. We determined that L-Sox5 and Sox6 dimers bind with high affinity to paired HMG sites in DNA rather than a single HMG site. Binding of paired sites is independent of DNA helical phasing, orientation of paired HMG sites and independent of distance up to 255 base pairs between sites. Mutational analysis demonstrated that binding of L-Sox5 and Sox6, independent of orientation of the sites, is critically dependent on the presence of paired HMG sites rather than one HMG site alone. Our data support a unique and novel model whereby L-Sox5 and Sox6 dimerize and bind DNA with pronounced spatial flexibility, possibly by a flexible hinge, and act as architectural transcription factors that bring distant DNA sites and proteins together to form higher order transcriptional complexes that are essential for the activation of their target genes in chondrogenesis. ^

Facetas de la relación política-territorio

Revista Proyección 6 integra autores latinoamericanos y europeos que presentan nuevas formas de organización del territorio, consecuencias y relación con políticas públicas, empresariales, macroeconómicas, regionales o locales. Se refieren al conflicto entre nuevas racionalizaciones económicas y comunidades tradicionales, expansión urbana y seguridad humana, políticas de “laisser faire" y ambiente natural, grandes obras para comercio y transporte transcontinental y aumento de pobreza y marginalidad. La reflexión teórico conceptual está presente en temas como políticas relativas al Paisaje en el contexto europeo, área rural y sus problemas de desarrollo, relación entre Ordenamiento Territorial y seguridad humana. El OT y los requerimientos de planificación conforme a modelos de desarrollo equitativos, con visión de futuro, es un deseo expreso por los autores. Reclaman nuevas formas de gestión a partir de políticas integradas y transversales, mejoramiento e innovación en las organizaciones, atención de todo punto de vista para minimizar efectos negativos del accionar del homo economicus.

Desde adentro del libro de Job : la lectura como clave de interpretación en tres textos tardíos de Osvaldo Horacio Dondo

Este trabajo consta, fundamentalmente, de dos partes bien diferenciadas. En la primera, se ubica al poeta Osvaldo Horacio Dondo (1902-1962) en el marco de las letras argentinas, cosa que se juzga necesaria, ya que hasta la década del 60 estuvo en la alta estima de muchos, pero luego cayó en el olvido generalizado. Su lugar es peculiar y representativo de aquellos que, habiéndose iniciado en el martinfierrismo, luego siguieron diversos derroteros; en este caso, el de la llamada vanguardia católica. Dondo es en sí mismo digno de ser considerado, como atestigua la autoridad de un Ara y la de un Aguirre, dos de los principales antólogos de la poesía argentina. El rescate de este autor será hecho, por un lado, teniendo en cuenta las antologías en tanto contracara ineludible de la historia de la literatura, de acuerdo con el ya canónico artículo de Alfonso Reyes (1952). Por otro lado, en la segunda parte, se ensaya un abordaje de su escritura desde el ángulo de la lectura como fenómeno complejo, que en cierta medida constituye un rasgo esencial del homo faber, además de actuar a modo de clave de interpretación de sus textos, especialmente los tardíos.

San Genet en las pampas : Una educación sentimental

En este trabajo se analizan algunos aspectos de la obra de Jean-Paul Sartre San Genet, comediante y mártir (1952), que permiten entender el interés y el impacto que esa lectura tuvo en un grupo de jóvenes que inician su respectivas trayectorias en la década del 50 y que marcan los límites de lo que se podrá pensar y decir sobre género y (homo)sexualidad en la primera mitad de los 60. Me refiero a Juan José Sebreli, Carlos Correas y Oscar Masotta. Me interesa indagar en qué medida el San Genet, en particular, y el existencialismo en general, permitieron articular nuevas formas incipientes de subjetividad y plantear la posibilidad de sacar a la luz, en ensayos y obras de ficción, personajes y experiencias que desafiaban la supuesta naturalidad de los modelos de identidad sexual hegemónicos

San Genet en las pampas : Una educación sentimental

En este trabajo se analizan algunos aspectos de la obra de Jean-Paul Sartre San Genet, comediante y mártir (1952), que permiten entender el interés y el impacto que esa lectura tuvo en un grupo de jóvenes que inician su respectivas trayectorias en la década del 50 y que marcan los límites de lo que se podrá pensar y decir sobre género y (homo)sexualidad en la primera mitad de los 60. Me refiero a Juan José Sebreli, Carlos Correas y Oscar Masotta. Me interesa indagar en qué medida el San Genet, en particular, y el existencialismo en general, permitieron articular nuevas formas incipientes de subjetividad y plantear la posibilidad de sacar a la luz, en ensayos y obras de ficción, personajes y experiencias que desafiaban la supuesta naturalidad de los modelos de identidad sexual hegemónicos

Clio may be seen and listened. Movies as source and resource on history

El cine como fuente historiográfica es utilizado a partir de la "batalla" que dio Marc Ferro hacia el interior de Annales. Cuando era difícil que se aceptaran otras fuentes que no fueran las gráficas, este historiador logró abrirse camino hasta llegar a ser el director de Annales en los años '70. El discurso de la imagen o el discurso audiovisual representa con mayor verosimilitud lo que el discurso gráfico no alcanza a expresar. Sin embargo, la sinécdoque y la generalización se encuentran a mitad de camino en un juego representativo para complementarse a la hora de comprender y reconstruir el pasado. El aporte del cine puede tomarse como reflejo o representación social y también como una alternativa discursiva. En este sentido, Rosenstone con el apoyo de Hayden White y su análisis de la "historiofotía" son los que incursionan en esta nueva dimensión, esto es la narración audiovisual de la historia

San Genet en las pampas : Una educación sentimental

En este trabajo se analizan algunos aspectos de la obra de Jean-Paul Sartre San Genet, comediante y mártir (1952), que permiten entender el interés y el impacto que esa lectura tuvo en un grupo de jóvenes que inician su respectivas trayectorias en la década del 50 y que marcan los límites de lo que se podrá pensar y decir sobre género y (homo)sexualidad en la primera mitad de los 60. Me refiero a Juan José Sebreli, Carlos Correas y Oscar Masotta. Me interesa indagar en qué medida el San Genet, en particular, y el existencialismo en general, permitieron articular nuevas formas incipientes de subjetividad y plantear la posibilidad de sacar a la luz, en ensayos y obras de ficción, personajes y experiencias que desafiaban la supuesta naturalidad de los modelos de identidad sexual hegemónicos