Convergencia de vías de señalización en un modelo de apoptosis

La sepsis es un evento inflamatorio generalizado del organismo inducido por un daño causado generalmente por un agente infeccioso. El patógeno más frecuentemente asociado con esta entidad es el Staphylococcus aureus, responsable de la inducción de apoptosis en células endoteliales debida a la producción de ceramida. Se ha descrito el efecto protector de la proteína C activada (PCA) en sepsis y su relación con la disminución de la apoptosis de las células endoteliales. En este trabajo se analizó la activación de las quinasas AKT, ASK1, SAPK/JNK y p38 en un modelo de apoptosis endotelial usando las técnicas de Western Blotting y ELISA. Las células endoteliales (EA.hy926), se trataron con C2-ceramida (130μM) en presencia de inhibidores químicos de cada una de estas quinasas y PCA. La supervivencia de las células en presencia de inhibidores químicos y PCA fue evaluada por medio de ensayos de activación de las caspasas 3, 7 y 9, que verificaban la muerte celular por apoptosis. Los resultados evidencian que la ceramida reduce la activación de AKT y aumenta la activación de las quinasas ASK, SAPK/JNK y p38, en tanto que PCA ejerce el efecto contrario. Adicionalmente se encontró que la tiorredoxina incrementa la activación/fosforilación de AKT, mientras que la quinasa p38 induce la defosforilación de AKT.

Supervivencia en pacientes con trasplante hepático realizado en la Fundación Cardioinfantil entre 2005 y 2013

Introducción: El trasplante hepático es la terapia de elección para los pacientes con enfermedad hepática terminal, logrando mejorar su expectativa y calidad de vida, de acuerdo a estudios realizados en otros países. En la Fundación Cardioinfantil – Instituto de Cardiología (FCI-IC) se han realizado 332 trasplantes hepáticos hasta el 2014, pero no se conoce la supervivencia y los factores pronósticos propios de los pacientes intervenidos. Objetivo Principal: Estimar la supervivencia a 1, 3 y 5 años e identificar los principales factores pronósticos de los pacientes a quienes se les realizó trasplante hepático en el periodo 2005-2013 en la FCI-IC. Método: Estudio observacional y retrospectivo, basado en revisión de historias clínicas de los pacientes adultos a quienes se les realizó trasplante hepático en el periodo 2005-2013 en la FCI-IC. Resultados: La supervivencia al año fue de 90.91% (IC95% 86.40-93.98), a los 3 años 83.64% (IC95% 77.89-88.01) y a los 5 años de 79.18% (IC95% 72.54-84.39). Los principales factores pronósticos fueron el antecedente de ascitis (HR 2.449, IC 1.252 – 4.792), la edad del donante (HR 1.040, IC 1.009 – 1.071) y el receptor (HR 1.037, IC 1.014 – 1.060). Se encontró una mayor supervivencia en los pacientes con cirrosis alcohólica (HR 0.099, IC 0.021 – 0.467). Conclusiones: El estudio mostró una supervivencia mayor a la reportada en estudios realizados en Estados Unidos (67.4-73.0% a los 5 años) y España (73,3% a los 3 años) y similar a la de Chile (80.0% a los 5 años). Cabe resaltar que estos estudios incluyeron series más grandes de pacientes.

Rainforest worlds.

Describe las características climáticas y el mundo de las selvas desde las de América del Sur a los bosques tropicales de Australia, descubriendo las plantas y los animales que allí viven y las preocupaciones ecológicas para conservar este ecosistema.

The art of teaching writing.

A partir de los conocimientos obtenidos a lo largo de ocho años de investigación sobre el desarrollo de la escritura en los niños, este libro se centra en la enseñanza de ésta en la escuela primaria. A lo largo de los capítulos, se ocupa de varios temas: la creación de un aula para fomentar y apoyar la escritura, las conexiones lectura-escritura, las primeras incursiones en la escritura por los alumnos más pequeños hasta los problemas y éxitos en la adolescencia, el equilibrio entre contenido y forma, redacción de documentos.

All kinds of animals.

Para informar a los niños sobre el mundo animal que les rodea y los lugares en que viven, escarabajos, ballenas azules, zorros, caracoles, elefantes, ranas, monos, perros, pájaros, reptiles y anfibios, insectos y animales marinos entre otros.

Things that go.

Todos los días, podemos escuchar los sonidos de todo tipo de máquinas de transporte por tierra, mar y aire. Motocicletas, automóviles, camiones, trenes y aviones llevan personas y mercancías de un lugar a otro. Con un texto breve se introduce a los niños en las diversas formas de transporte.

Me and my world.

Se describe el entorno y diversos aspectos del mismo incluidos las familias, las comunidades, lugares para vivir y comprar, tipos de hogares y escuelas, puestos de trabajo, juegos y celebraciones.

A practical guide to teaching citizenship in the secondary school.

Está planteado para desarrollar habilidades básicas de enseñanza y desarrollar o reforzar el conocimiento y comprensión de la materia de la educación para la ciudadanía en profesores en formación, aunque también puede ser de utilidad a recién titulados y profesores principiantes. Proporciona muchas actividades prácticas y materiales que ofrecen la oportunidad de analizar el aprendizaje y el rendimiento.

Learning to teach citizenship in the secondary school : a companion to school experience.

Este texto ayuda tanto a los estudiantes que se están formando para enseñar ciudadanía como a los profesores con experiencia que han optado por asumir la responsabilidad de impartir esta materia fundamental. También, ayuda a los alumnos a comprender su papel como ciudadanos en la sociedad actual. Se examina la ciudadanía como un tema amplio que se puede enseñar como tal ó bien a través de otras asignaturas del curriculo: historia, inglés, teatro, medios de comunicación, educación religiosa; e, igualmente, a través de actividades fuera del aula basadas en la comunidad de trabajo y en el aprendizaje en la calle.

The binding site distance test score: a robust method for the assessment of predicted protein binding sites

We propose a novel method for scoring the accuracy of protein binding site predictions – the Binding-site Distance Test (BDT) score. Recently, the Matthews Correlation Coefficient (MCC) has been used to evaluate binding site predictions, both by developers of new methods and by the assessors for the community wide prediction experiment – CASP8. Whilst being a rigorous scoring method, the MCC does not take into account the actual 3D location of the predicted residues from the observed binding site. Thus, an incorrectly predicted site that is nevertheless close to the observed binding site will obtain an identical score to the same number of nonbinding residues predicted at random. The MCC is somewhat affected by the subjectivity of determining observed binding residues and the ambiguity of choosing distance cutoffs. By contrast the BDT method produces continuous scores ranging between 0 and 1, relating to the distance between the predicted and observed residues. Residues predicted close to the binding site will score higher than those more distant, providing a better reflection of the true accuracy of predictions. The CASP8 function predictions were evaluated using both the MCC and BDT methods and the scores were compared. The BDT was found to strongly correlate with the MCC scores whilst also being less susceptible to the subjectivity of defining binding residues. We therefore suggest that this new simple score is a potentially more robust method for future evaluations of protein-ligand binding site predictions.

S-nitrosylation of proteins at the leading edge of migrating trophoblasts by inducible nitric oxide synthase promotes trophoblast invasion

Nitric oxide regulates many important cellular processes including motility and invasion. Many of its effects are mediated through the modification of specific cysteine residues in target proteins, a process called S-nitrosylation. Here we show that S-nitrosylation of proteins occurs at the leading edge of migrating trophoblasts and can be attributed to the specific enrichment of inducible nitric oxide synthase (iNOS/NOS2) in this region. Localisation of iNOS to the leading edge is co-incidental with a site of extensive actin polymerisation and is only observed in actively migrating cells. In contrast endothelial nitric oxide synthase (eNOS/NOS3) shows distribution that is distinct and non-colocalised with iNOS, suggesting that the protein S-nitrosylation observed at the leading edge is caused only by iNOS and not eNOS. We have identified MMP-9 as a potential target for S-nitrosylation in these cells and demonstrate that it co-localises with iNOS at the leading edge of migrating cells. We further demonstrate that iNOS plays an important role in promoting trophoblast invasion, which is an essential process in the establishment of a successful pregnancy.

Fas ligand-induced apoptosis is regulated by nitric oxide through the inhibition of fas receptor clustering and the nitrosylation of protein kinase Cepsilon

Apoptosis induced by the death-inducing ligand FasL (CD95L) is a major mechanism of cell death. Trophoblast cells express the Fas receptor yet survive in an environment that is rich in the ligand. We report that basal nitric oxide (NO) production is responsible for the resistance of trophoblasts to FasL-induced apoptosis. In this study we demonstrate that basal NO production resulted in the inhibition of receptor clustering following ligand binding. In addition NO also protected cells through the selective nitrosylation, and inhibition, of protein kinase Cepsilon (PKCepsilon) but not PKCalpha. In the absence of NO production PKCepsilon interacted with, and phosphorylated, the anti-apoptotic protein cFLIP. The interaction is predominantly with the short form of cFLIP and its phosphorylation reduces its recruitment to the death-inducing signaling complex (DISC) that is formed following binding of a death-inducing ligand to its receptor. Inhibition of cFLIP recruitment to the DISC leads to increased activation of caspase 8 and subsequently to apoptosis. Inhibition of PKCepsilon using siRNA significantly reversed the sensitivity to apoptosis induced by inhibition of NO synthesis suggesting that NO-mediated inhibition of PKCepsilon plays an important role in the regulation of Fas-induced apoptosis.