Aquaporin 3 (AQP3) participates in the cytotoxic response to nucleoside-derived drugs

Background: Nucleoside analogs used in the chemotherapy of solid tumors, such as the capecitabine catabolite50-deoxy-5-fluorouridine (50-DFUR) trigger a transcriptomic response that involves the aquaglyceroporin aquaporin 3 along with other p53-dependent genes. Here, we examined whether up-regulation of aquaporin 3 (AQP3) mRNA incancer cells treated with 50-DFUR represents a collateral transcriptomic effect of the drug, or conversely, AQP3participates in the activity of genotoxic agents. Methods: The role of AQP3 in cell volume increase, cytotoxicity and cell cycle arrest was analyzed using loss-of-function approaches. Results: 50-DFUR and gemcitabine, but not cisplatin, stimulated AQP3 expression and cell volume, which was partially and significantly blocked by knockdown of AQP3. Moreover, AQP3 siRNA significantly blocked other effects of nucleoside analogs, including G1/S cell cycle arrest, p21 and FAS up-regulation, and cell growth inhibition. Short incubations with 5-fluorouracil (5-FU) also induced AQP3 expression and increased cell volume, and the inhibition of AQP3 expression significantly blocked growth inhibition triggered by this drug. To further establish whether AQP3 induction is related to cell cycle arrest and apoptosis, cells were exposed to long incubations with escalating doses of 5-FU. AQP3 was highly up-regulated at doses associated with cell cycle arrest, whereas at doses promoting apoptosis induction of AQP3 mRNA expression was reduced. Conclusions: Based on the results, we propose that the aquaglyceroporin AQP3 is required for cytotoxic activity of 5’-DFUR and gemcitabine in the breast cancer cell line MCF7 and the colon adenocarcinoma cell line HT29, and is implicated in cell volume increase and cell cycle arrest.

Avaliação experimental do atordoamento da tireóide em camundongos

OBJETIVO: O atordoamento do tecido tireoidiano após doses diagnósticas de iodo-131 é descrito como causa de baixa captação e resposta insatisfatória a doses terapêuticas subseqüentes. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver um modelo experimental do atordoamento tireoidiano pós-actínico. MATERIAIS E MÉTODOS: Um total de 63 camundongos recebeu dose equivalente de 45 Sv na tireóide, mediante irradiação com iodo-123. Esta dose é similar à estimada para os remanescentes tireoidianos após administração de 185 MBq (5 mCi) de iodo-131 para pesquisa de corpo inteiro. As medidas de captação tireoidiana de uma dose traçadora de iodo-131 foram efetuadas em subgrupos de nove animais, 2, 3, 5, 7, 12 e 26 dias após a irradiação. A captação nestes subgrupos foi correlacionada à de um grupo controle de nove animais não irradiados. RESULTADOS: A captação de iodo no grupo controle foi de 9,26%. Não foi observada variação significativa do valor médio de captação no período de tempo estudado. Houve aumento da variância das medidas efetuadas cinco dias após a irradiação, quando quatro dos nove animais apresentaram captação menor que 60% da média do grupo controle. CONCLUSÃO: Não houve queda sistemática da captação nos animais submetidos à dose de 45 Sv, notando-se, entretanto, tendência a maior flutuação na captação cinco dias após a irradiação. Estes achados podem ser decorrentes de diferenças interespécies ou podem indicar que o atordoamento com doses nesta faixa dependa de características individuais ou anormalidades funcionais prévias, que se somam ao efeito da radiação.

Metástase de câncer gástrico simulando neoplasia primária de pulmão: relato de caso e revisão da literatura

O adenocarcinoma gástrico apresenta, freqüentemente, disseminação por extensão direta para órgãos vizinhos. Metástases para sítios distantes, como o pulmão, são menos freqüentes, sugerindo usualmente outras doenças. O objetivo deste artigo é apresentar o caso de um paciente de 47 anos de idade, cujos exames de imagem (radiografias simples e tomografia computadorizada de tórax) apresentaram características sugestivas de neoplasia pulmonar primária e com diagnóstico simultâneo de câncer gástrico evidenciado pela endoscopia digestiva alta. A biópsia, guiada por fibrobroncoscopia, da massa torácica confirmou o diagnóstico de metástase pulmonar de adenocarcinoma gástrico. Além da apresentação do caso, é feita uma revisão do padrão de disseminação do câncer gástrico.

Calcificações malignas da mama: correlação mamografia-anatomia patológica

Neste trabalho foram realizados 30 estudos de correlação entre os achados da mamografia e da anatomia patológica em 29 pacientes com tumores malignos na mama, cujas mamografias apresentaram calcificações relacionadas com as lesões. Os objetivos principais foram: verificar se as formas das calcificações corresponderam a tipos específicos de tumores e se as formas das calcificações estavam relacionadas aos locais onde eram formadas. Foram estudados dois aspectos objetivos das calcificações identificados nas mamografias: forma e distribuição. Este estudo concluiu que os carcinomas tipo comedo tiveram elevada freqüência de calcificações pleomorfas (95,5%) e padrão de distribuição ductal em 66,5% dos casos. Os carcinomas tipo cribriforme, quando não associados ao tipo comedo, evidenciaram somente calcificações arredondadas em 66,5% dos casos e predominância de distribuição indefinida (78,5%). Os tumores micropapilares, quando não associados ao tipo comedo, mostraram somente calcificações arredondadas em 66,5% dos casos e predominância do padrão de distribuição indefinido (66,5%). Nenhum tumor mostrou padrão de distribuição lobular. Calcificações amorfas na ausência de nódulo tumoral são suspeitas de carcinoma ductal infiltrante. De acordo com o padrão histológico arquitetural dos 30 tumores, 24 (80%) tiveram calcificações com as formas esperadas.

BRAF Alterations as Therapeutic Targets in Non-Small-Cell Lung Cancer.

BACKGROUND: Several subsets of non-small-cell lung cancer (NSCLC) are defined by molecular alterations acting as tumor drivers, some of them being currently therapeutically actionable. The rat sarcoma (RAS)-rapidly accelerated fibrosarcoma (RAF)-mitogen-activated protein/extracellular signal-regulated kinase kinase (MEK)-extracellular signal-regulated kinase (ERK) pathway constitutes an attractive potential target, as v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B (BRAF) mutations occur in 2-4% of NSCLC adenocarcinoma. METHODS: Here, we review the latest clinical data on BRAF serine/threonine kinase inhibitors in NSCLC. RESULTS: Treatment of V600E BRAF-mutated NSCLC with BRAF inhibitor monotherapy demonstrated encouraging antitumor activity. Combination of BRAF and MEK inhibitors using dabrafenib and trametinib is under evaluation. Preliminary data suggest superior efficacy compared with BRAF inhibitor monotherapy. CONCLUSION: Targeting BRAF alterations represents a promising new therapeutic approach for a restricted subset of oncogene-addicted NSCLC. Prospect ive trials refining this strategy are ongoing. A next step will probably aim at combining BRAF inhibitors and immunotherapy or alternatively improve a multilevel mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway blockade by combining with ERK inhibitors.

Targeted Therapy for Patients with BRAF-Mutant Lung Cancer: Results from the European EURAF Cohort.

INTRODUCTION: Approximately 2% of lung adenocarcinomas have BRAF (v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B) mutations, including V600E and other types. Vemurafenib, dabrafenib, and sorafenib as BRAF inhibitors are currently tested in clinical trials, but access for patients is limited. The aim of this study was to document the clinical course of patients treated outside of clinical trials. METHODS: We conducted a retrospective multicenter cohort study in Europe of patients with advanced BRAF-mutant lung cancer treated with known BRAF inhibitors. Data were anonymized and centrally assessed for age, gender, smoking, histology, stage, local molecular diagnostic results, systemic therapies, and survival. Best response was assessed locally by RECIST1.1. RESULTS: We documented 35 patients treated in 17 centers with vemurafenib, dabrafenib, or sorafenib. Median age was 63 years (range 42-85); gender was balanced; 14 (40%) were never smokers; all (100%) had adenocarcinoma; 29 (83%) had V600E; 6 (17%) had other mutations; one of them had a concomitant KRAS mutation. Thirty (86%) patients had chemotherapy in the first line. Overall survival with first-line therapy was 25.3 months for V600E and 11.8 months for non-V600E. Thirty-one patients received one BRAF inhibitor, and four received a second inhibitor. Overall response rate with BRAF therapy was 53%, and disease control rate was 85%. Median progression-free survival with BRAF therapy was 5.0 months, and overall survival was 10.8 months. CONCLUSIONS: These results confirm the activity of targeted therapy in patients with BRAF-mutant lung adenocarcinoma. Further trials are warranted to study combination therapies and drug resistance mechanisms.

Estudo prospectivo de 100 casos de "core" biópsia dirigida por ultra-som e revisão da literatura

OBJETIVO: Mostrar a eficácia do método para evitar biópsias excisionais, verificar suas dificuldades técnicas, definir entre seguimento e biópsia excisional nos nódulos categoria IV do BI-RADS™ e agilizar o procedimento cirúrgico nos casos de nódulos altamente suspeitos de malignidade (categoria V). MATERIAIS E MÉTODOS: As pacientes foram submetidas a exame clínico de rotina, mamografia e ultra-som. A "core" foi feita com pistola automática e agulha número 14, e foram colhidas de quatro a oito amostras. RESULTADOS: Das 100 lesões estudadas, 47 foram submetidas à cirurgia, além da "core", e diagnosticaram-se 34 carcinomas (34,0%). Das 23 lesões classificadas como categoria III, identificou-se apenas um carcinoma (4,34%); das 43 classificadas como categoria IV, sete (16,28%); e das 34 classificadas como categoria V, 26 (76,47%). Evitou-se a biópsia excisional em 53 casos (53,0%). Identificou-se dificuldade no método da "core" em sete casos (7,0%), devido a material insuficiente, risco para malignidade envolvendo lesões esclerosantes complexas e discordância entre imagem e histologia. As 33 lesões com resultados de malignidade à punção biópsia por agulha grossa foram confirmadas após a biópsia cirúrgica. Em um caso o diagnóstico pela "core" foi de hiperplasia ductal atípica e após a biópsia cirúrgica da peça diagnosticou-se carcinoma, correspondendo a um resultado falso-negativo. Não houve nenhum resultado falso-positivo.

Prevalência de achados pulmonares em 55 pacientes com neoplasias esofagianas

OBJETIVO: Identificar alterações pulmonares em pacientes com neoplasia esofágica. Comparar os dados obtidos, além de mostrar sua relação com o tabagismo. MATERIAIS E MÉTODOS: Estudo transversal tipo série de casos. Foram analisados prontuários e exames de imagem (tomografias computadorizadas e radiografias) de 55 pacientes com câncer de esôfago, diagnosticados entre 1998 e 2001, no Hospital de Base de São José do Rio Preto. Comparou-se a freqüência dos tumores encontrados e outras alterações pulmonares em dois grupos de pacientes: tabagistas e não tabagistas. RESULTADOS: Quarenta e seis (83%) pacientes apresentaram carcinomas espinocelulares, sete (13%) adenocarcinomas, um (2%) carcinoma de pequenas células e um (2%) linfoma não-Hodgkin. Quarenta e oito (87%) pacientes eram tabagistas e sete (13%) eram não tabagistas. Entre os tabagistas, 89% possuíam carcinoma espinocelular, 9% adenocarcinoma e 2% carcinoma de pequenas células. Entre os não tabagistas, 57% apresentaram adenocarcinoma, 28% carcinoma espinocelular e 15% linfoma não-Hodgkin. Houve metástases em quatro tabagistas e em dois não tabagistas. A prevalência das alterações pulmonares (infiltrado intersticial, enfisema e pneumonia) foi maior nos tabagistas (73%) do que nos não tabagistas (27%) (p = 0,03). CONCLUSÃO: Este fato reforça a importância da avaliação pulmonar nos pacientes com neoplasia esofágica.

Comprehensive Molecular Portraits of Invasive Lobular Breast Cancer.

Invasive lobular carcinoma (ILC) is the second most prevalent histologic subtype of invasive breast cancer. Here, we comprehensively profiled 817 breast tumors, including 127 ILC, 490 ductal (IDC), and 88 mixed IDC/ILC. Besides E-cadherin loss, the best known ILC genetic hallmark, we identified mutations targeting PTEN, TBX3, and FOXA1 as ILC enriched features. PTEN loss associated with increased AKT phosphorylation, which was highest in ILC among all breast cancer subtypes. Spatially clustered FOXA1 mutations correlated with increased FOXA1 expression and activity. Conversely, GATA3 mutations and high expression characterized luminal A IDC, suggesting differential modulation of ER activity in ILC and IDC. Proliferation and immune-related signatures determined three ILC transcriptional subtypes associated with survival differences. Mixed IDC/ILC cases were molecularly classified as ILC-like and IDC-like revealing no true hybrid features. This multidimensional molecular atlas sheds new light on the genetic bases of ILC and provides potential clinical options.

Braquiterapia intersticial para recidivas de câncer de colo uterino pós-radioterapia

OBJETIVO: Analisar a resposta e toxicidade da braquiterapia de alta taxa de dose (BATD) intersticial para carcinoma do colo do útero com recidiva pélvica pós-radioterapia. MATERIAIS E MÉTODOS: Entre 1998 e 2001, 11 pacientes com carcinoma de colo de útero e que tiveram recidiva pélvica pós-radioterapia receberam BATD intersticial. Idade: 41 a 71 anos (média: 56,5 anos); estádios (FIGO): IIA, IIB, IIIB e IVA. Nove (82%) pacientes tinham carcinoma de células escamosas e duas (18%), adenocarcinoma. Dose total de BATD: 20-30 Gy, em frações de 4-5 Gy. O seguimento variou de dois a 54 meses (média: 22,5 meses), através de exame físico periódico (três meses). Uma paciente faleceu sem avaliação de resposta. RESULTADOS: Dez pacientes (91%) tiveram resposta clínica completa, com duração de três a 46 meses (média: 18,9 meses). Três pacientes estão livres de doença (27%), duas estão vivas com doença (18%), três morreram (27%) e de três se perdeu o seguimento após nova recidiva (27%). A toxicidade para o trato urinário foi de 9% (uma paciente - grau III). CONCLUSÃO: A BATD intersticial é uma abordagem alternativa e viável para pacientes selecionadas que tiveram recidiva pós-radioterapia. Foi possível obter altas taxas de resposta com baixa toxicidade, considerando-se o grupo estudado, o tempo de seguimento e a re-irradiação.

Calcificações arredondadas como único achado mamográfico no carcinoma da mama: correlação mamografia-anatomia patológica

OBJETIVO: Correlacionar os achados da mamografia com os da anatomia patológica nos tumores de mama associados a calcificações arredondadas. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram avaliados 16 pacientes portadoras de câncer de mama, cujo único achado mamográfico foi o de calcificações arredondadas, estudando-se o tipo histológico, o padrão de distribuição mais freqüente e a quantidade de calcificações observada. RESULTADOS: O tumor mais freqüente foi o carcinoma ductal in situ (CDIS) tipo cribriforme, com 42,9% dos casos, seguido pelo CDIS tipo micropapilar com 23,8%, CDIS tipo comedo com 19% e carcinoma ductal infiltrante com 9,5%. Houve associação de dois ou mais tipos histológicos em cinco casos, perfazendo um total de 21 tumores. Quanto à distribuição, 56% dos casos apresentaram padrão indefinido, 31,25% padrão ductal e 12,5% padrão lobular. Em relação ao número de calcificações, 75% apresentaram mais de 20, 12,5% apresentaram entre 10 e 20 e 12,5% menos de 10 calcificações. CONCLUSÃO: O carcinoma de mama pode ter como único achado a presença de calcificações arredondadas, com padrão de distribuição ductal, lobular ou indefinido.

Tumores malignos da cavidade nasal: avaliação por tomografia computadorizada

OBJETIVO: Analisar os aspectos tomográficos dos tumores malignos da cavidade nasal. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram estudados 18 pacientes - dez homens e oito mulheres - com tumor da cavidade nasal, os quais realizaram tomografia computadorizada da face. RESULTADOS: Dos tumores, seis eram casos de carcinoma epidermóide, três melanomas, dois carcinomas adenóides císticos, um adenocarcinoma polimórfico de baixo grau, um carcinoma indiferenciado, um carcinoma neuroendócrino, um linfoma não-Hodgkin, um rabdomiossarcoma alveolar, um sarcoma fusocelular grau II e um estesioneuroblastoma. As lesões foram mais freqüentes (p > 0,05) no lado esquerdo e no andar médio. CONCLUSÃO: Os carcinomas epidermóides apresentam grau de destruição correspondente ao seu volume, semelhante aos tumores epidermóides de outros sítios. O septo nasal foi acometido de maneira diferente, de acordo com os tipos histológicos.

Dupla leitura no rastreamento mamográfico

OBJETIVO: Avaliar a eficácia da dupla leitura de mamografias de rotina para rastreamento do câncer de mama, em ambiente privado (não acadêmico). MATERIAIS E MÉTODOS: Durante um ano, 22.024 mamografias de rastreamento, em mulheres assintomáticas, foram submetidas a dupla leitura independente, por dois radiologistas especializados em imaginologia mamária. Foram determinados o número de carcinomas adicionais encontrados com a dupla interpretação e o número absoluto de reconvocações geradas por tal prática. RESULTADOS: Foram detectados nove carcinomas adicionais com a dupla leitura, sendo 55,5% ductal in situ e o restante, ductal invasivo até 1,5 cm. Nosso índice de reconvocação absoluto gerado pela dupla interpretação foi de apenas 1,8%, com achados falso-positivos em 98%. CONCLUSÃO: O uso da dupla leitura no rastreamento mamográfico aumentou o índice de detecção de câncer em 8,5% e todos os tumores encontrados foram estádio 0 ou 1.

Functional studies of a germ-line polymorphism at codon 47 within the p53 gene.

A rare germ-line polymorphism in codon 47 of the p53 gene replaces the wild-type proline (CCG) with a serine (TCG). Restriction analysis of 101 human samples revealed the frequency of the rare allele to be 0% (n = 69) in Caucasians and 4.7% (3/64, n = 32) among African-Americans. To investigate the consequence of this amino acid substitution, a cDNA construct (p53 mut47ser) containing the mutation was introduced into a lung adenocarcinoma cell line (Calu-6) that does not express p53. A growth suppression similar to that obtained after introduction of a wild-type p53 cDNA construct was observed, in contrast to the result obtained by introduction of p53 mut143ala. Furthermore, expression of neither p53 mut47ser nor wild-type p53 was tolerated by growing cells. In transient expression assays, both mut47ser and wild-type p53 activated the expression of a reporter gene linked to a p53 binding sequence (PG13-CAT) and inhibited the expression of the luciferase gene under the control of the Rous sarcoma virus promoter (RSVluc). In the same assay, mut143ala did not activate the expression of PG13-CAT and produced only a slight inhibitory effect on RSVluc. These findings indicate that the p53 variant with a serine at codon 47 should be considered as a rare germ-line polymorphism that does not alter the growth-suppression activity of p53.

Heme oxygenase-1 induction by endogenous nitric oxide: influence of intracellular glutathione.

To investigate the influence of glutathione (GSH) on cellular effects of nitric oxide (NO) formation, human colon adenocarcinoma cells were transfected with a vector allowing controlled expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS). Protein levels of oxidative stress-sensitive heme oxygenase-1 (HO-1) were analyzed in the presence or absence of GSH depletion using L-buthionine-[S,R]-sulfoximine and iNOS induction. While no effect was observed in the presence of iNOS activity alone, a synergistic effect on HO-1 expression was observed in the presence of iNOS expression and GSH depletion. This effect was prevented by addition of N-methyl-L-arginine. Therefore, targeting of endogenous NO may be modulated by intracellular GSH.