First report of Trypanosoma vivax outbreak in dairy cattle in São Paulo state, Brazil

Esta é a primeira descrição de um surto de Trypanosomavivax ocorrido no Estado de São Paulo, no município de Lins. Animais acometidos apresentaram febre, icterícia, diminuição da produção de leite, perda de peso, diarreia profusa, abortos, anemia, leucocitose e hiperfibrigenemia. Foram registrados 31 óbitos de vacas e bezerros em 1.080 bovinos no total. Três vacas apresentaram sintomatologia nervosa, como dismetria, ataxia e fraqueza muscular, além de ptialismo, aumento de linfonodos e edema submandibular. Hemoparasitas flagelados foram observados em esfregaços sanguíneos, e a espécie de tripanossomo foi diagnosticada como T.vivax por PCR. A cepa de T. vivax mostrou ser resistente ao tratamento com aceturato de diaminozeno e a infecção disseminou rapidamente no rebanho. Pelo ELISA, observou-se que 98,36% (599) das amostras de soro colhidas apresentaram títulos positivos para IgG anti-T.vivax. O surto ocorreu em condições de baixa precipitação pluviométrica, fato que indica que outros fatores estavam envolvidos na ocorrência desse surto, como a ausência de tabanídeos e a grande presença de Haematobia irritans e Stomoxys calcitrans, cujo aumento populacional pode ser devido ao uso de resíduos de usinas de açúcar e álcool nos canaviais que circundavam a granja leiteira.

Plasmid profile in oral Fusobacterium nucleatum from humans and Cebus apella monkeys

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Atividade antifúngica de óleos essenciais frente a amostras clínicas de Candida albicans isoladas de pacientes HIV positivos

Objetivou-se avaliar a atividade antifúngica dos óleos essenciais de Ocimum basilicum L. (manjericão), Cymbopogon martinii L. (palmarosa), Thymus vulgaris L. (tomilho) e Cinnamomum cassia Blume (canela da china) sobre cepas de Candida albicans isoladas de pacientes HIV positivos e cepa padrão (ATCC 76845). Quinze amostras clínicas de C. albicans (C1-C15) foram repicadas em ágar Sabouraud Dextrose, para confecção de suspensões em solução salina estéril (0,9%) contendo 1,5 x 10(6) UFC mL-1. As emulsões dos óleos essenciais foram preparadas em água destilada estéril e tween 80, com concentrações variando entre 1024 µg mL-1 e 4 µg mL-1. A ação antifúngica foi determinada por meio da Concentração Inibitória Mínima (CIM) utilizando-se a técnica da microdiluição. Foram utilizados como controles positivos a nistatina e o miconazol (50 µg mL-1). Os testes foram realizados em triplicata, sendo a CIM, a menor concentração capaz de inibir o crescimento das leveduras, observada por método visual de acordo com a turvação do meio de cultura. Para C. albicans (ATCC 76845), a CIM do óleo essencial de C. cassia foi 64 µg mL-1, enquanto para óleo de C. martinii foi 1024 µg mL-1. Para as cepas clínicas, verificou-se que a CIM de C. cassia para 80% das cepas foi 64 µg mL-1, sendo a variação dos valores da CIM entre 128 µg mL-1 e 64 µg mL-1. Observou-se que para 66,6% das amostras clínicas, a CIM de C. martinii foi 612 µg mL-1. Constatou-se que a nistatina não apresentou atividade frente às cepas clínicas (C1-C15), enquanto a atividade antifúngica do miconazol foi verificada em 100% das amostras. Não se constatou atividade antimicrobiana dos óleos essenciais de O. basilicum e T. vulgaris, nas concentrações avaliadas. Concluiu-se que os óleos essenciais de C. cassia e C. martinii, em diferentes concentrações, apresentam atividade antifúngica sobre cepas de C. albicans isoladas de pacientes HIV positivos e cepa padrão (ATCC 76845). Entretanto não foi observada inibição antimicrobiana para os óleos de O. basilicum e T. vulgaris.

Analysis of proteins from membrane and soluble fractions of Giardia duodenalis trophozoites of two Brazilian axenic strains

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Partial characterization of proteolytic activity in Giardia duodenalis purified proteins

O presente estudo consiste em uma caracterização preliminar da atividade proteolítica de frações de proteínas purificadas a partir de lisados de trofozoítos de cepa isolada e axenizada no Brasil. Frações obtidas por cromatografia líquida (FPLC) foram analisadas quanto ao perfil eletroforético em géis de poliacrilamida (SDS-PAGE) e a atividade proteolítica foi avaliada em géis contendo gelatina como substrato. A caracterização das enzimas foi realizada a partir da análise do efeito de inibidores sintéticos de cisteína-proteases (E-64, IAA), serina-proteases (PMSF), serina e cisteína-proteases (TPCK, TLCK, elastatinal), metalo-proteases (EDTA) e aspartil proteases (pepstatina) sobre a degradação do substrato. Entre 30 frações eluídas, bandas de proteínas foram observadas em oito delas, entretanto, atividade proteolítica foi detectada apenas nas frações 23, 24, 25 e 26. O perfil eletroforético das proteínas revelou poucas bandas distribuídas na faixa de 45 a 18 kDa. Os zimogramas revelaram zonas de proteólise na faixa de aproximadamente 62 a 35 kDa, entretanto destacaram-se as bandas de hidrólise de 62, 55, 53, 50, 46 e 40 kDa. Nos ensaios de inibição, a proteólise foi marcantemente inibida por E-64, TPCK, TLCK e elastatinal. Redução discreta da proteólise foi observada com IAA e PMSF, enquanto que EDTA e pepstatina não promoveram alteração dos perfis de hidrólise. Estas observações são relevantes, especialmente se considerarmos que para elucidar o envolvimento das proteases na relação parasita-hospedeiro, a purificação dessas moléculas é um requisito importante.

Rabies transmitted by vampire bats to humans: An emerging zoonotic disease in Latin America?

Human rabies transmitted by vampire bats reached new heights in Latin America in 2005. A total of 55 human cases were reported in several outbreaks, 41 of them in the Amazon region of Brazil. Peru and Brazil had the highest number of reported cases from 1975 to 2006. In Peru, outbreaks involving more than 20 cases of bat-transmitted human rabies were reported during the 1980s and 1990s. During this period, a smaller number of cases were reported from outbreaks in Brazil. A comparison of data from field studies conducted in Brazil in 2005 with those from the previous decade suggests similar bat-bite situations at the local level. The objective of this study was to review the epidemiological situation and, on the basis of this information, discuss possible factors associated with the outbreaks. Prevention and control measures already recommended for dealing with this problem are also reviewed, and some further suggestions are provided.

Determination of the antimutagenicity of an aqueous extract of Rhizophora mangle L. (Rhizophoraceae), using in vivo and in vitro test systems

An aqueous extract of Rhizophora mangle L. bark is used as raw material in pottery making in the State of Espirito Santo, Brazil. This extract presents large quantities of tannins, compounds possessing antioxidant properties. Tannin antioxidant activity, as a plant chemical defense mechanism in the process of stabilizing free radicals, has been an incentive to studies on anti-mutagenicity. The present work aimed to evaluate possible antimutagenic activity of a R. mangle aqueous extract, using the Allium cepa test-system and micronuclear (MN) assay with blockage of cytokinesis in Chinese hamster ovary cells (CHO-K1). The Allium cepa test-system indicated antimutagenic activity against the damage induced by the mutagenic agent methyl methanesulfonate. A reduction in both MN cell frequency and chromosome breaks occurred in both the pre and post-treatment protocols. The MN testing of CHO-K1 cells revealed anti-mutagenic activity of the R. mangle extract against methyl methanesulfonate and doxorubicin in pre, simultaneous and post-treatment protocols. These results suggest the presence of phyto-constituents in the extract presenting demutagenic and bio-antimutagenic activities. Since the chemical constitution of Rhizophora mangle species presents elevated tannin content, it is highly probable that these compounds are the antimutagenic promoters themselves.

Cyclodextrin glycosyltransferase production by new Bacillus sp. strains isolated from brazilian soil

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

BTEX biodegradation by bacteria from effluents of petroleum refinery

Groundwater contamination with benzene, toluene, ethylbenzene and xylene (BTEX) has been increasing, thus requiring an urgent development of methodologies that are able to remove or minimize the damages these compounds can cause to the environment. The biodegradation process using microorganisms has been regarded as an efficient technology to treat places contaminated with hydrocarbons, since they are able to biotransform and/or biodegrade target pollutants. To prove the efficiency of this process, besides chemical analysis, the use of biological assessments has been indicated. This work identified and selected BTEX-biodegrading microorganisms present in effluents from petroleum refinery, and evaluated the efficiency of microorganism biodegradation process for reducing genotoxic and mutagenic BTEX damage through two test-systems: Allium cepa and hepatoma tissue culture (HTC) cells. Five different non-biodegraded BTEX concentrations were evaluated in relation to biodegraded concentrations. The biodegradation process was performed in a BOO Trak Apparatus (HACH) for 20 days, using microorganisms pre-selected through enrichment. Although the biodegradation usually occurs by a consortium of different microorganisms, the consortium in this study was composed exclusively of five bacteria species and the bacteria Pseudomonas putida was held responsible for the BTEX biodegradation. The chemical analyses showed that BTEX was reduced in the biodegraded concentrations. The results obtained with genotoxicity assays, carried out with both A. cepa and HTC cells, showed that the biodegradation process was able to decrease the genotoxic damages of BTEX. By mutagenic tests, we observed a decrease in damage only to the A. cepa organism. Although no decrease in mutagenicity was observed for HTC cells, no increase of this effect after the biodegradation process was observed either. The application of pre-selected bacteria in biodegradation processes can represent a reliable and effective tool in the treatment of water contaminated with BTEX mixture. Therefore, the raw petroleum refinery effluent might be a source of hydrocarbon-biodegrading microorganisms. (c) 2010 Elsevier B.A. All rights reserved.

Pectinase production by Penicillium viridicatum RFC3 by solid state fermentation using agricultural wastes and agro-industrial by-products

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Efeitos de reguladores e estimulantes vegetais no desenvolvimento do milho (Zea mays L. cv. c-525)

Estudou-se, sob condições de casa de vegetação, o efeito da aplicação de reguladores e estimulantes vegetais no desenvolvimento do milho cultivar Cargill -525. Os reguladores e estimulantes utilizados foram: giberelina 100 ppm, ethephon 600 ppm, Agrostemin 0,8 g/l e Triacontanol 0,5 mg/l; aplicados por pulverização 34 dias após a semeadura, além do controle, foram determinados os parâmetros relativos a altura da planta, número de folhas, área foliar e peso da materia seca de raiz, caule e folhas. A partir dos dados de área foliar e peso da matéria seca total obtidos em 4coletas realizadas com intervalos de 14 dias, foram calculadas a taxa assimilatória líquida (TAL), taxa de crescimento relativo (TCR) e razão de área foliar (RAF). Giberelina 100 ppm aumentou inicialmente a altura das plantas de milho, sendo que ethephon 600 ppm reduziu a altura média do milho. 0 número de folhas foi diminuído nas plantas tratadas com giberelina, tendendo a aumentar no tratamento com ethephon. Giberelina reduziu o peso da matéria seca das plantas de milho, sendo que ethephon incrementou o peso de raízes, colmo e folhos. Triacontanol promoveu redução na TAL e na TCR do milho 'Cargill - 525' . Giberelina e ethephon tenderam a diminuir a RAF das plantas de Zea mays L.

Efeitos de giberelina e ethephon na anatomia de plantas de cana-de-açúcar

O presente trabalho teve como finalidade analisar os efeitos da aplicação de giberelina (GA) e do ethephon (CEPA) na anatomia de plantas de cana-de-açúcar. Para o estudo da anatomia de caules e folhas foi realizada pulverização de plantas jovens a partir de sementes. Após 216 dias da semeadura, realizaram-se cortes das folhas +4, da região do nó +10 e dos entrenós +10 e montagem de lâminas permanentes. Observou-se que o tratamento com GA 50 mg L-1 manteve intensa atividade meristemática, havendo contínua formação de feixes vasculares com menor quantidade de fibras de esclerênquima. O GA 50 mg L-1 provocou diminuição em número e tamanho de células buliformes nas folhas +4. Verificou-se que CEPA 1.200 mg L-1, inibiu a atividade meristemática na região do nó +10, reduziu a quantidade de fibras de esclerênquima dos feixes vasculares e aumentou o número de células buliformes.

VERIFICATION of THE PRESENCE of CAPSULE GENE SEQUENCES IN NASOPHARYNGEAL ISOLATES of NONTYPEABLE HAEMOPHILUS INFLUENZAE FROM HEALTHY CHILDREN AT A BRAZILIAN DAY CARE CENTER

Cinqüenta e oito cepas de Haemophilus influenzae foram isoladas da nasofaringe de crianças saudáveis que freqüentam uma creche, e através da técnica de Southern blot foi pesquisada nas cepas acapsuladas a presença de seqüências do gene capsular. Sete cepas (12%) caracterizadas sorologicamente como acapsuladas mostraram homologia com seqüências específicas da cápsula. Uma cepa foi caracterizada com uma linhagem H. influenzae tipo b cápsula deficiente.

Detection of Toxoplasma gondii in the reproductive system of male goats

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)

Toxoplasma gondii in experimentally infected Bos taurus and Bos indicus semen and tissues

Dezoito bovinos foram inoculados com Toxoplasma gondii e distribuídos aleatoriamente em três grupos de seis bovinos cada: GI (2,5x10(5) oocistos da cepa P), GII (5,0x10(6) taquizoítos da cepa RH) e GIII (controle). Exames clínicos, sorológicos e parasitêmicos foram realizados. Pesquisas do parasito, por meio da bioprova e pela técnica de Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), foram realizadas no sêmen e em fragmentos de musculatura esquelética, linfonodos, cérebro, retina, baço, fígado, pulmão, testículo, epidídimo e vesícula seminal. Amostras de sangue e sêmen foram colhidas nos dias -2, -1, 1, 3, 5, 7, 14 e, semanalmente, até o 84º dia pós-infecção (DPI). Os bovinos inoculados (GI e GII) apresentaram hipertermia do 3º ao 16º DPI. Anticorpos contra T. gondii foram detectados (IFI) no 5º DPI (1:16), em ambos grupos inoculados (oocistos e taquizoítos), atingindo picos de 1:4096 no 7º DPI. Surtos parasitêmicos ocorreram em todos os bovinos infectados, principalmente do 7º ao 28º DPI, independente da cepa e inóculo utilizados. O bioensaio revelou a presença do parasito em amostras seminais dos bovinos infectados com oocistos (GI) e taquizoítos (GII), em diversas datas experimentais, entre o 7º e 84º DPI. Parasitismo tissular por T. gondii foi diagnosticado por meio da bioprova e pela técnica da PCR, em vários fragmentos de tecidos e/ou órgãos. Os achados sugerem a possibilidade da ocorrência da transmissão sexual do T. gondii na espécie bovina.